郭鑫,徐勝奎

(中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院,北京 100193)

哺乳動(dòng)物細(xì)胞在外界環(huán)境壓力的作用下會(huì)發(fā)生一系列應(yīng)激反應(yīng),其中翻譯起始復(fù)合物可聚集形成應(yīng)激顆粒(stress granule,SG),阻礙細(xì)胞內(nèi)mRNA的正常翻譯[1]。病毒在細(xì)胞內(nèi)寄生,完全依賴于宿主細(xì)胞的翻譯系統(tǒng)合成病毒蛋白,完成自身生命周期。SG的形成對(duì)病毒的感染與復(fù)制具有重要調(diào)控作用。研究發(fā)現(xiàn),從簡(jiǎn)單的單股正鏈RNA病毒到復(fù)雜的雙鏈DNA病毒都可以調(diào)控宿主細(xì)胞SG的形成[2]。闡明SG與病毒感染之間的相互作用關(guān)系對(duì)于進(jìn)一步了解病毒的致病機(jī)制具有重要意義。

病毒感染破壞細(xì)胞正常的生理功能和穩(wěn)態(tài),對(duì)宿主細(xì)胞也是一種應(yīng)激。細(xì)胞可通過(guò)產(chǎn)生SG來(lái)下調(diào)整體的翻譯效率,其一方面用于能量?jī)?chǔ)存,另一方面則影響病毒蛋白的表達(dá)從而抑制病毒的復(fù)制。為了逃避宿主細(xì)胞對(duì)病毒的清除作用,病毒也進(jìn)化出一系列措施抑制SG組裝,發(fā)揮免疫逃逸的功能[3]。不同病毒的基因組、結(jié)構(gòu)、大小及復(fù)制方式等各不相同,調(diào)控SG形成的策略也多種多樣。病毒通過(guò)抑制細(xì)胞SG的形成,維持病毒蛋白的高效表達(dá)與基因組的有效復(fù)制,促進(jìn)自身的感染[4]。一般認(rèn)為,SG的形成影響宿主細(xì)胞的翻譯效率,進(jìn)而影響病毒的復(fù)制[5]。但是,也有研究表明SG的產(chǎn)生會(huì)抑制干擾素表達(dá),有利于病毒的免疫逃逸[6]。由此可見(jiàn),SG對(duì)不同病毒發(fā)揮的作用不盡相同。SG與病毒之間的相互影響關(guān)系可歸納為:宿主細(xì)胞感知病毒感染并誘導(dǎo)產(chǎn)生SG,同時(shí)病毒進(jìn)化出多種方式干擾細(xì)胞SG的形成;此外,病毒還可利用SG來(lái)促進(jìn)自身的復(fù)制。

1 SG的形成機(jī)制

SG的形成方式包括經(jīng)典型(即eIF2α磷酸化依賴型)及非經(jīng)典型(eIF2α磷酸化非依賴型)2種,其主要成分包括翻譯停滯的mRNA、40S核糖體及多種宿主蛋白(如TIA-1、TIAR、Sam68、G3BP1和eIF等)[7]。在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中,真核起始因子2α(eukaryotic initiation factor 2 α,eIF2α)可被細(xì)胞內(nèi)蛋白激酶R(protein kinase R,PKR)、血紅素調(diào)節(jié)抑制激酶(heme-regulated inhibitor kinase,HRI)、一般性調(diào)控阻遏蛋白激酶2(general control non-derepressible 2,GCN2)及PKR樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶(PKR-like endoplasmic reticulum kinase,PERK)4種激酶磷酸化[8-9]。磷酸化的eIF2α影響eIF2-GTP-tRNAMet三聚體形成,阻礙翻譯起始復(fù)合物組裝,促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)核糖核蛋白(RNP)聚集形成SG[10]。根據(jù)上述研究結(jié)果,筆者繪制了SG的形成機(jī)制示意圖(圖1)。

圖1 經(jīng)典型應(yīng)激顆粒(SG)的形成機(jī)制Fig.1 Typical stress granule(SG)formation mechanism1. 細(xì)胞內(nèi)有4種 eIF2α(真核起始因子2α)激酶:蛋白激酶R(PKR)、血紅素調(diào)節(jié)抑制激酶(HRI)、一般性調(diào)控阻遏蛋白激酶2(GCN2)及PKR樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶(PERK)。面臨不同的壓力時(shí),激酶的活化方式各異:病毒感染過(guò)程中產(chǎn)生的dsRNA是激活PKR的重要原因;細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生的過(guò)氧化物以及熱應(yīng)激可使HRI活化;在細(xì)胞內(nèi)營(yíng)養(yǎng)不足時(shí),GCN2被活化,使細(xì)胞保持較低水平的生命狀態(tài);病毒感染細(xì)胞后,病毒蛋白在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)大量合成,未正確折疊的蛋白質(zhì)激活PERK。2. 當(dāng)eIF2α被磷酸化后,eIF2α-GDP與eIF2α-GTP之間的循環(huán)發(fā)生障礙,細(xì)胞內(nèi)無(wú)法生成足夠的eIF2α-GTP,抑制細(xì)胞內(nèi)的正常翻譯。3. 未發(fā)生磷酸化修飾的eIF2α-GDP與eIF2α-GTP之間可進(jìn)行正常交換。4. RNA結(jié)合蛋白(如G3BP1,TIA-1)與翻譯停滯的mRNA結(jié)合形成復(fù)合物,RNA結(jié)合蛋白之間相互作用,使mRNA結(jié)合蛋白等復(fù)合物聚集形成SG。1. Four kinds of eIF2α(eukaryotic initiation factor 2α)kinases exist in host cell,including protein kinase R(PKR),heme-regulated inhibitor kinase(HRI),general control non-derepressible 2(GCN2)and PKR-like endoplasmic reticulum kinase(PERK). Kinases are activated in different ways in response to different stresses:dsRNA formed during virus infection may bind to and subsequently activate PKR;HRI could be activated by intracellular hyperoxide and hot stress;GCN2 could be activated under starvation environment to keep cells in a low state of life;excessive viral proteins synthesized in ER activate PERK in virus-infected cells. 2. The cycle between eIF2α-GDP and eIF2α-GTP is disrupted when eIF2α is phosphorylated,and the insufficiency of eIF2α-GTP inhibits normal translation. 3. The exchange between eIF2-GDP and eIF2-GTP occurs normally without phosphorylation. 4. RNA-binding proteins(such as G3BP1 and TIA-1)form complex together with untranslated mRNA and the interaction between RNA-binding proteins promote the assembly of SG.

在正常狀態(tài)下,eIF2α的磷酸化水平由eIF2α激酶和磷酸酶協(xié)調(diào)控制并保持動(dòng)態(tài)平衡。細(xì)胞內(nèi)蛋白磷酸酶1(protein phosphatase 1,PP1)與PP2介導(dǎo)eIF2α去磷酸化。PP2在細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定表達(dá),而PP1的表達(dá)量易受外界因素的調(diào)節(jié)[11-12]。PP1催化亞基PP1c通過(guò)與不同的調(diào)節(jié)亞基結(jié)合,靶向于不同的底物發(fā)揮作用,如PP1c與細(xì)胞內(nèi)調(diào)節(jié)亞基生長(zhǎng)停滯和DNA損傷可誘導(dǎo)蛋白34(growth arrest and DNA damage-inducible protein 34,GADD34)相互作用引導(dǎo)PP1作用于eIF2α使其去磷酸化[13]。低水平的磷酸化eIF2α不會(huì)造成RNP的聚集形成SG。因此,PP1c與GADD34的表達(dá)量可作為評(píng)估eIF2α去磷酸化酶活性的指標(biāo)。

2 病毒刺激SG形成的方式

eIF2α磷酸化是SG形成的基礎(chǔ),其激酶的活化方式各異:PKR識(shí)別細(xì)胞漿內(nèi)dsRNA并被活化;HRI可被細(xì)胞漿中活性氧激活;GCN2在氨基酸等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)缺乏的情況下發(fā)生活化;PERK可被內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)大量錯(cuò)誤折疊的蛋白質(zhì)激活(圖1)。在4種eIF2α激酶中,PKR和PERK的活化與病毒的感染密切相關(guān)。第1,RNA病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞后在細(xì)胞漿內(nèi)進(jìn)行復(fù)制形成復(fù)制中間體dsRNA,PKR作為模式識(shí)別受體首先識(shí)別并結(jié)合dsRNA從而引起自身寡聚化,寡聚化的PKR導(dǎo)致自身磷酸化,引起構(gòu)象發(fā)生改變并暴露出eIF2α結(jié)合位點(diǎn),隨后PKR與eIF2α結(jié)合并使其磷酸化[14]。豬瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)基因組為單股正鏈RNA,CSFV感染細(xì)胞后會(huì)促進(jìn)PKR磷酸化,同時(shí)造成eIF2α的磷酸化;然而滅活的CSFV并不能活化PKR,也不會(huì)使eIF2α發(fā)生磷酸化,說(shuō)明PKR的活化與病毒復(fù)制過(guò)程中形成的dsRNA密切相關(guān)[15]。同屬于黃病毒科的寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)與登革熱病毒(Dengue virus,DENV)感染細(xì)胞后,同樣會(huì)激活PKR并使eIF2α發(fā)生磷酸化,進(jìn)而抑制細(xì)胞的翻譯效率[14]。第2,囊膜病毒感染細(xì)胞后,需要合成大量的病毒囊膜糖蛋白完成自身的組裝。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)是病毒糖蛋白合成加工的主要場(chǎng)所,當(dāng)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)蛋白合成過(guò)多過(guò)快時(shí),造成內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)未正確折疊蛋白的積累,激活位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的激酶PERK,減緩蛋白的翻譯速率,維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)[9]。豬繁殖與呼吸綜合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)感染細(xì)胞后,病毒蛋白在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)大量合成,激活細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)壓力感受器PERK使eIF2α發(fā)生磷酸化,進(jìn)而刺激細(xì)胞產(chǎn)生SG[16]。馬立克氏病病毒(Marek’s disease virus,MDV)為皰疹病毒,在病毒裝配過(guò)程中需要合成大量的病毒囊膜蛋白,該病毒感染會(huì)激活細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)未折疊蛋白反應(yīng)[17]。病毒感染細(xì)胞后破壞細(xì)胞的穩(wěn)態(tài),除PKR與PERK之外,病毒也會(huì)激活細(xì)胞內(nèi)其他eIF2α激酶,如辛德畢斯病毒(Sindbis virus,SV)感染細(xì)胞后可通過(guò)其病毒RNA與GCN2結(jié)合,直接激活GCN2,進(jìn)而引起eIF2α的磷酸化[18]。綜上,機(jī)體可從多個(gè)方面感知病毒,抑制其在宿主細(xì)胞的翻譯,抵抗病毒感染。

除經(jīng)典方式外,SG也可以eIF2α非依賴型的方式形成[19-20]。

3 病毒抑制SG形成的方式

SG最重要的功能是抑制宿主細(xì)胞的翻譯,而病毒蛋白的表達(dá)及子代病毒的產(chǎn)生完全依賴于宿主的翻譯系統(tǒng),因此SG可作為宿主的天然免疫方式之一影響病毒的復(fù)制。病毒為了逃避宿主的清除作用,進(jìn)化出多種策略抑制SG的形成[21-22]。多數(shù)SG的形成是eIF2α磷酸化依賴型,因此病毒可以從抑制eIF2α激酶的活化、促進(jìn)eIF2α的去磷酸化以及直接破壞SG組成3個(gè)方面抑制SG的形成。筆者根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道繪制了病毒調(diào)控SG形成策略示意圖(圖2)。

圖2 病毒抑制SG形成的策略Fig.2 Virus strategies inhibiting SG assembly1. 病毒編碼的蛋白可直接抑制eIF2α激酶的活化;2. 病毒感染刺激GADD34(調(diào)節(jié)亞基生長(zhǎng)停滯與DNA損傷可誘導(dǎo)蛋白34)表達(dá)量提高,增強(qiáng)eIF2α的去磷酸化;3. 病毒蛋白(VP)可與蛋白磷酸酶(PP1)相互作用使eIF2α去磷酸化;4. eIF2α磷酸化促進(jìn)SG的形成;5. VP可與SG組分相互作用,干擾SG的組裝;6. 病毒編碼的蛋白酶(VEPase)切割SG組份,抑制SG的產(chǎn)生。1. Virus-encoded proteins could inhibit the activation of eIF2α kinases directly;2. Virus infection elevates GADD34(growth arrest and DNA damage-inducible protein 34)production and subsequently enhance the dephosphorylation of eIF2α;3. Virus proteins(VP)may interact with protein phosphatase 1(PP1)to dephosphorylate eIF2α;4. eIF2α phosphorylation promote SG formation;5. Virus proteins may interact with SG components and disrupt SG assembly;6. Virus-encoded proteinase(VEPase)could cleave SG components and inhibit SG formation.

3.1 抑制eIF2α激酶的活化

eIF2α的磷酸化酶主要包括PKR、HRI、GCN2及PERK。病毒感染過(guò)程中可激活eIF2α激酶使其磷酸化,抑制eIF2α激酶的活化從而抑制SG的產(chǎn)生是病毒發(fā)揮作用的最直接方式?？谔阋卟《?Foot and mouth disease virus,FMDV)感染PK-15細(xì)胞后激活細(xì)胞的天然免疫系統(tǒng),誘導(dǎo)干擾素及干擾素刺激基因(如PKR)的表達(dá)[23]。Li等[24]報(bào)道FMDV感染PK-15后,盡管PKR基因的轉(zhuǎn)錄水平上升,但是病毒編碼的3Cpro蛋白可通過(guò)溶酶體途徑降解PKR,抑制eIF2α磷酸化和SG形成,從而促進(jìn)病毒的復(fù)制。盡管流感病毒(Avain influenza virus,AIV)并不能在蛋白水平降解PKR,但有研究表明AIV編碼的NS1蛋白N端結(jié)構(gòu)域能與宿主細(xì)胞PKR相互作用,抑制PKR的活化,從而保證病毒的毒力與傳播能力[25]。與RNA病毒不同,DNA病毒在復(fù)制過(guò)程中并不會(huì)產(chǎn)生dsRNA,但是其轉(zhuǎn)錄形成的RNA會(huì)形成二級(jí)結(jié)構(gòu)激活PKR,因此DNA病毒也會(huì)進(jìn)化出相應(yīng)的策略抑制PKR的活化,如卡波濟(jì)肉瘤相關(guān)皰疹病毒(Kaposi’s sarcoma-associated herpesvirus,KSHV)編碼的ORF57蛋白可與PKR結(jié)合而破壞PKR與dsRNA之間的相互作用,抑制PKR自身的磷酸化及SG的形成[26]。人巨細(xì)胞病毒(Human cytomegalovirus,HCMV)感染后產(chǎn)生的dsRNA可作為PKR的激活劑,但是HCMV編碼的pTRS1蛋白可與PKR直接作用而抑制dsRNA誘導(dǎo)的PKR活化,間接抑制SG形成[14]。值得注意的是,HCMV編碼的pIRS1蛋白也會(huì)與HRI相互作用而抑制HRI的活化[14],表明病毒已經(jīng)進(jìn)化出多種策略抑制eIF2α激酶的活化。

除PKR外,病毒感染也可影響PERK的活化。多種病毒感染后可激活PERK,促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)eIF2α磷酸化抑制宿主翻譯,維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)[16]。為了抑制eIF2α的磷酸化以維持病毒蛋白的翻譯,單純皰疹病毒(Herpes simplex virus,HSV)編碼的gB蛋白可以特異性抑制PERK活化[27]。目前關(guān)于病毒抑制PERK活化的報(bào)道還很少,病毒調(diào)控SG的機(jī)制還需進(jìn)一步研究。

3.2 促進(jìn)eIF2α去磷酸化

當(dāng)細(xì)胞內(nèi)eIF2α磷酸化水平過(guò)高時(shí),細(xì)胞內(nèi)的負(fù)反饋機(jī)制將發(fā)揮作用,使eIF2α發(fā)生去磷酸化[28]。eIF2α磷酸化造成細(xì)胞內(nèi)廣泛的基因表達(dá)抑制,但是激活轉(zhuǎn)錄因子4(activating transcription factor 4,ATF4)與C/EBP同源蛋白(C/EBP-homologous protein,CHOP)的基因表達(dá)量卻升高,ATF4與CHOP協(xié)同作用上調(diào)下游蛋白如轉(zhuǎn)錄因子ATF3及GADD34的表達(dá)[29]。GADD34作為PP1的調(diào)節(jié)亞基,它與PP1共同作用于eIF2α使其去磷酸化,維持細(xì)胞內(nèi)eIF2α正常的磷酸化水平。GADD34的表達(dá)量易受環(huán)境的調(diào)控,因此病毒可通過(guò)提高GADD34的表達(dá)量使eIF2α磷酸化水平保持在較低水平,抑制SG的產(chǎn)生?；卓涎挪《?Chikungunya virus,CHIKV)感染細(xì)胞后,其在復(fù)制過(guò)程中產(chǎn)生的復(fù)制中間體dsRNA激活eIF2α的激酶PKR;同時(shí)該病毒可通過(guò)誘導(dǎo)GADD34表達(dá)增強(qiáng)細(xì)胞的去磷酸化作用,維持細(xì)胞的翻譯水平[30]。病毒感染宿主后引發(fā)2個(gè)相互拮抗的反應(yīng),一方面病毒感染過(guò)程中激活PKR,使eIF2α發(fā)生磷酸化,促進(jìn)SG的產(chǎn)生;另一方面,eIF2α的磷酸化誘導(dǎo)GADD34表達(dá)量升高,使eIF2α發(fā)生去磷酸化,這是病毒與宿主細(xì)胞相互博弈的結(jié)果。

3.3 直接破壞SG組成

病毒也可以直接作用于SG的主要組成成分,使其降解,或者阻礙SG的組裝,進(jìn)而發(fā)揮抑制SG形成的作用。黃病毒、小RNA病毒、杯狀病毒等單股正鏈RNA病毒進(jìn)入細(xì)胞后翻譯成大的前體蛋白質(zhì),并在自身表達(dá)的蛋白酶作用下切割成熟。病毒表達(dá)的蛋白酶一方面可以水解自身的前體蛋白,同時(shí)還可以作用于細(xì)胞內(nèi)的蛋白,發(fā)揮其免疫逃逸的作用。FMDV只含有1個(gè)開(kāi)放閱讀框,其編碼的前導(dǎo)蛋白酶(leader protease,Lpro)可以直接切割SG組分即G3BP1與G3BP2,從而抑制SG的形成[31]。貓杯狀病毒(Feline calicivirus,FCV)感染細(xì)胞后會(huì)使eIF2α發(fā)生磷酸化,但是并不會(huì)刺激細(xì)胞產(chǎn)生SG[32]。此外,FCV感染還會(huì)抑制亞砷酸鈉誘導(dǎo)的SG,多點(diǎn)突變?cè)囼?yàn)結(jié)果表明,FCV感染過(guò)程中產(chǎn)生的病毒蛋白酶NS6(Pro)會(huì)切割SG主要成分G3BP1,以此破壞SG的組裝[32]。CHIKV盡管不會(huì)破壞SG的組成成分,但是其編碼的非結(jié)構(gòu)蛋白nsp3含有SH3結(jié)構(gòu)域結(jié)合區(qū)域,可招募G3BP1從而干擾SG的組裝[33]。西尼羅病毒(West Nile virus,WNV)的負(fù)鏈RNA 3′端的頸環(huán)結(jié)構(gòu)可與SG組成成分TIA-1/TIAR相互作用,阻礙SG的組裝[34]。

值得注意的是,有些病毒可通過(guò)多種方式抑制SG的形成。如DENV不僅抑制eIF2α非依賴型SG形成,同時(shí)還可抑制eIF2α磷酸化依賴型的SG的形成[35]。傳染性支氣管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)可以通過(guò)非結(jié)構(gòu)蛋白nsp2抑制PKR的活化從上游抑制eIF2α的磷酸化,還可以上調(diào)GADD34的表達(dá)水平和提高PP1的去磷酸化酶活性,抑制eIF2α的磷酸化并影響SG形成[36]。HSV可通過(guò)表面糖蛋白gB抑制PERK的活化和抑制eIF2α的磷酸化[27];同時(shí)HSV蛋白ICP34.5可以通過(guò)與PP1相互作用而促進(jìn)eIF2α的去磷酸化,抑制SG的形成[37]。以上結(jié)果表明,病毒可以在SG形成的任何階段對(duì)其進(jìn)行調(diào)控。

4 SG對(duì)病毒復(fù)制的影響

細(xì)胞受到應(yīng)激(如病毒感染)時(shí),往往通過(guò)維持自身最基本的代謝進(jìn)行能量?jī)?chǔ)存,以抵抗惡劣的生存環(huán)境。越來(lái)越多的證據(jù)表明,病毒感染過(guò)程中可通過(guò)抑制宿主細(xì)胞內(nèi)SG的形成,促進(jìn)病毒自身蛋白的翻譯。SG的抗病毒作用主要表現(xiàn)為以下幾種形式:部分病毒的翻譯嚴(yán)格依賴于細(xì)胞中的翻譯起始因子如40S亞基與eIF4G,SG中滯留的翻譯起始因子不利于病毒蛋白的翻譯[38]。SG的主要組成成分TIA-1與TIAR通過(guò)與某些病毒3′端的頸環(huán)結(jié)構(gòu)相互作用來(lái)調(diào)控病毒的復(fù)制,當(dāng)TIA-1與TIAR滯留于SG后,病毒的復(fù)制水平將受到影響[34];丙肝病毒(Hepatitis C virus,HCV)在感染過(guò)程中會(huì)將SG的組成成分G3BP1、ATX2、PABP1等招募到病毒復(fù)制復(fù)合體周圍輔助病毒的復(fù)制,當(dāng)G3BP1等滯留于SG中時(shí),影響病毒復(fù)制復(fù)合體的組裝[39];Onomoto等[40]報(bào)道,滯留于SG中的RNA識(shí)別受體RIG-I可被SG中的dsRNA活化進(jìn)而激活細(xì)胞的天然免疫應(yīng)答;同樣地,破壞SG形成會(huì)影響HSV感染過(guò)程中PKR的活化[41]。因此,SG為病原相關(guān)分子模式的識(shí)別提供平臺(tái),激活宿主細(xì)胞的天然免疫信號(hào)通路,有利于病原的清除。

盡管SG的形成可發(fā)揮抗病毒的作用,但也有研究報(bào)道SG可有效抑制細(xì)胞的天然免疫反應(yīng),有利于病毒感染。細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄生成mRNA的翻譯是帽子依賴型的,需要宿主內(nèi)完整的翻譯起始因子參與,而DENV與ZIKV等病毒含有內(nèi)部核糖體進(jìn)入位點(diǎn),不依賴于帽子結(jié)構(gòu)就可起始翻譯[42]。SG中滯留的翻譯起始因子會(huì)抑制抗病毒因子如干擾素的表達(dá),然而病毒的蛋白表達(dá)并不受影響,在此情況下SG的形成有利于病毒的感染。

5 總結(jié)與展望

SG的形成是一個(gè)動(dòng)態(tài)的過(guò)程。由于SG含有大量mRNA及多種RNA結(jié)合蛋白,組成成分復(fù)雜,各成分的功能及其對(duì)于SG組裝的作用還需要進(jìn)一步闡明。深入研究SG的組裝機(jī)制不僅有助于深入了解宿主的抗病毒機(jī)制,還可為抗病毒藥物的研發(fā)提供新思路。

SG影響病毒在細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制,通過(guò)人為調(diào)控SG的形成可間接調(diào)控病毒的復(fù)制,在培養(yǎng)病毒及制作滅活苗時(shí)提高病毒滴度,降低生產(chǎn)成本。另外,在SG形成過(guò)程中,滯留于SG中的mRNA多為含有帽子結(jié)構(gòu)的宿主細(xì)胞基因,擁有核糖體進(jìn)入位點(diǎn)的病毒基因依然可以有效翻譯,SG捕獲mRNA是否具有選擇性依然值得深入研究。病毒的致病性與調(diào)控SG形成的能力密切相關(guān),利用基因編輯技術(shù)對(duì)病毒基因進(jìn)行人為改造,調(diào)控SG的形成能力,降低病毒的致病能力,可作為弱毒疫苗的候選毒株,為疫苗研發(fā)提供思路。