李照偉，李 濤，蒙炳超，王 慧，何 菊，張 海，王素春

（1.貴州省動物疫病預(yù)防控制中心，貴州貴陽 550008；2.黔南布依族苗族自治州養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展中心，貴州都勻 558000；3.水城縣動物疫病預(yù)防控制中心，貴州水城 553000；4.貴陽市動物疫病預(yù)防控制中心，貴州貴陽 550081；5.中國動物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心，山東青島 266032）

雞白痢（pullorum disease，PD）是由雞白痢沙門氏菌引起的雞細(xì)菌性疫病，在雞群中廣泛存在[1-2]。雞白痢沙門氏菌感染可造成雛雞嚴(yán)重白痢，有的呈急性敗血癥，發(fā)病率和死亡率都較高。成年雞感染后多呈慢性或隱性感染，可長期帶菌[3]。PD 既可水平傳播，也可垂直傳播，給家禽養(yǎng)殖業(yè)帶來嚴(yán)重危害和經(jīng)濟損失[4-5]。為了解貴州省規(guī)模雞場雞白痢沙門氏菌感染現(xiàn)狀，2017—2019 年在貴州省31 個不同規(guī)模雞場開展了雞白痢血清學(xué)調(diào)查，以期為探索雞白痢綜合防控和凈化措施，降低規(guī)模化雞場雞白痢感染傳播風(fēng)險提供依據(jù)。

1 材料

1.1 血清樣品

2017—2019 年，每年集中開展1 次雞白痢血清學(xué)檢測。綜合考慮貴州省規(guī)?；u場的養(yǎng)殖特點，按養(yǎng)殖規(guī)模大小隨機選擇大型、中型及小型養(yǎng)殖場共31 個，其中大型養(yǎng)殖場采集血清60 份、中型40 份、小型20 份，共計采集1 340 份雞血清樣品，樣品涵蓋原種場、父母代場、商品場，籠養(yǎng)模式、平養(yǎng)模式，育成期、產(chǎn)蛋期等。

1.2 檢測試劑

雞白痢沙門氏菌、雞傷寒沙門氏菌多價染色平板凝集試驗抗原及陽性血清，購自哈爾濱國生生物科技股份有限公司（抗原批號為20171023、20180412、20190321，陽性血清批號為20171211、20180604、20181129）。

1.3 儀器設(shè)備

生物安全柜：ESCO Ⅱ級B2 型；移液器：Eppendorf。

2 方法

采樣時，現(xiàn)場調(diào)查各檢測場點的生物安全措施及凈化情況，共設(shè)計11 項調(diào)查分類指標(biāo)。對采集的血清，采用血清平板凝集試驗，取抗原與血清各50 μL 于一次性反應(yīng)板上，充分混勻并涂散成直徑約2.0 cm 的液面，2 min 內(nèi)判定結(jié)果。結(jié)果判定：在陰、陽性對照成立前提下，發(fā)生50%（++）以上凝集，為陽性；不發(fā)生凝集，為陰性；介于兩者之間，為可疑。

對雞白痢個體陽性率在不同場點類型、飼養(yǎng)方式、生長階段及不同飲水來源之間的差異，運用卡方檢驗方法[6]進行統(tǒng)計分析，P＜0.05 為差異顯著，P＜0.01 為差異極顯著，P＞0.05 為差異不顯著。

3 結(jié)果與分析

3.1 檢測情況

本次調(diào)查在31 個場群的1 340 份雞血清樣品中，檢出陽性場群26 個、陽性樣品180 份，平均場群陽性率為83.87%，個體陽性率為13.43%。如表1 所示，不同場點類型雞白痢血清個體陽性率由高到低依次為商品場（15.24%）、父母代場（11.00%）、原種場（8.00%），商品場個體陽性率與父母代場差異顯著（P=0.044）；商品場個體陽性率與原種場差異不顯著（P=0.052）；父母代場個體陽性率與原種場差異不顯著（P=0.379）。不同飼養(yǎng)方式的雞白痢血清個體陽性率存在差異，但不顯著（P=0.738）；不同生長階段雞白痢血清個體陽性率分別為18.77%和11.83%，差異極顯著（P=0.002）。不同飲水來源雞白痢血清個體陽性率存在差異，但不顯著（P=0.371）。

表1 不同分類的雞白痢血清檢測結(jié)果

3.2 場點生物安全措施及凈化情況

各檢測場點生物安全措施及凈化情況的11 項調(diào)查分類指標(biāo)調(diào)查情況如表2 所示。通過調(diào)查發(fā)現(xiàn)，不同指標(biāo)的調(diào)查結(jié)果對雞白痢流行情況有不同影響。首先在場點地理位置上，方圓3 km 內(nèi)是否有其他家禽養(yǎng)殖場、交易市場或者屠宰場，其雞白痢個體陽性率差異不顯著（P=0.880）；場點是否與主要交通干道距離500 m 以上，表現(xiàn)差異顯著（P=0.013）；其次是不同環(huán)節(jié)的消毒上，車輛人員進出場區(qū)是否消毒、空舍是否消毒都表現(xiàn)為雞白痢個體陽性率較低，但差異不顯著（P=0.282、0.805）。每月場內(nèi)環(huán)境消毒次數(shù)不同，雞白痢的個體陽性率也有所不同，消毒頻率越高，陽性率越低。不同來源飲水在飲用前均進行消毒，但依然存在雞白痢感染情況。最后是疫病檢測及雞白痢凈化防控方面，引種前開展疫病檢測的場點雞白痢個體陽性率較未開展的場點低，差異極顯著（P=0.001）；已開展雞白痢凈化及愿意開展雞白痢凈化的場點占比都相對較低。采取雞白痢凈化及控制的場點僅有4 個，占場群總數(shù)的12.90%（4/31），其個體陽性率（10.31%）低于未開展凈化的雞場（16.93%），差異極顯著（P＜0.001）；有意愿開展雞白痢凈化的場點僅有10 個，占比32.26%，差異不顯著（P=0.482）。

表2 場點生物安全措施及凈化情況調(diào)查結(jié)果

4 討論

本次調(diào)查發(fā)現(xiàn)，貴州省31 個規(guī)模雞場場陽性率和個體陽性率分別為83.87%（26/31）和13.43%（180/1 340），表明規(guī)模雞場的雞白痢流行率較高，污染面較廣。不同場點類型、養(yǎng)殖方式、生長階段及飲水來源雞白痢感染情況存在一定差異。其中，原種場（8.00%）、父母代場（11.00%）、商品場（15.24%）雞白痢陽性率依次增高，父母代場與商品場雞白痢個體陽性率差異顯著，這可能與父母代場相較于商品場在飼養(yǎng)管理、消毒制度建立、陽性雞淘汰制度建立、入場疫病監(jiān)測等方面更加嚴(yán)格有關(guān)；育成期（18.77%）陽性率高于產(chǎn)蛋期（11.83%），差異極顯著。這是因為育成階段雞生長代謝比較旺盛，對于飼養(yǎng)密度、飼料配比、舍內(nèi)溫度、光照等與育雛期相比都有所調(diào)整，如未形成良好過渡，可能造成應(yīng)激而使雞抵抗力下降，因而增加了雞白痢沙門氏菌感染風(fēng)險。舍內(nèi)平養(yǎng)模式下（14.15%）雞白痢陽性率高于籠養(yǎng)模式（13.30%），自來水（14.60%）為飲水來源的雞白痢陽性率高于井水（12.84%），但差異均不顯著。有研究證明，場點飼養(yǎng)管理及生物安全模式是保證禽群生產(chǎn)性能和雞白痢防控的關(guān)鍵因素[3，7]，而此次調(diào)查的結(jié)果也提示可能與這些因素相關(guān)。不同規(guī)模和不同養(yǎng)殖類型的雞場飼養(yǎng)管理周期不同，應(yīng)根據(jù)實際情況制定飼養(yǎng)管理標(biāo)準(zhǔn)，配之相適應(yīng)的養(yǎng)殖方式及完善的生物安全管理制度，在飼養(yǎng)過程中采取嚴(yán)格的淘汰制度，以控制雞白痢擴散，顯著降低傳播風(fēng)險[8-9]。

5 結(jié)論

本次血清學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，貴州省規(guī)模雞場雞白痢沙門氏菌感染情況較為普遍，受場點類型、生長階段影響較大，受飼養(yǎng)方式和飲水來源影響較小，提示在對雞場實施雞白痢凈化時，可以著重考慮場點類型和生長階段這兩個因素。各檢測場點生物安全措施及凈化情況調(diào)查發(fā)現(xiàn)，不同場點地理位置、不同環(huán)節(jié)消毒措施、疫病檢測開展情況及雞白痢凈化控制情況都會影響雞白痢的流行，特別是在場點地理位置分布、引種前是否開展疫病檢測及是否采取雞白痢凈化防控措施這幾項因素上影響更大，提示應(yīng)合理選址，充分提高雞白痢防控和凈化意識，積極開展雞白痢凈化工作，以期更好地控制雞白痢的流行。