楊廣發(fā)，陶利明，柳 敏

（1.吳江區(qū)農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)督所，江蘇蘇州 215200；2.吳江區(qū)動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所，江蘇蘇州 215200）

磺胺類藥物的優(yōu)點(diǎn)是抗菌譜廣、使用簡便、性質(zhì)穩(wěn)定、毒性較低，屬于一種人工合成類抗菌藥物，如果家畜出現(xiàn)細(xì)菌感染，通常情況下會使用磺胺類藥物進(jìn)行治療?；前奉愃幬飳τ谙嚓P(guān)疾病具有良好的預(yù)防作用。除此之外，小劑量的磺胺類藥物能夠當(dāng)作飼料添加劑使用，不但有助于提高飼料的利用率，同時(shí)對于促進(jìn)家畜的生長發(fā)育具有積極作用。在磺胺類藥物的使用過程中，如果劑量控制得當(dāng)，不會導(dǎo)致藥物在家畜體內(nèi)組織聚集，如果使用不合理，畜產(chǎn)品中極易存在磺胺類藥物殘留，通過食物鏈對人體健康造成威脅。因此了解畜產(chǎn)品中磺胺類藥物殘留的原因并采取有效的檢測方法十分重要。

1 磺胺類藥物概述

磺胺類藥物是氨基苯磺酰胺的一種衍生物，顏色多為白色，性狀為淡黃色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末，無臭無味?；前奉愃幬镏饕ㄟ^干擾細(xì)菌的酶系統(tǒng)對氨基苯甲酸的利用而發(fā)揮抑菌作用，如多數(shù)革蘭氏陽性菌以及部分陰性菌，主要包括鏈球菌病、葡萄球菌病以及沙門氏菌病等[1]?？扇苄曰前奉愃幬镌诳诜竽軌蛟诙虝r(shí)間內(nèi)吸收并到達(dá)全身，短效的半衰期不足8 h，中效的半衰期超過10 h，長效的半衰期超過30 h。肌注磺胺類藥物，劑量的有效濃度維持時(shí)間為72 h，容易在畜產(chǎn)品中殘留。我國以及歐盟、美國等大多數(shù)國家對食品中磺胺類藥物的最高殘留量均有明確規(guī)定，我國規(guī)定了豬肉中的磺胺類藥物總量不得大于0.1 mg/kg[2]。

2 磺胺類藥物殘留的危害分析

如果磺胺類藥物在動(dòng)物或人體中積累到一定程度，會導(dǎo)致嚴(yán)重的不良反應(yīng)和副作用，對動(dòng)物和人體的健康造成嚴(yán)重威脅?；前奉愃幬飼绊懹仔髣?dòng)物的骨髓造血功能，導(dǎo)致功能抑制，引發(fā)其他嚴(yán)重不良反應(yīng)，如溶血性貧血、再生障礙性貧血等[3]。成年動(dòng)物長時(shí)間使用磺胺類藥物可能導(dǎo)致一系列神經(jīng)癥狀，對消化系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)形成程度不一的損傷，導(dǎo)致生產(chǎn)性能嚴(yán)重下降，臨床主要表現(xiàn)為精神沉郁、食欲衰退或消失、貧血、白細(xì)胞減少、尿少或無尿、血尿等。

人類如果長期食用存在磺胺類藥物殘留的畜產(chǎn)品，會導(dǎo)致人體間接性、長期性吸收磺胺類藥物，逐漸形成耐藥性。當(dāng)藥物濃度積累到一定程度后，會對人體中樞神經(jīng)系統(tǒng)造成不良影響，引發(fā)尿道受損、造血功能障礙以及過敏性反應(yīng)等，臨床表現(xiàn)主要包括血尿、蛋白尿、再生障礙性貧血、藥疹以及胃腸道不良反應(yīng)，同時(shí)存在一定的致癌、致突變風(fēng)險(xiǎn)[4]。

3 畜產(chǎn)品中磺胺類藥物殘留的原因分析

隨著相關(guān)檢測技術(shù)的不斷發(fā)展，目前對畜產(chǎn)品中磺胺類藥物殘留情況的檢測效果理想，但是畜產(chǎn)品中殘留磺胺類藥物的現(xiàn)象仍然十分明顯，對其原因進(jìn)行分析，主要包括下述幾個(gè)方面。

3.1 磺胺類藥物的使用不合理

目前部分獸醫(yī)因自身專業(yè)能力不足，用藥時(shí)未嚴(yán)格遵守相關(guān)規(guī)范進(jìn)行用藥，隨意增加用藥劑量，存在長期超標(biāo)濫用、誤用磺胺類藥物等不良情況，進(jìn)而導(dǎo)致磺胺類藥物在動(dòng)物體內(nèi)殘留量或殘留時(shí)間增加，雖然遵守相關(guān)要求執(zhí)行停藥期，但是仍然會導(dǎo)致畜產(chǎn)品中磺胺類藥物殘留超標(biāo)[5]。因此必須加強(qiáng)對動(dòng)物藥品的規(guī)范使用，避免超量用藥，同時(shí)加大對基層獸醫(yī)從業(yè)人員的培訓(xùn)力度，最大程度減少畜產(chǎn)品中的藥物殘留風(fēng)險(xiǎn)，為畜產(chǎn)品的質(zhì)量提供保障。

3.2 養(yǎng)殖過程中停藥期規(guī)定執(zhí)行不到位

為了提高獸藥應(yīng)用管理水平，保障動(dòng)物源性產(chǎn)品的質(zhì)量和安全，國家農(nóng)業(yè)部對20 余種磺胺類藥物以及適用動(dòng)物的停藥期進(jìn)行了明確規(guī)定。但是在具體養(yǎng)殖過程中，對于停藥期的執(zhí)行力度有所不足，部分獸醫(yī)并未嚴(yán)格遵守規(guī)定正確、合理應(yīng)用磺胺類藥物，不能嚴(yán)格根據(jù)停藥期相關(guān)規(guī)定及時(shí)停藥，進(jìn)而導(dǎo)致市場中銷售、流通的畜產(chǎn)品存在磺胺類藥物殘留情況[6]。

3.3 商品飼料中添加磺胺類藥物

《飼料藥物添加劑使用規(guī)范》中對磺胺類藥物制度的用法、用量、療程等進(jìn)行了明確規(guī)定，養(yǎng)殖場需要憑借獸醫(yī)開具的處方購買和使用磺胺類藥物，商品飼料中嚴(yán)禁擅自添加藥物。但是部分飼料生產(chǎn)企業(yè)為了追求利益，并未嚴(yán)格執(zhí)行相關(guān)規(guī)范，擅自在商品飼料中添加磺胺類藥物，動(dòng)物養(yǎng)殖過程中長期使用藥物，進(jìn)而導(dǎo)致畜產(chǎn)品藥物殘留超標(biāo)。

4 磺胺類藥物在畜產(chǎn)品中殘留的檢測方法

4.1 高效液相色譜法

色譜法最早是由俄國植物學(xué)家在1906年研究用碳酸鈣分離植物色素時(shí)發(fā)現(xiàn)的，目前色譜法在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域中的應(yīng)用日益廣泛[7]。多項(xiàng)相關(guān)研究顯示，對飼料以及畜產(chǎn)品等物品中的磺胺類藥物含量采取高效液相色譜法進(jìn)行檢測具有較高的應(yīng)用價(jià)值，并且檢測的準(zhǔn)確率較高，不易出現(xiàn)失誤，操作簡便[8]。

4.2 薄層色譜分離法

薄層色譜分離法也是一種應(yīng)用廣泛的檢測方法，主要是利用作為固定相的吸附劑對混合物中各種成分吸附力的大小不同，使各成分得到相互分離的方法，具有較高的檢測準(zhǔn)確性。薄層色譜分離法需要在塑料板、鋁基板或玻璃板涂抹均勻、較薄的一層固定相，之后進(jìn)行點(diǎn)樣，待其完全展開后，根據(jù)比移值（Rf）和合適的對照物進(jìn)行比較分析，進(jìn)而達(dá)到測定含量、檢測雜質(zhì)的作用。薄層色譜分離法的優(yōu)勢為檢測效率高、耗時(shí)短、分離速度快，能夠應(yīng)用于快遞定性，包括分離類固醇、磺胺類、脂肪酸以及核苷酸等多種物質(zhì)層析方法，同時(shí)能夠作用于跟蹤物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)的進(jìn)程，效果確切[9]。

4.3 免疫色譜法

免疫色譜法也被稱作免疫親和層析技術(shù)，最早出現(xiàn)于20 世紀(jì)50年代，屬于分離純化技術(shù)的一種，目前已得到全面推廣。免疫色譜法不但能夠應(yīng)用于純化生物大分子的分類，同時(shí)能夠應(yīng)用于定性、定量分析目標(biāo)產(chǎn)物，具有安全、穩(wěn)定、高效的優(yōu)勢。免疫色譜法能夠?qū)贵w進(jìn)行快速分離，主要原理為抗原抗體的特異性特征，能夠?qū)崿F(xiàn)對特異性抗體的分離純化，快速在樣本中得到目標(biāo)成分。因?yàn)榫哂休^強(qiáng)的專一性，因此使用免疫色譜法分離純化具有明顯效果。隨著研究的不斷深入，目前免疫親和柱能夠應(yīng)用于高效液相、高效氣相中，有效檢測和分析農(nóng)藥殘留、獸藥殘留、藥物成分。

4.4 毛細(xì)管電泳法

毛細(xì)管電泳法主要指溶質(zhì)在毛細(xì)管中的背景電解質(zhì)酶中，通過不同的速度逐漸遷移產(chǎn)生多個(gè)相對對立的溶質(zhì)帶電泳模式，也是目前檢測飼料、畜產(chǎn)品中磺胺類藥物含量的一種常用方法[10]。毛細(xì)管電泳法的分離通道使用彈性石英毛細(xì)管，動(dòng)力輸出表現(xiàn)為高壓直流電場，根據(jù)待測樣品中各組分的分配行為的差異性，能夠有效分離目標(biāo)和目標(biāo)物。因?yàn)槊?xì)管電泳法具有較小的毛細(xì)管電流，同時(shí)電阻較大，能夠有效控制焦耳熱效應(yīng)，散熱比面積較大，防止發(fā)生電泳溫度過高情況，分離效率較高，進(jìn)而提高了樣品檢測的準(zhǔn)確性。

4.5 熒光免疫測定

熒光免疫測定也是檢測畜產(chǎn)品中磺胺類藥物含量的常用方式，主要將血清、待測藥物、熒光標(biāo)記的待測藥物混合于聚苯乙烯管中，通過一定時(shí)間的孵育后加入γ-球蛋白和分子量6000 的聚乙二醇，使其結(jié)合的待測藥物與熒光標(biāo)記的藥物存留于上清液中。當(dāng)抗血清和熒光標(biāo)記藥物的量一定時(shí)，含待測藥物多的試管中，抗體結(jié)合的熒光標(biāo)記物較少，上清液中游離的熒光標(biāo)記物藥物較多。也就是待測物含量和熒光標(biāo)記物含量為正相關(guān)關(guān)系，檢測上清液的熒光強(qiáng)度便能夠有效計(jì)算待測物含量[11]。熒光免疫測定并不適用于目測，需要采用專門的設(shè)備和體系，因此在實(shí)際應(yīng)用過程中具有一定的局限性。

4.6 酶免疫測定

酶免疫測定是一種基于酶標(biāo)記抗原、半抗原或者抗體而形成的檢測方法。酶免疫測定能夠劃分為均相和非均相兩種類型。其中均相EIA 中并不需要游離和結(jié)合標(biāo)記物的分離便能夠?qū)崿F(xiàn)對標(biāo)記物的直接檢測，非均相EIA 需要首先進(jìn)行游離和標(biāo)記物的分離方可進(jìn)行檢測[12]。酶免疫檢測方法最早被稱為酶聯(lián)免疫吸附測定，具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、安全性強(qiáng)等優(yōu)勢，因此應(yīng)用廣泛。

4.7 分光光度法

分光光度法是一種靈敏、快捷便于操作的檢測方法，對畜產(chǎn)品中磺胺類藥物殘留的檢測效果理想。分光光度法的原理是黃安重氮化形成一種紅色物質(zhì)，檢測磺胺衍生物的主要范圍包括磺胺噻唑、磺胺嘧啶、磺乙酰胺、磺胺甲草唑、磺胺甲嘧啶、磺胺脒以及磺胺二甲嘧啶等。在硫酸介質(zhì)中，并且在鉬酸根離子存在的條件下，磺胺能夠和多巴胺發(fā)生絡(luò)合作用，在490 ～510 nm 波長下檢測生成紅色溶液的吸光度，該溶液能夠在27℃的環(huán)境下穩(wěn)定2 d，在最高吸收值波長下，0.04 ～8.00 μg/ml 濃度范圍內(nèi)遵循比爾定律。分光光度法目前已得到片劑藥物和眼藥水檢測的廣泛應(yīng)用，制藥階段所采用的的常規(guī)成型劑并不會影響檢測。分光光度法具有操作簡便、快速、靈敏度高等優(yōu)勢，并不需要加熱，沒有其他提取過程。

4.8 CAST 法

CAST 法也被稱作牛抗生素磺胺試驗(yàn)法，基本試驗(yàn)方法為將拭子插入待檢測樣品中，20 min 后去除，放入枯草芽孢桿菌的培養(yǎng)基中，通過18 ～24 h 的培養(yǎng)后，如果拭子周圍存在2 mm 以上的抑菌圈，說明該組織中存在抗菌藥物。CAST 法耗時(shí)較長，雖然具有操作簡單、經(jīng)濟(jì)、批量大等優(yōu)勢，但是需要特殊的抗體，同時(shí)可能存在交差反應(yīng)，定量并不準(zhǔn)確，易發(fā)生假陽性。

5 結(jié)語

磺胺類藥物在畜產(chǎn)品中殘留會對人體健康造成嚴(yán)重威脅。目前畜產(chǎn)品中磺胺類藥物類型繁多，藥物應(yīng)用的具體方式存在明顯差異，由于部分獸醫(yī)對磺胺類藥物的使用不熟悉，實(shí)際用藥時(shí)常發(fā)生錯(cuò)誤用藥、濫用藥物等現(xiàn)象，導(dǎo)致牲畜體內(nèi)殘留大量磺胺類藥物，進(jìn)而導(dǎo)致畜產(chǎn)品中磺胺類藥物含量超標(biāo)。另外一些養(yǎng)殖場為了保證牲畜的生存率，長期對養(yǎng)殖牲畜采用磺胺類藥物，進(jìn)一步加重藥物殘留情況。針對上述情況，飼養(yǎng)人員需要提高飼料管理水平，減少飼料中的磺胺類藥物，嚴(yán)格控制磺胺類藥物的使用劑量，保證合理用藥。同時(shí)相關(guān)工作人員需要掌握磺胺類藥物殘存的原因，同時(shí)采取有效的檢測技術(shù)進(jìn)行檢測，最大程度減少藥物殘留風(fēng)險(xiǎn)。