王 禹
(黑龍江省農(nóng)科院園藝分院,哈爾濱150060)
樹莓(RubusidaeusL.)為懸鉤子屬多年生落葉小灌木,俗稱托盤、覆盆子,分單季品種和雙季品種,適應(yīng)性強(qiáng),栽培范圍廣。其果實(shí)營養(yǎng)價值高、口感好,除富含豐富的維生素、氨基酸和類黃酮外,還含有糅化酸、花色苷、SOD 酶等有益成份,是當(dāng)今風(fēng)靡世界的第三代水果中的佼佼者。
隨著樹莓種植面積的擴(kuò)大,優(yōu)質(zhì)種苗的需求也隨之增長。但樹莓傳統(tǒng)的根蘗分株、埋土壓條和扦插繁殖育苗方式,受氣候條件、環(huán)境因素影響及母株數(shù)量和品種特性限制,致使生育周期長,繁殖系數(shù)低,苗木質(zhì)量參差不齊,難以滿足市場對優(yōu)質(zhì)苗木的需求。因此,應(yīng)探索有效的樹莓優(yōu)良種苗繁育途徑。從材料選擇、組培苗育苗、組培苗馴化及管理等方面闡述樹莓組織培養(yǎng)技術(shù)繁育種苗,以期提高種苗繁殖數(shù)量和質(zhì)量。
選擇無病蟲害、生長健壯、芽體飽滿莖粗不超過0.5 cm的嫩枝或半木質(zhì)化的枝條。田間采集時間為6月中旬~ 9月初。
所有培養(yǎng)基均采用MS + 植物激素 + 7 g/L瓊脂 + 30 g/L白糖,pH 5.4~6.0,0.103 MPa,121 ℃,濕熱滅菌20 min。無菌水、濾紙及工具,0.103 MPa,121 ℃,濕熱滅菌30 min。
將采集的枝條剪成帶一個芽1 cm長的莖段,用洗潔精清洗干凈,流水狀態(tài)下沖洗1 h,置于超凈工作臺中無菌水沖洗3次。
嫩枝莖段消毒:酒精40 s,無菌水沖洗3次,每次1 min以上;HgCl2消毒5 min,無菌水沖洗3次,每次1 min以上。
半木質(zhì)化莖段消毒:酒精1 min,無菌水沖洗3次,每次1 min以上;HgCl2消毒7 min,無菌水沖洗3次,每次1 min以上。
2.3.1 生長培養(yǎng)。將消毒好的莖段底部黑色部分切去,接種到MS + 1 mg/L 6-BA + 0.5 mg/L NAA生長培養(yǎng)基上。7 d后腋芽陸續(xù)萌發(fā),轉(zhuǎn)接增殖培養(yǎng)基時,芽高最好不超過1 cm。
2.3.2 增殖培養(yǎng)。將萌發(fā)的腋芽從莖段上切下,接種到MS + 1.5 mg/L 6-BA + 0.05 mg/L NAA增殖培養(yǎng)基上,每30 d轉(zhuǎn)接一次,增殖系數(shù)因品種而異,可達(dá)2.8~4.1。
增殖培養(yǎng)可連續(xù)進(jìn)行4次,然后進(jìn)行復(fù)壯培養(yǎng),復(fù)壯培養(yǎng)基可采用MS + 1 mg/L 6-BA + 0.5 mg/L NAA,培養(yǎng)溫度20 ℃,光照時間10 h/d,培養(yǎng)30 d。
2.3.3 生根培養(yǎng)。當(dāng)組培苗長至1 cm高時,切成單株狀,接種到MS+0.2 mg/L IBA生根培養(yǎng)基上。
2.3.4 培養(yǎng)條件。白天溫度23 ℃±2 ℃,夜間不低于18 ℃;光照時間14 h/d,光照強(qiáng)度為2500~3000 lx,相對空氣濕度40%~60%。
2.4.1 煉苗。當(dāng)組培苗根系1 cm長時,將組培苗從培養(yǎng)室移至馴化室。繼續(xù)生長至根系長2 cm、株高3 cm以下,此時進(jìn)行馴化。馴化前3 d,把瓶蓋打開,讓組培苗逐步適應(yīng)外界環(huán)境。
2.4.2 移栽。栽基質(zhì)采用草炭土,拌入30%的百菌清(百菌清∶土1∶100),噴灑2.5%殺滅菊酯乳油1000倍液,塑料布覆蓋7 d。采用72穴,5 cm深的穴盤,使用前穴盤澆透水,放置2 d。
將組培苗根部培養(yǎng)基洗凈,用鑷子在穴盤上上打孔,根系不要卷曲,栽好后輕輕把空隙填滿,不要用手壓,以免基部折斷,澆透水即可。
2.4.3 馴化管理。緩苗前保持土壤濕潤,遮光率20%;相對空氣濕度不高于40%;環(huán)境溫度白天不高于30 ℃,夜晚不低于18 ℃,30 d后成活率可達(dá)90%。
移栽后注意預(yù)防紅蜘蛛,可選用73%炔螨特乳油、阿維菌素等;真菌、細(xì)菌性害可采用甲基托布津、使百克等。緩苗后每15 d 噴 1 次0.2%~0.3%磷酸二氫鉀溶液。