劉翠翠，殷嘉妮，蔣斯明，邵陽,2*

（1.南京世和基因生物技術(shù)股份有限公司，江蘇 南京 210032; 2.南京醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院，江蘇 南京 210029）

膽管癌（cholangiocarcinoma，CCA）是一種罕見且致死率高的惡性腫瘤，該病的全球發(fā)病率逐年上升。對于可手術(shù)患者，根治性術(shù)后，約35%患者在2年內(nèi)會復(fù)發(fā)[1]。絕大多數(shù)患者在確診時，疾病已經(jīng)發(fā)展到了轉(zhuǎn)移性且不可手術(shù)的地步[2-3]。晚期轉(zhuǎn)移性CCA患者的標(biāo)準(zhǔn)治療方案為吉西他濱聯(lián)合順鉑，但是其5年生存率仍小于2%，且二線及末線治療手段有限[4]。因此，對于CCA的治療，急需新的治療方案和方法。

基因圖譜研究顯示，近一半的CCA攜帶潛在治療靶點，主要包括的激酶基因有成纖維細(xì)胞生長因子受體基因（fibroblast growth factor receptor，F(xiàn)GFR1/2/3），磷脂酰肌醇-3-激酶亞基基因（phosphatidylino-sitol-3-kinase，PIK3CA）、間 變性淋巴瘤激酶基因（anaplastic lymphoma kinase，ALK）、表皮生長因子受體基因（epidermal growth factor receptor，EGFR）、表皮生長因子受體2基因（ERBB2）、小鼠肉瘤病毒癌基因同源物B1（murine sarcoma viral oncogene homolog B1，BRAF）、Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因（Kirsten rat sarcoma viral oncogene，KRAS）、母體抗生物皮膚生長因子同源蛋白4基因（mothers against decapentaplegic homolog 4，SMAD4）、異檸檬酸脫氫酶1基因（isocitrate dehydrogenases 1，IDH1）、IDH2、 細(xì)胞周期素基因（cyclinD，CCND1）、CCND3、鼠雙微體2基因（murine double minute 2，MDM2），以及抑癌基因腫瘤蛋白p53（tumor protein p53，TP53）、乳 腺 癌 易 感 基 因（breast cancer susceptibility genes，BRCA1/2）[5-6]。根 據(jù) 腫 瘤 在膽道中的位置，可以分為肝內(nèi)膽管癌（intrahepatic cholangiocarcinoma，ICC）和肝外膽管癌(extrahepatic cholangiocarcinoma，ECC )，其中，ICC的發(fā)生頻率占CCA發(fā)病率的5% ～ 20%[7-8]。ICC和ECC兩者的發(fā)病率、危險因素、臨床表現(xiàn)均不相同[9]，同樣的，兩者基因突變圖譜也不相同：ICC中，常見突變基因為IDH1（30%）、AT豐富結(jié)合域1A（AT-rich interaction domain 1A，ARID1A，23%）、BRCA1相關(guān)蛋白1基因（BRCA1 associated protein-1，BAP1，20%)以及TP53（20%）和FGFR2融合基因（14%）；ECC中常見突變基因為KRAS（40%）、SMAD4（30%）和絲氨酸/蘇氨酸激酶11基因（serine/threonine kinase 11，STK11，11%）（見圖1）。在CCA常見的突變基因中，TP53常與細(xì)胞周期依賴性激酶抑制基因（cyclin-dependent kinase inhibitor 2A，CDKN2A）、CDKN2B突變共發(fā)生，而SMAD4和KRAS也存在共突變現(xiàn)象。另外，超出解剖位置上的差異，不同突變基因存在互斥的現(xiàn)象，比如TP53和IDH1、IDH1和KRAS、TP53和BAP1、IDH1和FGFR2[10]。

圖1 膽管癌分子圖譜 Figure 1 Molecular spectrum of cholangiocarcinoma

針對以上靶點的抑制劑有可能成為CCA的潛在治療方法。2020 美國臨床腫瘤學(xué)會胃腸道腫瘤研討會（ASCO GI）的一項研究，對212例膽道腫瘤患者進(jìn)行FoundationOne CDx檢測，篩選到68例具有可用藥靶點的患者接受靶向治療，與未接受靶向治療的患者相比，中位無進(jìn)展生存期（median progression-free survival，mPFS）分別為6.2和2.8個月[11]，具有顯著的臨床效果。

FGFR是CCA靶向治療中重要靶點之一。據(jù)報道約20%的ICC病例中存在FGFR通路的異常激活[12-13]。FGFR蛋白主要包括 FGFR1、FGFR2、FGFR3和FGFR4 4個亞型，均具有與配體結(jié)合的胞外區(qū)、跨膜區(qū)和受體磷酸化的胞內(nèi)區(qū)的結(jié)構(gòu)特點，是酪氨酸激酶信號通路的一部分，參與細(xì)胞增殖和分化。FGFR分子改變包括胞外結(jié)構(gòu)域和激酶結(jié)構(gòu)域?qū)?yīng)的點突變、擴(kuò)增以及FGFR基因融合，都可導(dǎo)致FGFR信號通路異常激活（見圖2），促進(jìn)細(xì)胞增殖、新血管生成、侵襲、轉(zhuǎn)移、抗凋亡等。

圖2 不同F(xiàn)GFR變異類型所導(dǎo)致的FGFR激活模式Figure 2 Activation of FGFR signaling caused by various types of oncogenic FGFR alterations

1 膽管癌中FGFR基因變異圖譜

在CCA中，F(xiàn)GFR變異的占比約為7%，變異類型包括融合（3.5%）、擴(kuò)增（2.6%）、點突變或插入缺失（0.9%）。不同F(xiàn)GFR基因在CCA中的變異頻率有明顯差異（見表1）。其中，F(xiàn)GFR2是FGFR家族中最高頻的CCA相關(guān)變異基因，占6.1%[5]；其變異形式以融合為主。其他FGFR基因的變異在CCA中也有報道，但是發(fā)生率相對較低[10,14-15]。

表1 膽管癌中FGFR基因變異頻率Table 1 Frequencies of FGFR aberrations in cholangiocarcinoma

傳統(tǒng)融合檢測與高通量測序技術(shù)的發(fā)展揭示了FGFR2在CCA中的融合圖譜。研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)GFR2融合幾乎僅發(fā)生在ICC中，發(fā)生頻率為5% ～ 17%[6,10,14,16-19]。Graham等[17]應(yīng)用熒光原位雜交技術(shù)（fluorescence in situ hybridization，F(xiàn)ISH），發(fā)現(xiàn)在156例膽道腫瘤患者中有13例攜帶FGFR2融合，其中12例為ICC患者（12/96，13%）、1例為膽管內(nèi)乳頭狀腫瘤。Arai等[16]應(yīng)用實時熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)（quantitative real time polymerase chain reaction，qRT-PCR）聯(lián)合一代桑格（Sanger）測序驗證FGFR2融合在CCA中的頻率是8.8%（9/102)，并且僅在ICC中發(fā)生的頻率為13.6%（9/66）。另一方面，利用二代測序技術(shù)（next generation sequencing，NGS）發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)GFR的融合斷點多位于18號外顯子，與伴侶基因的3'端結(jié)合，但是其融合伴侶繁富多樣，同時，F(xiàn)GFR3的融合在CCA中也有案例報道[15]。一項國際多中心研究[15]，對來自10個國家的489例CCA樣本進(jìn)行了多組學(xué)分析（全基因組、靶向/外顯子組、轉(zhuǎn)錄組、DNA甲基化組），定義了4個CCA亞群，其中一個亞組富集FGFR基因變異，包括10例點突變、3例插入缺失、1例擴(kuò)增以及多種FGFR2融合形式（FGFR2-BICC1，F(xiàn)GFR2-STK26，F(xiàn)GFR2-TBC1D1和FGFR2-WAC），并首次在CCA中檢測到FGFR3融合（FGFR3-TACC3）。在該研究中，還觀察到FGFR2基因3'非翻譯區(qū)（3'untranslated region，3'UTR）的丟失現(xiàn)象，這可能是FGFR2激活的新的潛在機(jī)制。另外，Nakamura等[6]對260例CCA患者進(jìn)行了全外顯子測序和轉(zhuǎn)錄組測序，包括145例ICC、86例ECC和29例膽囊癌。在6例ICC（6/109，5.5%）中鑒定了4種FGFR2融合伴侶：FGFR2-BICC1（3/6）、FGFR2-AHCYL1（1/6）、FGFR2-KCTD1（1/6）和FGFR2-TXLNA（1/6）。除了全基因組全外顯子檢測，大量針對FGFR融合圖譜的研究是基于NGS大panel基因檢測。一項針對195例CCA樣本（ICC，158例；ECC，27例）的研究[10]，基于紀(jì)念斯隆凱特琳癌癥研究中心癌癥基因檢測分析平臺（MSK-IMPACT）的410個基因的大panel，在19例ICC（12%）患者中檢測到16種FGFR2融合形式，常見融合伴侶為BICC1（6/16，37.5%）和KIAA1217（2/16，12.5%），其中BICC1包含多種融合形式。其他融合伴侶異質(zhì)性較高，都分別以個例形式發(fā)生。另一項針對75例CCA患者（ICC，55例；ECC，20例）的圖譜研究[14]檢測了236個癌癥相關(guān)基因，在4例ICC（7.3%）中檢測到3種FGFR2融合，融合伴侶分別是KIAA1598、NOL4和PARK。還有一項小樣本研究[18]，針對28例ICC患者做了182個基因的靶向檢測，發(fā)現(xiàn)4例FGFR2融合（14%），融合伴侶包括KIAA1598、BICC1和TACC3。FIGHT-202 Ⅱ期臨床試驗[20]入組了107例FGFR2融合膽管癌患者（105例ICC、1例ECC、1例亞型不明確），有56種FGFR2融合類型，其中75%融合類型為患者個體所特有，常見融合伴侶為BICC1，占比為29%。其他較高頻融合伴侶包括KIAA1217（4%）、AHCYL1（3%）和SLMAP（2%），剩余融合伴侶頻率大多為1% （見表2）。

表2 FGFR2融合伴侶Table 2 Landscape of FGFR2 fusion partners

另外，一項來自日本的研究結(jié)果顯示，4.8%的肝門旁膽管癌也攜帶FGFR2融合，而ICC中FGFR2融合發(fā)生頻率為7.7%[21]，這可能與肝門和ICC沒有清晰的解剖分類有關(guān)，但這也顯示了FGFR2融合在膽管癌中變異的復(fù)雜性。后續(xù)期待更多的研究揭示FGFR2融合在膽管癌不同亞型中的發(fā)生頻率。

2 靶向治療在膽管癌中的應(yīng)用

目前針對CCA的多種FGFR抑制劑處于臨床開發(fā)的各個階段，并在難治晚期FGFR融合或變異陽性患者中展現(xiàn)了一定的療效（見表3）。其中，Ⅱ期 FIGHT-202 的試驗結(jié)果顯示，培米替尼（pemigatinib，Pemazyre?）用于治療晚期經(jīng)治FGFR2基因融合陽性的CCA患者，客觀緩解率（objective response rate，ORR）高 達(dá)35.5%， mPFS和中位總生存期（median overall survival，mOS）分別長達(dá)6.9和21.1個月?；谶@項研究的結(jié)果，美國FDA批準(zhǔn)培米替尼作為首個用于治療攜帶FGFR2基因融合晚期膽管癌成人患者的靶向藥物，并批準(zhǔn)FoundationOne CDx作為培米替尼的伴隨診斷產(chǎn)品。同時，Ⅲ期隨機(jī)對照研究FIGHT-302正在開展，探究培米替尼一線治療攜帶FGFR2融合的CCA的療效[20]。此外，多個FGFR抑制劑都在CCA中初現(xiàn)療效 （見表3），這些研究均顯示了FGFR抑制劑以及檢測FGFR融合及變異在CCA治療中的應(yīng)用價值。

表3 膽管癌中有關(guān)FGFR抑制劑臨床試驗介紹Table 3 Clinical trials of FGFR inhibitors in cholangiocarcinoma

另外，IDH1在ICC和ECC中的突變頻率分別約為13%和4%[22-23]。Ⅲ期、多中心、隨機(jī)ClarIDHy試驗結(jié)果顯示：IDH抑制劑艾伏尼布（ivosidenib）治療接受過一線以上治療的IDH1突變的CCA患者的mPFS有所改善，對比安慰劑，分別是2.7和1.4個月，疾病控制率（disease control rate，DCR）分別是53%和28%[24]。另有2款I(lǐng)DH抑制劑達(dá)沙替尼（dasatinib）和AG-881（vorasidenib）目前正處于臨床研發(fā)階段。研究顯示，神經(jīng)營養(yǎng)素受體絡(luò)氨酸激酶（neurotrophic receptor kinase，NTRK）在ICC中的突變頻率約為3.5%[18]，恩曲替尼和拉羅替尼在CCA中也顯示出一定治療療效[25-26]。BRAF突變（最常見為V600E突變）在ICC中的發(fā)生頻率為3% ～ 22%[27]，在8例BRAFV600E突變接受威羅菲尼（vemurafenib）治療的膽管癌患者中，1例表現(xiàn)為部分緩解（partial response，PR），4例為病情穩(wěn)定（stable disease，SD）[28]。ROAR籃子試驗的初步結(jié)果顯示，達(dá)拉非尼聯(lián)合曲美替尼在BRAFV600E CCA隊列中顯示出一定療效[29]。BRCA1/2在ICC中的突變頻率為1% ～ 4%[6]。一項多中心回顧性研究顯示，4例攜帶種系或體系BRCA1/2突變的CCA患者接受聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶（poly ADP-ribose polymerase，PARP）抑制劑治療后，其中1例患者PFS長達(dá)42.6個月[30]。 其他CCA靶標(biāo)如間質(zhì)表皮轉(zhuǎn)化因子（mesenchymal to epithelial transition factor，MET）[31]、CDKN2A[32]等目前未顯示出治療前景。

3 FGFR基因檢測方法及伴隨診斷

伴隨診斷是體外診斷的一種，是能夠為患者提供特定藥物應(yīng)用的安全性與有效性信息的體外診斷試劑，能幫助醫(yī)療工作者評估不同患者的受益程度以及潛在不良反應(yīng)與風(fēng)險，并確定最終治療方案[36]。在腫瘤治療中，伴隨診斷與精準(zhǔn)醫(yī)療密不可分，用于篩選靶向治療獲益人群、監(jiān)測治療反應(yīng)[37]。針對FGFR基因融合及其他變異的檢測不但可以用于篩選抑制劑獲益人群，與患者的預(yù)后以及腫瘤的惰性狀態(tài)也相關(guān)。比如，攜帶FGFR融合的患者中位總體生存期（median overall survival，mOS）顯著高于FGFR野生型患者[38-39]，F(xiàn)GFR融合患者腫瘤處于相對惰性狀態(tài)[14]。因此有必要在CCA治療，尤其是靶向治療中引入FGFR基因檢測，目前可用于FGFR基因檢測的技術(shù)主要有免疫組織化學(xué)（immunohistochemistry，IHC）/FISH、qRT-PCR、NGS。

IHC/FISH技術(shù)是傳統(tǒng)的融合檢測方式。IHC是基于抗體對于組織細(xì)胞中抗原的特異性識別和結(jié)合，通過抗體上顯色反應(yīng)對于細(xì)胞中抗原進(jìn)行定位、定性及定量的技術(shù)。IHC并非直接檢測腫瘤細(xì)胞的遺傳學(xué)變化，而是檢測FGFR蛋白，通過表達(dá)量來判斷陽性與否。然而，融合不一定會引起蛋白水平的上升，導(dǎo)致假陰性的可能[40]。FISH技術(shù)是在待測基因兩端設(shè)計熒光探針，通過觀察兩端探針分離程度判定基因融合情況。FISH的結(jié)果判讀依賴經(jīng)過嚴(yán)格培訓(xùn)的病理醫(yī)生，且活檢標(biāo)本腫瘤細(xì)胞常達(dá)不到要求。同時，IHC和FISH不能確定融合斷點的位置、具體融合伴侶等信息，無法發(fā)現(xiàn)新的融合伴侶，并且通量低，通常一次檢測1個基因的融合。但是基于傳統(tǒng)檢測技術(shù)操作簡便、周期短，在特定融合基因的檢測中廣泛應(yīng)用。由于FGFR融合伴侶的復(fù)雜性，傳統(tǒng)檢測技術(shù)IHC/FISH用于檢測FGFR融合局限性較大。所以，傳統(tǒng)檢測方法中，往往只有FISH技術(shù)應(yīng)用于驗證高通量測序鑒定的FGFR融合結(jié)果[16]。

qRT-PCR技術(shù)利用熒光信號的變化實時檢測PCR擴(kuò)增反應(yīng)中每一個循環(huán)擴(kuò)增產(chǎn)物量的變化，從而對起始模板進(jìn)行定性、定量分析。熒光標(biāo)記方法有染料法和Taqman探針法，Taqman探針法適合目標(biāo)區(qū)域變異檢測。在泌尿上皮癌中，F(xiàn)DA批準(zhǔn)therascreen?FGFR RGQ RT-PCR Kit（Qiagen)作為厄達(dá)替尼的伴隨診斷試劑盒，該試劑盒基于qRTPCR技術(shù)定性檢測患者腫瘤組織中的FGFR基因變異，包括4種FGFR3點突變和3種FGFR3融合 及2種FGFR2融 合（FGFR2-BICC1、FGFR2-CASP7）。qRT-PCR技術(shù)操作簡單、周期短、相對敏感性較高，然而該方法應(yīng)用于CCA中FGFR融合的檢測存在明顯不足：1）qRT-PCR探針根據(jù)已知突變位點設(shè)計，僅能檢測已知突變，對未知突變檢出不足；2）檢測樣本為核糖核酸（ribonucleic acid，RNA），易降解，對樣本質(zhì)量和檢測環(huán)境要求較高；3）CCA中基因融合伴侶異質(zhì)性高，多為未知融合，因此該技術(shù)在CCA的臨床應(yīng)用中有一定局限性。但是該技術(shù)多用于驗證NGS鑒定的融合形式，比如Wu等[13]應(yīng)用qRT-PCR技術(shù)驗證了4個通過轉(zhuǎn)錄組測序（RNA-seq）鑒定的FGFR2融合形式。

NGS高通量測序技術(shù)，典型特點是讀長短、通量高、準(zhǔn)確性高，可以同時檢測多個突變、多種變異形式，尤其是在鑒定基因融合伴侶方面具有顯著優(yōu)勢，不僅可以揭示罕見新型融合，并能清晰給出融合伴侶和斷點信息，輔助判斷融合是否有效。有分析顯示約10 000種基因融合中的90%通過NGS技術(shù)發(fā)現(xiàn)鑒定[41]。NGS技術(shù)主要分為基于DNA和基于RNA的2種融合檢測方式。 基于DNA樣本的NGS包括全基因組測序（whole genome sequencing，WGS）、全外顯子測序（whole exome sequencing，WES）、目標(biāo)區(qū)域測序，綜合考慮檢測成本、分析復(fù)雜性及檢測周期等因素，臨床應(yīng)用中一般采用目標(biāo)區(qū)域測序。另一方面， 基于RNA樣本的NGS包括全部信使RNA（messenger RNA，mRNA）測序和目標(biāo)mRNA測序，前者檢測范圍全面，后者檢測更具針對性，RNA-seq克服了基因組panel檢測內(nèi)含子覆蓋不足的問題，也解決了基因組突變，轉(zhuǎn)錄組不一定表達(dá)的問題，在外顯子跳躍和可變剪切方面更具優(yōu)勢，可有效補(bǔ)充基因組基因融合檢測。針對全部mRNA測序，在CCA中鑒定了多種FGFR2融合形式[6,13,15]，應(yīng)用靶向mRNA測序，研究者也檢測到多種FGFR融合形式[21]。在血液系統(tǒng)腫瘤中，聯(lián)合DNA-seq和RNA-seq可有效檢測的基因突變、拷貝數(shù)變異、基因融合等多種變異形式[42]，因此在實體瘤融合基因檢測方面也可以嘗試兩者聯(lián)合檢測。另外，一項靶向檢測實體瘤中93種激酶及轉(zhuǎn)錄因子基因融合的RNA-seq技術(shù)，在敏感性和特異性方面分別可達(dá)93.3%和100%[43]。 目前，F(xiàn)oundation One CDx是CCA目前唯一獲批的伴隨診斷，中國還沒有針對FGFR基因檢測的NGS產(chǎn)品獲批。FoundationOne CDx獲美國FDA批準(zhǔn)作為培米替尼的伴隨診斷顯示出NGS技術(shù)在基因融合檢測中的重要作用，該伴隨診斷是針對DNA測序。

比較以上幾種技術(shù)（見表4），NGS技術(shù)檢測FGFR基因融合優(yōu)勢明顯，不僅可以揭示罕見新型融合，并能清晰給出融合伴侶和斷點信息，輔助判斷融合是否有效。除了融合，前文還提到FGFR基因還存在其他激活性變異，包括激酶結(jié)構(gòu)域的點突變和3'UTR的缺失。同時，盡管CCA中FGFR2靶向治療顯示出一定的應(yīng)用前景，但是獲得性耐藥不可避免，Goyal等[38]研究結(jié)果顯示，3例使用BGJ398有反應(yīng)的FGFR2融合陽性患者，在疾病進(jìn)展時均檢測到V564F突變，體外實驗證明為耐藥突變。NGS技術(shù)具有高通量特點，同時檢測多基因多位點，可以幫助全面揭示驅(qū)動和耐藥機(jī)制，與此同時檢測微衛(wèi)星不穩(wěn)定性（microsatellite instability，MSI）、腫瘤突變負(fù)荷（tumor mutation burden，TMB）、NTRK等泛癌種標(biāo)志物，為罕見腫瘤患者提供更多用藥機(jī)會。

表4 FGFR融合檢測技術(shù)對比Table 4 Comparison of detection methods for FGFR rearrangements

另一方面，分子診斷技術(shù)在準(zhǔn)確性和精確度上的提升推動了藥物的伴隨診斷試劑盒的開發(fā)。試劑盒根據(jù)開發(fā)的時間點，可以分為“原研伴隨診斷試劑”，即與相關(guān)抗腫瘤藥物共同開發(fā)，或“新研制伴隨診斷試劑”，即在抗腫瘤藥物上市后開發(fā)。因此存在針對同一抗腫瘤藥物開發(fā)多個伴隨診斷試劑的情況。在美國伴隨診斷按照醫(yī)療器械管理，有3條申請通道，分別是上市前批準(zhǔn)通道、上市前通告通道、實驗室開發(fā)診斷測試通道[36]。我國體外診斷根據(jù)產(chǎn)品風(fēng)險程度高低，依次分為三類、二類、一類產(chǎn)品。三類產(chǎn)品由國家藥品監(jiān)督管理局（National Medical Products Administration，NMPA）審查，二類產(chǎn)品由省、自治區(qū)、直轄市藥品監(jiān)督管理部門審查，一類產(chǎn)品實行備案管理，備案人向設(shè)區(qū)的市級藥品監(jiān)督管理部門提交備案資料。腫瘤相關(guān)體外診斷試劑按第三類體外診斷試劑管理，由NMPA審查，第三方醫(yī)學(xué)檢驗所由臨檢中心監(jiān)督管理。中國FGFR基因檢測技術(shù)主要包括：FISH、qRT-PCR、NGS，其中FISH已有成熟產(chǎn)品，qRT-PCR和NGS方法均有專利申請（見表5）。另外，一些大型檢測公司也在其檢測panel中加入了多種FGFR家族基因。但是目前NMPA尚未批準(zhǔn)任何FGFR相關(guān)的伴隨診斷產(chǎn)品。

表5 中國FGFR基因檢測代表性產(chǎn)品和專利Table 5 Representative detection assays of FGFR rearrangement in China

4 結(jié)語與展望

CCA遺傳異質(zhì)性高，常見突變基因有FGFR2、IDH1/2、KRAS、BRAF等，其 中FGFR2融 合 和IDH1/2突變最為重要，因為針對這2個靶點的藥物臨床研究和藥物審批走在前列。培米替尼的獲批以及多項臨床試驗的結(jié)果均證實了FGFR抑制劑對CCA的治療療效。FGFR2融合作為CCA中常見的FGFR家族變異，在多項臨床實驗中用于篩選潛在獲益人群。CCA基因圖譜也報道了其他FGFR基因變異形式，包括擴(kuò)增、點突變、插入缺失，但發(fā)生頻率相對較低，因此FGFR基因變異的精準(zhǔn)檢測對CCA，尤其是ICC的靶向精準(zhǔn)治療至關(guān)重要。

目前FGFR2融合檢測的方法包括IHC、FISH、qRT-PCR和NGS，4種方法各有優(yōu)劣勢。由于FGFR2基因融合伴侶異質(zhì)性強(qiáng)，70%以上的患者檢測到的融合伴侶均為個體所特有而非共有，最常見的融合伴侶僅占FGFR2融合陽性患者的29%。NGS技術(shù)在新型融合伴侶鑒定、明確斷點信息方面具有明顯優(yōu)勢，但是成本較高。美國FDA批準(zhǔn)FoundationOne CDx作為培米替尼的伴隨診斷產(chǎn)品，用于檢測FGFR2基因融合，該伴隨診斷采用NGS技術(shù)。目前中國一些大型檢測公司在其產(chǎn)品中加入FGFR家族基因檢測，但NMPA尚未批準(zhǔn)FGFR相關(guān)伴隨診斷產(chǎn)品。

CCA中不同F(xiàn)GFR2融合亞型患者的預(yù)后、對FGFR抑制劑的響應(yīng)情況是否不同、應(yīng)用不同檢測技術(shù)得到的基因融合形式對臨床的實用性如何，目前尚不明確，針對中國CCA人群的FGFR基因伴隨診斷試劑盒也有待進(jìn)一步開發(fā)。