王麗

（許昌市中心醫(yī)院 病理科， 河南 許昌461000）

肺癌是對(duì)人類(lèi)健康與生命威脅較大的惡性腫瘤之一， 該疾病組織類(lèi)型主要包括鱗癌、 腺癌、 小細(xì)胞癌及腺鱗癌， 不同類(lèi)型肺癌治療方式均不相同， 因此， 高效、 快速的肺癌鑒別診斷可為臨床早期預(yù)防與治療提供依據(jù)［1］。 既往臨床多采用穿刺活檢診斷肺癌， 該方式也是肺癌檢測(cè)的 “金標(biāo)準(zhǔn)”， 檢出率較高，但也是一種有創(chuàng)檢測(cè)， 故臨床應(yīng)用效果受限。 研究［2］表明，P63 蛋白 （P63）、 甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子－1 （TTF－1） 及細(xì)胞角蛋白7（CK7） 均與肺癌發(fā)生有關(guān)。 鑒于此， 本研究探討肺癌組織中P63、 TTF－1、 CK7 水平對(duì)肺癌的鑒別診斷價(jià)值， 現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選擇2017 年1 月至2020 年1 月我院的86 例肺癌穿刺活檢樣本作為研究對(duì)象， 其中男51 例， 女35 例； 年齡54 ～69 歲， 平均年齡 （61.23 ± 4.18） 歲； 體重45 ～78 kg， 平均體重 （61.57 ± 5.09） kg。 所有樣本均行病理檢測(cè)及免疫組織化學(xué)染色法 （S－P 檢測(cè)法）， 本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)［2017 年審 （106） 號(hào)］。

1.2 入選標(biāo)準(zhǔn)納入標(biāo)準(zhǔn)： ①符合 《現(xiàn)代腫瘤學(xué)》［3］中肺癌診斷標(biāo)準(zhǔn)； ②經(jīng)病理檢測(cè)確診為肺癌； ③未行放療、 化療治療； ④患者均知情并配合本研究， 且簽署相關(guān)知情同意書(shū)。 排除標(biāo)準(zhǔn)： ①精神狀態(tài)異常， 無(wú)法正常溝通； ②合并其他惡性腫瘤； ③血液系統(tǒng)疾??； ④感染性疾病。

1.3 方法（A） 檢測(cè)試劑與方法。 本研究所需主要試劑為鼠抗人P63、 TTF－1、 CK7 單克隆抗體， 所有試劑均由上海信裕生物科技有限公司提供， 并均在保質(zhì)期范圍內(nèi)， 使用時(shí)按照操作說(shuō)明嚴(yán)格進(jìn)行。 具體檢測(cè)方法如下： 采用S－P 檢測(cè)法檢測(cè)P63、 TTF－1、 CK7 水平， 所有穿刺活檢樣本采用10%中性甲醛液固定， 脫水處理后石蠟包埋切片， 連續(xù)切片5 ～7 張， 每張切片厚度約為4 μm， 切片進(jìn)行常規(guī)HE 染色， 其中一張用于常規(guī)病理檢測(cè)， 以PBS 緩沖液代替一抗作為陰性對(duì)照， 抗體陽(yáng)性標(biāo)本作為陽(yáng)性對(duì)照。 最終結(jié)果由我院兩位經(jīng)驗(yàn)豐富的病理醫(yī)生對(duì)免疫組化切片進(jìn)行評(píng)定并作出最終判斷。 （B） 判斷標(biāo)準(zhǔn)。①HE 染色結(jié)果以腫瘤細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)棕黃顆粒為陽(yáng)性， 其計(jì)分標(biāo)準(zhǔn)為： 0 分： 無(wú)著色； 1 分： 淺黃色； 2 分： 棕黃色； 3 分：棕褐色。 ②腫瘤細(xì)胞陽(yáng)性表達(dá)＞10%即為陽(yáng)性， 其陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)分標(biāo)準(zhǔn)為： 400×顯微鏡下隨機(jī)選取10 個(gè)視野進(jìn)行陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)， 0 分： 無(wú)陽(yáng)性細(xì)胞； 1 分： 陽(yáng)性細(xì)胞＜10%； 2 分： 陽(yáng)性細(xì)胞11% ～51%； 3 分： 陽(yáng)性細(xì)胞52% ～75%； 4 分： 陽(yáng)性細(xì)胞＞75%。 ③將上述兩者乘積作為最后P63、 TTF－1、 CK7 水平表達(dá)結(jié)果： 0 分記為陰性 （－）， 1 ～4 分記為弱陽(yáng)性 （＋）， 5 ～8 分記為中強(qiáng)度陽(yáng)性 （＋＋）， 9 ～12 分記為強(qiáng)陽(yáng)性 （＋＋＋）。

1.4 觀察指標(biāo)以病理檢測(cè)作為 “金標(biāo)準(zhǔn)”， 采用S－P 檢測(cè)法檢測(cè)86 例肺癌穿刺活檢樣本中P63、 TTF－1、 CK7 水平表達(dá)情況， 根據(jù)表達(dá)情況鑒別診斷鱗癌、 腺癌、 小細(xì)胞癌及腺鱗癌。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 18.0 統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)， 計(jì)數(shù)資料以n （%） 表示， 等級(jí)資料采用秩和檢驗(yàn)，P ＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 病理檢測(cè)結(jié)果病理檢測(cè)結(jié)果顯示， 86 例肺癌穿刺活檢樣本中， 鱗癌35 例， 占比40.70%； 腺癌34 例， 占比39.53%；小細(xì)胞癌11 例， 占比12.79%； 腺鱗癌6 例， 占比6.98%。

2.2 P63、 TTF-1、 CK7 水平表達(dá)情況P63 在鱗癌、 腺癌、 小細(xì)胞癌及腺鱗癌陽(yáng)性表達(dá)率分別為100.00%、 5.88%、 0.00%、100.00%； TTF－1 在鱗癌、 腺癌、 小細(xì)胞癌及腺鱗癌陽(yáng)性表達(dá)率 分 別 為0.00%、 94.12%、 90.91%、 100.00%； CK7 在 鱗 癌、腺癌、 小細(xì)胞癌及腺鱗癌陽(yáng)性表達(dá)率分別為8.57%、 94.12%、27.27%、 100.00%； P63、 TTF－1、 CK7 分別在鱗癌、 腺癌、 小細(xì)胞癌及腺鱗癌中陽(yáng)性表達(dá)率比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異 （P ＜0.05）。見(jiàn)表1。

表1 肺癌穿刺活檢樣本P63、 TTF-1、 CK7 水平表達(dá)情況比較 （例）

3 討論

肺癌是臨床常見(jiàn)的惡性疾病， 死亡率及發(fā)病率較高， 目前病因不清， 多認(rèn)為與不良作息習(xí)慣、 內(nèi)分泌功能紊亂等因素有關(guān)， 其臨床癥狀主要表現(xiàn)為持續(xù)性咳嗽、 低熱、 痰中帶血、 氣悶等， 如不及時(shí)治療， 可向肝、 腦、 腎等重要臟器轉(zhuǎn)移， 嚴(yán)重威脅患者的生命安全［4］。 肺癌主要包括鱗癌、 腺癌、 非小細(xì)胞癌等不同類(lèi)型， 目前臨床鑒別診斷肺癌類(lèi)型方式較多， 各類(lèi)檢測(cè)方案準(zhǔn)確性仍存在諸多爭(zhēng)議， 易導(dǎo)致誤診、 漏診等情況而耽誤疾病的最佳治療期， 加重患者身體及心理負(fù)擔(dān)［5］。 因此， 尋找一種高效、 快捷的早期鑒別診斷方式， 可有效降低患者痛苦， 為臨床治療提供準(zhǔn)確的依據(jù)。

本研究結(jié)果顯示， P63 在鱗癌及腺鱗癌陽(yáng)性表達(dá)率均為100.00%， TTF－1 在腺癌、 小細(xì)胞癌及腺鱗癌陽(yáng)性表達(dá)率分別為94.12%、 90.91%、 100.00%， CK7 在鱗癌、 腺癌及腺鱗癌陽(yáng)性表達(dá)率分別為8.57%、 94.12%、 100.00%。 P63 主要存在于肺部上皮組織及鱗狀組織的基底細(xì)胞內(nèi)， 其在肺鱗癌的陽(yáng)性表達(dá)率為100.00%， 表明P63 蛋白在支氣管黏膜上皮干細(xì)胞向鱗狀細(xì)胞轉(zhuǎn)化的過(guò)程中與肺鱗癌的發(fā)生與發(fā)展具有密切關(guān)系。 TTF－1 屬于一種甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子， 主要存在于肺上皮細(xì)胞與甲狀腺細(xì)胞內(nèi)， 大多數(shù)肺腺癌、 非小細(xì)胞癌患者機(jī)體TTF－1 的免疫組化呈陽(yáng)性， 而在肺鱗癌中免疫組化多呈陰性表達(dá)。 CK7 是一種細(xì)胞角蛋白， 其分子量為54 kDa， 多存在于肺腺上皮組織和移行上皮中， 當(dāng)肺腺上皮組織受到癌細(xì)胞侵襲時(shí)， 其表達(dá)水平顯著提升，故在肺腺癌中表達(dá)陽(yáng)性率較高［6－8］。 可見(jiàn)， P63、TTF－1、 CK7 水平可作為鑒別肺癌類(lèi)型的標(biāo)志物， 但本研究樣本量較少， 結(jié)果具有一定的局限性， 今后仍需擴(kuò)大樣本量進(jìn)一步隨訪研究。

綜上所述， P63 在肺鱗癌中呈高表達(dá)， TTF－1 在肺小細(xì)胞癌、 腺癌中呈高表達(dá)， CK7 在肺腺癌中呈高表達(dá)， P63、 TTF－1、 CK7 檢測(cè)對(duì)肺癌的鑒別診斷具有良好的應(yīng)用價(jià)值。