閆向民,李紅波,張寶剛,張金山,王傳軍,李 娜,袁理星,張 楊

(1 新疆畜牧科學(xué)院畜牧研究所,烏魯木齊830011;2 伊犁創(chuàng)錦犇牛股份有限公司,伊寧835000;3新疆農(nóng)業(yè)大學(xué),烏魯木齊830052)

同期發(fā)情技術(shù)和人工授精技術(shù)已廣泛應(yīng)用于肉牛養(yǎng)殖,其發(fā)情和排卵同步將有助于提高母畜的受胎比例[1],該技術(shù)在肉牛行業(yè)中越來越受歡迎,對肉牛生產(chǎn)具有積極的影響。 雖然發(fā)情檢測輔助工具已經(jīng)出現(xiàn)多年[2],但是由于其在檢測發(fā)情方面的效率較低,并沒有被大量使用。 定時輸精技術(shù)(即同期發(fā)情、同期排卵和定時人工輸精相結(jié)合的技術(shù)方案)的出現(xiàn),極大減輕了人工觀察母牛發(fā)情的工作量,具有效果可靠、使用面廣、可控性強、效率更高等優(yōu)點,已成為改善世界許多地區(qū)(包括美國和巴西)畜牧業(yè)生殖管理戰(zhàn)略的重要組成部分[3-4],定時輸精技術(shù)既可以控制繁殖季節(jié),提高繁殖效率,又能改善遺傳進程[5]。多年來,各大牧場廣泛采用定時輸精技術(shù),但同期發(fā)情的效果不一,使用方法、實施對象、操作方案等還存在許多問題[6]。 因此,本研究以西門塔爾青年母牛為實驗動物,進行不同定時輸精方案和體況評分對輸精效果的影響,旨在探討適用于規(guī)?；銮嗄昴概５亩〞r輸精方案,為今后牛場合理制定青年母牛同期發(fā)情計劃和改善母牛繁殖效率提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

在伊犁某規(guī)?；庇龍鲞x擇不同膘情及子宮、卵巢發(fā)育良好的16—20 月齡西門塔爾青年母牛150 頭。

1.2 試驗藥品及試劑

前列腺素類似物(PGF2α)、促排卵3 號(A3)、促性腺激素釋放激素(GnRH)均購自寧波市三生藥業(yè)有限公司;雌力維(EC)由上海計勝生物科技有限公司提供。

1.3 試驗分組及定時輸精程序

以牛舍一個散欄飼養(yǎng)牛只為1 組,共3 組,并以肉牛體況評分為準則進行評分,為5 分、6 分、7 分3 種膘情,對未觀察到自然發(fā)情的西門塔爾青年母牛適時采用定時輸精。 定時輸精根據(jù)方案不同分為G-6-G組、GPE 組和GPA 組,人工授精35 d 后進行B 超定胎。

G-6-G 組:第0 天肌肉注射(以下簡稱肌注)0.5 mg PGF2α,第2 天肌注200 μg GnRH,第8 天肌注200 μg GnRH,第15 天肌注0.5 mg PGF2α,第17 天+8 h 肌注200 μg GnRH,經(jīng)過16—20 h 后定時輸精。

GPE 組:第0 天肌注200 μg GnRH,第7 天肌注0.5 mg PGF2α,第8 天肌注雌力維(EC)2—3 mg,經(jīng)過40 h 后定時輸精并肌注200 μg GnRH。

GPA 組法:第0 天肌注200 μg GnRH,第7 天肌注0.5 mg PGF2α,第9 天肌注20 μg 促排卵3 號(A3),經(jīng)過18—20 h 后定時輸精。

1.4 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析

采用Excel 2019 和SPSS 21.0 統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行χ2檢驗以及Duncan's 和Tukey 法作多重比較,P＜0.05 表示差異顯著,P＜0.01 表示差異極顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同定時輸精方案對繁殖性能的影響

由表1 可以看出,G-6-G 組同期發(fā)情率最高,為100%,與其他組差異不顯著。 各試驗組牛體況評分均以6 分或7 分居多,G-6-G 組體況評分6 分最多,占65.22%,GPE 組體況評分7 分最多,占64.00%;G-6-G組情期受胎率最高,為56.52%,顯著高于其他組,說明G-6-G 組的定時輸精方案最好。

表1 不同定時輸精方案的效果分析Table 1 Effect analysis of different timing spermatozoa schemes

2.2 體況評分對定時輸精效果的影響

由表2 可以看出,體況評分5 分試驗組的同期發(fā)情率最低,為92.31%,顯著低于體況評分6 分、7 分試驗組,體況評分5 分試驗組的情期受胎率最低,為37.50%,極顯著低于體況評分6 分試驗組,顯著低于體況評分7 分試驗組,說明體況評分為6—7 分時,同期發(fā)情率和情期受胎率均較高,其同期發(fā)情率越高,情期受胎率也越高。

表2 體況評分對定時輸精效果分析Table 2 Analysis of the effects of body condition score on timed sperm transfusion

3 討論與結(jié)論

母牛發(fā)情的準確、高效檢測是人工授精在母牛繁育場應(yīng)用的局限性之一,當發(fā)情檢測低于70%時,定時輸精將成為提高母牛繁殖性能和經(jīng)濟效益的替代方法[7]。 但定時輸精方案差異會造成青年母牛排卵同步性不足,達不到同期排卵及同期輸精的效果,因為多達50%的青年母牛的發(fā)情周期具有3 個或更多的卵泡波[8],這限制了優(yōu)勢卵泡存在的機會并導(dǎo)致授精之前出現(xiàn)發(fā)情不同步[9],且不發(fā)情進行輸精會降低母牛受胎率[10]。 Moreira 等[11]研究發(fā)現(xiàn),所有在配種前期進行GnRH 治療的青年母牛都排卵,并同時出現(xiàn)新的卵泡波,且沒有黃體的母牛通常比帶有黃體的母牛排卵要多[12]。 Lima 等[13]研究發(fā)現(xiàn),在5 d 定時輸精方案第5 天和第6 天使用PGF2α 治療確保黃體溶解時,初始GnRH 的排卵提高了受胎率。Karakaya-Bilen 等[14]研究發(fā)現(xiàn),在5 d 定時輸精方案前2 d 進行PGF2α 治療可使孕酮質(zhì)量濃度低于1.0 ng∕mL的青年母牛比例增加,從而增加了5-d 定時輸精方案先用GnRH 治療的排卵反應(yīng)。 而本試驗中,試驗1 組采用G-6-G 方案其情期受胎率最高,為56.52%,顯著高于其他2 組(49.02%和50.00%),與Karakaya-Bilen 等[14]研究結(jié)論相一致,是因為同期開始前先用PGF2α 溶解黃體不僅消除了孕酮濃度升高導(dǎo)致黃體生成素釋放減弱的影響,還增加母牛的發(fā)情及排卵比例,從而提高了青年母牛的受胎率。

體況評分是評價母牛營養(yǎng)狀況的有效管理工具,是比體重更可靠的營養(yǎng)狀況指標,其評分系統(tǒng)是允許生產(chǎn)者通過視覺評估方式,客觀描述和評估牛群體脂儲備的數(shù)量和整體營養(yǎng)狀況。 Short 等[15]創(chuàng)建了能量使用的優(yōu)先排序,即生殖在能量利用方面被列為較低的優(yōu)先級,當營養(yǎng)有限、能量攝入不足時,青年母牛的青春期就會推遲。 Day 等[16]研究發(fā)現(xiàn),在營養(yǎng)和能量攝入有限的情況下,黃體生成素的分泌對雌二醇的負反饋更加敏感,誘導(dǎo)排卵的黃體生成素在青春期前的激增被延遲。 Imakawa 等[17]研究發(fā)現(xiàn),營養(yǎng)性缺乏的青年母牛不會對孕酮療法產(chǎn)生發(fā)情反應(yīng)。 而本研究中各試驗組牛體況評分均以6 分或7 分居多,表明參配青年母牛的身體狀況及營養(yǎng)狀況評價較好,為其發(fā)情周期起著重要的決定作用。 體況評分還與受胎率密切相關(guān),在本研究中,體況評分5 分組的情期受胎率為37.50%(9∕24),與體況評分6 分組的情期受胎率[為58.21%(39∕67)]差異極顯著,與體況評分7 分組的情期受胎率[為50.00%(28∕56)]差異顯著,其不同的體況評分使情期受胎率存在顯著性差異,表明體況評分對定時輸精的受胎率具有顯著影響[18],認為體況評分6 分時,適合進行定時輸精并表現(xiàn)出了較好的繁殖水平。 然而,體況評分的高低是通過觀察動物體表的體脂來反映出機體的營養(yǎng)儲備水平,其體脂的儲備被用于一般新陳代謝以提供能量來源,刺激下丘腦垂體軸分泌激素,釋放GnRH、FSH、LH 和其他對卵巢卵泡生長的重要因子[19]。Baruselli 等[20]研究發(fā)現(xiàn),體況評分小于3.0 分(5 分制)時牛群表現(xiàn)出較低的受胎率(＜50%);Monteiro等[21]研究發(fā)現(xiàn),體況評分大于2.5 分(5 分制)時進行定時輸精可以提高母牛受胎率;Bó 等[22]研究發(fā)現(xiàn),泌乳牛體況評分3 分(5 分制)組受胎率(66.90%)顯著高于體況評分2 分組受胎率(28.70%),與本研究中體況評分5 分組情期受胎率顯著低于6 分組和7 分組的研究結(jié)果相一致。 本研究中,當體況評分≥6 分(9 分制)時,受胎率和經(jīng)濟效益提升效果明顯,表明體況評分較好的動物對激素調(diào)控的作用較為明顯[20,23],這與Pereira 等[24]、Vale 等[18]研究結(jié)論相似。 因此,建議參加定時輸精的舍飼青年西門塔爾牛的體況評分應(yīng)為6 分,且能保持正能量平衡,有較好的情期受胎率。

定時輸精方案成功的重要方面不僅涉及排卵至最初的GnRH 治療和隨后卵泡波的同步出現(xiàn),而且還涉及定時輸精前已生成和新形成的黃體完全溶解。 本研究使用PGF2α、GnRH、雌力維(EC)、促排卵3 號(A3)有效組合后形成了3 種方案,經(jīng)過同期處理授精后,G-6-G 法(第0 天肌注0.5 mg PGF2α,第2 天肌注200 μg GnRH,第8 天肌注200 μg GnRH,第15 天肌注0.5 mg PGF2α,第17 天+8 h 肌注200 μg GnRH,經(jīng)過16—20 h后定時輸精)試驗方案為效果最好,定為首選方案,適合在規(guī)模牧場青年母牛中推廣使用。