李曉瓊 ， 王紅英 ， 陳玉晶 ， 張 潔 ， 趙東璞

(1.鄭州蘭博爾科技有限公司 ， 河南 鄭州 450009 ； 2.河南省化工研究所有限責(zé)任公司 ， 河南 鄭州 450052)

0 前言

氰霜唑是日本石原產(chǎn)業(yè)株式會(huì)社獨(dú)立開(kāi)發(fā)的新一代苯基咪唑類(lèi)殺菌劑，對(duì)以霜霉病、疫病為代表的卵菌綱病害和油菜科的根腐病有優(yōu)異的防效[1-2]。2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑(2-Cyano-4-chloro-5-(4-methylphenyl)imidazole)是合成氰霜唑的關(guān)鍵中間體(圖 1)，其含量對(duì)氰霜唑合成的收率和質(zhì)量有重要影響，因此2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑含量的實(shí)時(shí)分析監(jiān)控是非常必要的[3]。盡管氰霜唑的分析方法多有報(bào)道，但目前國(guó)內(nèi)還未見(jiàn)有2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑分析方法的報(bào)道，本文采用液相色譜法開(kāi)發(fā)了一種2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑的定量分析方法。該方法簡(jiǎn)便快捷，分離效果好，準(zhǔn)確度和精密度均能達(dá)到定量分析的要求，可作為企業(yè)生產(chǎn)過(guò)程控制中間體的分析手段，為產(chǎn)成品質(zhì)量控制提供重要保障[4-6]。

圖1 2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑的結(jié)構(gòu)

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 試劑和溶液

乙腈，色譜純；水，高純水；2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑標(biāo)樣，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為99.76%，自提純；2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑工業(yè)品。

1.2 儀器

Agilent 1220高效液相色譜儀，具有可變波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器；色譜工作站；色譜柱：150 mm ×4.6 mm(id)不銹鋼柱，內(nèi)裝5 μm粒徑的 XDB C18填充物。

1.3 液相色譜操作條件

流動(dòng)相，60∶40(體積比)的乙腈-水，經(jīng)過(guò)濾和超聲脫氣；流速，1.0 mL/min；柱溫，室溫；檢測(cè)波長(zhǎng)，254 nm；進(jìn)樣體積，5 μL；保留時(shí)間，2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑約3.7 min。

1.4 測(cè)定步驟

1.4.1標(biāo)樣溶液的配制

稱(chēng)取2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑標(biāo)樣0.03 g(精確至0.000 2 g)，置于25 mL容量瓶中，用乙腈溶解并稀釋至刻度，搖勻備用。

1.4.2試樣溶液的配制

稱(chēng)取2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑試樣0.03 g(精確至0.000 2 g)，置于25 mL容量瓶中，用乙腈溶解并稀釋至刻度，搖勻備用。

1.4.3測(cè)定

在上述操作條件下，待儀器基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，直至相鄰2針標(biāo)樣溶液的響應(yīng)值相對(duì)變化≤1.5%后 ，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)行測(cè)定。

1.4.4計(jì)算

將測(cè)得的2針試樣溶液以及試樣溶液前后2針標(biāo)樣溶液中2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑峰面積分別進(jìn)行平均。試樣中2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑的質(zhì)量分?jǐn)?shù)X(%)按下式計(jì)算：

式中：r1，標(biāo)樣溶液中2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑峰面積的平均值；r2，試樣溶液中2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑峰面積的平均值；m1，2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑標(biāo)樣的質(zhì)量，g；m2，2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑試樣的質(zhì)量，g；P，標(biāo)樣中2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%。

2 結(jié)果與分析

2.1 色譜條件的選擇

首先，用紫外分光光度計(jì)對(duì)2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行全波長(zhǎng)掃描，發(fā)現(xiàn)在波長(zhǎng)254 nm處有較強(qiáng)吸收，選擇254 nm為檢測(cè)波長(zhǎng)對(duì)樣品進(jìn)行測(cè)定。然后，分別選用不同比例的乙腈-水在不同流速下進(jìn)行分析測(cè)試，發(fā)現(xiàn)以60∶40(體積比)的乙腈-水作為流動(dòng)相，流速為1.0 mL/min時(shí)，2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑前后雜質(zhì)都能得到較好地分離，各峰峰形對(duì)稱(chēng)性好，保留時(shí)間相對(duì)較短，因此選擇了60∶40(體積比)的乙腈-水作為流動(dòng)相。

2.2 線性關(guān)系曲線的測(cè)定

在上述色譜操作條件下，按照“標(biāo)樣溶液的配制方法”，配制5個(gè)不同濃度的2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑的標(biāo)樣溶液，依次進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1。以2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑標(biāo)樣質(zhì)量體積濃度為橫坐標(biāo)，相應(yīng)的2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑峰面積為縱坐標(biāo)繪制出對(duì)應(yīng)的關(guān)系曲線，計(jì)算得出線性回歸方程為：y=7.851x+235.14，相關(guān)系數(shù)為：R2=0.999 5，見(jiàn)表1、圖2。

2.3 精密度的測(cè)定

在上述色譜操作條件下，稱(chēng)取5個(gè)同一批次的試樣，按照上述方法配制成5個(gè)試樣溶液進(jìn)行平行測(cè)定，2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑質(zhì)量分?jǐn)?shù)平均值為96.18%，標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.47，變異系數(shù)為0.49%。

表1 線性相關(guān)性測(cè)定結(jié)果

圖2 線性關(guān)系曲線

2.4 方法的準(zhǔn)確度的測(cè)定

在上述色譜操作條件下，稱(chēng)取5份已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)的2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑的試樣，分別加入已知質(zhì)量的2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑標(biāo)樣，配成5個(gè)混合樣，依次進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表2，測(cè)得平均回收率為99.70%。從檢測(cè)結(jié)果可以看出：該測(cè)定方法具有較好的準(zhǔn)確度。

表2 添加回收率測(cè)定結(jié)果

3 結(jié)論

本文開(kāi)發(fā)了一種2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑的高效液相色譜分析方法，該方法使用XDB C18色譜柱(5 μm，150 mm×4.6 mm)，優(yōu)化的檢測(cè)條件為紫外檢測(cè)器檢測(cè)波長(zhǎng)254 nm，流動(dòng)相60∶40(體積比)乙腈-水，流速1.0 mL/min。同時(shí)對(duì)該方法測(cè)試的線性關(guān)系、準(zhǔn)確度和精密度進(jìn)行了評(píng)價(jià)。結(jié)果表明，利用該方法分析2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑樣品時(shí)，含量與峰面積具有較好的線性關(guān)系，方法的準(zhǔn)確度和精密度較高，操作簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確，完全能夠滿足企業(yè)對(duì)產(chǎn)品生產(chǎn)和控制時(shí)的分析要求，是進(jìn)行產(chǎn)品質(zhì)量檢測(cè)的理想分析方法。