国产日韩欧美一区二区三区三州_亚洲少妇熟女av_久久久久亚洲av国产精品_波多野结衣网站一区二区_亚洲欧美色片在线91_国产亚洲精品精品国产优播av_日本一区二区三区波多野结衣 _久久国产av不卡

?

血流感染中頭孢吡肟異質(zhì)性耐藥大腸埃希菌的流行病學(xué)分析*

2021-05-13 06:04何建春趙峻英
國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志 2021年9期
關(guān)鍵詞:埃希菌頭孢大腸

吳 瑕,何建春,趙峻英,馮 婭

重慶市大足區(qū)人民醫(yī)院檢驗科,重慶 402360

大腸埃希菌是一種常見的條件致病菌,在某些條件下容易引起血流感染,最終導(dǎo)致膿毒癥或其他并發(fā)癥,嚴重威脅患者生命安全[1]。然而,近年來由于臨床不合理用藥或經(jīng)驗用藥導(dǎo)致高比例耐第3代頭孢菌素菌株不斷增加,甚至出現(xiàn)了一定比例耐頭孢吡肟菌株[2],給臨床抗感染治療帶來極大困擾。筆者團隊在進行K-B法復(fù)核頭孢吡肟藥敏時,發(fā)現(xiàn)其抑菌圈內(nèi)有大小不等的菌落生長,通過文獻得知其為異質(zhì)性耐藥[3],并且異質(zhì)性耐藥菌株通常是細菌從敏感進化到耐藥過程的中間階段菌株,如果不通過常規(guī)的K-B法,很難發(fā)現(xiàn)該類型的菌株[4]。因此,該類型的菌株將比敏感菌株更快進化成耐藥菌株。本研究對頭孢菌素類抗菌藥物產(chǎn)生異質(zhì)性耐藥的大腸埃希菌進行研究,并通過雙病例對照研究調(diào)查分析本院2015年1月至2018年12月血流感染中異質(zhì)性耐藥大腸埃希菌的流行病學(xué)情況,為指導(dǎo)臨床合理用藥從而預(yù)防和控制該類菌株甚至耐藥菌株的出現(xiàn)提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 回顧性收集本院2015年1月至2018年12月血流感染中分離的248株大腸埃希菌,去除同一患者反復(fù)培養(yǎng)陽性的重復(fù)菌株。根據(jù)大腸埃希菌對頭孢吡肟藥敏情況分為頭孢吡肟耐藥組、頭孢吡肟異質(zhì)性耐藥組、頭孢吡肟敏感組。

1.2方法

1.2.1菌株鑒定、藥敏情況及超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)確證 所選標本均為血液標本,并依據(jù)《全國臨床檢驗操作規(guī)程》第4版[5]進行細菌的分離和培養(yǎng),然后采用Vitek 2 Compact全自動細菌鑒定系統(tǒng)進行細菌鑒定,采用其配套藥敏卡分析細菌對各類抗菌藥物的最小抑菌濃度(MIC),即藥敏試驗。最后,依據(jù)美國臨床實驗室標準化委員會(CLSI)標準判讀結(jié)果。ESBLs檢測及確證:依據(jù)CLSI,采用雙紙片協(xié)同試驗進行確證。

1.2.2K-B法 在血平板上復(fù)蘇248株大腸埃希菌,并根據(jù)《全國臨床檢驗操作規(guī)程》第4版[5]進行K-B法標準操作,貼上頭孢吡肟藥敏紙片,于35 ℃孵育24~48 h后,測量其抑菌圈直徑,若觀察到抑菌圈內(nèi)有菌落生長則初步判斷為異質(zhì)性耐藥。相反,則為敏感、中介或耐藥。

1.2.3菌落譜型分析(PAP)實驗 該實驗是判定異質(zhì)性耐藥現(xiàn)象的“金標準”[3]。異質(zhì)性耐藥判斷標準:細菌在抗菌藥物最高非抑菌濃度到最低完全抑菌濃度之間的比值≥8倍[3]。將K-B法初篩為異質(zhì)性耐藥的菌株進一步通過PAP實驗進行確證,PAP實驗步驟參考文獻[6],主要步驟為:配制梯度頭孢吡肟抗菌藥物,制備梯度頭孢吡肟抗菌藥物平板,細菌均勻涂布頭孢吡肟抗菌藥物平板并孵育,每次實驗重復(fù)3次再計數(shù),并進行換算和作圖。將大腸埃希菌標準菌株ATCC25922作為質(zhì)控菌株。

1.2.4脈沖場凝膠電泳(PFGE) 該方法主要用于細菌同源性分型,是判定臨床菌株間是否發(fā)生同源性暴發(fā)最重要的方法。選擇MIC相同或相近的異質(zhì)性耐藥菌株共20株,通過相關(guān)文獻報道的PFGE方法完成該實驗[7],最后再通過PFGE條帶分析這些臨床菌株間的同源性。

1.2.5相關(guān)耐藥基因的檢測 選擇頭孢吡肟異質(zhì)性耐藥組的菌株為研究對象,進行相關(guān)耐藥基因檢測。首先,提取細菌的DNA,然后通過PCR法檢測其可能存在的相關(guān)耐藥基因,包括blaCTX-M、blaTEM、blaSHV、blaOmpF和blaOmpC等,其所需引物參考文獻[7]設(shè)計。

1.2.6相關(guān)危險因素分析 采用雙病例對照研究,通過本院臨床病歷系統(tǒng)和檢驗科醫(yī)院管理系統(tǒng)收集248例感染大腸埃希菌患者的相關(guān)資料,包括患者基本情況、基礎(chǔ)疾病、并發(fā)癥、侵入性操作、先前抗菌藥物使用和患者轉(zhuǎn)歸等。

1.3統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS22.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析。計數(shù)資料以率表示,采用χ2檢驗,采用多因素Logistic回歸(逐步前進法)進行因素分析,以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1菌株頭孢吡肟異質(zhì)性耐藥率及臨床分布特征 在248株菌株中,K-B法復(fù)核后發(fā)現(xiàn),在K-B法抑菌圈內(nèi)有菌落生長的菌株共78株,并將其初步判定為異質(zhì)性耐藥菌株,見圖1。然后再將這些菌株通過PAP實驗進行確認,發(fā)現(xiàn)其均為異質(zhì)性耐藥菌株。藥敏分析結(jié)果顯示,在248株菌株中,對頭孢吡肟異質(zhì)性耐藥的菌株有78株(占31.5%),對頭孢吡肟耐藥的菌株有63株(占25.4%),對頭孢吡肟敏感的菌株有107株(占43.1%)。從科室分布來看,頭孢吡肟異質(zhì)性耐藥大腸埃希菌主要來自外科(146株,占58.9%),主要集中在泌尿外科(38株,占26.0%)、ICU(28株,占19.2%)和感染科(18株,占12.3%)。

2.2頭孢吡肟異質(zhì)性耐藥大腸埃希菌的PFGE分型 通過對比分析20株頭孢吡肟異質(zhì)性耐藥大腸埃希菌的PFGE條帶,結(jié)果未發(fā)現(xiàn)有相同或相似PFGE條帶,表明這些菌株間型別及來源不同,不存在同源性傳播,見圖2。

2.3頭孢吡肟異質(zhì)性耐藥菌株耐藥基因的檢測 通過對78株頭孢吡肟異質(zhì)性耐藥大腸埃希菌的耐藥基因進行檢測,結(jié)果發(fā)現(xiàn)所有異質(zhì)性耐藥菌株均含blaOmpF和blaOmpC。在所有異質(zhì)性耐藥菌株中,有32株為產(chǎn)ESBLs菌株,PCR檢測結(jié)果顯示,有23株表達blaCTX-M(占71.9%),9株表達blaTEM(占28.1%),僅3株表達blaSHV(占9.4%),有2株同時表達blaCTX-M和blaTEM(占6.2%),有1株同時表達blaCTX-M和blaSHV(占3.1%)。

注:A表示對頭孢吡肟敏感;B表示對頭孢吡肟異質(zhì)性耐藥;C表示對頭孢吡肟耐藥。

注:1~20為20株異質(zhì)性耐藥菌株的對應(yīng)編號。

2.4危險因素分析

2.4.1單因素分析 頭孢吡肟耐藥組與頭孢吡肟敏感組比較,年齡>60歲、入住ICU、尿路感染、低蛋白血癥、導(dǎo)尿管、頭孢菌素類和產(chǎn)ESBLs差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);臨床轉(zhuǎn)歸顯示,總住院>30 d差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。頭孢吡肟耐藥組與頭孢吡肟異質(zhì)性耐藥組比較,轉(zhuǎn)院患者、尿路感染、頭孢菌素類和產(chǎn)ESBLs差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。頭孢吡肟異質(zhì)性耐藥組與頭孢吡肟敏感組比較,轉(zhuǎn)院患者、灌腸、頭孢菌素類和產(chǎn)ESBLs差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);臨床轉(zhuǎn)歸顯示,患者病死率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

2.4.2多因素分析 進一步將上述單因素分析中差異有統(tǒng)計學(xué)意義的變量采用多因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示,頭孢吡肟耐藥組與頭孢吡肟敏感組比較,年齡>60歲、尿路感染、導(dǎo)尿管、頭孢菌素類和產(chǎn)ESBLs是頭孢吡肟耐藥大腸埃希菌的獨立危險因素;頭孢吡肟耐藥組與頭孢吡肟異質(zhì)性耐藥組比較,尿路感染和產(chǎn)ESBLs是頭孢吡肟耐藥大腸埃希菌的獨立危險因素;頭孢吡肟異質(zhì)性耐藥組與頭孢吡肟敏感組比較,轉(zhuǎn)院、粒細胞減少癥、灌腸和產(chǎn)ESBLs是頭孢吡肟異質(zhì)性耐藥大腸埃希菌的獨立危險因素。見表2。

表1 頭孢吡肟敏感、耐藥和異質(zhì)性耐藥大腸埃希菌的單因素分析[n(%)]

續(xù)表1 頭孢吡肟敏感、耐藥和異質(zhì)性耐藥大腸埃希菌的單因素分析[n(%)]

表2 頭孢吡肟敏感、耐藥和異質(zhì)性耐藥大腸埃希菌的Logistic回歸分析

3 討 論

大腸埃希菌是一種常見的條件致病菌,易引起血流感染等導(dǎo)致患者死亡,臨床常采用頭孢菌素等抗菌藥物進行治療,導(dǎo)致出現(xiàn)越來越多的產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌,頭孢吡肟是一種常見的用于抗感染治療的β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物,也作為治療該類菌感染的一個重要選擇,但近年來呈現(xiàn)耐藥率逐漸增高的趨勢[8],導(dǎo)致臨床有時治療效果不佳或治療失敗。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),血流感染患者分離出的大腸埃希菌除對頭孢吡肟耐藥外,從相當(dāng)比例病情惡化的患者分離的大腸埃希菌對頭孢吡肟產(chǎn)生了異質(zhì)性耐藥現(xiàn)象,臨床常誤認為對頭孢吡肟敏感,而導(dǎo)致治療失敗。

從藥敏結(jié)果來看,本院大腸埃希菌對頭孢吡肟的耐藥率為25.4%,略低于2018年中國細菌耐藥監(jiān)測網(wǎng)(CHINET)的監(jiān)測數(shù)據(jù)[9],CHINET顯示,大腸埃希菌對頭孢吡肟的耐藥率為27.3%,但也低于本院大腸埃希菌對頭孢吡肟的異質(zhì)性耐藥率(31.5%),說明頭孢吡肟異質(zhì)性耐藥現(xiàn)象存在且需要臨床特別注意,以防臨床治療失敗而無法找出其中的原因。從科室分布來看,頭孢吡肟異質(zhì)性耐藥大腸埃希菌主要來自外科,并以泌尿外科和ICU檢出率最高,可能原因為泌尿外科患者經(jīng)常進行尿路插管等操作損傷尿道而引起細菌上行感染入血,ICU患者常有非常嚴重的病情,加上各類抗菌藥物的不合理使用,使得敏感菌被殺滅而未被殺死的耐藥亞群菌引起血流感染,所以應(yīng)加強對這些科室耐藥菌株的監(jiān)測和防控[10]。從頭孢吡肟異質(zhì)性耐藥菌株同源性來看,異質(zhì)性耐藥菌株P(guān)FGE條帶不一,說明頭孢吡肟異質(zhì)性耐藥菌株不是由于菌株間同源性傳播引起的。從耐藥基因檢測結(jié)果來看,異質(zhì)性耐藥菌株主要表達blaCTX-M基因,與相關(guān)報道CTX-M型是目前我國最主要產(chǎn)ESBLs基因型結(jié)果相一致[11],其次為TEM基因型。

進一步通過雙病例對照研究進行相關(guān)危險因素分析,結(jié)果顯示,在頭孢吡肟耐藥組、頭孢吡肟異質(zhì)性耐藥組和頭孢吡肟敏感組兩兩比較中,既存在各自不同的獨立危險因素,也存在其共同的獨立危險因素。首先,分析上述兩兩比較中的各自不同的獨立危險因素,從頭孢吡肟耐藥組與頭孢吡肟敏感組比較來看,尿路感染和導(dǎo)尿管是頭孢吡肟耐藥大腸埃希菌的獨立危險因素。尿路感染最常見的是大腸埃希菌感染,加上人為通過侵入性操作如導(dǎo)尿管入侵泌尿道引起尿路感染的細菌定居和繁殖,當(dāng)抗菌藥物作用于敏感細菌,而這些菌株隱蔽于導(dǎo)尿管等位置躲過抗菌藥物的作用或劑量不足,使得敏感菌株逐步變成耐藥菌株,再加上住院患者本來免疫力低下,使得引起尿路感染的細菌特別是耐藥菌就有機會入血液而引起耐藥菌血流感染,導(dǎo)致治療失敗[12]。這也與本研究發(fā)現(xiàn)的耐藥菌株主要來自泌尿外科相一致。另外,頭孢菌素類抗菌藥物的使用也是頭孢吡肟耐藥大腸埃希菌的獨立危險因素,并且在頭孢吡肟耐藥組有更高的頭孢菌素類抗菌藥物使用比例(46.0%vs. 16.8%),說明頭孢菌素類抗菌藥物常用于臨床抗感染治療。長期高頻率使用該類抗菌藥物使得細菌在抗菌藥物的壓力下為了生存而發(fā)生基因突變,或產(chǎn)生耐藥基因,導(dǎo)致細菌耐藥特性發(fā)生變化,甚至導(dǎo)致患者體內(nèi)菌群失調(diào),使臨床治療更加棘手[13]。臨床轉(zhuǎn)歸顯示,患者病死率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義,說明患者發(fā)生頭孢吡肟耐藥后,臨床可能直接使用碳青霉烯類抗菌藥物,使得患者病情好轉(zhuǎn)。從頭孢吡肟耐藥組與頭孢吡肟異質(zhì)性耐藥組比較來看,尿路感染是頭孢吡肟耐藥大腸埃希菌的獨立危險因素。異質(zhì)性耐藥常直接被臨床或微生物工作者作為敏感菌株處理,因而其發(fā)生原因可能與上述一致。從頭孢吡肟異質(zhì)性耐藥組與頭孢吡肟敏感組比較來看,轉(zhuǎn)院是頭孢吡肟異質(zhì)性耐藥大腸埃希菌的獨立危險因素,其發(fā)生原因可能為很多患者在轉(zhuǎn)入本院前在其他更低一級醫(yī)院進行了相關(guān)不合理的治療,如濫用抗菌藥物或使用的抗菌藥物不對、不足等,導(dǎo)致異質(zhì)性耐藥菌株的出現(xiàn),在轉(zhuǎn)入本院時已經(jīng)攜帶。另外,灌腸也是頭孢吡肟異質(zhì)性耐藥大腸埃希菌的獨立危險因素,其原因可能是住院患者長期使用抗菌藥物,一部分抗菌藥物進入腸道逐步作用于大腸埃希菌,使得敏感大腸埃希菌在劑量不足的抗菌藥物壓力下變成異質(zhì)性耐藥菌株,當(dāng)患者進行灌腸時,患者腸道黏膜受損,異質(zhì)性耐藥菌株乘機入血[14]。臨床轉(zhuǎn)歸顯示,患者病死率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義,異質(zhì)性耐藥菌株常常被誤認為是敏感菌株,未引起臨床注意,導(dǎo)致治療失敗。因此,通過常規(guī)的K-B法進行異質(zhì)性耐藥的篩選顯得格外重要。

最后,分析上述兩兩比較中的共同獨立危險因素,結(jié)果顯示,產(chǎn)ESBLs是頭孢吡肟耐藥和異質(zhì)性耐藥大腸埃希菌的共同獨立危險因素,其可能原因為頭孢吡肟是一種β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物,ESBLs又是一種能夠水解β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物最常見的酶,故而產(chǎn)ESBLs也是一種天然的耐頭孢菌素類抗菌藥物酶,因此,應(yīng)加強對ESBLs的監(jiān)測,對產(chǎn)ESBLs菌株的治療可以選擇其他種類抗菌藥物或活性更高的碳青霉烯類抗菌藥物進行治療,以減少異質(zhì)性耐藥菌的出現(xiàn)。

綜上所述,本院頭孢吡肟異質(zhì)性耐藥大腸埃希菌比例較高,隨著臨床抗菌藥物(特別是頭孢菌素類)的不合理應(yīng)用,產(chǎn)ESBLs菌株的不斷出現(xiàn),加上臨床對異質(zhì)性耐藥的關(guān)注度不夠,使得頭孢吡肟的異質(zhì)性耐藥和耐藥率逐年升高,給臨床治療帶來了困難。因此,臨床可以根據(jù)患者流行病學(xué)危險因素并結(jié)合患者的病情,采取適當(dāng)?shù)姆乐未胧?,以減少頭孢吡肟耐藥和異質(zhì)性耐藥大腸埃希菌的流行。本研究的不足之處在于未對異質(zhì)性耐藥的發(fā)生機制進行深入研究。

猜你喜歡
埃希菌頭孢大腸
2018—2020年甘肅省食源性疾病中致瀉大腸埃希菌的耐藥性分析
產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌的感染特點及耐藥性分析
大腸憩室是什么病
大腸埃希菌臨床分布及耐藥性分析
頭孢吡肟與頭孢呋辛治療癲癇患者肺部感染的療效比較
頭孢那么多,到底怎么選?
大腸變懶了
大腸變懶 了
一起家庭食物中毒事件
四代頭孢藥功效各不同
丰都县| 宁化县| 江北区| 定边县| 龙川县| 文登市| 灵丘县| 宁南县| 长治市| 潜山县| 托里县| 西乌珠穆沁旗| 江口县| 苏尼特右旗| 永仁县| 鲁甸县| 松潘县| 丰都县| 隆安县| 六盘水市| 永仁县| 桂林市| 潢川县| 芦溪县| 阿拉善盟| 泽库县| 东山县| 宜川县| 南通市| 灵台县| 朔州市| 会东县| 阿拉尔市| 汤阴县| 林芝县| 女性| 喀喇沁旗| 常熟市| 磴口县| 法库县| 民勤县|