張 雨，張 昀，崔亞鵬，張康逸，張國(guó)治

1.河南工業(yè)大學(xué) 糧油食品學(xué)院，河南 鄭州 450001

2.河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 農(nóng)副產(chǎn)品加工研究中心，河南 鄭州 450002

3.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué) 食品科學(xué)與營(yíng)養(yǎng)工程學(xué)院，北京 100083

青麥?zhǔn)俏覈?guó)傳統(tǒng)食物，有著悠久的歷史，其淀粉含量低于小麥，并富含膳食纖維、維生素、葉綠素等營(yíng)養(yǎng)成分，具有獨(dú)特的風(fēng)味與口感[1-4]。綠豆具有清熱解毒、利尿明目的功效，能幫助排泄體內(nèi)毒物[5]。青麥糕由青麥與脫皮綠豆為原料制作而成，淀粉是青麥糕的主要成分，這使得青麥糕與其他糕點(diǎn)類食品均面臨著相同的問(wèn)題——老化。淀粉老化會(huì)導(dǎo)致糕點(diǎn)品質(zhì)、口感和風(fēng)味變差，硬度增加，大大影響消費(fèi)者的食用感受。為了抑制淀粉老化，通過(guò)添加一些抗老化劑，如乳化劑、酶制劑、親水膠體等對(duì)糕點(diǎn)進(jìn)行優(yōu)化，以便其有更好的感官品質(zhì)[6]。

乳化劑既能起到抑制老化的作用還能保鮮。李立華等[7]在鮮濕面中添加了β-環(huán)糊精和硬脂酰乳酸鈉，起到了有效的抗老化作用，得出了抑制鮮濕面老化的新結(jié)論。Yu等[8]研究了硬脂酸和海藻酸鈉對(duì)小麥淀粉的抗老化作用，結(jié)果表明：添加抗老化劑后可有效延緩淀粉的老化并提高了淀粉的糊化初始溫度。酶制劑中抗老化效果最好的是α-淀粉酶，但過(guò)量的α-淀粉酶會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)品發(fā)黏，甚至塌架。Palacios等[9]將α-淀粉酶添加到米飯中，由于α-淀粉酶作用于支鏈淀粉使其側(cè)鏈短鏈增多，進(jìn)而抑制米飯老化。陳秋平等[10]在饅頭中添加3 mg/kg的細(xì)菌α-淀粉酶，可以有效抑制饅頭的老化現(xiàn)象。親水膠體多為多糖大分子，常見(jiàn)的有黃原膠、卡拉膠等[11]。何承云等[12]研究了親水膠體對(duì)饅頭的抗老化作用，通過(guò)正交試驗(yàn)獲得最佳復(fù)配添加劑為黃原膠0.15%、海藻酸鈉0.05%和卡拉膠0.15%。Ai等[13]認(rèn)為添加膠體可以有效抑制面包老化。陳德文等[14]研究了大米發(fā)糕的抗老化技術(shù)，結(jié)果表明：?jiǎn)胃术ズ吐蚜字谔砑恿糠謩e為0.8%和0.05%時(shí)效果最好。白菊紅等[15]研究了親水膠體對(duì)苦蕎凍糕的抗老化作用，且在-4 ℃條件下添加黃原膠0.13%、海藻酸鈉0.17%和卡拉膠0.24%，貯藏時(shí)間可以延長(zhǎng)2倍。呂思伊[16]對(duì)米發(fā)糕的抗老化進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)添加α-淀粉酶和蔗糖脂肪酸酯分別為12 g/kg和0.05 g/kg時(shí)抗老化效果最好，且蔗糖脂肪酸酯的抗老化效果優(yōu)于α-淀粉酶。差示掃描量熱儀(differential scanning calorimetry, DSC)常用于分析淀粉老化，淀粉老化后在DSC中會(huì)出現(xiàn)吸熱峰，且老化程度愈大，吸熱峰愈大[17-18]。紀(jì)瑩[19]對(duì)延緩米制松糕的老化進(jìn)行了研究，當(dāng)添加黃原膠0.2%、羧甲基纖維素鈉0.25%、β-淀粉酶0.03%時(shí)，有效抑制了松糕老化，同時(shí)，還運(yùn)用DSC研究添加抗老化劑后松糕的熱力學(xué)變化，研究表明：添加抗老化劑后松糕淀粉的重結(jié)晶方式發(fā)生改變。作者選用蔗糖脂肪酸酯、α-淀粉酶與黃原膠3種抗老化劑，通過(guò)研究青麥糕的硬度和熱特性來(lái)分析抗老化劑的效果，并通過(guò)對(duì)老化動(dòng)力學(xué)模型研究，掌握抗老化劑對(duì)青麥糕老化的改善規(guī)律，為選取最佳復(fù)配抗老化劑，改善青麥糕品質(zhì)，抑制青麥糕老化等提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

青麥：河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院；脫皮綠豆：新鄉(xiāng)良潤(rùn)全谷物食品有限公司；木糖醇：太古糖業(yè)(中國(guó))有限公司；黃油：廣州南僑食品有限公司；葉綠素銅鈉鹽：浙江一諾生物科技有限公司；D-異抗壞血酸鈉：德興市百勤異VC鈉有限公司；檸檬酸：山東豐泰生物科技有限公司；蔗糖脂肪酸酯：杭州瑞霖化工有限公司；α-淀粉酶(4 000 U/g)：源葉生物科技有限公司；黃原膠：山東優(yōu)索化工科技有限公司。

1.2 儀器

HC-400Y型多功能粉碎機(jī)：河城工貿(mào)有限公司；100目標(biāo)準(zhǔn)篩：浙江上虞市五四儀器篩具廠；C21-RT2140型電磁爐：佛山市美的電器制造有限公司；HM740型和面機(jī)：青島漢尚電器有限公司；MP5002型電子天平：上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司；FD-100S型真空冷凍干燥機(jī)：北京惠誠(chéng)佳儀科技有限公司；BCD-655WKPZM型冰箱：合肥美的電冰箱有限公司；TA-XT2i型質(zhì)構(gòu)儀：英國(guó)SMS公司；214型差示掃描量熱儀：德國(guó)Netzsch公司。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 原料處理

將清洗后的青麥進(jìn)行真空冷凍干燥處理，干燥后用粉碎機(jī)打粉，過(guò)100目篩，4 ℃冷藏保存?zhèn)溆?。脫皮綠豆用粉碎機(jī)打粉，過(guò)100目篩，4 ℃冷藏保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.2 青麥糕的制備及貯藏

稱取適量混合粉(青麥粉與脫皮綠豆粉的質(zhì)量比為7∶3)，分別加入水40%、木糖醇15%、少許黃油、葉綠素銅鈉鹽0.36‰、D-異抗壞血酸鈉0.62‰、檸檬酸2.00‰，在和面機(jī)中和面9 min，模具成型，放入蒸鍋中蒸制7.5 min。將青麥糕冷卻至室溫，放入自封袋中，4 ℃條件下分別貯藏0、1、2、3、5、7、9、11、15 d，其中，對(duì)部分青麥糕進(jìn)行真空冷凍干燥，粉碎并過(guò)100目篩，所有樣品4 ℃冷藏備用。

1.3.3 青麥糕抗老化研究

和面前在混合粉中分別添加蔗糖脂肪酸酯(0、2‰、4‰、6‰、8‰、10‰)、α-淀粉酶(0、0.02‰、0.04‰、0.06‰、0.08‰、0.10‰)、黃原膠(0、0.5‰、1.0‰、1.5‰、2.0‰、2.5‰)進(jìn)行單因素試驗(yàn)，研究它們對(duì)青麥糕硬度的影響。

1.3.4 青麥糕的硬度測(cè)定

對(duì)青麥糕樣品進(jìn)行質(zhì)構(gòu)分析，測(cè)定條件：Φ6 mm的圓柱形探頭，測(cè)試速率1.0 mm/s，壓縮程度30%，觸發(fā)力5 N，2次壓縮時(shí)間間隔1 s。

1.3.5 青麥糕的感官評(píng)價(jià)

邀請(qǐng)10名專業(yè)人員對(duì)青麥糕進(jìn)行感官評(píng)分。青麥糕的感官評(píng)價(jià)參照文獻(xiàn)[20-23]，評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)表1。

表1 青麥糕感官評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

1.3.6 青麥糕熱特性及淀粉老化動(dòng)力學(xué)分析

在青麥糕抗老化研究中，對(duì)各單因素最優(yōu)結(jié)果的青麥糕及原樣(無(wú)添加劑的青麥糕)進(jìn)行熱特性分析。在坩堝中稱取4.0 mg冷凍干燥的青麥糕樣品，按1∶ 2(mg∶ mL)加入去離子水，密封后平衡10 h開(kāi)始測(cè)試，空坩堝作參比。樣品從20 ℃以10 ℃/min升到130 ℃，N2為保護(hù)氣。DSC吸熱曲線上有相變起始溫度(T0)、相變峰值溫度(Tp)和相變終止溫度(Tc)等3個(gè)特征參數(shù)。

1.3.7 青麥糕復(fù)配抗老化劑研究

根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果，選取蔗糖脂肪酸酯(A)、α-淀粉酶(B)和黃原膠(C)添加量進(jìn)行3個(gè)水平響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn)，以老化15 d的綜合感官評(píng)分作為響應(yīng)值，確定青麥糕的最佳復(fù)配抗老化劑。試驗(yàn)設(shè)計(jì)如表2所示。

表2 復(fù)合抗老化劑因素與水平

1.4 數(shù)據(jù)處理

對(duì)所有數(shù)據(jù)采用SPSS 20.0進(jìn)行處理，并采用Origin 8.0作圖。每組試驗(yàn)至少進(jìn)行3次。

2 結(jié)果與分析

2.1 抗老化劑對(duì)青麥糕硬度的影響

2.1.1 蔗糖脂肪酸酯對(duì)青麥糕硬度的影響

蔗糖脂肪酸酯是一種具有較好乳化性能的非離子型表面活性劑，能進(jìn)入淀粉分子內(nèi)并與其絡(luò)合，促進(jìn)交聯(lián)作用，提高淀粉糊化的溫度，通過(guò)抑制淀粉顆粒膨脹而延緩老化[24]。同時(shí)，還能減少游離的淀粉分子，提高面團(tuán)韌性，使成品質(zhì)地柔軟、組織均勻、黏性降低[25]。由圖1a可知，隨著蔗糖脂肪酸酯添加量的增加，青麥糕的硬度逐漸降低。當(dāng)老化1 d時(shí)，雖然添加抗老化劑，但硬度顯著增加，說(shuō)明青麥糕短期老化較嚴(yán)重，且每個(gè)老化時(shí)間點(diǎn)的硬度均為顯著性變化；隨著蔗糖脂肪酸酯的增加，同一老化時(shí)間青麥糕硬度降低，且在添加量小于4‰時(shí)出現(xiàn)顯著性變化。當(dāng)添加量過(guò)多時(shí)，青麥糕硬度無(wú)顯著性變化且黏性變大，易發(fā)生形變和粘連。老化前11 d，添加少量蔗糖脂肪酸酯對(duì)青麥糕硬度有較好的改善作用，11 d后，隨著添加量增加，青麥糕硬度無(wú)顯著性變化。因此，當(dāng)蔗糖脂肪酸酯添加量為4‰時(shí)，抗老化效果最好。

2.1.2α-淀粉酶對(duì)青麥糕硬度的影響

α-淀粉酶通過(guò)水解α-1,4-葡萄糖苷鍵將淀粉分解成短鏈糊精和小分子糖類，從而影響淀粉分子重結(jié)晶，減小成品硬度，但過(guò)量使用會(huì)導(dǎo)致成品塌架，黏性增大[26-27]。如圖1b所示，當(dāng)青麥糕中α-淀粉酶的添加量逐漸增加后，青麥糕的硬度顯著降低，這可能是由于α-淀粉酶將淀粉鏈切斷，破壞了青麥糕內(nèi)部網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)所致。當(dāng)α-淀粉酶添加量過(guò)大時(shí)，硬度雖有降低，但硬度變化不大，且會(huì)導(dǎo)致青麥糕不易成型，黏性過(guò)大。添加α-淀粉酶后，隨著老化時(shí)間的延長(zhǎng)，青麥糕硬度呈先上升再緩慢下降的趨勢(shì)，這可能是因?yàn)棣?淀粉酶切斷大量淀粉鏈導(dǎo)致其無(wú)法重結(jié)晶。另外，添加α-淀粉酶會(huì)使青麥糕的麥青色變得更加均勻，顏色更加翠綠。當(dāng)α-淀粉酶添加量為0.04‰時(shí)，青麥糕的品質(zhì)最佳，且具有良好的抗老化作用。

2.1.3 黃原膠對(duì)青麥糕硬度的影響

黃原膠是由5個(gè)糖殘基單元組成的一種親水膠體，側(cè)鏈帶有負(fù)電荷，這些負(fù)電荷相互作用使黃原膠具有良好的乳化穩(wěn)定性等特點(diǎn)[28]。黃原膠加入面團(tuán)中，可以有更好的增稠作用和假塑性，并阻止淀粉分子羥基上的氫鍵相互作用，延緩了淀粉分子重排引起的老化現(xiàn)象，使成品有更好的穩(wěn)定性。由圖1c可知，隨著黃原膠添加量的增加，青麥糕的硬度顯著降低。當(dāng)黃原膠添加量大于1.0‰時(shí)，青麥糕硬度無(wú)顯著性變化且與老化時(shí)間無(wú)關(guān)，且當(dāng)添加量過(guò)大時(shí)，青麥糕表面較黏，這可能是由于添加黃原膠后，青麥糕與水的結(jié)合力變大所致。老化1 d時(shí)，青麥糕硬度顯著性增加，且明顯高于前兩組抗老化劑，說(shuō)明黃原膠對(duì)青麥糕短期老化效果不明顯。但當(dāng)老化時(shí)間超過(guò)5 d時(shí)，黃原膠能夠顯著降低青麥糕硬度，即黃原膠對(duì)青麥糕長(zhǎng)期老化作用顯著。綜上所述，當(dāng)黃原膠添加量為1.0‰時(shí)，青麥糕品質(zhì)最好，抗老化效果最佳。

2.2 青麥糕淀粉老化特性研究

通過(guò)DSC可以測(cè)定青麥糕中淀粉晶體在發(fā)生相變時(shí)所吸收和釋放的熱量，熱焓值(ΔH)越大，融化這些重結(jié)晶所需能量越多，即淀粉重結(jié)晶的晶體量變多，老化程度增加。DSC測(cè)定青麥糕老化過(guò)程的熱力學(xué)參數(shù)如表3所示，青麥糕中淀粉的相變溫度為40～65 ℃。在老化0 d內(nèi)，青麥糕淀粉重結(jié)晶融化的峰值溫度為53.1 ℃，高于老化1 d后的溫度，這表明短期老化與長(zhǎng)期老化淀粉重結(jié)晶的晶體不同。隨著老化時(shí)間延長(zhǎng)，融化淀粉重結(jié)晶的熱焓值ΔH增加，由1.17 J/g增加到3.35 J/g。這說(shuō)明青麥糕中淀粉重結(jié)晶含量增加，融化這些重結(jié)晶所需能量變多，即老化程度增加。青麥糕在貯藏過(guò)程中發(fā)生老化，主要是由支鏈淀粉老化引起。由表3可知，添加蔗糖脂肪酸酯、α-淀粉酶和黃原膠均可抑制青麥糕中支鏈淀粉的老化。其中，添加4‰蔗糖脂肪酸酯的青麥糕在老化過(guò)程中熱焓值較原樣有所降低，在老化15 d時(shí)由3.35 J/g 降到3.15 J/g。直鏈淀粉分子能與蔗糖脂肪酸酯發(fā)生交互作用，生成復(fù)合物沉淀，降低了游離支鏈淀粉含量，對(duì)青麥糕老化起到抑制作用。添加0.04‰的α-淀粉酶也有良好的抗老化作用，在老化15 d時(shí)熱焓值為2.83 J/g。α-淀粉酶能夠切斷淀粉鏈，分解淀粉成為小分子物質(zhì)，可以抑制淀粉分子重結(jié)晶。添加1.0‰的黃原膠同樣也能起到抗老化作用，在老化15 d時(shí)熱焓值為3.01 J/g。黃原膠的部分結(jié)構(gòu)與纖維素相似，可以進(jìn)入淀粉網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)中充當(dāng)填充物，保護(hù)淀粉雙螺旋結(jié)構(gòu)，并對(duì)淀粉羥基之間作用力有阻礙作用，增大與水的結(jié)合力，從而抑制淀粉老化。從熱焓值可以看出，α-淀粉酶對(duì)青麥糕抗老化作用最強(qiáng)，而蔗糖脂肪酸酯較弱。

注：不同小寫字母表示顯著性差異(P<0.05)；不同曲線在同一老化時(shí)間點(diǎn)上顯著性相同用統(tǒng)一字母表示。

表3 青麥糕老化過(guò)程DSC熱力學(xué)參數(shù)

對(duì)不同老化時(shí)間青麥糕的熱焓值(ΔH)用Avrami方程進(jìn)行回歸分析，得到青麥糕淀粉老化動(dòng)力學(xué)方程及參數(shù)(表4)。從表4可以看出，在4 ℃貯藏下青麥糕中淀粉的老化動(dòng)力學(xué)模型決定系數(shù)較高(R2>0.98)，說(shuō)明Avrami方程能夠很好地描述青麥糕中淀粉老化結(jié)晶特性。其中，青麥糕原樣的n值(Avrami指數(shù))小于1，其淀粉重結(jié)晶為瞬間成核，即在老化早期形成[6]。在青麥糕中添加蔗糖脂肪酸酯、α-淀粉酶和黃原膠后，n值變大，且均大于1，k值(淀粉重結(jié)晶常數(shù))減小。即添加抗老化劑后，青麥糕淀粉結(jié)晶方式由瞬間成核變?yōu)檫B續(xù)成核；青麥糕原樣淀粉k值最大，最易老化，添加α-淀粉酶的青麥糕結(jié)晶速率最低，抑制老化效果最明顯。

表4 青麥糕中淀粉老化動(dòng)力學(xué)模型

2.3 青麥糕抗老化劑優(yōu)化試驗(yàn)

以綜合感官評(píng)分為因變量，以蔗糖脂肪酸酯、α-淀粉酶、黃原膠添加量3個(gè)因素進(jìn)行響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn)，結(jié)果如表5所示。對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行二次多元回歸擬合，得到方程：Y=93.08+0.65A+0.55B-0.30C+0.82AB+0.77AC-1.57BC-0.78A2-5.13B2-3.53C2，其中Y為青麥糕老化15 d的綜合感官評(píng)分。模型變量的方差分析如表6所示。由表6可知，F(xiàn)值=99.45，P<0.000 1，模型顯著，R2=0.982 3，表明方程與實(shí)際試驗(yàn)擬合性好，可以有效地反映抗老化劑對(duì)青麥糕綜合感官評(píng)分的影響[22,29]。

表5 復(fù)配抗老化劑響應(yīng)面優(yōu)化結(jié)果

表6 響應(yīng)面二次模型的變量方差分析

通過(guò)Design-Expert軟件計(jì)算得到主次因素：蔗糖脂肪酸酯>α-淀粉酶>黃原膠，方程的極值點(diǎn)：蔗糖脂肪酸酯添加量為4.92‰，α-淀粉酶添加量為0.04‰，黃原膠添加量為0.99‰，此時(shí)的感官評(píng)分為93.26。經(jīng)試驗(yàn)驗(yàn)證，在此條件下青麥糕的綜合感官評(píng)分最高，品質(zhì)最佳。

3 結(jié)論

在青麥糕中添加蔗糖脂肪酸酯、α-淀粉酶和黃原膠等3種抗老化劑，研究其對(duì)青麥糕的抗老化作用。添加抗老化劑均能使青麥糕的硬度降低，添加4‰的蔗糖脂肪酸酯、0.04‰的α-淀粉酶、1.0‰的黃原膠均可有效抑制青麥糕老化。通過(guò)熱特性分析，添加4‰的蔗糖脂肪酸酯、0.04‰的α-淀粉酶、1.0‰的黃原膠的青麥糕老化15 d的熱焓值分別為3.15 J/g、2.83 J/g、3.01 J/g，均低于原樣的3.35 J/g，且α-淀粉酶的抗老化作用最強(qiáng)。3個(gè)Avrami方程中的n值與原樣相比變大，且均大于1，說(shuō)明添加抗老化劑后，青麥糕淀粉結(jié)晶方式由瞬間成核變?yōu)檫B續(xù)成核。青麥糕原樣淀粉k值最大，最易老化，添加α-淀粉酶的青麥糕結(jié)晶速率最低，抑制老化效果最明顯，其次是黃原膠，蔗糖脂肪酸酯抗老化效果相對(duì)最弱。通過(guò)響應(yīng)面試驗(yàn)綜合分析，添加4.92‰的蔗糖脂肪酸酯、0.04‰的α-淀粉酶和0.99‰的黃原膠，可以更有效地延緩青麥糕老化。