閆鑫磊，韓汶熒，汪 洋，黃亞東，孫智信

(內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010018)

弓形蟲(Toxoplasmagondii,T.gondii)是一種重要的人獸共患寄生蟲，可感染所有溫血?jiǎng)游锏挠泻思?xì)胞[1-2]。反芻動(dòng)物感染主要通過攝入被含有卵囊的貓糞便污染的草料、牧草和飲水[3-4]。其感染會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物生殖障礙及流產(chǎn)，給畜牧業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。同時(shí)弓形蟲可通過動(dòng)物性產(chǎn)品直接或間接地傳播給人類，也對居民食品安全和公眾健康構(gòu)成了嚴(yán)重威脅[5-6]。呼倫貝爾草原是我國最大最優(yōu)質(zhì)的天然牧場，然而目前針對該地區(qū)綿羊弓形蟲感染的系統(tǒng)報(bào)道較少。本試驗(yàn)深入呼倫貝爾市的6個(gè)地區(qū)，選取放牧綿羊?yàn)樵囼?yàn)對象，展開弓形蟲感染的血清學(xué)檢測，以期為該地區(qū)畜牧業(yè)發(fā)展，及人獸共患病防治等方面提供數(shù)據(jù)參考。

1 材料與方法

1.1 樣品采集及血清制備 本試驗(yàn)所用綿羊血液樣品采集自呼倫貝爾市的陳巴爾虎旗、鄂溫克旗、滿洲里區(qū)、新巴爾虎左旗、牙克石市、扎蘭屯市共6個(gè)地區(qū)，通過離心方法從全血中分離獲得血清，共588份，標(biāo)記后于-20 ℃冰箱保存待用。

1.2 試驗(yàn)試劑及試驗(yàn)方法 綿羊弓形蟲間接ELISA抗體檢測試劑盒，購自泉州市睿信生物科技有限公司，試驗(yàn)操作按試劑盒說明書要求進(jìn)行。

1.3 結(jié)果判定 在陽性對照樣本OD值≥1且陰性對照樣本OD值≤0.15的條件下，判定結(jié)果的臨界值=陰性對照樣本的平均OD值+0.15，若被測樣的OD值>臨界值，則被測樣為陽性，反之則為陰性。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì) 采用SPSS 21.0對數(shù)據(jù)進(jìn)行卡方檢驗(yàn)，P<0.05時(shí)差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 呼倫貝爾市各地區(qū)弓形蟲血清抗體檢測 本次調(diào)查從呼倫貝爾市的6個(gè)地區(qū)共采集樣品588份，經(jīng)弓形蟲抗體檢測，總體陽性率為12.07%。高于總體陽性率的有3個(gè)旗縣，其中最高為扎蘭屯市(14.81%)；低于總體陽性率的有3個(gè)地區(qū)，其中最低為鄂溫克旗(10.24%)。經(jīng)卡方檢驗(yàn)分析，各地區(qū)之間無顯著性差異(P>0.05)。結(jié)果見表1。

表1 弓形蟲抗體血清陽性率檢測結(jié)果Table 1 The results of serum positive rate of T. gondii antibody

2.2 不同性別綿羊弓形蟲血清抗體檢測 由表2可知，所檢測的278份雄性綿羊血清中，檢測結(jié)果為陽性的有43份，陽性率為15.47%；310份雌性綿羊樣品中，陽性樣品數(shù)為28份，陽性率為9.03%。經(jīng)卡方檢驗(yàn)分析，二者無顯著性差異(P>0.05)。

表2 不同性別綿羊弓形蟲血清陽性率Table 2 Prevalence of T. gondii infection in sheep in different sexes

2.3 不同年齡綿羊弓形蟲血清抗體檢測 以12月齡及以上為成年羊，12月齡以下為未成年羊。結(jié)果顯示，成年羊陽性率為18.58%；未成年羊陽性率為8.01%。成年綿羊弓形蟲血清抗體陽性率大于未成年綿羊，且二者差異極顯著(P<0.01)。結(jié)果見表3。

表3 不同年齡綿羊弓形蟲血清陽性率Table 3 Prevalence of T. gondii infection in sheep in different ages

3 討論

家畜羊感染弓形蟲后，會(huì)導(dǎo)致腦炎、眼病和胎盤炎等較嚴(yán)重的癥狀，同時(shí)也會(huì)伴隨神經(jīng)癥候或者繁殖癥狀等情況的出現(xiàn)，嚴(yán)重?fù)p害畜牧業(yè)發(fā)展[7]。呼倫貝爾市作為內(nèi)蒙古自治區(qū)綿羊的重要產(chǎn)區(qū)之一，且以放牧綿羊著稱，但近年來缺乏系統(tǒng)的弓形蟲感染數(shù)據(jù)。方變變等對內(nèi)蒙古部分地區(qū)的牛、羊弓形蟲感染進(jìn)行了相關(guān)研究，對于呼倫貝爾市只涉及到新巴爾虎右旗1個(gè)地區(qū)[8]。本試驗(yàn)利用間接ELISA方法檢測了呼倫貝爾市6個(gè)地區(qū)共588份放牧綿羊血樣，結(jié)果顯示，弓形蟲血清陽性率為12.07%。與已報(bào)道的國內(nèi)其他調(diào)查結(jié)果相比處于相對較高的水平[9-10]。因此就本試驗(yàn)結(jié)果而言，呼倫貝爾市綿羊弓形蟲感染情況應(yīng)當(dāng)引起重視。

本次試驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示，12月齡及以上綿羊弓形蟲感染率(18.58%)高于12月齡以下綿羊(8.01%)，且二者呈極顯著差異(P<0.01)。這可能是由于隨著年齡的增加，動(dòng)物與外界環(huán)境接觸時(shí)間較長，接觸弓形蟲卵囊的可能性也就越高，因此感染概率較大，導(dǎo)致年齡成為綿羊感染弓形蟲的一個(gè)重要因素。但需要指出的是，相關(guān)研究對于年齡是否為綿羊感染弓形蟲的風(fēng)險(xiǎn)因素報(bào)道不一[11-13]，這說明年齡因素可能與其他未知因素結(jié)合產(chǎn)生影響。此外本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，性別不是綿羊感染弓形蟲的主要因素，說明不同性別的綿羊存在同樣的感染風(fēng)險(xiǎn)，提示相關(guān)人員需做好全面防控工作。

綜上所述，該試驗(yàn)結(jié)果初步反映了呼倫貝爾市放牧綿羊弓形蟲感染情況，為該地區(qū)動(dòng)物疫病防控、畜牧業(yè)發(fā)展提供了參考數(shù)據(jù)。但呼倫貝爾市牧

場遼闊，綿羊養(yǎng)殖量較大，因此今后研究需擴(kuò)大采樣范圍及增加采樣量，以期獲得更加準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)。