吳 迪 孫 勇 劉 冰

(遼寧省蠶業(yè)科學(xué)研究所，遼寧鳳城 118100)

我國(guó)北方地區(qū)豐富的柞林資源和得天獨(dú)厚的環(huán)境條件，為柞蠶業(yè)的發(fā)展提供了充足的地理優(yōu)勢(shì)。近年來(lái)，隨著柞蠶育種研究的深入，優(yōu)良的柞蠶品種不斷推陳出新，為我國(guó)柞蠶業(yè)的健康可持續(xù)發(fā)展提供了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)保障。由于青黃蠶系統(tǒng)對(duì)我國(guó)北方地區(qū)低溫和多濕性氣候的適應(yīng)性較強(qiáng)，目前育成的二化性實(shí)用柞蠶品種均為青黃蠶系統(tǒng)，且其幼蟲(chóng)體色多屬類(lèi)似的淺綠色系，品種辨識(shí)度不高，親緣關(guān)系較近，為柞蠶品種的應(yīng)用帶來(lái)很大困擾，也不利于雜種優(yōu)勢(shì)的利用。另一方面，由于當(dāng)前對(duì)柞蠶種經(jīng)營(yíng)監(jiān)管的不規(guī)范性，大量的柞蠶品種被冒用或侵權(quán)使用，嚴(yán)重侵犯了柞蠶育種工作者的知識(shí)產(chǎn)權(quán)。現(xiàn)存的深綠色系蠶品種如8822[1]、高新一號(hào)[2]、林青品種盡管具有幼蟲(chóng)體的標(biāo)志性狀，但存在千粒繭重偏低、雜種優(yōu)勢(shì)不強(qiáng)或豐產(chǎn)性不高等問(wèn)題。

為此，我們于1998年以8822和H8701為親本，采用雜交育種的方法開(kāi)始著手選育一個(gè)適應(yīng)性強(qiáng)、具有一定抗病性和豐產(chǎn)性，且具有明顯生物學(xué)標(biāo)識(shí)的深綠色系柞蠶品種。歷經(jīng)22年的努力最終選育成功二化性柞蠶新品種“墨玉”。新品種具有對(duì)北方低溫多濕氣候適應(yīng)性強(qiáng)，繭型中等，抗病豐產(chǎn)等優(yōu)點(diǎn)，且其成蟲(chóng)、幼蟲(chóng)和繭期均具有明顯的生物學(xué)標(biāo)識(shí)。

1 選育經(jīng)過(guò)

1.1 親本材料的選擇

8822：由遼寧省蠶業(yè)科學(xué)研究所育成的高飼料效率柞蠶品種，幼蟲(chóng)體色深綠色，繭型較大。

H8701：由遼寧省蠶業(yè)科學(xué)研究所育成的青黃蠶抗病品種，成蟲(chóng)前翅前緣脈呈炭黑色或深紫色。

1.2 育種材料的創(chuàng)造與選育

在柞蠶成蟲(chóng)前翅前緣脈色遺傳規(guī)律研究的基礎(chǔ)上，2002年秋，以綠蠶高飼料效率品種8822和具成蟲(chóng)標(biāo)志性狀的H8701為親本，選擇各經(jīng)濟(jì)性狀優(yōu)良的蛾區(qū)進(jìn)行雜交，選留15個(gè)蛾的優(yōu)質(zhì)種卵混合收蟻放養(yǎng)，壯蠶期選擇蠶體健壯、食性強(qiáng)的個(gè)體集中窩繭留種。2003年春，淘汰成蟲(chóng)前翅前緣脈顏色正常(深灰色)的雌雄個(gè)體，選留成蟲(chóng)前翅前緣脈為深紫色、體大活潑的個(gè)體交配制種，選留產(chǎn)卵性能好、卵粒整齊度高的種蛾混合收蟻、放養(yǎng)，壯蠶期選擇幼蟲(chóng)體色深綠色的優(yōu)良個(gè)體窩繭留種，淘汰幼蟲(chóng)體色淺綠色的個(gè)體；秋季制種時(shí)，選擇具有黑翅緣標(biāo)記的雌雄蛾隨機(jī)交配，選留30頭種蛾蠶期混合放養(yǎng)，壯蠶期加強(qiáng)強(qiáng)健性選擇。2004年春，結(jié)合成蟲(chóng)標(biāo)記與生命力性狀、產(chǎn)卵性能等性狀的選擇，選留30頭種蛾單蛾區(qū)放養(yǎng)，選留繭色淡、幼蟲(chóng)及成蟲(chóng)期標(biāo)記性狀純度高、幼蟲(chóng)發(fā)育整齊、結(jié)繭率高的蛾區(qū)繼代，并注重單蛾產(chǎn)卵量、千粒繭重等其他性狀的平衡選擇。到2009年秋純種幼蟲(chóng)體色及成蟲(chóng)標(biāo)記性狀已基本固定，此后一直異蛾區(qū)交配繼代保存。為了進(jìn)一步純化新品種標(biāo)記性狀和淘汰不良基因，2016年至2018年秋選留綜合性狀優(yōu)良的蛾區(qū)繼代并建立譜系，繼續(xù)選擇具有顯著標(biāo)志性狀的雌雄蛾同蛾區(qū)自交留種，同時(shí)側(cè)重對(duì)千粒繭重和千克卵收繭數(shù)(量)的選擇，大蠶期嚴(yán)格淘汰雜色蠶和弱小蠶并作記錄。

2 選育結(jié)果

2.1 新品種“墨玉”主要形態(tài)特征和生物學(xué)特性

新品種屬青黃蠶血統(tǒng)，二化性，四眠五齡。單蛾產(chǎn)卵360粒，克卵數(shù)102粒。幼蟲(chóng)全齡經(jīng)過(guò)春季55 d、秋季45 d，壯蠶體背為寶石綠色。繭棕色偏白，全繭量11.4 g，繭層量1.27 g，繭層率11.14%。雌繭繭長(zhǎng)55.41 mm，繭幅30 mm；雄繭繭長(zhǎng)49.57 mm，繭幅26.38 mm。繭絲長(zhǎng)1 312.5 m，解舒絲長(zhǎng)816.89 m，生絲公量96.34 g，回收率76.10%， 鮮繭出絲率8.03%。蛹體褐色間有黃褐色，蛹期發(fā)育有效積溫235 ℃。成蟲(chóng)體色棕紅，前翅前緣脈呈黑紫色。雌蛾體長(zhǎng)47.3 mm，體幅27.8 mm，翅展160.58 mm；雄蛾體長(zhǎng)46.3 mm，體幅20.4 mm，翅展150.8 mm。

2.2新品種主要經(jīng)濟(jì)性狀

2.2.1 新品種純種生產(chǎn)性能

2016—2018年，新品種“墨玉”單蛾區(qū)放養(yǎng)，調(diào)查單蛾產(chǎn)卵數(shù)及產(chǎn)卵量，春秋各放養(yǎng)30蛾區(qū)，對(duì)照種抗大放養(yǎng)15蛾區(qū)，主要調(diào)查生命力性狀和產(chǎn)量性狀。試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1-2。

表1可見(jiàn)，新品種“墨玉”春季3年平均收蟻結(jié)繭率較對(duì)照品種抗大高3.42個(gè)百分點(diǎn)，死籠率較對(duì)照低0.48個(gè)百分點(diǎn)，單蛾產(chǎn)卵數(shù)較對(duì)照高4.35%，產(chǎn)卵量較對(duì)照高5.99%，全繭量、繭層量和繭層率分別比對(duì)照高3.21%、5.56%和0.16個(gè)百分點(diǎn)，千克卵收繭數(shù)和千克卵收繭量分別比對(duì)照高11.08%和14.3%。

表1 新品種“墨玉”春季品種比較試驗(yàn)結(jié)果

表2可見(jiàn)，秋季收蟻結(jié)繭率比抗大高2.49個(gè)百分點(diǎn)，死籠率較對(duì)照高0.7個(gè)百分點(diǎn)，單蛾產(chǎn)卵數(shù)較對(duì)照高3.08%，單蛾產(chǎn)卵量較對(duì)照高2.7%，全繭量、繭層量和繭層率分別比對(duì)照高4.42%、11.02%和0.64個(gè)百分點(diǎn)，千克卵收繭數(shù)和千克卵收繭量分別比對(duì)照高9.24%和13.59%。

表2 新品種“墨玉”秋季品種比較試驗(yàn)結(jié)果

上述結(jié)果表明，新品種“墨玉”生命力性狀較對(duì)照品種抗大雖小幅度提高，但增產(chǎn)效果明顯。

2.2.2 新品種“墨玉”繁種試驗(yàn)

2017—2019年，分別在遼寧、吉林試驗(yàn)地開(kāi)展了新品種“墨玉”繁種試驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)表3-4。

表3 新品種“墨玉”春季繁種試驗(yàn)結(jié)果(遼寧試驗(yàn)地)

表3可見(jiàn)，在遼寧試驗(yàn)地春季3年累計(jì)投放“墨玉”種蛾18 380頭，收獲種繭1 485 983粒，平均單蛾收繭81粒，比對(duì)照品種抗大增產(chǎn)9.08%；平均千粒繭重8.2 kg，比抗大高6.49%。

表4可見(jiàn)，在遼寧試驗(yàn)地秋季3年累計(jì)投放“墨玉”種蛾2 600頭，平均單蛾結(jié)繭數(shù)73粒，較對(duì)照品種抗大高7.20%；平均千粒繭重10.82 kg，比抗大高3.84%。

表4 新品種“墨玉”秋季繁種試驗(yàn)結(jié)果

表4可見(jiàn)，在吉林試驗(yàn)地秋季3年累計(jì)投放“墨玉”種蛾15 150頭，平均單蛾收繭量1.37 kg，比對(duì)照品種抗大增產(chǎn)9.87%。

2.2.3 新品種對(duì)ApNPV抗病性測(cè)定

2017年春，分別制備“墨玉”、抗大各120個(gè)蛾，將蛾卵按品種充分混勻，用甲醛鹽酸混合液進(jìn)行卵面消毒，于養(yǎng)蠶室暖卵孵化，選留孵化同一天的蟻蠶飼育。起青后將柞葉浸蘸柞蠶核型多角體病毒液，病毒液的濃度分別為1×103p/mL、1×104p/mL、1×105p/mL、1×106p/mL、1×107p/mL、1×108p/mL和1×109p/mL。柞葉陰干后飼喂試蠶，每個(gè)養(yǎng)蟲(chóng)瓶飼育試蠶12～13頭，待取食24小時(shí)后，換新鮮柞葉飼喂，并固定每個(gè)養(yǎng)蟲(chóng)瓶的試蠶數(shù)為10頭，每個(gè)養(yǎng)蟲(chóng)瓶為一個(gè)重復(fù)區(qū)，每個(gè)處理設(shè)10個(gè)重復(fù)區(qū)。同時(shí)，兩個(gè)品種分別設(shè)不添食病毒的空白對(duì)照。定期除沙，并觀(guān)察發(fā)病情況，記錄發(fā)病數(shù)量，統(tǒng)計(jì)發(fā)病率，計(jì)算LC50，比較兩品種之間的抗性差異，試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表5。測(cè)得“墨玉”對(duì)NPV病毒的LC50值為5.821×103p/mL，對(duì)照抗大LC50為1.352×103p/mL，表明“墨玉”對(duì)NPV抗性比對(duì)照抗大高3.305倍。

表5 新品種“墨玉”對(duì)ApNPV抗性測(cè)定結(jié)果

2.2.4 新品種“墨玉”對(duì)微粒子病抗性測(cè)定

2018年春，分別制備2.4×105個(gè)/mL、2.4×106個(gè)/mL、2.4×107個(gè)/mL、2.4×108個(gè)/mL和2.4×109個(gè)/mL 5個(gè)濃度梯度的微粒子孢子懸浮液，取同一天眠起的3齡幼蟲(chóng)，“墨玉”和對(duì)照抗大各濃度梯度分別經(jīng)口添食病毒液5μL，每濃度梯度每品種分別添食32頭蠶，在相同室內(nèi)條件下飼養(yǎng)，調(diào)查死亡率，結(jié)果見(jiàn)表6和圖1。用DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)統(tǒng)計(jì)分析兩品種對(duì)微粒子病的抗性，結(jié)果見(jiàn)表7。

圖1 “墨玉”與抗大添食微孢子后的死亡率

表7 致死劑量(LD)比率測(cè)定結(jié)果

從表6和圖1可以看出，“墨玉”對(duì)微粒子病的抗性高于對(duì)照品種抗大。表7中致死劑量比率的測(cè)定結(jié)果，“墨玉”與抗大對(duì)微粒子病LD50差異顯著。

2.2.5 新品種“墨玉”百粒繭繅絲試驗(yàn)

2018年秋季，完成了新品種“墨玉”百粒繭繅絲試驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)表8。

表8 新品種“墨玉”百粒繭繅絲成績(jī)

表8可見(jiàn)，新品種“墨玉”繭絲長(zhǎng)比對(duì)照品種抗大長(zhǎng)4.41 m，解舒率較對(duì)照高1.06個(gè)百分點(diǎn)，解舒絲長(zhǎng)較對(duì)照長(zhǎng)16.69 m，生絲公量比對(duì)照高0.48 g，而鮮繭出絲率與對(duì)照相當(dāng)。

3 討 論

柞蠶新品種“墨玉”屬青黃蠶血統(tǒng)，二化性、四眠五齡。其幼蟲(chóng)體色為寶石綠色，屬深綠色系，相較于大多數(shù)二化性柞蠶品種的淡綠色系具有很明顯的形態(tài)特征，綜合其成蟲(chóng)具有的黑紫色前翅前緣脈標(biāo)記性狀，形成了該品種形態(tài)性狀的唯一性，從而大大降低了品種鑒別的難度，對(duì)于解決我國(guó)北方柞蠶種市場(chǎng)管理松散，育種者知識(shí)產(chǎn)權(quán)難以維護(hù)的困境局面具有極大的推動(dòng)作用。同時(shí)，其生產(chǎn)性能與對(duì)照品種抗大相比，增產(chǎn)9%以上，增產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)性好，同時(shí)抗病性也有所提高，能夠很好地適應(yīng)我國(guó)北方蠶區(qū)的氣候特點(diǎn)，適合遼寧、吉林、黑龍江等地二化性地區(qū)推廣使用。