韋美德，胡禮賓，秦志麗，黃榆蘇，凌建生

（廣西醫(yī)科大學(xué)第四附屬醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科，廣西 柳州 545005）

按ISO 15189認(rèn)可的要求，臨床實(shí)驗(yàn)室中通過認(rèn)可的項(xiàng)目，應(yīng)每年進(jìn)行儀器比對，樣本量應(yīng)≥20例，濃度應(yīng)覆蓋測量范圍，比對結(jié)果應(yīng)滿足要求；如比對結(jié)果不一致時(shí)，應(yīng)分析原因，采取必要的糾正措施，并評估糾正措施的有效性，以保證實(shí)驗(yàn)室中不同分析系統(tǒng)的檢測結(jié)果具有一致性和可比性[1]。廣西醫(yī)科大學(xué)第四附屬醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科有2臺cobas c702全自動生化分析儀（簡稱c702-1和c702-2），而同型號的不同儀器檢測同一份樣本也不可避免地存在系統(tǒng)誤差[2]。為此，本研究擬通過2臺同型號的生化分析儀血清鈣檢測結(jié)果的比對分析，探討比對結(jié)果不通過的原因和糾正措施。

1 材料和方法

1.1 樣本來源

收集廣西醫(yī)科大學(xué)第四附屬醫(yī)院門診和住院患者新鮮血清樣本20份，血清鈣濃度覆蓋高、中、低水平，每份血清樣本體積不少3 mL，且無黃疸、脂血或溶血。

1.2 儀器和試劑

cobas c702全自動生化分析儀（瑞士羅氏公司）及配套試劑、c.f.a.s校準(zhǔn)品。多參數(shù)質(zhì)控品購自美國伯樂公司。

1.3 方法

1.3.1 儀器保養(yǎng)與質(zhì)量保證 2臺儀器比對當(dāng)天室內(nèi)質(zhì)量控制（簡稱室內(nèi)質(zhì)控）結(jié)果在控，近期室間質(zhì)量評價(jià)（簡稱室內(nèi)質(zhì)評）成績合格，2臺儀器比對時(shí)性能良好。

1.3.2 比對儀器的確定 以連續(xù)多年參加國家衛(wèi)生健康委臨床檢驗(yàn)中心、廣西省臨床檢驗(yàn)中心室間質(zhì)評，成績優(yōu)秀的儀器（c702-2）為比對儀器，c702-1為試驗(yàn)儀器。

1.3.3 樣本測定 按本實(shí)驗(yàn)室比對程序要求，將20份血清樣本同時(shí)在2臺儀器上進(jìn)行血清鈣濃度檢測。

1.3.4 判斷標(biāo)準(zhǔn) （1）2臺儀器比對結(jié)果r2≥0.95，且有≥80%的結(jié)果符合|偏移%|≤該項(xiàng)目比對質(zhì)量目標(biāo)；（2）平均偏移的絕對值應(yīng)低于本實(shí)驗(yàn)室規(guī)定的允許范圍；（3）各醫(yī)學(xué)決定水平值代入直線回歸方程（Y=aX+b）后的理論值與實(shí)際值的偏移應(yīng)低于本實(shí)驗(yàn)室規(guī)定的允許范圍，a值在1.00±0.05范圍內(nèi)，r2≥0.95。

2 結(jié)果

2.1 血清鈣首次比對結(jié)果

c702-1與c702-2比對結(jié)果的絕對偏移為-0.16～0.08 mmol/L，有65%的結(jié)果符合|偏移%|≤該項(xiàng)目比對質(zhì)量目標(biāo)，平均|偏移%|為4.94%，醫(yī)學(xué)決定水平處的|偏移%|為3.38%。線性回歸方程為Y=1.040 1X-0.199 9（r2=0.987 1），見圖1。比對結(jié)果通過率為65%，未達(dá)到≥80%的要求，本次比對未通過。

圖1 c702-1與c702-2血清鈣首次比對的線性回歸分析

2.2 首次比對不通過原因分析

2.2.1 攜帶污染或試劑干擾因素 首先考慮試劑加樣攜帶污染或干擾。通過查看相關(guān)文獻(xiàn)并進(jìn)行血清鈣干擾排查試驗(yàn)后，確認(rèn)c702-2試劑倉試劑的排列順序合理，不存在攜帶污染或干擾。c702-1試劑倉中排列于血清鈣試劑前的鎂和總蛋白試劑均對血清鈣檢測有干擾作用。因此，將鎂和總蛋白試劑的擺放位置移至血清鈣試劑之后。

2.2.2 儀器準(zhǔn)確度因素 通過查看近期室間質(zhì)評和室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果，確認(rèn)儀器性能良好，血清鈣結(jié)果在控，但室間質(zhì)評和室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果均高于靶值，考慮為定標(biāo)原因引起。通過查閱文獻(xiàn)并進(jìn)行相關(guān)分析后，判斷可能是校準(zhǔn)品溶劑原因和空白對照液選取不當(dāng)。通過對比排除試驗(yàn)并進(jìn)行驗(yàn)證，發(fā)現(xiàn)用去離子水復(fù)溶校準(zhǔn)品，用去離子水作為空白進(jìn)行定標(biāo)后，血清鈣的室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果和室間質(zhì)評結(jié)果更接近于靶值。

2.3 實(shí)施糾正措施后血清鈣的第2次比對結(jié)果

第2次比對結(jié)果顯示，c702-1與c702-2血清鈣檢測結(jié)果的絕對偏移為-0.05～0.06 mmol/L，各項(xiàng)判斷指標(biāo)結(jié)果均符合要求。線性回歸分析見圖2。比對結(jié)果可接受，比對通過。

圖2 c702-1與c702-2血清鈣第2次比對的線性回歸分析

3 討論

在臨床生化檢測中，很多實(shí)驗(yàn)室采用蒸餾水復(fù)溶校準(zhǔn)品、質(zhì)控品，并進(jìn)行本底空白定標(biāo)（本實(shí)驗(yàn)室之前也習(xí)慣用0.9% NaCl溶液或蒸餾水作空白對照，用蒸餾水復(fù)溶c.f.a.s校準(zhǔn)品、質(zhì)控品），而儀器系統(tǒng)用水中采用去離子水、蒸餾水或純凈水的情況均存在。本研究結(jié)果顯示，校準(zhǔn)品、質(zhì)控品復(fù)溶劑及本底空白定標(biāo)液與儀器系統(tǒng)用水不一致可能會對血清鈣的檢測造成一定影響，導(dǎo)致儀器比對出現(xiàn)差異。本實(shí)驗(yàn)室根據(jù)本研究結(jié)果，規(guī)定使用與儀器系統(tǒng)用水同源的去離子水進(jìn)行空白定標(biāo)對照，復(fù)溶校準(zhǔn)品、質(zhì)控品，同時(shí)更正了實(shí)驗(yàn)室相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。因此，建議統(tǒng)一儀器實(shí)驗(yàn)用水，校準(zhǔn)品、質(zhì)控品復(fù)溶劑及本底空白定標(biāo)液選取與儀器系統(tǒng)用水同源的液體。因?qū)嶒?yàn)用水在純水機(jī)等水源供給過程中，水（包括去離子水）中都不可避免地含有極少量的鈣、鎂等離子或雜質(zhì)，而在檢測鈣、鎂等項(xiàng)目或其他項(xiàng)目時(shí)，使用的試劑均為濃縮試劑，需加水（實(shí)驗(yàn)用水）稀釋，采用相同來源的水來進(jìn)行空白定標(biāo)，復(fù)溶校準(zhǔn)品、質(zhì)控品，可有效去除本底中鈣、鎂等離子或雜質(zhì)的影響，使結(jié)果更加準(zhǔn)確。

有研究結(jié)果顯示，鎂和總蛋白對鈣離子測定有干擾作用，且鎂的干擾作用大于總蛋白[3]。鎂的測定試劑中含有乙二醇二乙醚二胺四乙酸，該成分為鈣的絡(luò)合劑。另外，鈣的測定方法一般采用鄰甲酚酞絡(luò)合酮比色法，由于方法學(xué)的缺陷，影響因素較多，試劑開瓶放置一段時(shí)間后會有輕微的顏色變化，影響檢測結(jié)果，所以臨床實(shí)驗(yàn)室均規(guī)定每天或間隔一定時(shí)間需對鈣項(xiàng)目進(jìn)行定標(biāo)。由于鈣測定的干擾因素較多，加上我國衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)WS/T 403—2012[4]推薦使用的鈣項(xiàng)目的允許總誤差和比對質(zhì)量目標(biāo)要求均較嚴(yán)格，所以血清鈣比對難以通過是長期困擾臨床實(shí)驗(yàn)室的一大難題。

同一檢測系統(tǒng)、不同檢測系統(tǒng)同一項(xiàng)目檢測結(jié)果可比是非常重要的，涉及到結(jié)果解釋及臨床應(yīng)用，因此只有實(shí)現(xiàn)檢測結(jié)果可比，才能保證不同系統(tǒng)檢測結(jié)果的統(tǒng)一性和一致性，才能給臨床提供準(zhǔn)確、可靠的實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)。即使使用不同參考區(qū)間的不同檢測系統(tǒng)，因方法學(xué)原理等差異無法實(shí)現(xiàn)可比時(shí)，也要將這種結(jié)果差異告知臨床，并采取風(fēng)險(xiǎn)控制措施（如在檢驗(yàn)報(bào)告上做出明確標(biāo)識等）。