戴 青，韓寧寧，王 軒，范 強(qiáng)

(中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所，北京 100081)

pH值是溶液中氫離子濃度的負(fù)對(duì)數(shù)值，是衡量溶液酸、堿程度的指標(biāo)[1]，pH值測(cè)定是獸用藥品檢驗(yàn)中常見(jiàn)的檢測(cè)項(xiàng)目，在藥品檢測(cè)領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用，檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行pH值測(cè)定的水平可以客觀反映出該實(shí)驗(yàn)室的藥品檢測(cè)能力。能力驗(yàn)證是利用實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)，依據(jù)預(yù)先制定的準(zhǔn)則評(píng)價(jià)參與者的能力，是外部質(zhì)量評(píng)價(jià)與自我監(jiān)控的結(jié)合，通過(guò)能力驗(yàn)證，可以幫助檢驗(yàn)檢測(cè)機(jī)構(gòu)發(fā)現(xiàn)問(wèn)題，提高檢測(cè)能力和水平[2-3]。在檢測(cè)和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室的國(guó)家認(rèn)可制度中對(duì)實(shí)驗(yàn)室參加能力驗(yàn)證并取得滿意結(jié)果提出了明確的要求[4]。本研究對(duì)中國(guó)35家獸藥檢測(cè)機(jī)構(gòu)的溶液pH值測(cè)定能力進(jìn)行測(cè)試，其中省級(jí)獸藥檢測(cè)機(jī)構(gòu)29家，市級(jí)獸藥檢測(cè)機(jī)構(gòu)2 家，第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)3家，獸藥生產(chǎn)企業(yè)1家，并對(duì)測(cè)試結(jié)果進(jìn)行討論。

1 材料與方法

1.1 材 料 pH計(jì)(HI9017 型，意大利HANNA公司)；標(biāo)準(zhǔn)緩沖液(阿法埃莎化學(xué)有限公司)。

1.2 方 法

1.2.1 樣品制備 經(jīng)調(diào)研，阿法埃莎化學(xué)有限公司生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn)緩沖液性質(zhì)穩(wěn)定，可溯源至美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)與技術(shù)研究院(NIST)的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。因此，將市售阿法埃莎公司生產(chǎn)的pH 4.01與pH 6.86兩種標(biāo)準(zhǔn)緩沖液按照不同比例混合均勻，制備兩種不同pH值的樣品，在25±2 ℃、相對(duì)濕度≤50%的環(huán)境下分裝至安瓿，每支裝量約為15 mL，熔封，即制得本次能力驗(yàn)證樣品。采用上述方法配制兩批能力驗(yàn)證樣品，樣品pH值分別約為5.21與5.74，提供給各參加單位樣品A和樣品B各一支。

1.2.2 樣品均勻性和穩(wěn)定性考察 從兩組能力驗(yàn)證樣品中各隨機(jī)抽取10支進(jìn)行均勻性檢驗(yàn)，每支樣品在重復(fù)性條件下測(cè)定兩次。為考察環(huán)境溫度對(duì)pH值測(cè)定的影響，分別將兩組樣品在15、25、30 ℃環(huán)境中放置120 min，然后分別在該溫度環(huán)境下測(cè)定溶液的pH值。為考察樣品對(duì)運(yùn)輸過(guò)程中高溫的耐受性，將兩組樣品放置于50 ℃下，分別放置1、3、5、7、14 d后測(cè)定。為考察樣品對(duì)高濕環(huán)境的耐受性，將每組樣品開(kāi)封后，放置于相對(duì)濕度80%條件下，分別放置1、3、5、7、14 d后測(cè)定。

1.2.3 評(píng)定方法及標(biāo)準(zhǔn) 根據(jù)CNAS-GL002《能力驗(yàn)證結(jié)果的統(tǒng)計(jì)處理和能力評(píng)價(jià)指南》要求，采用穩(wěn)健統(tǒng)計(jì)法計(jì)算各參加實(shí)驗(yàn)室的Z值[5]。本次能力驗(yàn)證采用穩(wěn)健統(tǒng)計(jì)的中位值作為指定值(X)，其能力評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)差(σ)為0.03，該值由專家實(shí)驗(yàn)室測(cè)定結(jié)果的重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)差與再現(xiàn)性標(biāo)準(zhǔn)差合并計(jì)算而得[6-7]。將各單位報(bào)告的兩種樣品的各三次測(cè)定結(jié)果平均值作為其測(cè)試結(jié)果(x)，根據(jù)以下公式計(jì)算實(shí)驗(yàn)室Z比分?jǐn)?shù)。

Z=(x-X)/σ

以Z比分?jǐn)?shù)評(píng)價(jià)各實(shí)驗(yàn)室結(jié)果，即：若同一實(shí)驗(yàn)室兩份樣品的Z比分?jǐn)?shù)均滿足|Z|≤2，檢測(cè)結(jié)果為滿意結(jié)果；若同一實(shí)驗(yàn)室兩份樣品的Z比分?jǐn)?shù)有1個(gè)或兩個(gè)滿足2<|Z|<3，檢測(cè)結(jié)果為有問(wèn)題；若同一實(shí)驗(yàn)室兩份樣品的Z比分?jǐn)?shù)有1個(gè)或兩個(gè)滿足|Z|≥3，檢測(cè)結(jié)果為不滿意結(jié)果或離群值。

2 結(jié)果與分析

2.1 樣品均勻性結(jié)果 采用單因子方差分析法計(jì)算統(tǒng)計(jì)量F值(表1)，兩種樣品的F值均小于給定顯著性水平α=0.05時(shí)的臨界值F0.05(9,10)，表明兩種樣品的均勻性均符合要求。

表1 能力驗(yàn)證樣品均勻性考察結(jié)果表Tab 1 Results of homogeneity test of proficiency testing samples

表2 不同環(huán)境溫度下樣品pH值測(cè)定結(jié)果Tab 2 Results of pH value of samples at different ambient temperatures

表3 樣品高溫環(huán)境耐受性測(cè)定結(jié)果Tab 3 Results of high temperature environmental tolerance test of samples

表4 樣品高溫環(huán)境測(cè)定結(jié)果的單一樣本t檢驗(yàn)Tab 4 T-test for determination results of high temperature environment of samples

表5 樣品高濕環(huán)境耐受性測(cè)定結(jié)果Tab 5 Results of high humidity environmental tolerance test of samples

表6 樣品高濕環(huán)境測(cè)定結(jié)果的單一樣本t檢驗(yàn)Tab 6 T-test for determination results of high humidity environment of samples

2.3 能力驗(yàn)證結(jié)果 對(duì)35家實(shí)驗(yàn)室的結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)(表7)，以實(shí)驗(yàn)室Z比分?jǐn)?shù)柱狀圖表示各參加實(shí)驗(yàn)室Z值(圖1～圖2)。在Z比分?jǐn)?shù)的統(tǒng)計(jì)中，35家實(shí)驗(yàn)室結(jié)果均為滿意，滿意率為100%。

表7 檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)量匯總表Tab 7 Summary of test results statistics

圖1 pH 5.21樣品組各實(shí)驗(yàn)室Z比分?jǐn)?shù)分布圖Fig 1 Distribution of Z-score of laboratories in pH 5.21 sample groups

圖2 pH 5.74樣品組各實(shí)驗(yàn)室Z比分?jǐn)?shù)分布圖Fig 2 Distribution of Z-score of laboratories in pH 5.74 sample groups

3 討論與結(jié)論

《中國(guó)獸藥典》一部附錄0631規(guī)定[8]：測(cè)定前應(yīng)選擇兩種pH值約相差3個(gè)pH單位的標(biāo)準(zhǔn)緩沖液對(duì)pH計(jì)進(jìn)行校正，儀器顯示值與標(biāo)準(zhǔn)緩沖液規(guī)定值不能大于0.02，并使供試品的pH值處于二者之間。根據(jù)各實(shí)驗(yàn)室返回的結(jié)果報(bào)告單，所有參加實(shí)驗(yàn)室均對(duì)pH計(jì)進(jìn)行了校正。標(biāo)準(zhǔn)緩沖液一旦打開(kāi)，需在短期內(nèi)使用完畢，實(shí)驗(yàn)室對(duì)標(biāo)準(zhǔn)緩沖液進(jìn)行合理的貯存，如發(fā)現(xiàn)有渾濁、發(fā)霉或沉淀等現(xiàn)象時(shí)，不能繼續(xù)使用。pH計(jì)屬于精密儀器，是國(guó)家實(shí)行強(qiáng)制檢定的計(jì)量器具之一，規(guī)定每年應(yīng)進(jìn)行計(jì)量檢定。

標(biāo)準(zhǔn)緩沖液在不同溫度下測(cè)得的pH值是不同的，因此測(cè)定待測(cè)溶液時(shí)，其溫度應(yīng)與校正用標(biāo)準(zhǔn)緩沖液保持一致，否則會(huì)影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。本次能力驗(yàn)證重點(diǎn)考察環(huán)境溫度對(duì)pH值測(cè)定的影響，試驗(yàn)表明在15 ℃至30 ℃環(huán)境下測(cè)得的結(jié)果無(wú)明顯差異。樣品混勻后，取出適量，用于測(cè)定，每次更換標(biāo)準(zhǔn)緩沖液或供試品之前，均應(yīng)用純化水充分淋洗電極，然后用濾紙吸干，再將電極浸入待測(cè)溶液中進(jìn)行測(cè)定。在測(cè)定pH值時(shí)，最好將電極在待測(cè)溶液中平衡10～20 min后再測(cè)量讀數(shù)，以減少測(cè)量誤差。儀器的使用、維護(hù)、校準(zhǔn)、環(huán)境溫濕度控制、電極的清洗等都是測(cè)量準(zhǔn)確的前提條件，各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)自身情況按照要求制定自己的標(biāo)準(zhǔn)操作細(xì)則。

本研究首次對(duì)中國(guó)35家獸藥檢測(cè)機(jī)構(gòu)的溶液pH值測(cè)定能力進(jìn)行了測(cè)試，通過(guò)穩(wěn)健統(tǒng)計(jì)法計(jì)算各參加實(shí)驗(yàn)室的Z值，測(cè)試結(jié)果的滿意率為100%，表明承擔(dān)獸藥監(jiān)督抽檢和風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè)任務(wù)的單位具有較高的溶液pH值測(cè)定能力。各檢測(cè)機(jī)構(gòu)應(yīng)進(jìn)一步完善質(zhì)量管理，加強(qiáng)基礎(chǔ)理論與實(shí)操培訓(xùn)，確保檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，不斷提高實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)和實(shí)驗(yàn)室管理水平，為行業(yè)發(fā)展提供有力支撐。