王 艷

（沈陽迪安醫(yī)學(xué)檢驗所有限公司，遼寧 沈陽 110000）

自身免疫疾病是指機體對自身抗原發(fā)生免疫反應(yīng)而導(dǎo)致自身組織損害所引起的疾病，其種類較多，病理機制復(fù)雜，常見類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、腎炎、甲亢等疾病，同時包括多發(fā)性大動脈炎、自身免疫性睪丸炎等非常見疾病，全身各器官系統(tǒng)都可發(fā)生自身免疫性疾病[1]。隨著臨床研究深入，眾多疾病相繼被列為自身免疫性疾病，且自身抗體可存在于無自身免疫性疾病的正常人，如抗甲狀腺球蛋白、甲狀腺上皮細(xì)胞、胃壁細(xì)胞、細(xì)胞核DNA抗體等[2]。為深入探析抗核抗體譜檢測對自身免疫性疾病診斷價值，本次研究抽取100例自身免疫性疾病患者與健康者進(jìn)行臨床分析對比，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年9月至2019年9月在某院接受抗核抗體譜檢測的100例自身免疫性疾病患者為臨床研究對象，將其作為觀察組，其中包括男性58例，女性42例，年齡25～76歲，平均年齡（48.38±5.64）歲，疾病種類：系統(tǒng)性紅斑狼瘡38例、混合性結(jié)締組織病26例、干燥綜合征18例、系統(tǒng)性硬化12例、血小板減少性紫癜4例、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）2例；同時選擇100例健康體檢者作為對照組，其中男性60例，女性40例，年齡26～77歲，平均年齡（49.63±6.17）歲；兩組患者一般資料的比較，P＞0.05，有可比性。納入標(biāo)準(zhǔn)：①所有患者年齡均18歲以上。②臨床檢驗依從性高；排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并嚴(yán)重心、肺、肝、腎等合并癥者。②存在精神異常、認(rèn)知功能低下者。③過敏體質(zhì)者。④存在血液疾病者。⑤存在凝血功能異常者。⑥存在惡性腫瘤者。⑦家屬未簽訂知情同意書者及中途退出者。

1.2 方法 通過歐蒙印跡法試劑盒檢測抗核抗體譜（IgG），本次研究所選擇的試劑盒均由歐蒙（杭州醫(yī)學(xué)實驗診斷有限公司）出品，嚴(yán)格執(zhí)行說明書檢測標(biāo)準(zhǔn)，針對患者Sm、SCL-70、CENP B等抗原不同的IgG類抗體進(jìn)行檢驗。具體操作流程如下：①檢驗科免疫組工作人員需規(guī)范抗核抗體譜（IgG）檢測，保證結(jié)果的準(zhǔn)確性，型號名稱：ANA譜1，靶抗原：nRNP/Sm，Sm，SS-A，Ro-52，SS-B，Scl-70，Jo-1，CENP B，dsDNA，核小體，組蛋白，核糖體P蛋白；類型：IgG；基質(zhì)：抗原包被的檢測膜條；規(guī)格：16×01（16）。②適應(yīng)證包括：夏普綜合征（MCTD），系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE），干燥綜合征，進(jìn)行性系統(tǒng)性硬化癥，多肌炎皮肌炎、重疊綜合征、局限型進(jìn)行性系統(tǒng)性硬化癥（CREST綜合征），原發(fā)性膽汁性肝硬化。③主要組成成分包括：包被抗原的檢測膜條：nRNP/Sm、Sm、SS-A（天然SS-A和Ro-52）、SS-B、Scl-70、PM-Scl、Jo-1、CENP B、PCNA、dsDNA、核小體、組蛋白、核糖體P蛋白、AMA M2，規(guī)格（4×16條/16條）；陽性對照為人體IgG，100倍濃縮（規(guī)格：1×0.02 mL）；酶結(jié)合物為：堿性磷酸酶標(biāo)記的羊抗人IgG，10倍濃縮（規(guī)格：1×3 mL）；直接使用樣本緩沖液，清洗緩沖液為10倍濃縮，底物液為：NBT/BCIP（四唑硝基苯胺蘭/5-溴-4-氯啶-3-吲哚-磷酸鹽），直接使用。④樣本儲存均在2～8 ℃條件下保存，無須冷凍，未開封前，除非特別說明，試劑盒自生產(chǎn)日起可穩(wěn)定18個月，稀釋后的酶結(jié)合物和清洗緩沖液需在一個工作日內(nèi)用完。樣本要求：樣本為人血清或 EDTA、肝素或檸檬酸鹽抗凝的血漿；穩(wěn)定性要求待檢患者樣本于2～8 ℃可穩(wěn)定14 d，稀釋后的樣本應(yīng)在同一個工作日內(nèi)檢測。樣本稀釋要求患者樣本用樣本緩沖液1∶101稀釋，如可取15 μL血清用1.5 mL樣本緩沖液稀釋并用漩渦混勻器充分混勻，不可用加樣器混勻。⑤使用前所有試劑均必須于室溫（18～25 ℃）平衡30 min。從第一次使用起，試劑盒保存在2～8 ℃，良好情況下可穩(wěn)定至所標(biāo)示的有效期；為防止膜條發(fā)生冷凝，只有當(dāng)膜條平衡到室溫后才可打開包裝，取出膜條后應(yīng)立即密封好原包裝并將其保存于2～8 ℃。陽性對照過程中，均為100倍濃縮，使用時用干凈的吸管從瓶中吸取所需陽性對照，用樣本緩沖液1∶101稀釋，如：15 μL陽性對照用1.5 mL樣本緩沖液稀釋并充分混勻，已稀釋的陽性對照應(yīng)在同一個工作日用完。⑥預(yù)處理需取出所需的膜條，將其放入溫育槽內(nèi)。

1.3 觀察指標(biāo) 觀察兩組受檢者的臨床檢測結(jié)果，分析38例SLE、26例MCTD、18例SS、12例PSS、4例ITP、2例RA患者與對照組受檢者在ANA、抗Sm、抗SS-A、抗SCL-70、抗JO-1、抗PCNA、抗核小體、抗組蛋白、抗nRNP、抗SS-B、抗PM-SCL、抗dsDNA、抗核糖體、P蛋白、抗AMA M2陽性率檢出率。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 使用SPSS19.0統(tǒng)計學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)，組內(nèi)比較采用重復(fù)測量設(shè)計資料的方差分析，組間比較采用成組χ2檢驗；計數(shù)資料以率（%）表示，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

SLE的ANA、抗Sm、抗SS-A、抗SS-B、抗核小體、抗組蛋白、抗dsDNA、抗核糖體P蛋白等陽性檢出率均顯著高于對照組，組間對比差異明顯（P均＜0.05）。見表1。

表1 兩組受檢者血清抗核抗體譜檢測結(jié)果對比[n（%）]

3 討 論

自身免疫性疾病與患者機體自身的免疫系統(tǒng)之間存在著十分密切的聯(lián)系，臨床研究發(fā)現(xiàn)，自身免疫性疾病患者不僅存在T細(xì)胞的細(xì)胞免疫現(xiàn)象，同時還有B細(xì)胞活化所造成的體液免疫現(xiàn)象發(fā)生，可見，其均屬于多種抗體共同作用的產(chǎn)物，從而致使自身免疫性疾病患者的臨床癥狀趨向于多樣化，且不易診斷，從而嚴(yán)重威脅其生命健康安全[3]。

臨床研究發(fā)現(xiàn)，自身免疫性疾病的病因主要包括自身抗原的出現(xiàn)、免疫調(diào)節(jié)異常、交叉抗原、遺傳因素等，自身抗原多見于隱蔽抗原的釋放，如晶狀體，而自身抗原發(fā)生改變多見于類風(fēng)濕因子（RF）[4]；免疫調(diào)節(jié)異常多于見多克隆刺激劑的旁路活化與Th1和Th2細(xì)胞功能失衡；交叉感染的常見病菌包括柯薩奇病毒、鏈球菌感染，前者可導(dǎo)致糖尿病，后者可導(dǎo)致急性腎小球腎炎，風(fēng)濕性心臟病等疾??；遺傳因素多因MHC單型不同而存在差異，如DR3個體易患重癥肌無力；而DR4與類風(fēng)濕管理密切，B27與強直性脊柱炎關(guān)聯(lián)密切，且DR2與肺出血肺炎綜合征高度相關(guān)[5]。自身免疫性疾病患者的臨床癥狀較為復(fù)雜，大多數(shù)原因不明，可能與遺傳、感染、藥物及環(huán)境等因素有關(guān)，患者血清中?？蓹z出高滴度自身抗體，同時出現(xiàn)與免疫反應(yīng)有關(guān)的病理變化，病變部位主要是有淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞浸潤為主的慢性炎癥；女性多于男性，病程一般較長，多為發(fā)作與緩解反復(fù)交替出現(xiàn)[6]。同時，受損或抗原性發(fā)生變化的組織可激發(fā)自身抗體的產(chǎn)生，如心肌缺血時，壞死的心肌可導(dǎo)致抗心肌自身抗體形成，但此抗體并無致病作用，屬于一種典型的繼發(fā)性免疫反應(yīng)。自身免疫系統(tǒng)疾病多在自身抗體作用下引發(fā)多器官損傷，因此加強臨床檢測，在控制病情發(fā)展，提升臨床治療的針對性方面具有十分重要的意義[7-9]。

本次研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，抗核抗體在多種自身免疫病中均呈不同程度的陽性率，針對ANA、抗Sm、抗SS-A、抗SCL-70、抗JO-1、抗PCNA等類型，能夠按其核內(nèi)各個分子的性能不同可將各ANA區(qū)分開來，提升其診斷分辨率。陳向華等[10]人發(fā)現(xiàn)：抗核抗體檢測的血樣結(jié)果為陽性的患者占所有受檢患者的6.32%。

綜上所述，抗核抗體譜檢測針對自身免疫性疾病的臨床診斷具有十分積極的應(yīng)用價值，診斷率高，可有效分辨不同疾病機制，為臨床治療提供可靠的數(shù)據(jù)支持，適應(yīng)于臨床上作進(jìn)一步推廣普及。