王海旭 張建芳 李硯

(空軍軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院婦產(chǎn)科生殖中心,陜西 西安 710032)

根據(jù)世界衛(wèi)生組織既有定義，男性不育癥是指育齡夫婦雙方在未采取任何避孕措施下，婚后同居后1年以上，由男方原因?qū)е屡圆辉械幕颊遊1]。相關(guān)流行病學(xué)調(diào)查顯示[2]，全球范圍內(nèi)約有20%的夫妻存在生育困難的問題，其中男性不育癥占比50%左右。特發(fā)性少弱精子癥是男性不育癥的常見類型，由于該病發(fā)病機(jī)制尚未明確，臨床主要采用經(jīng)驗(yàn)性治療，缺乏有效的治療手段，因此探討該病的致病因素具有重要意義[3-4]。有研究[5]發(fā)現(xiàn)，免疫機(jī)制在男性不育癥中發(fā)揮著重要作用，輔助T細(xì)胞可分化出Th1、Th2兩種亞型，正常情況下，機(jī)體Th1/Th2處于動(dòng)態(tài)平衡，一旦兩者失衡，則會(huì)出現(xiàn)免疫功能紊亂。因此本研究主要探討特發(fā)性少弱精子癥Th1/Th2細(xì)胞因子與自身抗體的表達(dá)水平及臨床意義，具體報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 于2018年1月至2020年1月期間，選取于我院就診的特發(fā)性少弱精子癥患者150例為觀察組，入選標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合《人類精液檢查與處理實(shí)驗(yàn)室手冊(cè)(第5版)診斷標(biāo)準(zhǔn)》[6]；(2)睪丸體積正常，無精索靜脈曲張等干擾睪丸生精功能的疾??；(3)黃體生成素、卵泡雌激素等生殖激素均在正常范圍內(nèi)；(4)精子濃度<15×106/mL且存活率<40%，經(jīng)巴氏染色正常形態(tài)精子百分率≥4%；(5)近6個(gè)月未使用生精藥物治療，生活作息規(guī)律。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)明確其他因素所致不育者；(2)合并嚴(yán)重免疫、內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病者；(3)畸形精子癥；(4)極重度、少、弱精子癥；(5)合并生殖系統(tǒng)感染；(6)使用激素、化療等藥物治療者。根據(jù)精子濃度分為，輕、中度組(n=95)：精子濃度(5～15)×106/mL；重度組(n=55)：精子濃度(1～5)×106/mL。另選取同期于我院就診的精液檢測(cè)正常的男性80名為健康對(duì)照組。本研究已通過我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2方法 收集所有受檢者精液標(biāo)本，約2～6 mL，37℃水浴箱孵育至精液液化，采用彩色精子質(zhì)量檢測(cè)系統(tǒng)分析精液。將精液離心后，直接取上清檢測(cè)不同細(xì)胞因子水平，Th1細(xì)胞因子主要包括白介素-2(IL-2)、腫瘤壞死因子-ɑ(TNF-ɑ)、干擾素-γ(IFN-γ)；Th2細(xì)胞因子包括白介素-4(IL-4)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)。采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)抗人絨毛促性腺素抗體(AhCGAb)、抗精子抗體(AsAb)，操作嚴(yán)格遵循試劑盒說明書進(jìn)行。

2 結(jié) 果

2.1三組一般資料比較 三組年齡比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。三組精子濃度、精子總數(shù)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 三組一般資料比較

2.2三組細(xì)胞因子水平比較 三組IL-2、TNF-ɑ、IFN-γ、IL-4、IL-6、IL-10水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，重度組上述細(xì)胞因子水平明顯高于輕中度組，輕中度上述細(xì)胞因子水平明顯高于對(duì)照組(P<0.05)。見表2。

表2 三組細(xì)胞因子水平比較

2.3三組自身抗體陽性表達(dá)率比較 三組組間AhCGAb、AsAb抗體陽性表達(dá)率比較，差異無顯著性(P>0.05)。重度組AhCGAb、AsAb抗體陽性表達(dá)率明顯高于輕中度組，輕中度組AhCGAb、AsAb抗體陽性表達(dá)率明顯高于對(duì)照組(P<0.05)。見表3。

表3 三組自身抗體陽性表達(dá)率比較[n(%)]

3 討 論

特發(fā)性少弱精子癥患者臨床主要表現(xiàn)為少精、弱精或畸形精子等，多項(xiàng)研究認(rèn)為該病的發(fā)生與長期應(yīng)激環(huán)境、內(nèi)分泌紊亂、基因缺陷等多種因素有關(guān)[7-8]，但具體發(fā)病機(jī)制尚不明確，臨床以經(jīng)驗(yàn)性治療為主，總體療效不甚理想，因此分析特發(fā)性少弱精子癥的致病因素具有重要意義。

既往研究[9]發(fā)現(xiàn)，某些病理狀態(tài)能夠針對(duì)生精細(xì)胞的自身免疫反應(yīng)，進(jìn)而誘導(dǎo)自身免疫性睪丸炎和附睪炎，損傷精子發(fā)生，進(jìn)一步產(chǎn)生抗精子抗體，提示免疫機(jī)制在特發(fā)性少弱精子癥的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮著重要作用。P.P?ll?nen等[10]學(xué)者指出，Sertoli和Leydig細(xì)胞可分泌轉(zhuǎn)化生長因子β,而轉(zhuǎn)化生長因子β，可抑制睪丸內(nèi)移植物的免疫排斥，同時(shí)分泌出轉(zhuǎn)化生長因子β同源物，抑制睪丸免疫應(yīng)答，不利于維持睪丸免疫豁免環(huán)境。目前特發(fā)性少弱精子癥與機(jī)體免疫應(yīng)答的相關(guān)性研究較少。輔助性T細(xì)胞可分化出Th1、Th2兩種亞型[11-12]。其中Th1細(xì)胞主要分泌IL-2、TNF-ɑ、IFN-γ等細(xì)胞因子，主要參與細(xì)胞免疫應(yīng)答過程，IL-2是機(jī)體內(nèi)功能最為強(qiáng)大有效的T細(xì)胞生長因子，可促進(jìn)幾乎所有亞型的T細(xì)胞增殖、活化[13]；IFN-γ與IL-2作用相似，可促進(jìn)多種細(xì)胞表達(dá)生物相容復(fù)合物體抗原I類和II類分子發(fā)揮抑制病毒復(fù)制和抑制Th2細(xì)胞分化增殖的作用[14]。而Th2細(xì)胞以分泌IL-4、IL-6、IL-10為主，其中IL-6在機(jī)體免疫調(diào)節(jié)和抵御外來侵襲中發(fā)揮著重要作用。IL-4對(duì)于B細(xì)胞、T細(xì)胞都有免疫調(diào)節(jié)作用；IL-10是典型的抗炎因子，可通過抑制機(jī)體固有免疫和適應(yīng)性免疫功能進(jìn)而降低機(jī)體免疫反應(yīng)[15]。有研究[16]發(fā)現(xiàn)，機(jī)體病理狀態(tài)下，高水平IL-6可直接誘導(dǎo)生精細(xì)胞的凋亡，而IL-10會(huì)通過抑制實(shí)驗(yàn)性自身免疫性睪丸炎進(jìn)而破壞睪丸組織結(jié)構(gòu)與精子發(fā)生。既往研究表明[17]，機(jī)體在正常情況，Th1/Th2處于動(dòng)態(tài)平衡，兩者失衡則容易發(fā)生免疫功能紊亂。本研究中，重度組、輕中度組精子濃度、精子總數(shù)明顯低于對(duì)照組，重度組IL-2、TNF-ɑ、IFN-γ、IL-4、IL-6、IL-10明顯高于輕中度組和對(duì)照組，提示Th1/Th2細(xì)胞因子水平與特發(fā)性少弱精子癥的發(fā)生發(fā)展存在相關(guān)性，分析原因可能是過度增加Th1/Th2細(xì)胞因子可能會(huì)引發(fā)慢性隱匿性睪丸炎癥，當(dāng)病情進(jìn)展時(shí)，炎性多肽會(huì)通過刺激內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)而分泌更多的Th1/Th2細(xì)胞因子，大量的白細(xì)胞可能會(huì)透過受損的血-睪屏障，損害睪丸微環(huán)境，進(jìn)而損害精子功能和精子數(shù)量，造成精液質(zhì)量的下降[18]。

本研究結(jié)果顯示，重度組AhCGAb、AsAb抗體陽性表達(dá)率明顯高于輕中度組和對(duì)照組，提示自身抗體水平與特發(fā)性少弱精子癥的發(fā)生發(fā)展存在相關(guān)性，有研究[19]發(fā)現(xiàn)，免疫抗體AsAb與多項(xiàng)不育癥關(guān)系密切，當(dāng)免疫抗體AsAb能力較強(qiáng)的狀態(tài)下，機(jī)體排斥作用增強(qiáng)，影響精子前向運(yùn)動(dòng)，進(jìn)而干擾精子代謝和獲能，是影響患者不育的重要原因。

綜上所述，Th1/Th2細(xì)胞因子與自身抗體表達(dá)水平與特發(fā)性少弱精子癥的發(fā)生發(fā)展具有相關(guān)性，是影響男性不育的重要因素，但本研究納入樣本量較少，具體機(jī)制有待進(jìn)一步探討。