李 瑞，倪春艷，矣林炆，胡 琳，黃相中，李 剛，陳毅堅，蔣孟圓

(云南民族大學 民族藥資源化學國家民族事務委員會-教育部重點實驗室，云南 昆明 650500)

粗梗稠李（Padus napaulensis）屬薔薇科稠李屬植物，別名鬼眼睛果、山李子. 稠李屬植物共有21 種，中國有14 種[1-2]，主要分布于云南、貴州、陜西等地[3]. 稠李屬植物果實、花、葉、樹皮均可入藥[4-6]，傳統(tǒng)上被用于止咳、清熱、止瀉、抗風濕及利尿[7]. 研究報道薔薇科李屬、臭櫻屬、扁核木屬植物中富含維生素類、黃酮類、三萜類、植物甾醇、有機酸、花青素類、酚酸等成分[8-11]，但稠李屬研究較少. 辛越等[12]報道紫葉稠李、山桃稠李、稠李果實花色苷色素具有抗腫瘤和抗氧化活性報道[12].羅恒國[13]證實粗梗稠李多酚成分具有一定抗氧化作用. 楊新周等[1-2,14]對粗梗稠李花色苷色素提取工藝進行優(yōu)化. 目前，粗梗稠李的化學成分未見報道. 本文旨在對粗梗稠李乙醇提取物乙酸乙酯萃取部分進行單體化合物的分離，這也是首次對粗梗稠李化學成分的報道.

1 材料與方法

BRUKER AVⅢ-40 核磁共振儀（德國BRUKER公司）；OSB-2100 型旋轉蒸發(fā)儀（日本EYELA 公司）；Sephadex LH-20 葡聚糖凝膠（美國GE 公司）；硅膠（青島海洋化工有限公司）；反相C-18(40～63 μm)硅膠（德國Merck 公司）；試劑均為色譜純或分析純，購自天津風船有限公司.

樣品粗梗稠李果實于2018 年11 月采自云南省臨滄市鳳慶縣，經(jīng)云南民族大學楊青松教授鑒定為薔薇科稠李屬植物粗梗稠李（Padus napaulensis）.樣品現(xiàn)保存于云南民族大學民族藥資源化學重點實驗室，標本號為YMU-J-20181102.

2 提取與分離

去核粗梗稠李果實3.4 kg，粉碎并用95%的乙醇作為溶劑進行超聲提取(20 L/次)，每次超聲提取45 min，反復提取3 次，合并提取液，減壓濃縮后加入適量水，待浸膏溶解后用乙酸乙酯萃取，減壓蒸餾得深紫紅色浸膏51.7 g，浸膏采用硅膠柱層析以氯仿-甲醇(體積比50∶1→0∶1，下同)梯度洗脫，采用TLC 對收集得到的濃縮液進行檢測，分為4 個組分，記為Fr.A～D.

Fr.A (4.3 g)以氯仿-甲醇（3∶7）為溶劑，采用Sephadex LH-20 凝膠及反相RP-C18 對Fr.A-1-2 反復細分純化得化合物9(9.2 mg)；Fr.A-1-4 同上得化合 物10(6.1 mg). Fr.A-3 以 石 油 醚-乙 酸 乙 酯(30∶1→2∶1)為溶劑得到化合物7(27.3 mg). Fr.B(5.5 g)以石油醚-乙酸乙酯(60∶1→1∶1)硅膠柱洗脫，收集并濃縮各極性段洗脫下的樣品經(jīng)TLC分析后共分為4 個組分，記為Fr.B-1～4. Fr.B-2 以石油醚-乙酸乙酯(30∶1→1∶1)硅膠柱洗脫得化合物8(31.3 mg). Fr.B-2-3 采用氯仿-甲醇3∶7）為溶劑反復經(jīng)Sephadex LH-20 及反向RP-C18 純化得化合物3(8.3 mg)，4(8.3 mg)，6(7.6 mg). Fr.B-2-4 與Fr.B-2-3 分離方法一致，得到化合物5(7.2 mg).Fr.C (4.2 g)以石油醚-乙酸乙酯(20∶1→1∶1)硅膠柱洗脫，收集并濃縮各極性段洗脫下的樣品經(jīng)TLC 分析后共分為2 個組分，記為Fr.C-1～2. Fr.C-1 經(jīng)反向RP-C18 分離得到化合物1(10.1 mg). Fr.D(18.0 g)以石油醚-乙酸乙酯(60∶1→0∶1)硅膠柱，以及反復經(jīng)氯仿-甲醇（3∶7）為洗脫劑，洗脫后采用Sephadex LH-20 凝膠純化得化合物2(18.9 mg).

3 結構鑒定

化合物1～10結構見圖1.

圖1 粗梗稠李化合物1～10 結構Fig. 1 The structures of compounds 1-10 from Padus napaulensis

化合物1～10 的13C NMR 數(shù)據(jù)均見表1. 其外觀形態(tài)、1H NMR 及鑒定結果分別如下.

表1 化合物1～10 13C NMR 數(shù)據(jù)(100 MHz)Tab. 1 13C NMR data of compounds 1-10

化 合 物1. 白 色 結 晶.1H NMR (400 MHz，CDCl3)δ：5.93 (1H，d，J= 6.2 Hz，H-6)，3.50 (1H，brs，H-3)，1.22～2.03 為三萜骨架特征氫，1.18 (3H，s，H-28)，1.15 (3H，s，H-23)，1.11 (3H，s，H-26)，1.09 (3H，s，H-24)，1.02 (3H，s，H-27)，1.00 (3H，s，H-30)，0.95(3H，s，H-29)，0.86 (3H，s，H-25). 上述數(shù)據(jù)與文獻[15]報道一致，故鑒定化合物1為5(6)-gluten-3α-ol.

化 合 物2. 白 色 粉 末.1H NMR (400 MHz，DMSO)δ：12.17 (1H，s，28-COOH)，5.15 (1H，s，H-12)，4.31 (1H，brs，3-OH)，3.19 (1H，dd，J= 11.0，5.2 Hz，H-3)，2.60 (1H，s，H-18)，1.15 (3H，d，J= 3.1 Hz，H-30)，1.02 (3H，d，J= 4.7 Hz，H-29). 上述數(shù)據(jù)與文獻[16]報道一致，故鑒定化合物2為烏蘇酸.

化 合 物3. 白 色 粉 末.1H NMR (400 MHz，CDCl3)δ：5.27 (1H，brs，J= 3.3 Hz，H-12)，3.20 (1H，dd，J= 11.2，4.4 Hz，H-3)，2.81 (1H，dd，J= 9.6，4.0 Hz，H-18)，1.13 (3H，s，H-27)，0.99 (3H，s，H-25)，0.93 (3H，s，H-30b)，0.91 (3H，s，H-29)，0.90 (3H，s，H-30a)，0.77 (3H，s，H-23)，0.75 (3H，s，H-26). 上述數(shù)據(jù)與文獻[17]報道一致，故鑒定化合物3為齊墩果酸.

化 合 物4. 白 色 粉 末.1H NMR (400 MHz，CDCl3)δ：4.37 (1H，d，J= 2.2 Hz，H-29a)，4.25 (1H，d，J= 2.3 Hz，H-29b)，3.20 (1H，dd，J= 11.1，4.7 Hz，H-3)，1.51 (3H，s，H-30)，1.05 (3H，s，H-26)，0.72 (3H，s，H-23)，0.70 (3H，s，H-27)，0.84 (3H，s，H-25)，0.76(3H，s，H-28)，0.73 (3H，s，H-24). 上述數(shù)據(jù)與文獻[18]報道一致，故鑒定化合物4為羽扇豆醇.

化合物5. 無色針狀結晶.1H NMR (400 MHz，CDCl3)δ：2.36 (2H，m，H-2)，2.22 (1H，m，H-4)，1.94(1H，m，H-1a)，1.74 (1H，m，H-6b)，1.67 (1H，m，H-1b)，1.16 (3H，s，H-28)，1.02 (3H，s，H-27)，0.98 (6H，s，H-26，H-30)，0.93 (3H，s，H-29)，0.84 (3H，s，H-25)，0.78 (3H，s，H-24). 上述數(shù)據(jù)與文獻[19]報道一致，故鑒定化合物5為無羈萜.

化 合 物6. 無 色 晶 體.1H NMR (400 MHz，CDCl3)δ：4.63 (1H，brs，H-29b)，4.58 (1H，brs，H-29a)，1.68 (3H，s，H-30)，1.08 (6H，s，H-23，H-26)，1.04 (3H，s，H-24)，0.96 (3H，s，H-27)，0.94 (3H，s，H-25)，0.80 (3H，s，H-28). 上述數(shù)據(jù)與文獻[20]報道一致，故鑒定化合物6為羽扇烯酮.

化 合 物7. 白 色 粉 末.1H NMR (400 MHz，CDCl3)δ：5.35 (1H，d，J= 5.3 Hz，H-6)，3.51 (1H，m，H-3)，1.03 (3H，s，H-19)，0.96 (3H，d，J= 8.1 Hz，H-21)，0.88 (3H，t，J= 7.8 Hz，H-29)，0.83 (3H，d，J=8.7 Hz，H-27)，0.81 (3H，d，J= 8.7 Hz，H-26)，0.67(3H，s，H-18). 上述數(shù)據(jù)與文獻[19]報道一致，故鑒定化合物7為β-谷甾醇.

化 合 物8. 白 色 結 晶.1H NMR (400 MHz，CDCl3)δ：5.36～5.38 (1H，m，H-6)，5.29 (1H，dd，J=15.3，8.9 Hz，H-23)，5.04 (1H，dd，J= 15.5，8.9 Hz，H-22)，3.53～3.59 (1H，m，H-3)，1.22 (3H，d，J= 6.7 Hz，H-21)，1.20 (3H，s，H-19)，1.03 (3H，d，J= 6.4 Hz，H-26)，0.99 (3H，t，J= 7.5 Hz，H-29)，0.90 (3H，d，J= 6.5 Hz，H-27)，0.70 (3H，s，H-18). 上述數(shù)據(jù)與文獻[21]報道一致，故鑒定化合物8為豆甾醇.

化合物9：無色油狀液體.1H NMR (400 MHz，CDCl3)δ：5.29～5.43 (6H，m，H-11，H-12，H-14，H-15，H-17，H-18)，4.12 (2H，q，J= 7.2 Hz，H2-2)，2.81(6H，m，H2-13，H2-16，H2-19)，2.29 (2H，t，J= 7.8 Hz，H2-4)， 2.08 (2H， m， H2-10)， 1.62 (2H， m， H2-5)，1.23～1.36 (8H，m，H2-6，H2-9)，1.25 (3H，t，J= 7.2 Hz，H3-1)，0.98 (3H，t，J= 7.8 Hz，H3-20). 上述數(shù)據(jù)與文獻[22]報道一致，故鑒定化合物9為亞麻酸乙酯.

化合物10：淺黃色的油狀液體.1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ：5.32 (6H，m，H-9，H-10，H-12，H-13，H-15，H-16)，2.81 (4H，t，J= 5.8 Hz，H-11，H-14)，2.27 (2H，t，J= 7.4 Hz，H-2)，2.08 (4H，dd，J= 13.9，7.0 Hz，H-8，H-17)，1.57 (2H，m，H-3)，1.34(8H，m，H-4，H-7)，0.98 (3H，t，J= 7.5 Hz，H-18). 上述數(shù)據(jù)與文獻[23]報道一致，故鑒定化合物10為亞麻酸.

4 結果與討論

本文首次從粗梗稠李中分離到10 個化合物，都為已知化合物. 其中1～6為五環(huán)三萜類化合物，三萜類化合物廣泛分布在薔薇科植物中，在整個植被季中，每年9 —11 月初三萜含量最高，為收獲優(yōu)質(zhì)植物原材料的最佳時間[11]，化合物2和3有抗炎抗氧化、抗糖尿病、抗動脈粥樣硬化、抗肥胖、抗焦慮、抗骨質(zhì)疏松、調(diào)血脂、鎮(zhèn)痛、免疫調(diào)控及保護心肝腎肺臟的作用[24-26]；化合物4有抗炎、降糖的活性[27].7～8為甾體類化合物，自然界中天然植物甾醇共有250 余種，其中化合物7和8含量最為豐富，有抗炎、降膽固醇功效[28]，9～10為有機酸類化合物，可有效預防心血管疾病、在機體有內(nèi)免疫調(diào)節(jié)、抑制衰老、抗癌、抗氧化等作用[29]. 這也是首次對粗梗稠李的化學成分做出報道.