楊 悅，高如意，劉 群

(西南民族大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院，四川成都610041)

免疫制劑包括免疫增強(qiáng)劑、免疫抑制劑和免疫調(diào)節(jié)劑.實(shí)驗(yàn)免疫藥理學(xué)研究常涉及到動(dòng)物模型的建立.目前建立免疫抑制模型的方法有輻射損傷法、胸腺摘除法、免疫抑制劑誘導(dǎo)法和相關(guān)基因敲除法等.免疫抑制劑誘導(dǎo)法由于操作簡(jiǎn)單、成本較低，在免疫學(xué)研究中應(yīng)用廣泛.環(huán)磷酰胺和地塞米松是相關(guān)研究報(bào)道中應(yīng)用最多的兩類免疫抑制劑[1].紅細(xì)胞通過(guò)其膜上的CR1(C3b受體)粘附抗原、抗原-抗體復(fù)合物實(shí)現(xiàn)其免疫功能[2-3].藏藥秦艽花具有清熱、解毒、退虛熱、舒經(jīng)絡(luò)、祛風(fēng)濕、利濕退黃等功效，臨床上用于消化系統(tǒng)炎癥的治療[4-6].但目前對(duì)藏藥秦艽花的化學(xué)成分及藥理作用研究極少[7].本研究以乙醇回流提取的總黃酮為研究材料，DXMS(地塞米松)小鼠為研究對(duì)象，RBC-C3bRR、RBC-ICR、RBC-C3bER、RBC-C3bIR、RBC-C3bMφ、DTER為研究手段，探討不同劑量秦艽花黃酮對(duì)地塞米松致免疫抑制小鼠紅細(xì)胞免疫的調(diào)節(jié)作用，現(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)告如下.

1 材料

1.1 研究藥物

白花秦艽(GentianastramineaMaxim.)花采集于四川甘孜色達(dá)地區(qū)，由西南大學(xué)園藝園林學(xué)院李先源鑒定.室溫通風(fēng)干燥，避光保存.

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

ICR小鼠，8周齡，雌雄各半，體重20 g±2 g/只.由成都達(dá)碩生物實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司提供(SCXK(川)2015-030).

1.3 主要試劑及儀器

DXMS(2008204)；左旋咪唑(20190101)；豚鼠血清(北京索萊寶科技有限公司，1010M051)；瑞氏染液(北京索萊寶科技有限公司，20201107)；酵母菌凍干粉(西南民族大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)室提供，SWUN5700)等.光學(xué)顯微鏡(日本奧林巴斯公司，CX21FS1)；離心機(jī)(四川蜀科儀器有限公司，TGL-16)；超凈工作臺(tái)(濟(jì)南鑫貝西生物技術(shù)有限公司，BBS-DDC)等.

2 方法

2.1 研究材料的制備

秦艽花總黃酮，參照李琦對(duì)藏藥秦艽花總黃酮提取工藝[8]，提取溫度60℃、乙醇體積分?jǐn)?shù)45%、提取時(shí)間30 min、液 料 比25∶1，總黃酮實(shí)際得率24.4 mg/g.按照生藥濃度，將總黃酮配制成高200%(48.8 mg/mL)、中100%(24.4 mg/mL)、低50%(12.2 mg/mL)口服液，4℃冰箱保存?zhèn)溆?

2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及處理

ICR小鼠，120只，適應(yīng)性飼喂7 d，隨機(jī)分為6組，每組20只，雌雄各半(分籠飼養(yǎng)).各組處理:空白組，皮下注射滅菌生理鹽水，同時(shí)灌胃生理鹽水0.01 mL/g·d，連續(xù)14 d；DXMS組，皮下注射DXMS50mg/kg·d(5 mg/mL)，同時(shí)灌胃生理鹽水20 mL/kg·d，連續(xù)14 d；左旋咪唑組，皮下注射DXMS 50 mg/kg·d，同時(shí)灌胃左旋咪唑10 mg/kg·d(1 mg/mL)，連續(xù)14 d；低劑量組，皮下注射DXMS 50 mg/kg·d，同時(shí)灌胃低劑量口服液0.01 mL/g·d(總黃酮濃度12.2 mg/mL)，連續(xù)14 d；中劑量組，皮下注射DXMS 50 mg/kg·d，同時(shí)灌胃中劑量口服液0.01 mL/g·d(總黃酮濃度24.4 mg/mL)，連續(xù)14 d；高劑量組，皮下注射DXMS 50 mg/kg·d，同時(shí)灌胃高劑量口服液0.01 mL/g·d(總黃酮濃度48.8 mg/mL)，連續(xù)14 d.

2.3 紅細(xì)胞懸液制備

在灌胃的第7 d、14 d后24 h，各組隨機(jī)抽取10只小鼠，眼眶采后，肝素抗凝，制備紅細(xì)胞懸液和血漿，4℃冰箱保存，待測(cè).

2.4 檢測(cè)指標(biāo)

本文通過(guò)紅細(xì)胞C3b受體酵母菌花環(huán)率(RBCC3bRR)、紅細(xì)胞免疫復(fù)合物酵母菌花環(huán)率(RBCICRR)、紅細(xì)胞免疫黏附促進(jìn)/抑制因子花環(huán)率(RBC-C3bER/RBC-C3bIR)、紅細(xì)胞C3b受體調(diào)節(jié)吞噬細(xì)胞吞噬功能試驗(yàn)(RBC-C3bMφ)所反映的吞噬率和吞噬指數(shù)以及腫瘤細(xì)胞花環(huán)率(DTER)來(lái)反映秦艽花黃酮對(duì)小鼠紅細(xì)胞免疫功能的影響.其中，RBCC3bRR是紅細(xì)胞C3b受體通過(guò)與C3b致敏的酵母菌粘附，使酵母菌吸附于周圍而形成花環(huán)(C3bRR)，C3bRR高低可反映紅細(xì)胞C3b受體活性[9-11]；RBC-ICRR是酵母菌通過(guò)其表面的酵母多糖與粘附于紅細(xì)胞表面的免疫復(fù)合物中的補(bǔ)體成分C3b分子結(jié)合而形成ICRR，ICRR高低可反映紅細(xì)胞C3b受體活性[9-11]；血清中存在紅細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)抑制因子及促進(jìn)因子，在進(jìn)行紅細(xì)胞C3b受體酵母菌花環(huán)試驗(yàn)時(shí)加入不同處理的新鮮血清，統(tǒng)計(jì)紅細(xì)胞C3b受體花環(huán)抑制率(ERIR)及促進(jìn)率(ERIR)，從而評(píng)價(jià)紅細(xì)胞免疫黏附促進(jìn)因子與抑制因子活性[12]；RBC-C3bMφ是將粘附有酵母菌(補(bǔ)體致敏酵母菌)的紅細(xì)胞與吞噬細(xì)胞共同孵育，吞噬細(xì)胞吞噬酵母菌的吞噬百分率和吞噬指數(shù)反映吞噬細(xì)胞功能，間接反應(yīng)紅細(xì)胞C3b受體對(duì)吞噬細(xì)胞吞噬功能的調(diào)理作用[13]；DTER是腫瘤細(xì)胞可旁路激活補(bǔ)體系統(tǒng)并粘附補(bǔ)體C3b，紅細(xì)胞膜上的CR1能與腫瘤細(xì)胞表面的C3b發(fā)生免疫粘附，從而粘附腫瘤細(xì)胞達(dá)到抗腫瘤的作用[14].

2.5 數(shù)據(jù)處理

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，采用SPSS 26.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析.

3 結(jié)果與分析

3.1 RBC-C3bRR

各組小鼠在灌胃第7 d、14 d的紅細(xì)胞C3b受體酵母菌花環(huán)率(RBC-C3bRR)見(jiàn)表1.

表1 紅細(xì)胞C3b受體酵母菌花環(huán)率組間和組內(nèi)比較( ±s，%，n=10)Table 1 Comparison of erythrocyte C3b receptor yeast rosette rate between and within groups(±s，%，n=10)

表1 紅細(xì)胞C3b受體酵母菌花環(huán)率組間和組內(nèi)比較( ±s，%，n=10)Table 1 Comparison of erythrocyte C3b receptor yeast rosette rate between and within groups(±s，%，n=10)

注:同列數(shù)據(jù)肩上標(biāo)有相同小寫(xiě)字母表示組間差異不顯著(P＞0.05)，標(biāo)有不同小寫(xiě)字母表示組間差異顯著(0.01＜P＜0.05)，標(biāo)有不同大寫(xiě)字母表示組間極顯著差異(P＜0.01)；同列數(shù)據(jù)肩上標(biāo)記為*表示組內(nèi)差異不顯著(P＞0.05)，標(biāo)記為**表示組內(nèi)差異顯著(0.01＜P＜0.05)，標(biāo)記為***表示組內(nèi)極顯著差異(P＜0.01).Note:The same lowercase letters on the shoulders of the data in the same column indicate that the difference between groups is not significant(P＞0.05)，the difference between lowercase letters indicates that the difference between groups is significant(0.01＜P＜0.05)，and the difference between uppercase letters indicates extreme differences between groups significant difference(P＜0.01)；and the data in the same column is marked with*to indicate that the difference within the group is not significant(P＞0.05)，and the mark as**indicates that the difference within the group is significant(0.01＜p＞0.05)，and the mark is marked as***to indicate very significant differences within the group(P＜0.01).

組別 劑量(mg/mL) 7 d花環(huán)率(%) 14 d花環(huán)率(%)空白組 - 9.40±3.60Cc 16.10±4.41Cc***DXMS組 5 5.60±1.07DEde 13.40±2.37Cd***左旋咪唑組 1 13.30±2.58Bb 20.70±2.45Abb***低劑量組 12.2 4.10±0.74Ee 16.20±2.39Cc***中劑量組 24.4 17.10±3.70Aa 23.70±2.87Aa***高劑量組 48.8 7.80±1.40CDcd 19.90±2.73Bb***

小鼠連續(xù)皮下注射受試藥物7 d后，與DXMS組RBC-C3bRR相比較，除低劑量受試藥物組無(wú)明顯差異外，其余各組均極顯著增加，其中值得注意的是，高劑量受試藥物組顯著低于中劑量受試藥物組.再連續(xù)皮下注射7 d，各組RBC-C3bRR均極顯著增加，其中，三個(gè)劑量受試藥物組數(shù)據(jù)均顯著高于DXMS組，低劑量受試藥物組和空白組相當(dāng).連續(xù)皮下注射7～14 d DXMS，小鼠RBC-C3bRR明顯下降；給予7～14 d左旋咪唑，RBC-C3bRR有極顯著增加；給予7～14 d不同劑量受試藥物，RBC-C3bRR極顯著增加，中劑量受試藥物組最為明顯.

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，藏藥秦艽花總黃酮具有增強(qiáng)小鼠紅細(xì)胞C3b受體活性的作用并具有良好的時(shí)效關(guān)系，其中以生藥濃度100%(總黃酮濃度24.4 mg/mL)作用尤為明顯.

3.2 RBC-ICRR

各組小鼠在灌胃第7 d、14 d的紅細(xì)胞免疫復(fù)合物花環(huán)率(RBC-ICRR)見(jiàn)表2.

表2 紅細(xì)胞免疫復(fù)合物花環(huán)率組間和組內(nèi)比較(x ±s，%，n=10)Table 2 Comparison of rosette rate of red blood cell immune complex between and within groups(x ±s，%，n=10)

小鼠連續(xù)皮下注射受試藥物7 d后，與DXMS組RBC-ICRR相比較，除低劑量受試藥物組沒(méi)有明顯差異無(wú)統(tǒng)計(jì)意義外，其余各組均極顯著高于DXMS組.再連續(xù)皮下注射和治療7 d，DXMS組、左旋咪唑組和高劑量組RBC-ICRR均極顯著下降，低劑量組極顯著上升，中劑量受試藥物組沒(méi)有明顯差異；其中DXMS組、左旋咪唑組均極顯著低于空白組，低劑量組與空白組相當(dāng)，中、高劑量受試藥物組顯著低于空白組，但均極顯著大于左旋咪唑組和DXMS組.連續(xù)皮下注射7～14 d DXMS，小鼠RBC-ICR明顯下降；給予7～14 d左旋咪唑，RBC-ICR先后呈上升和下降趨勢(shì)；給予7～14 d不同劑量受試藥物，低、中劑量藥物組RBC-ICR極顯著增加且極顯著大于DXMS組的RBC-ICR而與正常小鼠相當(dāng).

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，藏藥秦艽花總黃酮具有拮抗DXMS引起的小鼠紅細(xì)胞免疫復(fù)合物花環(huán)率下降的作用，其中以生藥濃度50%～200%(總黃酮濃度12.2～48.8 mg/mL)作用更為明顯.

3.3 ERER

各組小鼠在灌胃第7 d、14 d的紅細(xì)胞C3b受體花環(huán)促進(jìn)率(ERER)結(jié)果見(jiàn)表3.

表3 紅細(xì)胞C3b受體花環(huán)促進(jìn)率組間和組內(nèi)比較(x ±s，%，n=10)Table 3 Comparison of the promotion rate of red blood cell C3b receptor rosette betweenand within groups(x ±s，%，n=10)

小鼠連續(xù)皮下注射受試藥物7 d后，與DXMS組ERER相比較，空白對(duì)照組顯著升高，左旋咪唑組和中劑量受試藥物組極顯著性升高，低劑量受試藥物組雖然無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但絕對(duì)平均值增大，值得注意，高劑量受試藥物組絕對(duì)平均值降低.再連續(xù)皮下注射7 d，DXMS組、左旋咪唑組和中、高劑量受試藥物組均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，低試劑量藥物組極顯著增加；其中左旋咪唑組和高劑量組極顯著高于DXMS組并與空白對(duì)照組相當(dāng)，低劑量受試藥物組與左旋咪唑組相當(dāng)，中劑量受試藥物組極顯著增加且高于空白組.連續(xù)皮下注射7～14 d DXMS，小鼠ERER下降；給予7～14 d左旋咪唑，ERER增加并達(dá)到正常小鼠水平；給予7～14 d不同劑量受試藥物，ERER極顯著增加，尤其是低、中劑量受試藥物更為明顯.

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，藏藥秦艽花總黃酮具有拮抗DXMS引起的小鼠血清紅細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)促進(jìn)因子低下的作用，其中以生藥濃度50%～100%(總黃酮濃度12.2～24.4 mg/mL)作用更為明顯.

3.4 ERIR

各組小鼠在灌胃第7 d、14 d的紅細(xì)胞C3b受體花環(huán)抑制率(ERIR)結(jié)果見(jiàn)表4.

表4 紅細(xì)胞C3b受體花環(huán)抑制率組間和組內(nèi)比較(x±s，%，n=10)Table 4 Comparison of the inhibition rate of red blood cell C3b receptor rosette between and within groups(x±s，%，n=10)

小鼠連續(xù)皮下注射受試藥物7 d后，與DXMS組ERIR相比較，空白組、左旋咪唑組和中劑量受試藥物均極顯著性低下，低劑量受試藥物組雖然高于空白對(duì)照組，但極顯著低于DXMS組，高劑量受試藥物組雖有所增加，但仍低于DXMS組.再連續(xù)皮下注射7 d，空白對(duì)照組、DXMS組有所下降、左旋咪唑組和中、高受試劑量藥物組變化不大，低劑量受試藥物極顯著下降；左旋咪唑組和低、中劑量受試藥物組均極顯著低于DXMS組而與空白組相當(dāng)，高劑量受試藥物ERIR雖然顯著升高，但仍極顯著低于DXMS組.連續(xù)皮下注射7～14 d DXMS，小鼠ERIR升高；給予7～14 d左旋咪唑，ERIR降低并達(dá)到正常小鼠水平；給予7～14 d不同劑量受試藥物，ERIR顯著降低，尤其是低、中劑量受試藥物更為明顯.

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，藏藥秦艽花總黃酮具有降低DXMS引起的小鼠血清紅細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)抑制因子升高的作用，其中以生藥濃度50%～100%(總黃酮濃度12.2～24.4 mg/mL)作用更為明顯.

根據(jù)紅細(xì)胞C3b受體花環(huán)促進(jìn)與抑制試驗(yàn)原理，綜合“3.3、3.4”實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析，藏藥秦艽花總黃酮通過(guò)提高血清紅細(xì)胞免疫促進(jìn)因子的活性和降低抑制因子的活性達(dá)到提高紅細(xì)胞C3b受體活性.

3.5 紅細(xì)胞調(diào)節(jié)吞噬細(xì)胞吞噬功能試驗(yàn)

各組小鼠在灌胃第7 d、14 d的紅細(xì)胞調(diào)節(jié)吞噬細(xì)胞吞噬功能結(jié)果見(jiàn)表5、6.

表5 吞噬百分率組間和組內(nèi)比較(x ±s，%，n=10)Table 5 Comparison of phagocytosis percentage between and within groups(x ±s，%，n=10)

小鼠連續(xù)皮下注射受試藥物7 d后，與DXMS組巨噬細(xì)胞吞噬百分率相比較，空白組、左旋咪唑組和低、中劑量受試藥物組均極顯著性升高.再連續(xù)皮下注射7 d，各組吞噬百分率具有極顯著增加；其中左旋咪唑組吞噬百分率極顯著高于DXMS組、空白對(duì)照組；低、中劑量藥物組吞噬百分率雖低于左旋咪唑組，但均極顯著高于DXMS組.連續(xù)皮下注射7～14 d DXMS，小鼠巨噬細(xì)胞吞噬百分率下降；給予7～14 d左旋咪唑，巨噬細(xì)胞吞噬百分率增加并高于正常小鼠水平；給予7～14 d不同劑量受試藥物，巨噬細(xì)胞吞噬百分率極顯著增加，尤其是低、中劑量受試藥物更為明顯.

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，藏藥秦艽花總黃酮具有拮抗DXMS引起的小鼠巨噬細(xì)胞吞噬活性下降的作用，其中以生藥濃度50%～100%(總黃酮濃度12.2～24.4 mg/mL)作用更為明顯.

表6 吞噬指數(shù)組間和組內(nèi)比較(x ±s，%，n=10)Table 6 Comparison of phagocytic index between and within groups(x ±s，%，n=10)

小鼠連續(xù)皮下注射受試藥物7 d后，與DXMS組巨噬細(xì)胞吞噬指數(shù)相比較，空白組、左旋咪唑組吞噬指數(shù)顯著性升高；低、中劑量受試藥物組雖然吞噬指數(shù)低于空白對(duì)照組，但顯著高于DXMS組，高劑量受試藥物組吞噬指數(shù)與DXMS組相當(dāng).再連續(xù)皮下注射7 d，其左旋咪唑組和三個(gè)受試劑量受試藥物組吞噬指數(shù)均極顯著增加.低、中劑量藥物組吞噬指數(shù)雖低于左旋咪唑組，但極顯著高于DXMS組.連續(xù)皮下注射7～14 d DXMS，小鼠巨噬細(xì)胞吞噬指數(shù)下降；給予7～14 d左旋咪唑，巨噬細(xì)胞吞噬指數(shù)增加并高于正常小鼠水平；給予7～14 d不同劑量受試藥物，巨噬細(xì)胞吞噬指數(shù)極顯著增加，尤其是低、中劑量受試藥物更為明顯.

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，藏藥秦艽花總黃酮具有拮抗DXMS引起的小鼠巨噬細(xì)胞吞噬指數(shù)下降的作用，其中以生藥濃度50%～100%(總黃酮濃度12.2～24.4 mg/mL)作用更為明顯.

根據(jù)紅細(xì)胞調(diào)節(jié)吞噬細(xì)胞吞噬功能試驗(yàn)原理，綜合上述分析，藏藥秦艽花總黃酮通過(guò)促進(jìn)紅細(xì)胞C3b受體活性達(dá)到提高吞噬細(xì)胞的吞噬活性和增強(qiáng)吞噬細(xì)胞的吞噬能力.

3.6 腫瘤細(xì)胞花環(huán)試驗(yàn)

各組小鼠在灌胃第7 d、14 d的紅細(xì)胞C3b受體腫瘤細(xì)胞花環(huán)率(DTER)結(jié)果見(jiàn)表7.

表7 腫瘤細(xì)胞花環(huán)率組間和組內(nèi)比較(x ±s，%，n=10)Table 7 Comparison of tumor cell rosette rate between and within groups(x ±s，%，n=10)

小鼠連續(xù)皮下注射受試藥物7 d后，與DXMS組DTER相比較，空白組、左旋咪唑組和低劑量受試藥物組均極顯著性升高且左旋咪唑組極顯著大于空白組和低劑量受試藥物組；中劑量受試藥物組極顯著高于低劑量受試藥物，高劑量受試藥物組雖下降，但仍極顯著高于DXMS組而與空白對(duì)照組相當(dāng).再連續(xù)皮下注射7 d，DXMS組、左旋咪唑組增加，中劑量藥物組降低；三個(gè)受試劑量藥物組雖低于左旋咪唑組，但極顯著高于DXMS組，其中中劑量藥物組DTER與空白組相當(dāng).連續(xù)皮下注射7～14 d DXMS，DTER下降；給予7～14 d左旋咪唑，DTER增加并高于正常小鼠水平；給予7～14 d不同劑量受試藥物，DTER極顯著增加，尤其是中劑量受試藥物更為明顯.

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，藏藥秦艽花總黃酮具有拮抗DXMS引起的DTER下降的作用，其中以生藥濃度100%(總黃酮濃度24.4 mg/mL)作用更為明顯.

4 討論

1981年，Siegel等突破紅細(xì)胞只具有運(yùn)輸O2和CO2的傳統(tǒng)認(rèn)識(shí)，提出了“紅細(xì)胞免疫系統(tǒng)”(RCIS)概念并認(rèn)為紅細(xì)胞免疫功能的發(fā)揮主要是通過(guò)紅細(xì)胞免疫黏附的方式體現(xiàn)[15].紅細(xì)胞存在有許多與免疫有關(guān)的物質(zhì)，如CR1/3/58/59、LFA-3、DAF、HRF、CD58+、CD59+、IL-8受體和SOD等，數(shù)目眾多，因而具有識(shí)別、粘附、濃縮、殺傷抗原、清除循環(huán)免疫復(fù)合物(circle immune complex，CIC)的作用而自成系統(tǒng)，參與機(jī)體的免疫調(diào)控，是機(jī)體免疫系統(tǒng)不可分割的重要組成部分，數(shù)目眾多，自成系統(tǒng)[15-20].紅細(xì)胞免疫功能主要是通過(guò)免疫黏附作用(RCIA)來(lái)實(shí)現(xiàn)的，故能識(shí)別、黏附和運(yùn)輸循環(huán)“抗原-抗體-補(bǔ)體”復(fù)合物至肝脾清除，其物質(zhì)基礎(chǔ)是紅細(xì)胞膜上的CR1(C3b受體)[21].血循環(huán)中C3b受體總數(shù)的95%以上是存在于紅細(xì)胞膜上，且呈簇狀分布的結(jié)合位點(diǎn)并具多價(jià)性，有利于抗原物質(zhì)牢固結(jié)合，因此將紅細(xì)胞膜上的C3b受體活性和數(shù)量作為重要的指標(biāo)來(lái)評(píng)價(jià)紅細(xì)胞免疫功能[22-23].

紅細(xì)胞免疫功能檢測(cè)包括紅細(xì)胞免疫黏附、自我調(diào)控以及對(duì)其他免疫細(xì)胞調(diào)控能力三個(gè)方面.目前，國(guó)內(nèi)外評(píng)價(jià)紅細(xì)胞的免疫功能主要是通過(guò)測(cè)定紅細(xì)胞的免疫粘附(RCIA)活性來(lái)實(shí)現(xiàn).本研究以乙醇輔助提取秦艽花黃酮為研究材料，DXMS(地塞米松)致免疫抑制小鼠為研究對(duì)象，通過(guò)RBC-C3bRR、RBC-ICRR、RBC-C3bER/RBC-C3bIR、RBC-C3bMφ、DTER，探討藏藥秦艽花總黃酮對(duì)機(jī)體紅細(xì)胞免疫功能的影響，研究結(jié)果表明:連續(xù)注射7～14 d DXMS，紅細(xì)胞C3b受體活性下降，紅細(xì)胞免疫復(fù)合物花環(huán)率下降、血清紅細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)促進(jìn)因子活性低下、血清紅細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)抑制因子活性升高、調(diào)理吞噬細(xì)胞的吞噬作用下降、腫瘤細(xì)胞花環(huán)率下降，說(shuō)明DXMS導(dǎo)致機(jī)體紅細(xì)胞功能低下；給予7 d～14 d的秦艽花黃酮，小鼠紅細(xì)胞C3b受體酵母花環(huán)率上升、免疫復(fù)合物花環(huán)率上升、紅細(xì)胞C3b受體腫瘤細(xì)胞花環(huán)率上升，說(shuō)明藏藥秦艽花總黃酮具有增強(qiáng)小鼠紅細(xì)胞C3b受體活性的作用(生藥濃度100%、總黃酮濃度24.4 mg/mL作用明顯)；血清紅細(xì)胞C3b受體促進(jìn)因子花環(huán)率上升、血清紅細(xì)胞C3b受體抑制因子花環(huán)率降低，說(shuō)明藏藥秦艽花總黃酮具有增強(qiáng)促進(jìn)因子活性和降低抑制因子活性的作用(生藥濃度50%～100%、總黃酮濃度12.2～24.4 mg/mL作用明顯)；秦艽花總黃酮能使DXMS引起的小鼠腹腔巨噬細(xì)胞低下的吞噬百分率和吞噬指數(shù)增大，說(shuō)明藏藥秦艽花總黃酮通過(guò)促進(jìn)紅細(xì)胞C3b受體活性達(dá)到提高吞噬細(xì)胞的吞噬活性和增強(qiáng)吞噬細(xì)胞的吞噬能力(生藥濃度50%～100%、總黃酮濃度12.2～24.4 mg/mL作用明顯).

5 小結(jié)

藏藥秦艽花總黃酮(12.2～24.4 mg/mL)通過(guò)提高血清紅細(xì)胞免疫促進(jìn)因子的活性和降低抑制因子的活性達(dá)到提高紅細(xì)胞C3b受體活性，實(shí)現(xiàn)其促進(jìn)紅細(xì)胞免疫粘附功能和增強(qiáng)吞噬細(xì)胞吞噬功能的作用.