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復(fù)方甘草含片與復(fù)方甘草片的藥效學(xué)比較研究

2021-11-16 03:03薄雙琴景明朱英布李宗民王靜
藥學(xué)研究 2021年10期
關(guān)鍵詞:含片豚鼠平喘

薄雙琴,景明,朱英布,李宗民,王靜

(1.甘肅中醫(yī)藥大學(xué),甘肅 蘭州 730000;2.甘肅祁連山制藥股份有限公司,甘肅 酒泉 735000)

復(fù)方甘草片是臨床應(yīng)用較廣的止咳化痰藥,其止咳化痰平喘效果顯著。復(fù)方甘草片中含有甘草流浸膏、阿片粉、樟腦、八角茴香、酒石酸銻鉀等成分。復(fù)方甘草片組分中的甘草浸膏為保護(hù)性鎮(zhèn)咳祛痰劑;阿片粉有較強(qiáng)的鎮(zhèn)咳作用;樟腦及八角茴香油能刺激支氣管黏膜,反射性地增加腺體分泌,稀釋痰液,使痰易于咳出[1]。含服復(fù)方甘草片,可使藥片在口腔中溶化,有效成分易覆蓋在發(fā)炎的咽部黏膜,止咳作用起效快。同時(shí),阿片的有效成分經(jīng)口腔黏膜吸收后,不經(jīng)肝臟的首過效應(yīng)而直接進(jìn)入血液,減少了有效成分的損失,避免了吞服復(fù)方甘草片中阿片粉的肝臟代謝,減輕了藥物的不良反應(yīng),如惡心、口干、便秘等[2]。大多研究表明,復(fù)方甘草片的含服效果較好,不良反應(yīng)較少[3-7]。但是,目前生產(chǎn)的復(fù)方甘草片為素片,藥片中含阿片粉,導(dǎo)致素片具阿片粉特殊臭氣,影響服用,從而影響藥物的療效;其次,處方中含八角茴香油、樟腦,屬易揮發(fā)物質(zhì),貯存期間成分易散失,也會(huì)影響療效。復(fù)方甘草含片是近年來對(duì)復(fù)方甘草片劑型進(jìn)行改良的一種新制劑,其可改善人們對(duì)藥物的順應(yīng)性,最大限度地發(fā)揮藥物療效,同時(shí)也能夠提高復(fù)藥物穩(wěn)定性。本文通過比較復(fù)方甘草片與復(fù)方甘草含片止咳、化痰、平喘以及抗炎作用,為復(fù)方甘草含片的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 SPF級(jí)昆明種小鼠,雌雄各半,體重18~22 g,動(dòng)物合格證號(hào):SCXK(甘)2015-0002-0001382;SPF級(jí)豚鼠,雌雄各半,體重180~210 g,均由甘肅中醫(yī)藥大學(xué)科研實(shí)驗(yàn)中心提供。

1.2 主要藥物及試劑 復(fù)方甘草片(甘肅莫高制藥廠,批號(hào):1903181);復(fù)方甘草含片(甘肅祁連山藥業(yè)有限公司,批號(hào):1811070);生理鹽水(四川科倫藥業(yè)有限公司,規(guī)格250 mL:2.25 g,批號(hào):N20101507B);0.1%磷酸組胺(Bioruler,批號(hào):3410);二甲苯(成都金山化學(xué)試劑有限公司,批號(hào)20190906);酚紅(北京索萊寶公司,批號(hào):1211C031);氨水(北京化工廠,批號(hào):20141008)。

1.3 主要儀器設(shè)備 JWC-201D型超聲霧化器(鞍山市同信醫(yī)用儀器廠);Benchmark Plus酶標(biāo)儀(Bio RAD公司);小鼠/豚鼠熏蒸系統(tǒng)(自制);HX502T電子天平(慈溪市天東衡器廠)。

2 方法

2.1 小鼠止咳實(shí)驗(yàn) 取昆明種雄性小鼠30只,隨機(jī)分為3組,即空白對(duì)照組、復(fù)方甘草含片組及復(fù)方甘草含片組(10 g·kg-1),每組各10只。各組給予相應(yīng)的藥物混懸液(20 mL·kg-1),空白對(duì)照組給予等容積的純水,每天1次,連續(xù)7 d,末次給藥1 h后,將小鼠置于密封的透明容器中,用超聲霧化器通過連接容器的軟管噴入霧化氨水20 s后,立即取出小鼠放在另一個(gè)干凈容器中,記錄小鼠咳嗽潛伏時(shí)間3 min內(nèi)咳嗽次數(shù)(小鼠腹肌劇烈收縮,肩背聳動(dòng),伴有張嘴為咳嗽指標(biāo))。以用藥后咳嗽潛伏期(s)、3 min的咳嗽次數(shù)為評(píng)價(jià)指標(biāo),評(píng)價(jià)藥物有無止咳作用。

2.2 小鼠氣管段酚紅祛痰實(shí)驗(yàn)[8-9]取昆明小鼠30只,分為3組,每組10只,雌雄各半,空白對(duì)照組(生理鹽水0.4 mL/20 g)、復(fù)方甘草片組10 g·kg-1、復(fù)方甘草含片組10 g·kg-1,容量按20 mL·kg-1,連續(xù)5 d。末次給藥30 min后腹腔注射0.5%酚紅溶液0.5 mL,30 min后處死小鼠,剝離頸部氣管周圍組織,甲狀軟骨下緣及氣管分支處用小血管夾夾住,然后剪下甲狀軟骨下至氣管分支處的一段氣管,將各氣管段放入預(yù)先盛有4 mL、5% NaHCO3溶液試管中靜置1 h,將試管中上清液于酶標(biāo)儀558 nm處測(cè)量并記錄OD值(OD值大小表示酚紅排泌量的多少,OD值大表示酚紅排泌量多)。

2.3 豚鼠磷酸組胺引喘平喘實(shí)驗(yàn) 將40只豚鼠于密閉容器內(nèi),連接超聲霧化器,將2 mg·mL-1磷酸組胺注入霧化罐內(nèi),持續(xù)熏蒸20 s,觀察豚鼠從接受噴霧到發(fā)生抽搐跌倒的引喘潛伏期,選擇150 s內(nèi)出現(xiàn)哮喘的豚鼠30只,隨機(jī)分為3組,即空白對(duì)照組、復(fù)方甘草片組以及復(fù)方甘草含片組(6 g·kg-1),各組灌胃給予相應(yīng)的藥物混懸液(20 mL·kg-1);空白對(duì)照組予等容積純水灌胃。均每天1次,連續(xù)7 d。末次給藥后30 min,將豚鼠放入噴霧裝置內(nèi),按同樣條件分別噴霧加入磷酸組胺,記錄豚鼠自噴霧開始出現(xiàn)哮喘的潛伏期(以第一次抽搐跌倒的時(shí)間作為潛伏期),引喘潛伏期超過5 min者,以5 min計(jì)[10]。

2.4 小鼠耳郭腫脹實(shí)驗(yàn) 取昆明種小鼠30只,隨機(jī)分成空白對(duì)照組(生理鹽水),復(fù)方甘草片(10 g·kg-1)、復(fù)方甘草含片組(10 g·kg-1),每組10只。連續(xù)7 d灌胃給藥,并于末次給藥30 min后用二甲苯致炎小鼠耳郭[11]。將二甲苯0.05 mL涂于小鼠右耳正反兩側(cè)致炎,左耳做對(duì)照。致炎2 h后將小鼠脫頸椎致死,沿耳郭基線剪下兩耳,打孔器在左右耳同一部位打下圓耳片,電子天平稱重。計(jì)算耳腫脹度和腫脹抑制率。

腫脹抑制率(%)=(空白對(duì)照組腫脹度-給藥組腫脹度)/空白對(duì)照組腫脹度×100%

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 小鼠止咳實(shí)驗(yàn)結(jié)果 與空白對(duì)照組相比,復(fù)方甘草含片及復(fù)方甘草片均可延長小鼠咳嗽潛伏期,減少咳嗽次數(shù)(P<0.01或P<0.05);與復(fù)方甘草片組相比,復(fù)方甘草含片對(duì)小鼠咳嗽潛伏期的延長效果以及減少咳嗽次數(shù)的趨勢(shì)更顯著(P<0.05)。

3.2 小鼠氣管段酚紅祛痰實(shí)驗(yàn)結(jié)果 與空白對(duì)照組相比,復(fù)方甘草含片及復(fù)方甘草片的OD值明顯增大(P<0.01),表示復(fù)方甘草含片及復(fù)方甘草片均可明顯增加酚紅排泌量;復(fù)方甘草含片比復(fù)方甘草片的OD值明顯增大(P<0.01),表示復(fù)方甘草含片可明顯增加酚紅排泌量。說明復(fù)方甘草含片及復(fù)方甘草片均具有化痰作用,但復(fù)方甘草含片的化痰作用更明顯。

表2 各組小鼠OD值

3.3 豚鼠磷酸組胺引喘平喘實(shí)驗(yàn)結(jié)果 與空白對(duì)照組相比,復(fù)方甘草片以及復(fù)方甘草含片均可明顯延長豚鼠引喘潛伏期(P<0.01),減少抽搐跌倒的豚鼠數(shù)量,但復(fù)方甘草含片延長豚鼠引喘潛伏期,減少抽搐跌倒的豚鼠數(shù)量更明顯(P<0.01)。

表3 各組豚鼠引喘潛伏期及抽搐跌倒數(shù)

3.4 小鼠耳郭腫脹實(shí)驗(yàn)結(jié)果 復(fù)方甘草含片以及復(fù)方甘草含片較空白對(duì)照組對(duì)小鼠耳郭腫脹的抑制率明顯增高(P<0.01),復(fù)方甘草含片組的耳郭腫脹度與復(fù)方甘草含片組相比,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),說明復(fù)方甘草含片的抗炎效果更明顯。

表4 各組小鼠耳郭腫脹度及腫脹抑制率

4 討論

咳嗽、咳痰、喘息是呼吸系統(tǒng)疾病常見的臨床癥狀,而且在呼吸系統(tǒng)疾病的發(fā)生發(fā)展中會(huì)伴隨炎癥的發(fā)生,包括鼻腔、咽喉、上呼吸道、下呼吸道、肺部等炎癥,主要表現(xiàn)為組織腫脹、發(fā)紅、發(fā)熱、分泌物增多、組織周圍免疫細(xì)胞增多、免疫因子濃度增加[12]。臨床上治療呼吸道感染,主要是根據(jù)患者的感染原因,通過改善其咳嗽及咳痰癥狀達(dá)到主要治療目的。復(fù)方甘草片主要用于各種原因?qū)е碌目人院涂忍抵委熤?,以呼吸道感染的治療最為常見。?fù)方甘草片與復(fù)方甘草含片中的主要成分甘草浸膏粉發(fā)揮鎮(zhèn)咳祛痰的作用。本研究采用氣管酚紅排泌量測(cè)定、氨水致小鼠咳嗽、磷酸組胺引喘、二甲苯致小鼠耳郭腫脹法來評(píng)價(jià)并比較復(fù)方甘草片和復(fù)方甘草含片的止咳、化痰、平喘以及抗炎作用。研究結(jié)果表明,復(fù)方甘草含片及復(fù)方甘草片均可延長小鼠咳嗽潛伏期,減少咳嗽次數(shù),復(fù)方甘草含片對(duì)小鼠咳嗽潛伏期的延長效果以及減少咳嗽次數(shù)的趨勢(shì)更顯著。復(fù)方甘草含片比復(fù)方甘草片增加酚紅排泌量更多,顯示復(fù)方甘草含片明顯的化痰作用。復(fù)方甘草含片可更明顯的延長豚鼠引喘潛伏期,減少豚鼠抽搐跌倒的數(shù)量,表明復(fù)方甘草含片較復(fù)方甘草片的平喘作用更強(qiáng)。在二甲苯致小鼠耳腫脹實(shí)驗(yàn)中,復(fù)方甘草含片以及復(fù)方甘草片均可抑制小鼠耳郭腫脹,但復(fù)方甘草含片的抑制率更高,說明復(fù)方甘草含片的抗炎效果更明顯。綜上所述,復(fù)方甘草含片止咳、化痰、平喘以及抗炎作用更明顯,治療效果更好,并且改善了患者對(duì)藥物的順應(yīng)性。本實(shí)驗(yàn)通過比較復(fù)方甘草含片以及復(fù)方甘草片的止咳、化痰、平喘以及抗炎作用,為復(fù)方甘草含片投入臨床使用提供了科學(xué)依據(jù),對(duì)復(fù)方甘草含片的其他藥理作用及不良反應(yīng)還需進(jìn)一步的研究與觀察。

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