李 軍，謝 菁，程丹鳳

重慶市血液中心，重慶 400015

新型冠狀病毒肺炎(COVID-19)的主要傳播途徑為經(jīng)呼吸道飛沫傳播和接觸傳播，目前尚無特效治療方法，主要以隔離和對(duì)癥支持治療為主[1]?！缎滦凸跔畈《靖腥镜姆窝自\療方案(試行第五版)》[2]提出,在重型、危重型病例的治療中，可采用康復(fù)者恢復(fù)期血漿(CP)。根據(jù)《新冠肺炎康復(fù)者恢復(fù)期血漿救治工作方案》[3]，結(jié)合《新冠肺炎康復(fù)者恢復(fù)期血漿臨床治療方案(試行第二版)》[4](簡(jiǎn)稱《血漿臨床治療方案》)的要求，血站將全面推進(jìn)COVID-19康復(fù)者CP采集工作。我國采供血機(jī)構(gòu)分為血站和單采血漿站，血漿采集是在單采血漿站完成的，各級(jí)血站(特別是血液中心)并未開展此項(xiàng)工作，也無相關(guān)質(zhì)量體系文件支持，雖然有單采設(shè)備，但基本用于單采血小板，這給處于疫情期間的血站帶來了不小的困難。故本文對(duì)COVID-19康復(fù)者CP采集過程進(jìn)行回顧，為突發(fā)事件中特殊血液采集的應(yīng)急預(yù)案提供參考。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2020年2-3月重慶市血液中心收集的擬捐獻(xiàn)CP的COVID-19康復(fù)者9例，男女比為7∶2，平均年齡(39.2±9.1)歲，平均身高(169.0±7.6)cm，平均體質(zhì)量(69.6±9.1)kg。

1.2CP采集應(yīng)急方案

1.2.1質(zhì)量體系文件 根據(jù)《血漿臨床治療方案》和《血站技術(shù)操作規(guī)程(2019版)》[5]，結(jié)合本中心情況制訂了《新冠肺炎康復(fù)者恢復(fù)期血漿采集制備方案》和《血漿采集標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》，以及《獻(xiàn)漿者健康征詢及獻(xiàn)漿登記表》《自愿捐獻(xiàn)新型冠狀病毒抗體血漿知情同意書》《恢復(fù)期獻(xiàn)血漿者臨床評(píng)估表》《采漿工作記錄》《獻(xiàn)漿不良反應(yīng)觀測(cè)表》等相應(yīng)的記錄表單。

1.2.2血液信息管理系統(tǒng)(Pass Spring System) COVID-19康復(fù)者CP捐獻(xiàn)相關(guān)信息通過本中心Pass Spring System錄入，新增CP單采模塊和產(chǎn)品標(biāo)識(shí)條形碼。

1.2.3單采區(qū)域配置 啟用空置團(tuán)體采血區(qū)域，改造為征詢體檢室、捐獻(xiàn)室和觀察室，人流、物流、醫(yī)療廢物分開，清潔區(qū)和污染區(qū)分離，通風(fēng)良好，設(shè)備齊全。相關(guān)儀器、材料主要包括：MCS+血細(xì)胞分離機(jī)和Trima血細(xì)胞分離機(jī)各1臺(tái)、相應(yīng)采漿一次性配套耗材、枸櫞酸鈉注射液、注射用生理鹽水、葡萄糖酸鈣口服溶液、醫(yī)用聚維酮碘、醫(yī)用棉簽、一次性采血護(hù)理包、環(huán)境清潔消毒劑、急救箱等。

1.2.4籌備工作小組 抽調(diào)6名技術(shù)全面的業(yè)務(wù)骨干組成COVID-19康復(fù)者CP采集應(yīng)急小組。其中2名工作人員具體負(fù)責(zé)對(duì)捐獻(xiàn)者進(jìn)行健康征詢、體檢、初篩和采集等工作。工作人員采用2級(jí)防護(hù)措施：(1)穿雙層工作服，即內(nèi)穿醫(yī)用工作服，外穿防護(hù)服；(2)戴雙層帽子，即內(nèi)戴醫(yī)用帽，外戴防護(hù)服連帶帽；(3)戴雙層手套，即于內(nèi)部將醫(yī)用工作服袖子扎緊并用彈力繃帶固定，于外部將防護(hù)服袖子扎緊并用彈力繃帶固定；(4)穿一次性隔離鞋套；(5)戴N95口罩；(6)戴防護(hù)鏡。采集前對(duì)小組成員進(jìn)行Pass Spring System和穿脫防護(hù)服等防疫培訓(xùn)，并實(shí)地進(jìn)行模擬演練。

1.3方法

1.3.1COVID-19康復(fù)者招募 招募對(duì)象符合《血漿臨床治療方案》相關(guān)要求。主要包括：(1)距首發(fā)癥狀時(shí)間不少于3周；(2)符合最新版診療方案中解除隔離和出院標(biāo)準(zhǔn)；(3)符合《獻(xiàn)血者健康檢查要求》(GB18467-2011)；(4)兩次采漿時(shí)間間隔不少于14 d。有條件的地區(qū)應(yīng)進(jìn)行新型冠狀病毒核酸和抗體檢測(cè)。患者康復(fù)出院時(shí)由定點(diǎn)醫(yī)院工作人員對(duì)其進(jìn)行捐獻(xiàn)血漿招募，將有捐獻(xiàn)意愿的康復(fù)者告知本中心。本中心也對(duì)外公示預(yù)約途徑及電話。捐獻(xiàn)前再由本中心工作人員對(duì)有意愿的捐獻(xiàn)者進(jìn)行電話問詢和審核(包括年齡、既往病史、首發(fā)癥狀時(shí)間、出院時(shí)間、核酸復(fù)查結(jié)果、出院后有無癥狀、有無確診或疑似患者接觸史)。與符合條件的捐獻(xiàn)者確定捐獻(xiàn)時(shí)間和地點(diǎn)，并告知其注意事項(xiàng)。

1.3.2捐獻(xiàn)者初篩 捐獻(xiàn)者在捐獻(xiàn)當(dāng)日由專車接送至本中心(護(hù)送人員、駕駛員均采用2級(jí)防護(hù)措施)，并由專人引導(dǎo)經(jīng)單獨(dú)通道進(jìn)入血漿捐獻(xiàn)區(qū)域。捐獻(xiàn)者填寫登記表及知情同意書。根據(jù)《血站技術(shù)操作規(guī)程(2019)》要求，工作人員對(duì)捐獻(xiàn)者進(jìn)行健康征詢、一般健康檢查和血液檢測(cè)。

1.3.3CP采集 根據(jù)捐獻(xiàn)者的初篩檢查結(jié)果和血管條件等選擇適合的血細(xì)胞分離機(jī)，主要有MCS+血細(xì)胞分離機(jī)和Trima血細(xì)胞分離機(jī)。MCS+血細(xì)胞分離機(jī)無單采血漿的程序，可使用血小板收集程序進(jìn)行采集，但是需要工作人員在每個(gè)循環(huán)采集至淘洗階段手動(dòng)按下停止鍵阻止血小板的收集，然后回輸除血漿外的其他血液成分至捐獻(xiàn)者體內(nèi)，主要適用于女性或者體質(zhì)量較低男性捐獻(xiàn)者。使用Trima血細(xì)胞分離機(jī)前與工程師聯(lián)系，增加單采血漿的程序，其優(yōu)勢(shì)在于采集過程無須手動(dòng)干預(yù)且時(shí)間短，適用于體質(zhì)量大、血管充盈的男性捐獻(xiàn)者。血細(xì)胞分離機(jī)耗材正確安裝完成后，在初始化期間，核對(duì)捐獻(xiàn)者身份信息，根據(jù)捐獻(xiàn)者體質(zhì)量及其自身意愿選擇血漿捐獻(xiàn)劑量200/300/400 mL，對(duì)體檢初篩結(jié)果及捐獻(xiàn)劑量沒有任何疑問后，請(qǐng)捐獻(xiàn)者簽署知情同意書。初始化完成后輸入捐獻(xiàn)者相關(guān)信息并設(shè)定血漿采集程序。根據(jù)捐獻(xiàn)者選擇的捐獻(xiàn)量進(jìn)行采集，穿刺成功后，留取1管血清學(xué)檢測(cè)標(biāo)本，再留取2管核酸檢測(cè)標(biāo)本，最后留取2管促凝標(biāo)本。告知捐獻(xiàn)者若有任何不適立即提出。采集中需密切觀察以下內(nèi)容：(1)捐獻(xiàn)者有無獻(xiàn)血不良反應(yīng)的發(fā)生。若捐獻(xiàn)者出現(xiàn)不適，如面色蒼白、頭暈、口麻等需根據(jù)質(zhì)量體系文件的要求進(jìn)行處理，暫停或終止采集，并填寫《獻(xiàn)漿不良反應(yīng)觀測(cè)表》。(2)產(chǎn)品袋中血漿外觀質(zhì)量。觀察產(chǎn)品袋中是否出現(xiàn)紅細(xì)胞溢出或者乳糜等不符合血漿質(zhì)量要求的情況，及時(shí)調(diào)整血細(xì)胞分離機(jī)設(shè)置參數(shù)。若上述情況無明顯改善，采集結(jié)束后需對(duì)關(guān)鍵指標(biāo)進(jìn)行質(zhì)量檢測(cè)。

1.3.4產(chǎn)品和標(biāo)本交接 產(chǎn)品和標(biāo)本運(yùn)輸采用3層包裝，由內(nèi)到外分別為主容器、防滲漏包裝和外包裝。在相對(duì)獨(dú)立的區(qū)域保存，標(biāo)識(shí)明確，由專人負(fù)責(zé)。常規(guī)消毒，并在交接血漿標(biāo)本過程中及開啟、關(guān)閉轉(zhuǎn)運(yùn)箱蓋前后用2 000 mg/L含氯消毒液噴灑。若血液滲漏時(shí)立即用5 500 mg/L含氯消毒液進(jìn)行噴灑消毒。

1.3.5數(shù)據(jù)收集 通過Pass Spring System收集重慶地區(qū)COVID-19康復(fù)者捐獻(xiàn)前初篩結(jié)果和采集過程的信息。捐獻(xiàn)前初篩結(jié)果包括一般健康檢查和血液檢查的結(jié)果；采集過程信息包括捐獻(xiàn)者的全血處理量、抗凝劑使用量和采集時(shí)間。

2 結(jié) 果

2.1COVID-19 CP捐獻(xiàn)者一般情況 重慶地區(qū)COVID-19康復(fù)者中共9例擬捐獻(xiàn)CP。捐獻(xiàn)者體溫、脈搏和血壓均無異常。血液檢測(cè)結(jié)果如下：血紅蛋白合格率為100.0%，乙型肝炎病毒抗原/梅毒螺旋體抗體檢測(cè)無反應(yīng)性為100.0%，丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶為(33.7±13.6) U/L，合格率為77.8%。捐獻(xiàn)前初篩合格7例(男5例、女2例)，合格率為77.8%。

2.2COVID-19 CP捐獻(xiàn)者采集情況 共7例達(dá)到捐獻(xiàn)要求。采集過程中血細(xì)胞分離機(jī)采集程序運(yùn)行正常，無報(bào)警提示。捐獻(xiàn)者狀態(tài)良好，未述不適。捐獻(xiàn)者采集情況如下：捐獻(xiàn)者均捐獻(xiàn)CP 400 mL，平均全血處理量(2 132.6±504.9)mL，平均抗凝劑使用量(238.6±39.0)mL，平均采集時(shí)間(47.4±8.9)min，男、女CP捐獻(xiàn)者的相關(guān)指標(biāo)見表1。

表1 CP捐獻(xiàn)者的全血處理量、抗凝劑使用量和采集時(shí)間比較

3 討 論

CP治療利用康復(fù)者血漿中一定滴度的病毒特異性抗體來識(shí)別和清除患者體內(nèi)病毒，是一種被動(dòng)免疫的治療方法[6]。將CP用于重癥感染患者的治療已有相關(guān)報(bào)道，如埃博拉病毒[7]、嚴(yán)重急性呼吸綜合征冠狀病毒[8]、甲型H5N1流感病毒[9]等引起的感染。近幾年也有使用CP治療病毒性急性呼吸道感染后明顯降低患者病死率的報(bào)道[10]。

疫情發(fā)生后，本中心接到通知迅速安排部署CP采集應(yīng)急方案，成立COVID-19康復(fù)者CP采集應(yīng)急小組。隨即開展相關(guān)工作，按照“獨(dú)立空間、獨(dú)立流程、獨(dú)立產(chǎn)品通道、獨(dú)立信息通道”等原則，完善相關(guān)質(zhì)量體系文件及硬件設(shè)施的改造。CP的采集與單采血小板的操作很接近，均通過血細(xì)胞分離機(jī)進(jìn)行分離。其原理是通過離心將捐獻(xiàn)者血液分離至不同層面，在探測(cè)器的識(shí)別下對(duì)不同成分進(jìn)行提取，之后將剩余血液回輸給捐獻(xiàn)者，經(jīng)多次循環(huán)后得到所要產(chǎn)品。對(duì)捐獻(xiàn)者獻(xiàn)血不良反應(yīng)和血漿外觀質(zhì)量不符合要求的處理與單采血小板一致，可直接使用原有質(zhì)量體系文件。這有利于血液中心快速熟練掌握CP采集的操作流程并開展工作。此次，重慶市共成功招募COVID-19康復(fù)者9例，男女比例為7∶2，平均年齡(39.2±9.1)歲。捐獻(xiàn)前均進(jìn)行了健康征詢、一般檢查和血液檢測(cè)。其中2例男性捐獻(xiàn)者丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶不符合捐獻(xiàn)條件，分別為54.4 U/L和53.3 U/L。在采集過程中，筆者發(fā)現(xiàn)女性捐獻(xiàn)者平均全血處理量為(1 475.5±299.1)mL，平均抗凝劑使用量為(190.0±9.9)mL，明顯少于男性捐獻(xiàn)者，其捐獻(xiàn)體驗(yàn)優(yōu)于男性捐獻(xiàn)者[11]。但男女性平均采集時(shí)間相差不明顯，女性為(53.0±17.0)min，男性為(45.2±5.0)min。因本研究樣本量較小，故未進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。目前已有COVID-19患者采用CP治療的報(bào)道，該方法具有一定的療效[12-13]，因此未來還可以進(jìn)一步研究COVID-19康復(fù)者血漿中IgG抗體的免疫應(yīng)答規(guī)律并制備人免疫球蛋白制劑[14]，以實(shí)現(xiàn)對(duì)COVID-19更好的治療和預(yù)防。

CP采集也與單采血小板存在諸多不同之處[15]：(1)捐獻(xiàn)者身份。日常工作中面對(duì)的捐獻(xiàn)者都身體健康且有多次獻(xiàn)血經(jīng)歷，而CP采集面對(duì)的是大病初愈且無獻(xiàn)血經(jīng)歷的COVID-19康復(fù)者,需工作人員對(duì)其加強(qiáng)獻(xiàn)漿知識(shí)宣教和心理引導(dǎo)。(2)工作場(chǎng)所和工作流程[16-17]。CP是在獨(dú)立場(chǎng)所完成采集，全過程存在感染源暴露風(fēng)險(xiǎn)。工作人員采用2級(jí)防護(hù)，增加了操作的難度。(3)CP捐獻(xiàn)者需提前預(yù)約時(shí)間，由專車專人接送。捐獻(xiàn)者全程佩戴一次性外科口罩，工作人員在獻(xiàn)血過程的護(hù)理，以及捐獻(xiàn)后的注意事項(xiàng)的講解應(yīng)該更加仔細(xì)。(4)享受的榮譽(yù)和待遇。捐獻(xiàn)CP 200 mL視為捐獻(xiàn)1次全血，并發(fā)放獻(xiàn)血證、獻(xiàn)漿專屬紀(jì)念品和感謝狀。

綜上所述，此次COVID-19康復(fù)者CP采集工作順利、安全完成，可為完善突發(fā)事件中特殊血液采集的應(yīng)急預(yù)案提供參考。