莫超越,楊珍琳

1.廣西壯族自治區(qū)梧州市中醫(yī)醫(yī)院檢驗科，廣西梧州 543002；2.廣西壯族自治區(qū)梧州市長洲區(qū)興龍社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心，廣西梧州 543002

α-珠蛋白生成障礙性貧血(簡稱地貧)是由于α珠蛋白基因的缺失或功能缺陷(點突變)而導(dǎo)致α珠蛋白鏈合成障礙所引起的一組遺傳性溶血性疾病[1]。廣西是α-地貧的高發(fā)區(qū)，為了解梧州市新生兒α-地貧的發(fā)生率，筆者選取梧州市中醫(yī)醫(yī)院2018年8月至2019年8月出生的新生兒進(jìn)行臍帶血血紅蛋白(Hb)電泳，將出現(xiàn)Hb Bart′s帶的標(biāo)本視為α-地貧標(biāo)本，與無Hb Bart′s帶的標(biāo)本進(jìn)行紅細(xì)胞相關(guān)參數(shù)的比較，分析各指標(biāo)的差異。因Hb、紅細(xì)胞平均體積(MCV)、平均血紅蛋白含量(MCH)、平均血紅蛋白濃度(MCHC)、紅細(xì)胞分布寬度標(biāo)準(zhǔn)差(RDW-SD)、紅細(xì)胞計數(shù)(RBC)、紅細(xì)胞分布寬度變異系數(shù)(RDW-CV)等臍帶血參數(shù)在α-地貧的篩查中已有相關(guān)報道，但較少有紅細(xì)胞計數(shù)與血紅蛋白比值(RBC/Hb)、紅細(xì)胞計數(shù)與紅細(xì)胞平均體積比值(RBC/MCV)的相關(guān)報道，故本研究將其作為主要研究對象，并與既往文獻(xiàn)報道中關(guān)于篩查α-地貧有效的靜脈血參數(shù)進(jìn)行比較，挖掘其診斷α-地貧的最佳臨界值，為本地區(qū)應(yīng)用新生兒臍帶血診斷α-地貧尋找一些經(jīng)濟、快捷、準(zhǔn)確的指標(biāo)，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年8月至2019年8月在梧州市中醫(yī)醫(yī)院出生的696例新生兒(男367例，女329例)，將臍帶血進(jìn)行Hb電泳，把檢出的72例Hb Bart′s陽性標(biāo)本納入Hb Bart′s陽性組，將無Hb Bart′s帶的標(biāo)本作為電泳正常組(624例)。所選的新生兒經(jīng)產(chǎn)科醫(yī)師檢查，排除心、肺、肝、腎、腦等疾病，無腫瘤及感染性疾病。

1.2儀器與試劑 采用Sysmex XT-4000i及配套試劑對抗凝臍帶血進(jìn)行血液學(xué)分析；采用美國Helena SPIFE3000全自動電泳儀及配套的試劑、瓊脂板、掃描系統(tǒng)進(jìn)行臍帶血電泳分析。

1.3方法 EDTA-K2抗凝管取2 mL臍帶血混勻送檢，以3 000 r/min離心5 min，吸100 μL紅細(xì)胞加入5 mL生理鹽水中充分混勻、洗滌，離心8 min，吸走上清液，加270 μL蒸餾水，充分振蕩溶血，用四氯化碳抽提Hb后離心，取上層Hb液17 μL到點樣槽，按儀器設(shè)定程序和操作步驟進(jìn)行點樣、電泳、染色、脫色、烘干、膠片掃描、結(jié)果分析。

1.4診斷標(biāo)準(zhǔn)[2]以臍帶血Hb電泳出現(xiàn)Hb Bart′s帶為新生兒α-地貧的診斷標(biāo)準(zhǔn)，根據(jù)Hb Bart′s含量分為4個類型：(1)靜止型，1%～<3%；(2)標(biāo)準(zhǔn)型，3%～<20%；(3)中間型，20%～40%；(4)重型(又稱Hb Bart′s胎兒水腫綜合征)，>80%。

2 結(jié) 果

2.1臍帶血Hb Bart′s陽性率統(tǒng)計分析 2018年8月至2019年8月696例臍帶血標(biāo)本中共檢出Hb Bart′s陽性標(biāo)本72份，陽性率為10.34%。其中靜止型14例，陽性率為2.01%；標(biāo)準(zhǔn)型57例，陽性率為8.19%；中間型1例，陽性率為0.14%。α-地貧各類型中以標(biāo)準(zhǔn)型為主，占79.17%，靜止型占19.44%，中間型占1.39%。

2.2各型α-地貧男女發(fā)生率比較 696例臍帶血標(biāo)本檢出情況：靜止型中男性檢出8例，占1.15%(8/696)，女性檢出6例，占0.86%(6/696)；標(biāo)準(zhǔn)型中男性檢出35例，占5.03%(35/696)，女性檢出22例，占3.16%(22/696)；中間型1例為男性，占0.14%(1/696)。

2.3男女性α-地貧的發(fā)生率比較 696例采集臍帶血的新生兒中男367例，女329例。男性中檢出正常323例，α-地貧44例；女性中檢出正常301例，α-地貧28例。男女性α-地貧的發(fā)生率比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=2.26，P>0.05)。

2.4Hb Bart′s陽性組與電泳正常組紅細(xì)胞相關(guān)參數(shù)比較 Hb Bart′s陽性組新生兒臍帶血RBC、RDW-CV、RBC/Hb、RBC/MCV水平高于電泳正常組，而Hb、MCV、MCH、MCHC、RDW-SD水平低于電泳正常組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 Hb Bart′s陽性組與電泳正常組紅細(xì)胞相關(guān)參數(shù)比較

組別nRDW-SD(fL)RDW-CV(%)RBC/HbRBC/MCVHb Bart's陽性組7254.1±5.6 17.8±1.73.60±0.335.56±1.10電泳正常組 62462.2±5.816.7±2.92.91±0.164.18±0.61t-11.375 3.265 29.77516.578P0.0010.0010.0010.001

2.5Hb Bart′s陽性組不同性別間紅細(xì)胞相關(guān)參數(shù)比較 各參數(shù)間的性別差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表2 Hb Bart′s陽性組不同性別間紅細(xì)胞相關(guān)參數(shù)比較

項目nRDW-SD(fL)RDW-CV(%)RBC/HbRBC/MCV男4454.4±6.317.8±2.0 3.60±0.33 5.58±0.98女2853.7±4.417.8±1.2 3.56±0.345.43±1.13t 0.506 -0.1450.8290.342P0.6150.8850.410 0.560

2.6紅細(xì)胞相關(guān)參數(shù)診斷α-地貧的效能評價 MCH、RBC/Hb、MCV、RDW-SD、RBC/MCV、MCHC的曲線下面積(AUC)分別是0.954、0.952、0.946、0.888、0.862、0.850，而RBC、Hb、RDW-CV分別為0.737、0.764、0.754，均小于0.800。部分結(jié)果見表3。分析RBC/Hb、RBC/MCV兩個參數(shù)的約登指數(shù)，得到兩個參數(shù)的診斷臨界值、靈敏度和特異度，當(dāng)RBC/MCV為4.741 8時，其診斷α-地貧的靈敏度為79.2%，特異度為84.8%，RBC/Hb為3.201 3時，其診斷α-地貧的靈敏度為86.1%,特異度為96.3%。

表3 部分紅細(xì)胞相關(guān)參數(shù)診斷α-地貧的效能

3 討 論

α-地貧是α珠蛋白基因缺失或點突變導(dǎo)致血紅蛋白中1種或1種以上珠蛋白鏈合成缺失或不足所導(dǎo)致的貧血[3]。α珠蛋白基因位于16號染色體短臂上，健康者可自父母雙方繼承2個α珠蛋白基因合成足量的α珠蛋白鏈，若遺傳了父母中有缺陷的α珠蛋白基因，則根據(jù)α珠蛋白基因缺失數(shù)目及點突變的不同，臨床上把α-地貧分成靜止型、標(biāo)準(zhǔn)型、中間型、重型4種類型[4]。其中靜止型α-地貧是由于缺失1個α珠蛋白基因或者點突變而造成Hb組分合成異常，因其一般無明顯的臨床癥狀而易被忽視；標(biāo)準(zhǔn)型α-地貧則是因為有2個α珠蛋白基因缺失或點突變導(dǎo)致，一般情況下也無明顯臨床表現(xiàn)，部分患者可能出現(xiàn)輕度溶血癥狀，也易被忽視；中間型則是由3個α珠蛋白基因缺失或點突變引起，可因出現(xiàn)慢性溶血性貧血癥狀而受到關(guān)注；重型則是由4個α珠蛋白基因缺失或點突變引起，主要表現(xiàn)為新生兒在胎兒期不能合成正常的胎兒血紅蛋白(HbF)而導(dǎo)致全身水腫、肝脾腫大、腹部膨隆、四肢短小，大部分胎兒在宮內(nèi)死亡或出生后1～2 h內(nèi)死亡。

Hb Bart′s是新生兒臍帶血中特殊的Hb，是α-地貧患者胎兒期的一個重要特征，也是國際公認(rèn)的診斷α-地貧簡便、有效的指標(biāo)[5]。Hb Bart′s作為α-地貧基因攜帶者的早期篩查指標(biāo)，能有效檢出α-地貧患兒[6]。在新生兒臍帶血中，不同類型的α-地貧可檢測到不同含量的 Hb Bart′s[7]。

本研究檢出Hb Bart′s陽性標(biāo)本72例，陽性率為10.34%，比廣西其他地區(qū)α-地貧人群攜帶率(14.95%)[8-9]低。72例α-地貧新生兒中男44例，女28例，男女間α-地貧的發(fā)生率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。本地區(qū)α-地貧以標(biāo)準(zhǔn)型為主，占79.17%，靜止型占19.44%，中間型占1.39%，也提示了本地區(qū)α-地貧的類型主要為標(biāo)準(zhǔn)型和靜止型，與百色地區(qū)結(jié)果相同[10]。由于在半歲后α-地貧中的靜止型和部分標(biāo)準(zhǔn)型患兒其臨床表現(xiàn)與健康人無明顯差異，在基層地區(qū)，婚育時容易漏掉這部分人群，加大了下一代地貧患兒的出生風(fēng)險。

成人靜脈血紅細(xì)胞相關(guān)參數(shù)MCV、MCH用于α-地貧的篩查及與α-地貧基因的相關(guān)性已有報道[8]，臍帶血MCV、MCH、MCHC應(yīng)用于診斷新生兒α-地貧也有研究報道[11]。本研究結(jié)果顯示，Hb Bart′s陽性組新生兒臍帶血RBC、RDW-CV、RBC/Hb、RBC/MCV高于電泳正常組，而Hb、MCV、MCH、MCHC、RDW-SD低于電泳正常組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，與文獻(xiàn)[12]報道結(jié)果相符。這說明α-地貧患兒在胎兒期即表現(xiàn)為小細(xì)胞低色素性貧血，臍帶血紅細(xì)胞相關(guān)參數(shù)可作為篩查α-地貧的有效指標(biāo)。本研究還發(fā)現(xiàn)Hb Bart′s陽性組臍帶血紅細(xì)胞參數(shù)在性別間的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。由于各參數(shù)的應(yīng)用價值不同，本研究通過ROC曲線評估其診斷效能：MCH>RBC/Hb>MCV>RDW-SD>RBC/MCV>MCHC，以上參數(shù)的AUC均大于0.800，有較高的應(yīng)用價值。而MCH的診斷效能優(yōu)于MCV，與文獻(xiàn)[13-14]報道一致。建議臨床在篩查診斷α-地貧時按診斷效能高低選擇相關(guān)參數(shù)作為判斷依據(jù)，提高診斷的準(zhǔn)確度。

本研究發(fā)現(xiàn)，RBC/Hb、RBC/MCV有較高的應(yīng)用價值，有研究報道RBC/MCV>5.9用于篩查成人α-地貧的靈敏度為95.0%,特異度為91.0%，MCV/RBC應(yīng)用于診斷α-地貧的靈敏度為91.67%，特異度為90.09%[15-16]，說明這兩個指標(biāo)用于診斷α-地貧較為理想。由于新生兒臍帶血的MCV大于成人，因此RBC/MCV>5.9不適宜用于新生兒α-地貧篩查。筆者進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，臍帶血RBC/MCV為4.741 8時，其診斷α-地貧的靈敏度為79.2%,特異度為84.8%，RBC/Hb為3.201 3時，其診斷α-地貧的靈敏度為86.1%,特異度為96.3%，是較理想的指標(biāo)。究其原因可能是因為α-地貧患兒紅細(xì)胞利用鐵發(fā)生障礙,原卟啉與鐵結(jié)合受到阻礙,引起小細(xì)胞低色素性貧血,MCV降低，而另一方面由于珠蛋白鏈合成異常導(dǎo)致Hb下降,機體促紅細(xì)胞生成素生成增加而促使紅細(xì)胞代償性增多,導(dǎo)致RBC結(jié)果與Hb、MCV相背離。

綜上所述，以臍帶血紅細(xì)胞相關(guān)參數(shù)作為α-地貧的篩查指標(biāo)，具有準(zhǔn)確、經(jīng)濟、便捷的特點，有利于各級醫(yī)療單位，尤其是基層單位開展地貧的防治工作，能及早地為α-地貧基因攜帶患兒立卡建檔，降低α-地貧基因攜帶者成年后相互婚配導(dǎo)致重癥地貧患兒出生的概率，對優(yōu)生優(yōu)育及提高人口質(zhì)量具有重要意義。