劉紅玲

江蘇省宿遷市沭陽縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇宿遷 223600

隨著自身免疫抗體篩查等檢測手段的廣泛應(yīng)用，自身免疫性肝炎(AIH)的檢出率呈升高趨勢，AIH的主要臨床表現(xiàn)是免疫性肝細(xì)胞損害，伴丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)水平升高，γ-球蛋白比例上調(diào)和淋巴細(xì)胞的炎性反應(yīng)及緩慢進(jìn)展的肝纖維化[1]。目前的研究認(rèn)為，AIH的發(fā)生機(jī)制主要與環(huán)境、遺傳和免疫狀態(tài)的改變有關(guān)，AIH引起的慢性炎癥會(huì)直接導(dǎo)致肝細(xì)胞損傷和肝纖維化，最終導(dǎo)致肝硬化甚至肝衰竭[2]。定期檢測AIH相關(guān)自身免疫抗體水平是進(jìn)行病情評(píng)估的常用方法，但仍需尋找更多與病情進(jìn)展和監(jiān)測相關(guān)的指標(biāo)。目前，紅細(xì)胞分布寬度(RDW)在AIH病情監(jiān)測中的應(yīng)用已成為研究熱點(diǎn)。有研究證實(shí)，RDW與AIH的病情進(jìn)展具有較好的相關(guān)性，并認(rèn)為RDW是AIH肝硬化轉(zhuǎn)歸的獨(dú)立危險(xiǎn)因素[3]，但是鮮有研究關(guān)注RDW對(duì)該類患者血清球蛋白占比和炎癥因子等相關(guān)指標(biāo)的影響。故本研究分析了RDW在這方面的影響，并探討RDW與AIH肝硬化的關(guān)系，以求為AIH的病情監(jiān)測和預(yù)后判斷提供依據(jù)和建議。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2017年1月至2020年1月在本院就診120例AIH患者作為AIH組，其中AIH合并肝硬化患者43例、未合并肝硬化患者77例，平均年齡(55.7±13.4)歲，男34例、女86例。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)年齡≥18周歲；(2)符合AIH的診斷指南[1]；(3)完成1年的隨訪；(4)具有完整的臨床實(shí)驗(yàn)室檢查記錄。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并其他肝臟疾病，如病毒性肝炎；(2)合并嚴(yán)重的心腦血管疾??；(3)合并惡性腫瘤；(4)有酗酒、吸煙史。另選取同期140例慢性乙型肝炎患者作為病毒性肝炎組(V組)，其中合并肝硬化患者51例、未合并肝硬化患者89例，平均年齡(55.2±11.8)歲，男42例、女98例；同期180例健康體檢者作為對(duì)照組，平均年齡(56.3±12.6)歲，男63例、女117例。3組受試者年齡、性別等一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有研究對(duì)象及其家屬均簽署知情同意書。

1.2方法 抽取研究對(duì)象肘靜脈血，采用紫色和黃色采血管，其中黃管3 000 r/min離心10 min后取血清。血常規(guī)指標(biāo)采用邁瑞B(yǎng)C-6800全自動(dòng)分析儀和配套試劑進(jìn)行檢測；肝、腎功能等生化指標(biāo)采用深圳邁瑞G92000全自動(dòng)分析儀和九強(qiáng)試劑進(jìn)行檢測；自身免疫抗體采用德國歐盟試劑公司產(chǎn)品(EURO Blot MasterⅡ)和原裝試劑進(jìn)行檢測；γ-球蛋白等血清蛋白采用西比亞毛細(xì)血管血清蛋白電泳儀(CAPILLARYS)和原裝試劑進(jìn)行檢測；白細(xì)胞介素(IL)-4、IL-6等炎癥因子采用相應(yīng)試劑盒(Sigma公司)進(jìn)行檢測。所有指標(biāo)的檢測均按照說明書進(jìn)行，出現(xiàn)陽性結(jié)果則需2位具有中級(jí)職稱的檢驗(yàn)師復(fù)核。

1.3觀察指標(biāo) (1)生化指標(biāo)，如ALT、AST和γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶(GGT)等；(2)自身免疫抗體，如抗核抗體(ANA)、抗平滑肌抗體(ASMA)、抗肝腎微粒體抗體(LKM)、抗肝細(xì)胞溶質(zhì)抗原1型抗體(LC-1)、抗可溶性肝抗原抗體(SLA/LP)；(3)血清球蛋白占比指標(biāo)，γ-球蛋白占比、β1-球蛋白占比等；(4)炎癥因子，如IL-4、IL-6、腫瘤壞死因子(TNF)-α和干擾素(IFN)-γ等；(5)血常規(guī)指標(biāo)，如RDW、血紅蛋白(Hb)等。

2 結(jié) 果

2.13組人群ALT、AST、GGT、RDW和Hb水平比較 3組人群的ALT、AST、GGT、RDW和Hb水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；兩兩比較中，AIH組的RDW水平明顯高于V組和對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；AIH組的ALT、AST水平較V組明顯降低，但明顯高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)； AIH組與V組的GGT和Hb水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，但AIH組、V組與對(duì)照組的GGT和Hb水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 3組人群ALT、AST、GGT、RDW和Hb水平比較

2.2RDW與AIH患者自身免疫抗體陽性率的關(guān)系 以RDW=14.7%為臨界值將AIH患者分為低值組(67例)和高值組(53例)，比較兩組患者自身免疫抗體陽性率，結(jié)果顯示，高值組的ANA陽性率與低值組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，而高值組患者LC-1、ASMA、LKM和SLA/LP的陽性率明顯高于低值組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表2 RDW與AIH患者自身免疫抗體陽性率的關(guān)系[n(%)]

2.3RDW與AIH患者血清球蛋白占比的關(guān)系 高值組患者的β1-球蛋白、α1-球蛋白和α2-球蛋白占比與低值組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；但高值組患者γ-球蛋白占比和β2-球蛋白占比明顯高于低值組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表3。

表3 RDW與AIH患者血清球蛋白占比的關(guān)系

2.4RDW與AIH患者炎癥因子水平的關(guān)系 兩組患者的IL-4、IL-10、TNF-α和IFN-γ水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；高值組患者的IL-2和IL-6水平明顯高于低值組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表4。

表4 RDW與AIH患者炎癥因子水平的關(guān)系

2.5RDW等觀察指標(biāo)與AIH肝硬化的關(guān)系 經(jīng)單因素分析發(fā)現(xiàn)，RDW、γ-球蛋白和β2-球蛋白占比與AIH肝硬化有關(guān)(P<0.05)；Logistic回歸分析顯示，RDW和γ-球蛋白占比是AIH肝硬化的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.05)，見表5。

表5 RDW等觀察指標(biāo)與AIH肝硬化的關(guān)系

3 討 論

本研究結(jié)果顯示，與健康體檢人群相比，AIH患者不僅肝功能指標(biāo)(如ALT、AST等)出現(xiàn)明顯異常，而且血常規(guī)指標(biāo)RDW亦顯著升高，提示AIH患者的RDW可能具有重要的臨床意義。本研究以RDW=14.7%為臨界值將患者進(jìn)行分組，比較低值組和高值組相關(guān)指標(biāo)的差異。經(jīng)分析發(fā)現(xiàn)，高值組的ANA陽性率與低值組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，但高值組患者LC-1、ASMA、LKM和SLA/LP的陽性率明顯高于低值組(P<0.05)。這說明RDW可能與該類患者的血清自身免疫抗體水平具有相關(guān)性，雖然本研究并未關(guān)注RDW與抗體滴度和相關(guān)核型的關(guān)系，但高值組AIH患者的自身免疫抗體具有更高的陽性率，提示該類患者可能具有更高的自身免疫性疾病發(fā)病率，其炎癥因子水平和自身免疫耐受可能出現(xiàn)失衡。AIH的發(fā)病機(jī)制雖然與多種因素相關(guān)，但是免疫調(diào)節(jié)的失衡和炎癥因子異常激活引起的肝臟損傷被認(rèn)為是重要的參與因素[4-7]。在本研究中，高值組患者的自身免疫抗體陽性率升高，說明該類患者自身免疫狀態(tài)的失衡更加明顯，免疫性肝損傷持續(xù)存在，可能會(huì)導(dǎo)致病情的持續(xù)進(jìn)展，甚至引起肝硬化[6]。

隨著對(duì)RDW的研究不斷深入，作為紅細(xì)胞相關(guān)參數(shù)的RDW被認(rèn)為與多種疾病的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)。有研究指出，RDW與腫瘤患者的治療療效有關(guān)，并能夠影響該類患者的預(yù)后[8-9]。亦有研究證實(shí)，RDW與心腦血管疾病的病情進(jìn)展和預(yù)后關(guān)系密切，高RDW的患者具有更高的再發(fā)腦卒中的可能性[10-11]。本研究發(fā)現(xiàn)，RDW不僅與AIH患者的自身免疫抗體陽性率有關(guān)，而且與AIH患者的血清球蛋白占比和炎癥因子水平具有關(guān)聯(lián)，結(jié)果顯示，高值組患者的β1-球蛋白占比、α1-球蛋白占比、α2-球蛋白占比與低值組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，但是在γ-球蛋白占比和β2-球蛋白占比的比較中，高值組患者明顯高于低值組(P<0.05)。此外，高值組患者的IL-2和IL-6水平明顯高于低值組(P<0.05)。AIH常伴隨γ-球蛋白水平的升高，本研究還發(fā)現(xiàn)，AIH患者β2-球蛋白的占比亦出現(xiàn)上升，主要的原因：隨著AIH病情的進(jìn)展，肝細(xì)胞損傷加重，部分患者出現(xiàn)不同程度的肝纖維化，而肝纖維化在血清蛋白電泳中的表現(xiàn)是β-球蛋白和γ-球蛋白占比升高，以及β-γ橋的出現(xiàn)，這提示RDW與患者的血清球蛋白水平異常具有關(guān)聯(lián)，并可能影響AIH患者的肝硬化轉(zhuǎn)歸。此外，高值組患者的IL-2和IL-6水平出現(xiàn)明顯的上調(diào)，這也說明該類患者處于高炎癥狀態(tài)，高炎癥狀態(tài)能夠?qū)е伦陨砻庖叩氖Ш猓M(jìn)而促進(jìn)病情的進(jìn)展[12]。

本研究還分析了RDW、肝功能指標(biāo)、炎癥因子水平與AIH患者肝硬化轉(zhuǎn)歸的關(guān)系，單因素分析發(fā)現(xiàn)，RDW、γ-球蛋白和β2-球蛋白占比與AIH肝硬化有關(guān)；多因素分析顯示，RDW和γ-球蛋白占比是AIH肝硬化的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。該結(jié)果證實(shí)RDW可以作為AIH患者肝硬化轉(zhuǎn)歸的監(jiān)測指標(biāo)，其可能的機(jī)制是RDW可以反映機(jī)體的炎癥狀態(tài)和自身免疫抗體的陽性情況， RDW高水平預(yù)示著自身免疫抗體的高陽性率和高炎癥狀態(tài)，而這些指標(biāo)與AIH患者的肝硬化轉(zhuǎn)歸密切相關(guān)，故RDW會(huì)影響AIH患者的肝硬化轉(zhuǎn)歸[4]。

綜上所述，RDW升高與AIH患者血清球蛋白占比和炎癥水平升高有關(guān)，RDW和γ-球蛋白占比是AIH患者肝硬化的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。