孫瑤 李云霞 柴美清 李青 韓鵬遠(yuǎn) 張鎖峰

摘要 以2種馬鞍菌為供試菌株，通過(guò)對(duì)其菌絲顏色、密度、均勻度、長(zhǎng)勢(shì)、菌絲生長(zhǎng)速度及菌絲生長(zhǎng)指數(shù)進(jìn)行比較，探討7種氮源對(duì)2種野生馬鞍菌菌絲生長(zhǎng)的影響。結(jié)果表明， 2種馬鞍菌對(duì)有機(jī)氮源、無(wú)機(jī)氮源、氨基酸氮源均能利用，說(shuō)明其有較廣的氮源譜，但利用程度有所差異，表現(xiàn)為有機(jī)氮源的培養(yǎng)基優(yōu)于無(wú)機(jī)氮源和氨基酸氮源的培養(yǎng)基。2種馬鞍菌在以牛肉膏為氮源時(shí)，菌絲潔白、濃密、均勻，菌絲長(zhǎng)勢(shì)為5分，菌絲生長(zhǎng)速度較快，菌絲生長(zhǎng)指數(shù)最高，分別達(dá)到45.5和45.0。綜合分析馬鞍菌菌絲生長(zhǎng)的最適氮源為牛肉膏。

關(guān)鍵詞 馬鞍菌;菌絲生長(zhǎng)速率;菌絲生長(zhǎng)指數(shù);氮源

中圖分類(lèi)號(hào) S 646? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A

文章編號(hào) 0517-6611（2021）21-0059-03

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2021.21.015

開(kāi)放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識(shí)碼（OSID）：

Effect of Different Nitrogen Sources on the Growth of Mycelia of Helvella elastica

SUN Yao，LI Yun-xia，CHAI Mei-qing et al

（Office of Research Administration，Shanxi Agricultural University， Taiyuan，Shanxi? 030031）

Abstract This experiment selected 2 kinds of Helvella elastica as the tested materials，the mycelium color，density，uniformity，growth，mycelium growth rate and mycelium growth index were compared to study the effects of seven nitrogen sources on the growth of mycelia on 2 kinds of Helvella elastica.The results showed that 2 kinds of Helvella elastica could use organic nitrogen sources， inorganic nitrogen sources， and amino acid nitrogen sources， which indicated that Helvella elastica had a wide spectrum of nitrogen sources.But the utilization degree was different， which showed that the organic nitrogen source medium was better than the inorganic nitrogen source medium and the amino acid nitrogen sources.When the beef extract was used as the nitrogen source，the mycelia of 2 kinds of Helvella elastica? white， dense and uniform，the mycelium growth was 5 points，the mycelium growth rate was fast， and the mycelium growth index was the highest， reaching 45.5 and 45.0， respectively.Comprehensive analysis of the most suitable nitrogen source for the growth of Helvella elastica was beef extract.

Key words Helvella elastica;Mycelium growth rate;Myceliaum growth index;Nitrogen sources

基金項(xiàng)目 山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)科技創(chuàng)新研究課題;山西“農(nóng)谷”研發(fā)專(zhuān)項(xiàng)“山西省馬鞍菌種質(zhì)資源調(diào)查研究與馴化初探”（YCX2020208）。

作者簡(jiǎn)介 孫瑤（1994—），女，山西永濟(jì)人，研究實(shí)習(xí)員，從事食用菌栽培研究。*通信作者，副研究員，從事食用菌方面的研究。

收稿日期 2021-06-11

馬鞍菌（Helvella elastica）是一種綠色珍稀的食用菌，在生物分類(lèi)學(xué)上隸屬于子囊菌門(mén)（Ascomyzcota）、盤(pán)菌綱（Discomycetes）、盤(pán)菌目（Pezizales）、馬鞍菌科（Helvellaceae）、馬鞍菌屬（Helvella）[1]。馬鞍菌中含有氨基酸、生物堿、脂肪酸、糖醇和甾體化合物等，有調(diào)節(jié)人體脂質(zhì)代謝、治療和預(yù)防心腦血管疾病、抗炎、抗病毒、抗癌等功效[2-3]，是一種極具開(kāi)發(fā)價(jià)值的子囊菌類(lèi)野生食用菌。馬鞍菌在我國(guó)分布較廣泛，在黑龍江、吉林、陜西、山西、河北、青海、甘肅、四川、云南、江蘇、浙江、福建、新疆等地均有分布[4-5]。

氮源是食用菌菌絲生長(zhǎng)發(fā)育最重要的營(yíng)養(yǎng)源之一，是合成碳水化合物、核酸和蛋白質(zhì)的原料，可以為菌絲的生長(zhǎng)發(fā)育提供營(yíng)養(yǎng)成分[6-7]。不同食用菌對(duì)氮源的利用情況不同。目前，關(guān)于馬鞍菌的氮源利用情況的研究較少。筆者主要研究了不同氮源對(duì)2種野生馬鞍菌菌絲生長(zhǎng)的影響，旨在明確馬鞍菌菌絲生長(zhǎng)的最適氮源，為馬鞍菌的營(yíng)養(yǎng)生理特性、人工馴化栽培等提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)時(shí)間和地點(diǎn) 試驗(yàn)于2020年在山西農(nóng)業(yè)大學(xué)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行。

1.2 試驗(yàn)材料

1.2.1 菌種。菌株由筆者所在課題組野外采集、分離并純化所得，分別采集于山西省太原市婁煩縣、忻州市五臺(tái)山，菌株編號(hào)分別為M2和M7。

1.2.2 培養(yǎng)基?；A(chǔ)培養(yǎng)基：馬鈴薯200 g，蛋白胨4 g，葡萄糖10 g，瓊脂粉20 g，磷酸二氫鉀2 g，硫酸鎂1 g，去離子水1 000 mL，pH自然。

1.3 試驗(yàn)方法

采用平板培養(yǎng)法，測(cè)定不同培養(yǎng)基上馬鞍菌的菌落直徑，并對(duì)菌落長(zhǎng)勢(shì)進(jìn)行評(píng)分，研究不同氮源對(duì)馬鞍菌菌絲生長(zhǎng)的影響。觀察、記錄每個(gè)菌株的菌落直徑、顏色、長(zhǎng)勢(shì)、疏密度、平均生長(zhǎng)速率等情況。

具體評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：5分，菌絲長(zhǎng)勢(shì)濃密，均勻;4分，菌絲長(zhǎng)勢(shì)較濃密，較均勻;3分，菌絲長(zhǎng)勢(shì)較稀疏，較均勻;2分，菌絲長(zhǎng)勢(shì)較稀疏，不均勻;1分，菌絲長(zhǎng)勢(shì)稀疏，不均勻。

1.4 不同氮源對(duì)馬鞍菌菌絲生長(zhǎng)的影響 分別用等量的供試氮源代替基礎(chǔ)培養(yǎng)基中的蛋白胨，以不加氮源為對(duì)照，研究不同氮源對(duì)馬鞍菌菌絲生長(zhǎng)的影響，每個(gè)處理重復(fù)5次。供試培養(yǎng)基氮源為蛋白胨、牛肉膏、酵母膏、硝酸銨、甘氨酸、尿素。

菌絲生長(zhǎng)指數(shù)=菌絲長(zhǎng)勢(shì)評(píng)分×菌絲生長(zhǎng)速率

1.5 數(shù)據(jù)處理 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Microsoft Excel 2003軟件進(jìn)行處理，SPSS軟件進(jìn)行顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同氮源對(duì)馬鞍菌菌絲生長(zhǎng)的影響

由表1可知，2種野生馬鞍菌在不同氮源培養(yǎng)基上均能生長(zhǎng)，說(shuō)明馬鞍菌的氮源利用譜較廣。不同馬鞍菌在同種氮源培養(yǎng)基上，其菌絲生長(zhǎng)情況基本相似，M7略優(yōu)于M 說(shuō)明不同馬鞍菌對(duì)氮源的選擇可能相同。但同種馬鞍菌在不同培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)情況不同。從菌絲顏色來(lái)看，2種馬鞍菌在不同氮源培養(yǎng)基上，顏色均呈潔白色;從菌絲密度、均勻度和長(zhǎng)勢(shì)評(píng)分來(lái)看，M2和M7馬鞍菌均在牛肉膏培養(yǎng)基上生長(zhǎng)最好，菌絲濃密、均勻、長(zhǎng)勢(shì)評(píng)分達(dá)5分，其次是在酵母膏、蛋白胨、CK培養(yǎng)基上生長(zhǎng)較好，而在硝酸銨、甘氨酸、尿素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)較差，尤其是在尿素培養(yǎng)基上菌絲稀疏，評(píng)分只有1分。由此可見(jiàn)，馬鞍菌在有機(jī)氮源培養(yǎng)基上的菌絲生長(zhǎng)情況優(yōu)于無(wú)機(jī)氮源和氨基酸氮源培養(yǎng)基。

2.2 不同氮源對(duì)馬鞍菌菌絲生長(zhǎng)速率的影響

由表2可知，2種野生馬鞍菌在不同氮源培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)速率基本相似，都是在硝酸銨培養(yǎng)基上生長(zhǎng)較快，達(dá)9.5 mm/d，其次是在蛋白胨、牛肉膏、CK培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)速率在9.0 mm/d以上，而在尿素培養(yǎng)基上均生長(zhǎng)較慢，分別只有5.2和4.6 mm/d。整體來(lái)看，M2馬鞍菌在各個(gè)培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)速率略高于M7馬鞍菌。方差分析結(jié)果表明，2種野生馬鞍菌在蛋白胨、牛肉膏、酵母膏、硝酸銨培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)速率無(wú)顯著差異，但在甘氨酸和尿素培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)速率均極顯著低于其他培養(yǎng)基。

2.3 不同氮源對(duì)馬鞍菌菌絲生長(zhǎng)的影響

由圖1可知，2種野生馬鞍菌在7種氮源培養(yǎng)基上的菌絲生長(zhǎng)指數(shù)不同。對(duì)于同種培養(yǎng)基、不同馬鞍菌，M2馬鞍菌菌絲生長(zhǎng)指數(shù)均略高于M7馬鞍菌（除甘氨酸），但差異不顯著。對(duì)于同種馬鞍菌、不同培養(yǎng)基，則表現(xiàn)為M2和M7馬鞍菌均是在牛肉膏培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)指數(shù)最高，分別達(dá)45.5和45.0，其次是在酵母膏、蛋白胨、CK培養(yǎng)基菌絲生長(zhǎng)指數(shù)較高，再次是硝酸銨、甘氨酸培養(yǎng)基，而二者均在尿素培養(yǎng)基上的菌絲生長(zhǎng)指數(shù)較小，只有5.2和4.6。

3 結(jié)論

該驗(yàn)結(jié)果表明，2種馬鞍菌在有機(jī)氮源、無(wú)機(jī)氮源、氨基酸氮源培養(yǎng)基上均能生長(zhǎng)，說(shuō)明馬鞍菌對(duì)氮源的利用較為廣泛，但利用程度有所差異，表現(xiàn)為有機(jī)氮源優(yōu)于無(wú)機(jī)氮源、氨基酸氮源。2種馬鞍菌在以牛肉膏為氮源時(shí)，菌絲潔白、濃密、均勻，菌絲長(zhǎng)勢(shì)為5分，菌絲生長(zhǎng)速度較快，菌絲生長(zhǎng)指數(shù)最高，分別達(dá)45.5和45.0。綜合分析馬鞍菌菌絲生長(zhǎng)的最適氮源為牛肉膏。

4 討論

氮源是食用菌菌絲生長(zhǎng)發(fā)育最重要的營(yíng)養(yǎng)源之一，是合成碳水化合物、核酸和蛋白質(zhì)的原料，可以為菌絲的生長(zhǎng)發(fā)育提供營(yíng)養(yǎng)成分。該試驗(yàn)中，供試氮源包括有機(jī)氮源、無(wú)機(jī)氮源和氨基酸氮源，結(jié)果顯示，有機(jī)氮源要優(yōu)于無(wú)機(jī)氮源和氨基酸氮源，這與多數(shù)食用菌對(duì)氮源的利用情況相似[8-10]。這是因?yàn)橛袡C(jī)氮源中含有豐富的蛋白質(zhì)，可以滿足菌絲生長(zhǎng)的需求，有利于酶的代謝，而無(wú)機(jī)氮源和氨基酸氮源成分比較單一，難以完全滿足菌絲對(duì)微量元素、生長(zhǎng)因子等的需要，所以效果相對(duì)較差[11-12]。

國(guó)內(nèi)外對(duì)馬鞍菌母種培養(yǎng)基的研究較少，其中何培新等[13]對(duì)河南省野生馬鞍菌進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)最適氮源為蛋白胨，徐麗娜[14]對(duì)山西省野生馬鞍菌進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)最適氮源為酵母浸膏，在蛋白胨上反而生長(zhǎng)最慢，而該試驗(yàn)結(jié)果顯示2種馬鞍菌在牛肉膏培養(yǎng)基上均比在酵母膏和蛋白胨培養(yǎng)基上生長(zhǎng)要好。這與紫紅蘑菇[15]、花臉香蘑[16]、荷葉離褶傘[17]、黃傘[18]等食用菌在牛肉膏培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)特點(diǎn)相似，可能與牛肉膏中含有的礦物質(zhì)、維生素類(lèi)及核苷酸類(lèi)的水溶性等物質(zhì)有關(guān)[19]。

該試驗(yàn)結(jié)果顯示2種馬鞍菌均在尿素培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)緩慢，極顯著低于其他培養(yǎng)基，其菌絲稀疏、長(zhǎng)勢(shì)評(píng)分低、生長(zhǎng)指數(shù)小，因此，并不推薦尿素作為馬鞍菌的氮源。這與羊肚菌[20-23]、杏鮑菇[24]、點(diǎn)柄粘蓋牛肝菌[25]、繡球菌[7]、秀珍菇[26]等食用菌在尿素培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)特點(diǎn)相似。可能是因?yàn)轳R鞍菌無(wú)法分解尿素來(lái)為菌絲生長(zhǎng)提供氮源，也可能是尿素分解釋放出的氫氰酸和氨影響了菌絲的生長(zhǎng)[27-28]。

該試驗(yàn)僅研究了不同氮源對(duì)2種馬鞍菌菌絲生長(zhǎng)的影響，對(duì)于其他產(chǎn)地不同品種的馬鞍菌及不同碳源、不同碳氮比、不同溫度、pH等其他相關(guān)的營(yíng)養(yǎng)生理特性還有待進(jìn)一步研究。

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