張景杰 劉志軍

1）商丘市第三人民醫(yī)院，河南 商丘 476000 2）河南大學(xué)附屬淮河醫(yī)院，河南 開封 475000

腦膠質(zhì)瘤約占顱內(nèi)腫瘤的45%，是成人中樞神經(jīng)系統(tǒng)最為常見的惡性腫瘤［1］，其顯著特征是患者生存期短、預(yù)后差，且腫瘤細(xì)胞的侵襲性及惡性增殖生長，復(fù)發(fā)率高［2］。腦膠質(zhì)瘤屬于一類顱腦腫瘤，腦膠質(zhì)瘤的重要臨床特征之一是侵襲性強(qiáng)，目前尚不十分清楚其發(fā)生機(jī)制［3］。據(jù)臨床統(tǒng)計(jì)，惡性腦膠質(zhì)瘤5 a 病死率僅次于肺癌和胰腺癌，居全身腫瘤的第3 位。臨床對于確診的腦膠質(zhì)瘤的治療，手術(shù)為主要方法，不過也發(fā)現(xiàn)腦膠質(zhì)瘤存在非常強(qiáng)的侵襲性，經(jīng)手術(shù)可能無法一次性徹底清除，術(shù)后仍存在復(fù)發(fā)以及轉(zhuǎn)移的風(fēng)險［5］。腦膠質(zhì)瘤的臨床診斷主要依靠術(shù)后的病理檢查和術(shù)前影像學(xué)檢查，近年來，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)深入研究腦膠質(zhì)瘤的生物分子學(xué)，逐漸發(fā)現(xiàn)腦膠質(zhì)瘤的發(fā)生、發(fā)展關(guān)系極為密切的是細(xì)胞因子的參與［6-7］。研究發(fā)現(xiàn)，單核細(xì)胞趨化蛋白-1（monocyte chemotactic protein1，MCP-1）、白 介 素-17（interleukin-17，IL-17）、腫 瘤 壞 死 因 子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）均在腦膠質(zhì)瘤轉(zhuǎn)移、侵襲過程中發(fā)揮促進(jìn)作用［8-9］。白細(xì)胞介素-17（IL-17）在顱內(nèi)腫瘤中的研究多集中于體外研究，報(bào)道顯示IL-17 與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展等一系列過程密切相關(guān)，是一種具有促進(jìn)炎癥作用的細(xì)胞因子［10-11］。MCP-1 即單核細(xì)胞趨化蛋白-1（monocyte chemoattractant protein-1）是其家族中最先被克隆的趨化因子，近年通過對MCP-1 深入研究發(fā)現(xiàn)，屬趨化因子CC 類家族，是具有活化、趨化單核巨噬細(xì)胞的一類趨化因子，在多種疾病的發(fā)生和發(fā)展過程中作用關(guān)鍵［12-13］。TNF-α是一種腫瘤壞死因子，其表達(dá)水平調(diào)控大量惡性腫瘤甚至良性疾病的發(fā)生和發(fā)展過程［14］。為了解血清IL-17、MCP-1、TNF-α指標(biāo)與腦膠質(zhì)瘤的具體關(guān)系，本研究以100 例腦膠質(zhì)瘤患者及50 例健康者為對象，均進(jìn)行上述指標(biāo)水平的測定，探討其在腦膠質(zhì)瘤術(shù)后療效判斷中的價值。

1 對象及方法

1.1 對象選取商丘市第三人民醫(yī)院2015-01—2019-02 收治的100 例腦膠質(zhì)瘤患者為觀察組，均接受微創(chuàng)手術(shù)治療，另選取50例健康受檢者作對照組。觀察組男56 例，女44 例；年齡32～59（45.28±10.36）歲；病理分級：Ⅰ級27 例，Ⅱ級25 例，Ⅲ級26 例，Ⅳ級22例；對照組男28 例，女22 例；年齡32～58（46.59±10.14）歲。2組年齡、性別差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）符合腦膠質(zhì)瘤診斷標(biāo)準(zhǔn)；（2）具有病理結(jié)果，經(jīng)影像學(xué)檢查證實(shí)；（3）接受顯微鏡下腦膠質(zhì)瘤切除；（4）患者簽署知情同意書，獲得倫理委員會批準(zhǔn)。

排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）合并其他腫瘤者；（2）合并明顯感染者；（3）以往接受過放療或化療者；（4）以往接受過激素治療者；（5）合并心、肝、肺、腎嚴(yán)重疾病者；（6）合并免疫系統(tǒng)疾病者；（7）合并內(nèi)分泌疾病者。

1.2 方法所有研究對象均在清晨空腹?fàn)顟B(tài)下收集4 mL 靜脈血液作為檢測標(biāo)本，于4 ℃的環(huán)境下進(jìn)行持續(xù)15 min 的離心處理，離心速度3 000 r/min，收集上層血清等待檢測。使用配套試劑盒在酶聯(lián)免疫吸附法下測定血清IL-17、MCP-1、TNF-α水平。對照組僅接受一次測定，觀察組患者分別在術(shù)前1 d、術(shù)后2周相應(yīng)進(jìn)行一次測定。

1.3 評價指標(biāo)比較不同分級的腦膠質(zhì)瘤患者與對照組血清IL-17、MCP-1、TNF-α水平。比較觀察組高級別（Ⅲ～Ⅳ級）、低級別（Ⅰ～Ⅱ級）腦膠質(zhì)瘤患者術(shù)前1 d、術(shù)后2 周血清IL-17、MCP-1、TNF-α水平。比較觀察組術(shù)后復(fù)發(fā)、未復(fù)發(fā)及死亡、存活患者的血清IL-17、MCP-1、TNF-α水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法數(shù)據(jù)通過統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 22.0 分析，計(jì)數(shù)資料以率為（%）表示，行χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，行t檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2 組血清IL-17、MCP-1、TNF-α水平比較隨著病理分級增高，觀察組IL-17水平逐漸升高，MCP-1、TNF-α水平逐漸下降，觀察組各級IL-17、MCP-1、TNF-α水平與對照組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 2組血清IL-17、MCP-1、TNF-α水平比較 （±s）Table 1 Comparison of serum IL-17, MCP-1 and TNF-α levels in the two groups （±s）

表1 2組血清IL-17、MCP-1、TNF-α水平比較 （±s）Table 1 Comparison of serum IL-17, MCP-1 and TNF-α levels in the two groups （±s）

注：與Ⅰ級比較，*P＜0.05，與Ⅱ級比較，&P＜0.05，與Ⅲ級比較，#P＜0.05；與觀察組各組比較，△P＜0.05

組別n觀察組Ⅰ級Ⅱ級Ⅲ級Ⅳ級27 25 26 22 t 組內(nèi)P 組內(nèi)對照組50 t 組間P 組間IL-17（ng/L）63.28±13.21 75.45±15.28*98.58±18.62&*114.27±21.37#&*19.146＜0.001 34.26±10.19△10.313＜0.001 MCP-1（pg/mL）355.69±95.27 287.42±52.13*233.62±45.30&*185.24±37.19#&*17.250 0.001 447.85±96.38△9.486＜0.001 TNF-α（ng/L）16.52±2.95 13.43±3.24*9.13±2.57&*7.54±2.19#&*13.277 0.011 2.35±1.65△11.344＜0.001

2.2 觀察組術(shù)前、術(shù)后血清IL-17、MCP-1、TNF-α水平低級別組、高級別組術(shù)后2周血清IL-17、MCP-1、TNF-α水平與術(shù)前1 d 比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），高級別組術(shù)前1 d、術(shù)后2 周血清各指標(biāo)水平與低級別組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 觀察組高、低級別患者手術(shù)前后血清IL-17、MCP-1、TNF-α水平比較 （±s）Table 2 Comparison of the levels of serum IL-17，MCP-1，TNF-α before and after surgery for highand low-grade patients in the observation group （±s）

表2 觀察組高、低級別患者手術(shù)前后血清IL-17、MCP-1、TNF-α水平比較 （±s）Table 2 Comparison of the levels of serum IL-17，MCP-1，TNF-α before and after surgery for highand low-grade patients in the observation group （±s）

注：與低級別術(shù)前1 d比較，*P＜0.05；與低級別術(shù)后2周比較，&P＜0.05；與組內(nèi)術(shù)前1 d比較，#P＜0.05

組別TNF-α（ng/L）15.41±3.29 2.64±1.32#13.551＜0.001 10.19±2.31*4.56±2.09.900＜0.001 13.045 0.013 n低級別組52時間術(shù)前1 d術(shù)后2周t 組內(nèi)P 組內(nèi)高級別組48術(shù)前1 d術(shù)后2周t 組內(nèi)P 組內(nèi)t 組間P 組間IL-17（ng/L）64.23±12.24 39.56±8.59#23.376 0.020 105.41±11.37*62.23±10.18.676 0.012 18.855 0.118 MCP-1（pg/mL）318.59±85.27 437.46±101.27#24.240 0.017 206.37±84.24*381.12±70.65.350＜0.001 21.373 0.005

2.3 觀察組不同預(yù)后患者IL-17、MCP-1、TNF-α水平比較本組腦膠質(zhì)瘤患者均成功手術(shù)，術(shù)后存活1 a 以上者90 例（90.00%），2 a以上者83 例（83.00%）；術(shù)后隨訪2 a，存活的83 例 中 復(fù) 發(fā)16 例（19.28），未 復(fù) 發(fā)67 例（80.72%）。腦膠質(zhì)瘤術(shù)后復(fù)發(fā)患者血清IL-17、MCP-1、TNF-α水平與未復(fù)發(fā)患者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），術(shù)后存活患者血清IL-17、MCP-1、TNF-α水平與術(shù)后死亡患者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表3。

表3 觀察組不同預(yù)后患者血清IL-17、MCP-1、TNF-α比較 （±s）Table 3 Comparison of the levels of serum IL-17, MCP-1, TNF-α in different prognostic patients in the observation group （±s）

表3 觀察組不同預(yù)后患者血清IL-17、MCP-1、TNF-α比較 （±s）Table 3 Comparison of the levels of serum IL-17, MCP-1, TNF-α in different prognostic patients in the observation group （±s）

注：與未復(fù)發(fā)組比較，*P＜0.05，與死亡組比較，&P＜0.05

預(yù)后復(fù)發(fā)與否t值P值存活與否復(fù)發(fā)未復(fù)發(fā)存活死亡t值P值TNF-α（ng/L）11.64±2.58 5.02±1.62 13.241＜0.001 6.23±1.71 16.44±3.59 12.502 0.000 IL-17（ng/L）80.46±9.65 65.38±7.46 17.710＜0.001 72.56±8.42 121.26±10.27 19.330 0.001 MCP-1（pg/mL）346.85±72.40 402.36±89.64 23.056 0.015 400.51±92.19 320.19±64.18 21.372 0.013

3 討論

影像學(xué)方法是臨床診斷腦膠質(zhì)瘤的主要方法，雖診斷準(zhǔn)確率較高，不過無法對病理分期進(jìn)行準(zhǔn)確確定［15-17］。臨床關(guān)于腦膠質(zhì)瘤的病理分期可分為Ⅰ～Ⅳ期，一般將前兩期視作低級別病變，后兩期視作高級別病變，其中低級別病變預(yù)后明顯更優(yōu)，生存時間明顯更長，高級別病變惡變風(fēng)險高，生存時間明顯縮短［18］。由此可知，臨床準(zhǔn)確區(qū)別腦膠質(zhì)瘤的病變分級，指導(dǎo)臨床準(zhǔn)確判斷腦膠質(zhì)瘤病情，采取針對性的治療措施，對于改善患者預(yù)后非常重要。

炎性因子與腫瘤的出現(xiàn)及進(jìn)展緊密聯(lián)系，臨床將炎癥因子視作重要的腫瘤標(biāo)志物［19］。研究發(fā)現(xiàn)［20］，正常人腦膠質(zhì)細(xì)胞僅有極微量的IL-17 表達(dá)，腦膠質(zhì)瘤患者由于血-腦脊液屏障的破壞，IL-17 在高級別和低級別腦膠質(zhì)瘤、正常腦組織中表達(dá)依次降低，也可滲透到腫瘤中。IL-17 作用機(jī)制為細(xì)胞趨化作用，可調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)［21］。IL-17 為促炎癥因子，表達(dá)于胸腺細(xì)胞、上皮細(xì)胞及血管內(nèi)皮細(xì)胞［22］。IL-17 的分泌由于在腦膠質(zhì)瘤中Th17 的直接浸潤而顯著增加，因此IL-17具有抗腫瘤免疫和促膠質(zhì)瘤的雙重作用。雖然臨床還未發(fā)現(xiàn)IL-17 與腫瘤的關(guān)系機(jī)制，不過發(fā)現(xiàn)其可以對特定細(xì)胞形成刺激，生成多種細(xì)胞因子，細(xì)胞因子又緊密聯(lián)系腦膠質(zhì)瘤的出現(xiàn)及進(jìn)展。研究發(fā)現(xiàn)，IL-17 能夠直接加快腫瘤生長，也可能通過加快腫瘤血管生成或誘導(dǎo)其他細(xì)胞因子而加快腫瘤生長［23］。

TNF-α在人體分布很廣泛，在腦脊液和腦組織中可以微量表達(dá)，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的星形細(xì)胞、小膠質(zhì)細(xì)胞也可產(chǎn)生，但主要存在于外周血循環(huán)系統(tǒng)。TNF-α在機(jī)體正常情況下可來源于腫瘤細(xì)胞，但主要是免疫細(xì)胞。TNF-α在腦膠質(zhì)瘤發(fā)生后需要機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答時可大量分泌［24］。TNF-α屬于抗腫瘤細(xì)胞因子的一類，具體抗腫瘤機(jī)制體現(xiàn)在通過與腫瘤細(xì)胞結(jié)合，影響其內(nèi)部酸堿度，使酸堿平衡受損，從而對腫瘤細(xì)胞的生長形成抑制。另外，該指標(biāo)可使磷脂酶具有更強(qiáng)活性，進(jìn)而能夠降低腫瘤細(xì)胞內(nèi)核苷酸活性，加快腫瘤細(xì)胞滅亡［25］。研究［26］證實(shí)TNF-α發(fā)揮抗腫瘤作用通過調(diào)節(jié)膠質(zhì)瘤細(xì)胞內(nèi)的抑癌基因與凋亡基因的比例完成。TNF-α能夠增強(qiáng)白細(xì)胞的吞噬能力，TNF-α作為炎癥因子之一，可損傷腫瘤血管的內(nèi)皮細(xì)胞，從而損傷腫瘤血管，最終引起腫瘤出血壞死［27］；TNF-α還可通過活化磷脂酶而切斷DNA 序列，通過結(jié)合細(xì)胞膜調(diào)節(jié)打破細(xì)胞酸堿平衡能抑制腫瘤細(xì)胞，殺死腫瘤細(xì)胞［28］。

MPC-1 能經(jīng)不同組織細(xì)胞分泌，研究證實(shí)其在腫瘤細(xì)胞侵襲以及轉(zhuǎn)移中有非常重要的作用。MPC-1 能夠?qū)δ[瘤組織形成誘導(dǎo)，出現(xiàn)炎性浸潤，加快腫瘤的轉(zhuǎn)移以及增殖。另外其可以對腫瘤形成刺激，加快臨近形成更多新血管，使腫瘤組織的增殖具備足夠的營養(yǎng)［29］。隨著臨床不斷研究MCP-1 的功能和結(jié)構(gòu)，發(fā)現(xiàn)其在肺癌、結(jié)直腸癌、胃癌、鼻咽癌、口腔癌等研究中與腫瘤的生長、轉(zhuǎn)移等方面及惡性程度密切相關(guān)，MCP-1表達(dá)越豐富，膠質(zhì)瘤的病理級別越高［30-35］。

本研究顯示，各個級別的腦膠質(zhì)瘤患者血清IL-17、TNF-α水平明顯高于健康對照組，MCP-1 水平低于健康對照組（P＜0.05），表明腦膠質(zhì)瘤發(fā)生后血清IL-17、TNF-α水平會明顯升高，MCP-1 水平會明顯下降。觀察組中低級別、高級別患者術(shù)后血清IL-17、TNF-α水平明顯低于術(shù)前，MCP-1 水平明顯高于術(shù)前（P＜0.05），表明經(jīng)過微創(chuàng)手術(shù)治療，腦膠質(zhì)瘤患者血清IL-17、TNF-α、MCP-1 水平都能夠出現(xiàn)明顯改善。觀察組中復(fù)發(fā)及死亡的腦膠質(zhì)瘤患者血清IL-17、TNF-α水平明顯更高，MCP-1 水平明顯更低（P＜0.05），提示通過測定血清IL-17、TNF-α、MCP-1 指標(biāo)水平，不僅能夠輔助判斷腦膠質(zhì)瘤的病理分級，還能夠幫助評價臨床治療的效果，評估患者預(yù)后。

腦膠質(zhì)瘤患者微創(chuàng)手術(shù)前后血清IL-17、MCP-1、TNF-α水平會有明顯變化，通過測定這些指標(biāo)水平有助于輔助評價治療效果，進(jìn)行預(yù)后的判斷。