李廈潔，朱立莖，梁麗華

（東莞市石碣醫(yī)院，廣東 東莞 523290）

對(duì)于婦女在妊娠中的高血壓則是屬于妊娠期比較特有的一種疾病，以妊娠中晚期出有高血壓、水腫、蛋白尿等臨床特征。其病例變化主要是通過全身的小動(dòng)脈一般發(fā)生痙攣，一般在我國這種疾病的并發(fā)為10%左右。另外就是在此過程中，金屬基質(zhì)的蛋白酶（MMPS）能夠比較好的降低相關(guān)的外基質(zhì)的蛋白酶，各種成份可被其組織抑制物(tissueinhibitorsofmetalloproteinases, TIMPs)具有一定的抑制性, 其活性依賴于鈣、鎂等金屬性的離子濃度，參與創(chuàng)傷修復(fù)、腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移等過程，與排卵、受精卵著床、一般在胎盤形成的過程中，月經(jīng)已經(jīng)宮頸的擴(kuò)張等一些生殖系統(tǒng)的密切程度具有一定的相關(guān)性。另外就是對(duì)于MMP9 和TIMP1 則是互相的影響以及滋養(yǎng)層細(xì)胞的重要生化性的介質(zhì)，另外就是在癲癇的前期（PE）則是出現(xiàn)相關(guān)的高血壓、尿蛋白以及出現(xiàn)的各種的頭疼等眼花等針狀的發(fā)生，嚴(yán)重的患者則會(huì)出現(xiàn)相關(guān)的溶血以及血小板不斷的減少，對(duì)于妊娠期間的高血壓疾病主要威脅母嬰的健康，進(jìn)一步的嚴(yán)重會(huì)導(dǎo)致母嬰的死亡以及嬰兒發(fā)病率的不斷增加主要原因之一。根據(jù)相關(guān)的研究發(fā)現(xiàn)，該病對(duì)于細(xì)胞的滋養(yǎng)以及侵蝕子宮的螺旋的動(dòng)脈的線等以及胎盤生理性障礙具有一定的關(guān)系。一旦MMP-9 的滋養(yǎng)細(xì)胞植入到細(xì)胞中，則是發(fā)揮重要的作用。妊娠期高血壓疾病患者胎盤MMP-9 表達(dá)明顯低于正常妊娠，MMP-9 的相關(guān)的趨勢在不斷的下降，再有就是在妊娠期的高血壓患者M(jìn)MP-9 比較低的，這樣長期以往導(dǎo)致相關(guān)的細(xì)胞的能力不斷的出現(xiàn)下降的趨勢，繼而抑制了相關(guān)的細(xì)胞的侵入性，最后導(dǎo)致相關(guān)的發(fā)育不良，MMP-9 的滋養(yǎng)細(xì)胞的這種能力下降，進(jìn)一步的滋養(yǎng)潤了細(xì)胞的各種的潤侵性。最后導(dǎo)致的因素就是發(fā)育不良。MMP-9 具有一定的降解相關(guān)的細(xì)胞的外基質(zhì)的相關(guān)成分的作用，在ITMP-1 調(diào)控作用下，MMP-9 在相關(guān)的絨毛的滋養(yǎng)不斷的進(jìn)入相關(guān)的母體的細(xì)胞，這種進(jìn)入母體的細(xì)胞可以說發(fā)揮著一定的作用，隨著近些年人們對(duì)于妊娠的高血壓的發(fā)病率可以說不斷上升，其中對(duì)于孕婦、新生兒的死亡主要原因，但是就目前為止，對(duì)于其中的妊娠的高血壓的一些發(fā)病機(jī)理，醫(yī)生并不是非常的清楚，這個(gè)主要的核心可能是和胎盤的組織中的MMP-9 和ITMP-1 的相關(guān)表達(dá)具有一定的關(guān)系，其中根據(jù)我們相關(guān)的組織中的MMP-9 的表達(dá)能力在不斷的出現(xiàn)下降，進(jìn)一步的引起胎盤的局部出現(xiàn)缺血以及缺氧，最后導(dǎo)致相關(guān)的胎盤的妊娠的高血壓。

該研究通過測定正常孕婦、妊高癥、子癇前期、子癇前期重度各個(gè)級(jí)別的孕婦各15 例共60 例胎盤組織MMP9 的表達(dá)，本文的主要核心就是探索相關(guān)的基質(zhì)蛋白酶的9 在妊娠的高血壓期間的發(fā)病機(jī)理以及作用。

1 資料與方法

1.1 病例選擇標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn):①符合《婦產(chǎn)科學(xué)》中有關(guān)子癇前期的診斷及分類標(biāo)準(zhǔn)；②單胎妊娠，產(chǎn)前無明顯子宮收縮；③患者及其家屬知情同意后自愿參與本研究，并簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①存在慢性高血壓、心臟病、糖尿病、慢性腎病及免疫性疾病等病史；②臨床資料不完整；③不配合本研究者。1.2 一般資料

自2019年12月至2021年12月，我院正常孕婦、妊高癥、子癇前期、子癇前期重度各個(gè)級(jí)別的孕婦各15 例共60例為研究對(duì)象。病例均無其他產(chǎn)科并發(fā)癥及原發(fā)性肝腎疾病，年齡（27±1.7）周歲，平均孕周（37±1.1）周，各組間年齡及孕周均無顯著差異。1.3 方法

①標(biāo)本采集及處理：組織塊樣本提取，待胎盤娩出后，切取胎盤中央肉眼觀察無病變的組織1g，立即置于-20 攝氏度冰凍保存。②Western blot 測定組織中MMP-9 相關(guān)的表達(dá)水平，大約將相關(guān)的500mg 的組織以及樣本的加入其中大約是400ul%NP-40 的裂解溶液中上海江萊生物科技有限公司）混勻，一般在一定數(shù)量的蛋白酶進(jìn)行印制以后的4 攝氏度，轉(zhuǎn)速為10000r/min 下離心5min，不斷的進(jìn)行相關(guān)的溶液的測定以及蛋白的濃度，在相關(guān)的蛋白的20ug 上清野，加入相關(guān)的8%SDS 聚丙烯的凝膠中進(jìn)行相關(guān)的垂直電泳測定，然后在轉(zhuǎn)速的纖維的進(jìn)行互相的轉(zhuǎn)化。硝化纖維素膜與Anti-MMP9抗體（BA0573，boster）于4 攝氏度下過夜孵育（1:200）。③結(jié)果判定：通過灰度值計(jì)算得到MMP-9 的量, 其含量處于總體水平5%之下的樣本判定為陰性(-), 5% ～15%判定為弱陽性(+), 16% ～50%判定為陽性(++), >50%判定為強(qiáng)陽性(+++)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

所得數(shù)據(jù)用SPSS13.0 軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，根據(jù)資料性質(zhì)采用Kruskal-Wallis 秩和檢驗(yàn)和Spearman 秩相關(guān)，P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組比較，差異顯著性（P<0.01）即妊娠期高血壓疾病患者胎盤中MMP-9 含量明顯低于正常。詳見表1。

表1 MMP-9 在妊娠期高血壓疾病患者與正常妊娠患者胎盤母面中的表達(dá)及比較

2.2 結(jié)果顯示，妊高癥組的母嬰不良結(jié)局發(fā)生率顯著高于正常組，P<0.05，詳見表2。

表2 兩組母嬰不良并發(fā)癥發(fā)生率比較

2.3 結(jié)果顯示，MMP-9 表達(dá)水平與孕周、胎盤重量、胎兒體質(zhì)量均成正相關(guān)，P<0.05,詳見表3。

表3 MMP-9 表達(dá)水平與臨床相關(guān)因素的相關(guān)性

3 討論

近些年研究表明，妊娠的高血壓的并發(fā)疾病的發(fā)生的妊娠的早期的滋養(yǎng)不斷的侵蝕各種的相關(guān)的妊娠高血壓的患病以及各種的螺旋的小動(dòng)脈的血管的異常的現(xiàn)象，絨毛的滋養(yǎng)的相關(guān)侵蝕能力不斷的下降以及范圍不斷的縮小。這個(gè)過程的與MMP-9 失去的密切的相關(guān)。國外的學(xué)者對(duì)于MMP 的妊娠的高血壓疾病的相關(guān)的研究，在Kolben 等[11]利用相關(guān)的ELLSA 法子檢測提前的提前的溶液的MMP-9 的含量，發(fā)現(xiàn)了相關(guān)的HELLP 綜合的患者的低于正常。Lim 等[12]對(duì)于癲癇的患者以及正常胎盤的滋養(yǎng)的進(jìn)行細(xì)胞的體外的培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)一些癲癇前期的組織以及各種的滋養(yǎng)的層的細(xì)胞的侵蝕能力以及各種的體外的培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)了癲癇期間組織以及各種的滋養(yǎng)的細(xì)胞的侵蝕能力在不斷的降低，表達(dá)的MMP-9 能力不斷的下降，滋養(yǎng)細(xì)胞表達(dá)MMP-9 能力不斷下賤，滋養(yǎng)的細(xì)胞的對(duì)于子宮螺旋的動(dòng)脈的侵蝕不足，是的相關(guān)的胎盤入過淺，侵入脫膜段，在子宮的動(dòng)脈的沒有經(jīng)歷正常的妊娠的生時(shí)候，妊娠的變化但是實(shí)際的保持的相對(duì)的狹窄的管徑的對(duì)于縮管的物質(zhì)的反應(yīng)，進(jìn)而造成相關(guān)的胎盤缺血。另外就是對(duì)于相關(guān)的胎盤的血管的不足以及發(fā)育的缺陷，最終導(dǎo)致母體的系統(tǒng)性管的內(nèi)皮的損失組織以及相關(guān)妊娠出現(xiàn)高血壓等一些列的針狀，因此, 妊娠期高血壓疾病患者可能由于母胎免疫平衡失調(diào)，導(dǎo)致MMP-9 的分泌減少。

該研究發(fā)現(xiàn)在胎盤上子癇前期組中MMP-9 的表達(dá)明顯少于正常孕足月組 (P<0.05), 提示MMP-9 水平變化在妊娠期高血壓疾病的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用。妊娠期高血壓疾病各組胎盤上MMP-9 的減少與其胎盤病理改變有密切的關(guān)系, MMP-9 的減少直接影響胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞對(duì)螺旋小動(dòng)脈的逆向侵潤, 即胎盤對(duì)子宮肌層組織的侵蝕深度不足 (胎盤淺著床)以致發(fā)生胎盤缺血、缺氧等一系列病理變化, 引起妊娠期高血壓疾病的發(fā)生。 因此認(rèn)為妊娠MMP-9 的紊亂參與了妊娠期高血壓疾病的病理生理變化, 其表達(dá)的異常對(duì)于妊娠期高血壓疾病的發(fā)生具有重要意義, 為妊娠期高血壓的預(yù)防和治療有了一個(gè)大致方向，對(duì)其進(jìn)一步的研究為妊娠期高血壓疾病的病因?qū)W開辟了新的途徑。