胡偉華 熊 陽(yáng) 郭穩(wěn)杰 王宇宏 朱曉鳴 梅 潔

(1. 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院, 武漢 430070; 2. 中國(guó)科學(xué)院水生生物研究所, 武漢 430072)

黃顙魚(yú)(Pelteobagrus fulvidracoRichardson)是我國(guó)一種重要的淡水經(jīng)濟(jì)魚(yú)類(lèi), 育種技術(shù)的創(chuàng)新和新品種的培育推動(dòng)了黃顙魚(yú)產(chǎn)業(yè)的快速發(fā)展[1—5]。隨著黃顙魚(yú)“全雄1號(hào)”[6,7]和雜交黃顙魚(yú)“黃優(yōu)1號(hào)”[8]等水產(chǎn)新品種的推廣, 黃顙魚(yú)的養(yǎng)殖產(chǎn)量呈現(xiàn)持續(xù)增長(zhǎng), 從2010年的18.43×107kg增長(zhǎng)到2019年的53.69×107kg[9]。

近年來(lái), 隨著黃顙魚(yú)產(chǎn)業(yè)的不斷發(fā)展, 對(duì)苗種質(zhì)量要求也越來(lái)越高, 而苗種的好壞與母本的質(zhì)量緊密相關(guān)。目前黃顙魚(yú)生產(chǎn)過(guò)程中所使用的母本非常混雜, 沒(méi)有經(jīng)過(guò)系統(tǒng)的選育和培育。由于普通黃顙魚(yú)經(jīng)濟(jì)效益低, 養(yǎng)殖戶多去養(yǎng)全雄或者雜交黃顙魚(yú), 導(dǎo)致雌魚(yú)缺乏; 少數(shù)企業(yè)根據(jù)黃顙魚(yú)雌雄生長(zhǎng)差異的現(xiàn)象, 把過(guò)篩所得的小的個(gè)體作為母本進(jìn)行培育, 但其中混雜了20%—30%的雄性黃顙魚(yú), 不僅浪費(fèi)了親本培育飼料, 而且將生長(zhǎng)快個(gè)體較大的母本過(guò)篩掉。楊天毅等[10]和Xiong等[11]利用魚(yú)類(lèi)性逆轉(zhuǎn)技術(shù)結(jié)合黃顙魚(yú)性別連鎖分子標(biāo)記成功將XX雌性黃顙魚(yú)逆轉(zhuǎn)為XX雄性黃顙魚(yú), 然后XX雄性和雌性黃顙魚(yú)繁殖后獲得黃顙魚(yú)全雌配套系。黃顙魚(yú)全雌配套系還需要一個(gè)完善的母本培育模式進(jìn)一步提升其繁殖性能, 充分發(fā)揮其作用, 實(shí)現(xiàn)黃顙魚(yú)“全雄1號(hào)”和雜交黃顙魚(yú)“黃優(yōu)1號(hào)”新品種的改良。

雜食性和肉食性魚(yú)類(lèi)對(duì)碳水化合物利用率較低, 對(duì)脂肪消化率較高, 因此在雜食性和肉食性魚(yú)類(lèi)飼料中, 脂肪常作為重要的能源物質(zhì)。同時(shí), 脂肪是魚(yú)類(lèi)必需脂肪酸的主要來(lái)源, 也是細(xì)胞的組成成分和代謝中不可缺少的物質(zhì)[12,13]。適宜的脂肪水平和均衡的脂肪酸組成對(duì)維持魚(yú)類(lèi)的生長(zhǎng)、發(fā)育和繁殖起著重要的作用[14]。已有關(guān)于黃顙魚(yú)和瓦氏黃顙魚(yú)(Pelteobagrus vachelli)的研究中, 蛋白質(zhì)、脂肪和糖類(lèi)適宜的需求量或耐受能力結(jié)果差異較大, 蛋白質(zhì)適宜需求量在36%—45%[15,16], 對(duì)糖類(lèi)的耐受能力可高至40%[17], 脂肪的需求量處于6%—11.31%[13,18,19]。近年來(lái), 養(yǎng)殖戶為了片面追求生長(zhǎng)速度和產(chǎn)量, 采取過(guò)度投喂而造成營(yíng)養(yǎng)過(guò)剩,容易促進(jìn)魚(yú)體脂肪含量增加。

目前對(duì)于黃顙魚(yú)的營(yíng)養(yǎng)需求研究還不夠全面,缺乏完善的黃顙魚(yú)親本培育飼料。在黃顙魚(yú)養(yǎng)殖過(guò)程中大多使用的是膨化飼料, 淀粉是膨化飼料加工成型的關(guān)鍵成分[20], 過(guò)量投喂高糖高脂飼料容易造成黃顙魚(yú)腸系膜脂肪堆積和消化系統(tǒng)病變[16,18];而野生黃顙魚(yú)中不存在腸系膜脂肪堆積的現(xiàn)象。目前大多數(shù)黃顙魚(yú)苗種場(chǎng)所使用的親本都是從養(yǎng)殖的商品魚(yú)中挑選的, 存在腸系膜脂肪和內(nèi)臟脂肪堆積的問(wèn)題, 容易造成種質(zhì)的嚴(yán)重退化進(jìn)而影響苗種的質(zhì)量。在本研究中, 我們收集了3個(gè)不同地區(qū)苗種繁育場(chǎng)的雌性親本并追蹤分析母本飼養(yǎng)管理記錄, 通過(guò)與性成熟的野生雌性黃顙魚(yú)進(jìn)行繁殖性能比較分析試驗(yàn), 旨在探索一套適合黃顙魚(yú)全雌配套系的母本培育方式, 提高苗種質(zhì)量。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

本實(shí)驗(yàn)選擇3個(gè)不同黃顙魚(yú)苗種場(chǎng)(每個(gè)苗種場(chǎng)隨機(jī)挑選5尾雌魚(yú)解剖觀察內(nèi)臟脂肪沉積情況)及湖北省武漢市周邊自然湖泊中捕獲的性成熟雌性黃顙魚(yú), 建立4個(gè)實(shí)驗(yàn)?zāi)副救后w[平均體重(91.05±16.35) g, 每組50尾]。Group 1為野生黃顙魚(yú);group 2為腸系膜脂肪較少的黃顙魚(yú)在繁殖前1個(gè)月進(jìn)行強(qiáng)化培育, 培育方式如下: 將魚(yú)糜與甲魚(yú)料(粗蛋白含為46%、粗灰分為17%、 粗脂肪為4.0%和粗纖維為2.0%)進(jìn)行混合, 第1周魚(yú)糜含量為10%, 第2至第3周魚(yú)糜含量為20%—25%, 第4周魚(yú)糜含量降為10%。group 3和group 4為腸系膜脂肪較多的2個(gè)黃顙魚(yú)養(yǎng)殖群體, 一直投喂黃顙魚(yú)商品膨化料(粗蛋白為42.2%、粗灰分為10.1%、粗脂肪為8.1%和粗纖維為2.6%)。試驗(yàn)魚(yú)均放置于規(guī)格為2 m×2 m×1.5 m且在表面光滑的養(yǎng)殖池中, 水溫控制在23—26℃,晝夜充氧, 暫養(yǎng)48h后分別進(jìn)行取樣和人工催產(chǎn)實(shí)驗(yàn)。

1.2 形體指標(biāo)測(cè)量及解剖觀察

每個(gè)群體隨機(jī)選取6尾進(jìn)行取樣, 將實(shí)驗(yàn)魚(yú)置于200 mg/L MS-222(間氨基苯甲酸乙酯甲磺酸鹽)的環(huán)境中麻醉, 稱(chēng)量體重(Body weight,BW), 取性腺和內(nèi)臟團(tuán), 用濾紙吸取流出的血液, 將完整卵巢和內(nèi)臟團(tuán)置于解剖盤(pán)上, 拍照記錄。然后, 稱(chēng)量性腺重(Gonad weight,GW)、完全剝離后腸系膜脂肪重量(Mesenteric fat weight,MFW), 計(jì)算性腺指數(shù)(Gonad somatic index,GSI)及腸系膜脂肪指數(shù)(Mesenteric fat index,MFI)。

1.3 冰凍切片油紅染色

將測(cè)量形體指標(biāo)過(guò)程中取得的卵巢和肝臟組織置于4%多聚甲醛中固定48h, 用PBS(pH 7.2)沖洗2次, 30%蔗糖溶液(PBS配制)4℃浸透12h后,OCT包埋劑(Optimal cutting temperature compound)包埋, 用冰凍切片機(jī)連續(xù)切取4 μm厚度切片。60℃烤片30min, 然后用丙二醇梯度滲透處理, 0.5%油紅O染液常溫下染色2h后PBS沖洗, 100%丙二醇去背景色后PBS沖洗, 蘇木精染液復(fù)染10s, 清水沖洗吸干, 明膠封片。在光學(xué)顯微鏡下觀察并拍照保存。

1.4 過(guò)碘酸-希夫染色(Periodic acid-Schiff, PAS)

將取得的肝臟置于4%多聚甲醛中固定48h; 逐級(jí)酒精脫水, 使用石蠟包埋劑包埋, 石蠟切片4 μm;蒸餾水洗滌1—2min, 用1%高碘酸水溶液氧化6—20min, 蒸餾水洗滌數(shù)次; 用Schiff試劑染色5—10min, 如果溫度低可適當(dāng)延長(zhǎng)染色時(shí)間; 傾去Schiff 試劑, 在流水中沖洗, 直至流水顏色由紅色變?yōu)闊o(wú)色; 用Harri 蘇木素染液淺染細(xì)胞核2—3min,流水沖洗5—10min; 逐級(jí)酒精脫水, 二甲苯透明, 中性樹(shù)脂封固; 在光學(xué)顯微鏡下觀察肝臟組織形態(tài),細(xì)胞核為藍(lán)色, 糖原為深紫色, 并拍照保存。

1.5 血清激素和蛋白水平檢測(cè)

在人工催產(chǎn)前, 每個(gè)群體隨機(jī)選取3尾黃顙魚(yú),用1 mL注射器從尾部取血, 離心收集血清。分別采用江蘇博深生物科技有限公司生產(chǎn)的魚(yú)促黃體生成素(Luteinizing hormone, LH)Elisa試劑盒(BSE17501O2)和魚(yú)卵黃蛋白原(Vitellogenin, VTG)Elisa試劑盒(BS-E17403O2), 測(cè)定血清中LH和VTG含量。

1.6 人工繁殖

隨機(jī)挑選活力良好、無(wú)傷病、重量相近且性腺成熟好的雌魚(yú), 6尾為一組, 每個(gè)群體選3組; 選取3條生殖器末端凸起較尖, 有明顯紅點(diǎn)的雄性黃顙魚(yú)。

催產(chǎn)方式: 催產(chǎn)藥物為地歐酮(DOM)、魚(yú)用絨毛膜促性腺激素(HCG)和促黃體激素釋放激素(LRH-A2)3種藥物配伍。雌魚(yú)采取2針?lè)ㄗ⑸?胸鰭基部注射), 劑量分別為: 第一針, LHRH-A2 12 μg/kg+HCG 150 IU/kg; 第二針, LHRH-A2 18 μg/kg+HCG 1500 IU/kg+DOM 8 mg/kg, 2針間距時(shí)間為12h。雄魚(yú)只注射第二針, 且劑量減半[9]。

采用“半干法”進(jìn)行黃顙魚(yú)人工授精, 達(dá)到效應(yīng)時(shí)間前2—3h檢查親魚(yú)狀態(tài), 待60%—70%的雌性黃顙魚(yú)個(gè)體都能達(dá)到順利排卵的時(shí)候, 開(kāi)始人工擠卵。在卵收集完成后, 稱(chēng)取產(chǎn)卵重量(Oviposition weight,OW), 計(jì)算產(chǎn)卵率(Spawning rate,SR); 用已經(jīng)準(zhǔn)備好的3條健康雄性黃顙魚(yú)的混合精液, 進(jìn)行人工授精。

黃顙魚(yú)受精卵置于玻璃平皿中充氣孵化。受精卵發(fā)育至原腸胚期后計(jì)算卵的總數(shù)和受精卵數(shù)量以及計(jì)算受精率(Fertilization rate,FR)。然后繼續(xù)充氣孵化, 統(tǒng)計(jì)孵化出苗數(shù)量。待出膜的魚(yú)苗發(fā)育至可平游時(shí)(96 hpf), 統(tǒng)計(jì)魚(yú)苗畸形率(Malformation rate,MR)。當(dāng)魚(yú)苗能主動(dòng)開(kāi)口攝食, 由內(nèi)源性營(yíng)養(yǎng)轉(zhuǎn)為混合營(yíng)養(yǎng)時(shí)(144 hpf), 統(tǒng)計(jì)魚(yú)苗數(shù)量, 計(jì)算每尾母魚(yú)的出苗數(shù)量(Number of fry produced per female)。

1.7 結(jié)果統(tǒng)計(jì)及處理

腸系膜脂肪指數(shù)(MFI)=腸系膜脂肪重/體重×100

性腺指數(shù)(GSI)=性腺重/體重×100

產(chǎn)卵率(SR, %)=產(chǎn)卵重量/卵巢重×100

受精率(FR, %)=受精卵數(shù)/總卵數(shù)×100

畸形率(MR, %)=畸形苗數(shù)量/孵化出苗數(shù)量×100

單尾母魚(yú)出苗量=出苗數(shù)量/產(chǎn)卵親本尾數(shù)

采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析, 采用單因素方差分析(One-way ANOVA)進(jìn)行各組數(shù)據(jù)的組間差異分析,P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 黃顙魚(yú)母本腸系膜脂肪指數(shù)和性腺指數(shù)分析

通過(guò)解剖測(cè)量, 比較野生群體 (group 1)和3個(gè)養(yǎng)殖群體(group 2—4)母本腸系膜脂肪沉積及性腺發(fā)育情況 (圖 1A)。野生黃顙魚(yú)腸系膜脂肪指數(shù)(MFI)為(0.56±0.17)%, 在養(yǎng)殖群體中g(shù)roup 2—4分別為(1.97±0.40)%、(5.92±1.85)%和(9.62±1.01)%(圖 1B)。在性腺指數(shù) (GSI)上, 野生群體為(14.24±3.21)%, 養(yǎng)殖群體group 2—4分別為(17.95±2.97)%、(10.91±2.56)%和(9.69±2.88)%。野生群體的GSI稍微低于養(yǎng)殖群體group 2, 而group 2的GSI顯著高于group 3和4(圖 1C)。在人工培育群體中, group 2—4的MFI逐漸升高, 而GSI呈下降趨勢(shì)(group 3和4由于MFI過(guò)高,GSI差異不顯著), 故總體上MFI與GSI呈負(fù)相關(guān)。

圖1 四組母本黃顙魚(yú)的內(nèi)臟解剖圖、腸系膜脂肪指數(shù)和性腺指數(shù)Fig. 1 The anatomy, mesenteric fat index and gonadosomatic index of female yellow catfish in four groups

2.2 卵巢和肝臟組織學(xué)分析

肝臟油紅染色結(jié)果顯示, 腸系膜脂肪沉積較少的group 1在肝臟中的油脂滴沉積也較少, 而腸系膜脂肪沉積較多的群體group 3和group 4中, 肝臟中油脂沉積量也隨之增加, 腸系膜脂肪與肝臟脂肪含量存在相關(guān)性(圖 2)。

圖2 肝臟油紅染色組織切片分析Fig. 2 The oil red staining results of liver in these four groups of yellow catfish

肝臟糖原染色結(jié)果如圖 3所示, 在group 1和group 2中, 肝臟細(xì)胞排列整齊且無(wú)糖原沉積, 而在group 3和group 4中, 存在顯著糖原沉積, 且細(xì)胞出現(xiàn)空泡狀, 存在炎癥現(xiàn)象。

圖3 PAS染色比較分析肝臟組織的糖原含量Fig. 3 PAS staining showing the glycogen content in the liver tissue of four groups of yellow catfish

為了進(jìn)一步研究脂肪對(duì)卵巢發(fā)育的影響的規(guī)律, 對(duì)4個(gè)群體中催產(chǎn)前的卵巢進(jìn)行油紅染色和圖片梯度可視化分析。發(fā)現(xiàn)腸系膜脂肪沉積較少的野生群體group 1在卵子中油脂沉積也較少, 在人工培育群體中, 繁殖性能接近野生的群體group 2, 在卵巢中脂肪的沉積量與野生群體接近。而在腸系膜脂肪沉積較多的群體group 3和group 4中, 卵巢油脂沉積量也隨之增加(圖 4)。

圖4 各群體卵巢油紅染色組織切片F(xiàn)ig. 4 The oil red staining results of ovaries in these four groups of yellow catfish

2.3 人工繁殖結(jié)果差異分析

人工繁殖結(jié)果表明, 野生群體的產(chǎn)卵比[(66.54±12.43)%]與脂肪含量較少的group 2[(63.83±12.03)%]無(wú)顯著性差異, 但顯著高于脂肪含量較高的group 3[(48.56±10.04)%]和group 4[(42.21±8.68)%; 圖 5A]。同樣地, 受精率隨脂肪含量的升高而降低; group 1的受精率[(76.70±3.76)%]與group 2[(77.23±4.76)%]無(wú)顯著差異(P＞0.05), 但顯著高于group 3[(69.02±3.38)%]和group 4[(55.13±5.43)%; 圖 5B]。

圖5 四個(gè)母本群體人工繁殖的產(chǎn)卵比和受精率情況Fig. 5 The spawning rate and fertilization rate of the four female groups

2.4 苗種畸形分類(lèi)、畸形率及出苗量統(tǒng)計(jì)分析

為了更好地評(píng)估腸系膜脂肪沉積對(duì)苗種的影響, 我們統(tǒng)計(jì)了苗種的畸形率和出苗量, 并對(duì)其畸形表型進(jìn)行分類(lèi)。根據(jù)觀察結(jié)果, 畸形苗種的表型主要有心包水腫、脊椎畸形和斷尾, 有些畸形苗種表現(xiàn)出一種表型, 有些則同時(shí)表現(xiàn)出兩種或者三種表型(圖 6)。

圖6 96 hpf黃顙魚(yú)畸形苗種的種類(lèi)Fig. 6 The types of malformation in 96 hpf yellow catfish

統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果表明黃顙魚(yú)苗種畸形率隨著母本腸系膜脂肪沉積增多而顯著增多(圖 7A)。我們選取魚(yú)苗開(kāi)口攝食, 內(nèi)源性營(yíng)養(yǎng)轉(zhuǎn)為混合營(yíng)養(yǎng)階段(144 hpf), 進(jìn)行魚(yú)苗數(shù)量統(tǒng)計(jì), 計(jì)算每尾親本出苗量。結(jié)果顯示, 野生群體出苗量與動(dòng)物蛋白投喂組無(wú)明顯差異, 顯著高于膨化料投喂群體。結(jié)合畸形率和出苗量, 畸形苗在轉(zhuǎn)食階段出現(xiàn)死亡, 從而造成畸形率與出苗量呈負(fù)相關(guān), 同時(shí), 隨著腸系膜脂肪沉積增多, 畸形率增高, 出苗量降低(圖 7B)。

圖7 四個(gè)群體人工繁殖的苗種畸形率和單尾魚(yú)出苗量Fig. 7 The malformation rate and number of fry produced per female in these four groups

2.5 母本激素水平分析

黃顙魚(yú)血清中促黃體生成素(LH)和卵黃蛋白原(VTG)水平的測(cè)量結(jié)果表明: group 1與group 2的LH水平無(wú)明顯差異(P＞0.05), 而group 3和group 4相較于前兩組顯著降低(P＜0.05; 圖 8A)。在VTG水平上, group 1和2無(wú)明顯差異(P＞0.05), group 3和group 4顯著低于前兩組(P＜0.05), 且group 4的VTG含量最低(圖 8B)。

圖8 母本血清中促黃體生成素和卵黃蛋白濃度Fig. 8 The concentrations of LH and VTG in four groups of females

3 討論

目前, 一些黃顙魚(yú)苗種場(chǎng)忽視親本培育, 在親本培育過(guò)程中不合理或過(guò)量地投喂成魚(yú)配合飼料,致使培育出的母本普遍存在腸系膜脂肪沉積的現(xiàn)象。本研究系統(tǒng)評(píng)價(jià)了腸系膜脂肪沉積與黃顙魚(yú)繁育性能的關(guān)聯(lián), 腸系膜脂肪過(guò)度沉積的黃顙魚(yú)母本繁殖性能明顯下降, 生產(chǎn)出來(lái)的苗種質(zhì)量欠佳;而使用腸系膜脂肪較少的黃顙魚(yú), 在繁殖前1個(gè)月用動(dòng)物性蛋白餌料進(jìn)行強(qiáng)化培育能夠顯著改善繁殖性能和提高苗種質(zhì)量。

脂類(lèi)在魚(yú)類(lèi)生命代謝過(guò)程中具有多種生理功能, 在飼料中添加適量脂類(lèi), 能節(jié)約蛋白質(zhì), 提高飼料蛋白的利用率[21]。魚(yú)類(lèi)缺乏皮下脂肪層, 脂肪主要蓄積在腸系膜脂肪組織、肝臟及肌肉[13]。蛋白、脂肪和糖類(lèi)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)攝入過(guò)量, 容易在魚(yú)體形成大量的脂肪沉積成為體脂, 引起機(jī)體代謝紊亂,造成抗病力降低, 嚴(yán)重危害魚(yú)類(lèi)的生長(zhǎng)和健康[22]。其中腸系膜脂肪沉積重量占魚(yú)體的質(zhì)量比例與攝入量密切相關(guān)。當(dāng)脂肪沉積超過(guò)正常肝脂積累量時(shí), 則表現(xiàn)為出魚(yú)類(lèi)脂肪肝[23], 甚至產(chǎn)生脂毒性[24]。在本研究中, 腸系膜脂肪沉積量高的群體group 3和4的肝臟脂質(zhì)和糖原積累顯著高于野生群體group 1和腸系膜脂肪沉積量低的群體group 2(圖 2和圖 3)。

在動(dòng)物中, 脂肪過(guò)度積累會(huì)嚴(yán)重影響雌性的繁殖性能; 在母豬妊娠期肥胖研究中發(fā)現(xiàn), 母豬背膘大于24 mm時(shí)候, 過(guò)度積累的脂肪, 會(huì)促進(jìn)胎盤(pán)組織脂質(zhì)毒性環(huán)境發(fā)生, 致使氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)加劇, 造成弱仔(Low Birth Weight, LBW)比例增加[24]。肝臟能夠合成卵黃源蛋白等高密度脂蛋白及為卵發(fā)育提供能量的中性脂油滴, 其轉(zhuǎn)運(yùn)至卵巢并調(diào)控卵巢的發(fā)育[25,26]。在Mansour等[27]研究中發(fā)現(xiàn)脂滴均勻分布的卵為好卵, 受精率較高, 而脂滴均勻成塊、大面積分布的卵為壞卵, 受精卵低或無(wú)法受精。在本研究中, group 1和2中脂質(zhì)均勻分布在卵母細(xì)胞中, 而group 3和4中脂質(zhì)成塊堆積在卵母細(xì)胞中(圖 4), 表明group 1和2的卵巢和卵子質(zhì)量比group 3和4好; 因此, group 1和2的產(chǎn)卵比、受精率和出苗量高, 且畸形率低(圖 5—7)。脂肪過(guò)度積累甚至還會(huì)隔代遺傳影響動(dòng)物子代胚胎質(zhì)量和代謝功能, 在連續(xù)16周高脂投喂的小鼠模型中, 其卵子質(zhì)量、排卵率和子代胚胎發(fā)育均比正常投喂組差[28,29];高糖高脂飲食導(dǎo)致肥胖會(huì)損傷小鼠的卵子質(zhì)量, 這種影響甚至?xí)掷m(xù)三代[30]。

在人類(lèi)中, 越來(lái)越多的研究表明, 肥胖會(huì)對(duì)女性生殖系統(tǒng)產(chǎn)生不良影響, 引起生育能力下降及性激素的缺乏[31]。促黃體生成素(LH)是由腺垂體細(xì)胞分泌的一種促性腺激素, 可促進(jìn)膽固醇在性腺細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)化成性激素。在肥胖女性中, LH激素水平顯著低于正常體重女性[32,33]。在魚(yú)類(lèi)卵巢中, LH與FSH共同作用, 促進(jìn)卵泡分泌甾體激素, 觸發(fā)排卵[34]。卵黃蛋白原(Vitellogenin, VTG)是進(jìn)行卵黃合成的重要物質(zhì), 是魚(yú)類(lèi)生殖過(guò)程中重要的生殖蛋白[35]。VTG在肝臟中合成, 后隨血液循環(huán)進(jìn)入卵母細(xì)胞,在卵母細(xì)胞發(fā)育過(guò)程中水解為卵黃蛋白[36], 可為將來(lái)胚胎生長(zhǎng)發(fā)育提供必需的營(yíng)養(yǎng)。在爪蟾中,VTG能轉(zhuǎn)運(yùn)Zn2+, Zn2+對(duì)胚胎發(fā)育非常重要, 缺乏會(huì)導(dǎo)致胚胎器官畸形[37]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn), 脂肪高的群體group 3和group 4血清LH和 VTG水平顯著低于脂肪低的野生群體和group 2(圖 8)。此外, 脂肪過(guò)度沉積的母本在注射催產(chǎn)藥物后, 會(huì)發(fā)生排卵不完全甚至不排卵, 從而導(dǎo)致母魚(yú)大量死亡, 這在很大程度上影響了黃顙魚(yú)苗種生產(chǎn)和產(chǎn)業(yè)的進(jìn)一步發(fā)展[38, 39]。

綜上所述, 黃顙魚(yú)母本脂肪過(guò)度沉積會(huì)影響卵子和苗種質(zhì)量, 而腸系膜脂肪指數(shù)(MFI)可以作為一個(gè)很好的脂肪含量指示參數(shù)。在黃顙魚(yú)等雜食性和肉食性魚(yú)類(lèi)的親本培育過(guò)程中, 不能按照傳統(tǒng)的商品魚(yú)養(yǎng)殖方式, 要制定一套合理的親本培育操作規(guī)范; 只有深入研究和了解親本的營(yíng)養(yǎng)需求, 合理投喂減少腸系膜脂肪沉積, 改善繁殖性能, 才能生產(chǎn)出高質(zhì)量的苗種。