關(guān)愛(ài)國(guó)

（江西科技職業(yè)學(xué)院，江西南昌 330000）

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

原料：市售新鮮雞蛋。

試劑：乙醚（分析純）；丙酮。

1.2 設(shè)備

磁攪拌器（79-1型，江蘇中大儀器廠）；離心機(jī)（TDL80-2B型，上海安亭科學(xué)儀器廠）；真空干燥器（DZF-6020型，上海-恒科學(xué)儀器有限公司）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（SHZ-Ⅲ型，上海亞榮生化儀器廠）[1]。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 卵磷脂的提取工藝流程

卵磷脂的提取工藝流程如圖1所示。

圖1 卵磷脂提取工藝流程圖

1.3.2 操作要點(diǎn)

（1）蛋黃分離[2]。取3 kg左右雞蛋，先用清水沖洗干凈，再將蛋黃與蛋清分離，大約能獲得500 g蛋黃（須將蛋黃和蛋清徹底分離）。稱量一定量的雞蛋蛋黃（去蛋清）于潔凈的帶塞三角錐形瓶中備用。

（2）乙醚濃度配制[2]。分別配制體積分?jǐn)?shù)為75%、80%、85%、90%、95%的乙醚各120 mL，以備后用。

（3）攪拌回流提取。將準(zhǔn)備好的蛋黃攪拌均勻，向其中加入一定濃度的乙醚溶液，然后在磁攪拌器上攪拌回流提取一定時(shí)間后，靜置10 min，經(jīng)漏斗過(guò)濾，往殘?jiān)屑尤胪瑵舛鹊囊颐讶芤?，再將其放于磁攪拌器上攪拌回流提取一定時(shí)間，過(guò)濾，取濾液，與第一次濾液合并，加入一定量丙酮除雜質(zhì)，待用[4]。

（4）離心。將粗提物離心分離，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為4 000 r/min，時(shí)間10 min。

（5）蒸發(fā)回收。將第一次提取液和第二次提取液混合，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中用60 ℃水浴回收乙醚。

（6）過(guò)濾。將磁攪拌器攪拌后的提取液用布氏漏斗在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上真空抽濾，濾餅用一定量丙酮沖洗[5]。

（7）真空干燥。減壓真空干燥約30 min，溫度為60 ℃、真空度為-0.09～-0.1 MPa。

2 結(jié)果與分析

2.1 乙醚濃度對(duì)粗卵磷脂提取率的影響

選取95%乙醚、90%乙醚、85%乙醚、80%乙醚、75%乙醚進(jìn)行水平試驗(yàn)。其他條件：提取時(shí)間40 min；溫度30 ℃。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖2所示，在試驗(yàn)取值范圍內(nèi)，乙醚濃度為90%時(shí)，卵磷脂得率可達(dá)到最大值。在乙醚濃度大于90%時(shí)，由于乙醚容易揮發(fā)，使提取率沒(méi)有提高，因此，90%乙醚為提取卵磷脂的最佳濃度。

圖2 乙醇濃度與粗卵磷脂提取率的關(guān)系

2.2 提取溫度對(duì)粗卵磷脂提取率的影響

選取溫度為 20 ℃、25 ℃、30 ℃、35 ℃、40 ℃進(jìn)行水平實(shí)驗(yàn)。其他條件恒定：95%乙醚；提取時(shí)間30 min。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖3所示，在試驗(yàn)取值范圍內(nèi)，提取率隨萃取溫度的增大而逐漸增加，30 ℃時(shí)提取率達(dá)到最大，高于30 ℃反而下降。提取過(guò)程是固-液相之間的擴(kuò)散過(guò)程，溫度較低時(shí)提高提取溫度，可以增加分子的動(dòng)能，從而提高溶質(zhì)擴(kuò)散速率，導(dǎo)致卵磷脂溶解度增大。但是，高于30 ℃后，提取率下降的原因可能是由于卵磷脂溶于乙醚是放熱反應(yīng)，溶解度隨溫度的上升而減小，故卵磷脂的提取溫度以30 ℃為宜。

圖3 提取溫度與粗卵磷脂提取率的關(guān)系

2.3 提取時(shí)間對(duì)卵磷脂提取的影響

選取時(shí)間為20 min、30 min、40 min、60 min、80 min進(jìn)行水平試驗(yàn)。其他條件恒定：95%乙醚；溫度30 ℃。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖3所示，結(jié)果表明，卵磷脂提取率隨萃取時(shí)間的延長(zhǎng)而增加。由于溶質(zhì)分子的溶解擴(kuò)散需要一定時(shí)間，延長(zhǎng)靜置時(shí)間，有利于提高卵磷脂提取率。由圖4可知，提取時(shí)間在1 h后曲線上升比較平緩，從經(jīng)濟(jì)、效率等方面考慮，提取時(shí)間以1 h最為合適。

圖4 提取時(shí)間與粗卵磷脂提取率的關(guān)系

2.4 提取工藝優(yōu)化

根據(jù)乙醚濃度A、萃取溫度B、萃取時(shí)間C對(duì)卵磷脂提取率的影響，設(shè)計(jì)3水平3因素L9（33）正交實(shí)驗(yàn)（表1），實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表2。

表1 L9（33）正交因素水平表

表2 L9（33）正交試驗(yàn)結(jié)果表

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，最優(yōu)工藝條件為A3B2C3，即乙醚濃度為90%，溫度為30 ℃，提取時(shí)間為1 h，在該提取條件下，得率為14.50%。對(duì)表2進(jìn)行極差分析可知：對(duì)卵磷脂提取率影響因素依次為乙醚濃度A＞提取溫度B＞提取時(shí)間C。

3 結(jié)論

本研究以蛋黃為原料，利用乙醚溶液作為提取劑、丙酮除去雜質(zhì)提取蛋黃卵磷脂，研究了提取溫度、提取時(shí)間、溶劑濃度對(duì)提取率的影響。最佳提取條件為：乙醚濃度為90%，溫度為30 ℃，提取時(shí)間為1 h，在該提取條件下，得率為14.50%。剛制備時(shí)產(chǎn)品為白色，放置一段時(shí)間后變?yōu)辄S色，久置變?yōu)樽睾稚?，可能是由于分子中存在不飽和脂肪酸，存放過(guò)程中易受光線、空氣及溫度的影響而變色，因此，產(chǎn)品宜放在低溫、棕色瓶密封儲(chǔ)存。