趙方舒 侯林 楊穎 尹怡銘 王曉晴 倪雯婷 孫允紅 李保宏 田景振

中圖分類號(hào) R979.1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼 A 文章編號(hào) 1001-0408（2021）24-3054-06

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2021.24.19

摘 要 目的：為異鼠李素的進(jìn)一步研究和新藥開(kāi)發(fā)提供依據(jù)。方法：收集文獻(xiàn)，就近年來(lái)異鼠李素抗腫瘤活性相關(guān)作用機(jī)制的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。結(jié)果與結(jié)論：異鼠李素是一種黃酮類化合物，其抗腫瘤作用機(jī)制主要包括阻斷腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞周期（S期阻滯、G2/M期阻滯及G0/G1期阻滯）、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡、抑制腫瘤細(xì)胞遷移和侵襲、誘導(dǎo)活性氧的產(chǎn)生、增強(qiáng)抗腫瘤藥物活性、抑制致癌基因表達(dá)或增加抑癌基因表達(dá)等，可通過(guò)調(diào)控磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白、Ras/絲裂原激活蛋白激酶、Wnt/β-聯(lián)蛋白等信號(hào)通路發(fā)揮抗腫瘤作用。但目前大部分研究還停留在體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)階段，研究人員應(yīng)盡快建立動(dòng)物模型對(duì)相關(guān)作用機(jī)制進(jìn)行體內(nèi)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，同時(shí)需對(duì)異鼠李素的成藥性進(jìn)行分析，以加快該化合物的新藥開(kāi)發(fā)進(jìn)程。

關(guān)鍵詞 異鼠李素;抗腫瘤;作用機(jī)制;進(jìn)展

基金項(xiàng)目：山東省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（No.ZR2019QH- 007）;山東省重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃（重大科技創(chuàng)新工程）項(xiàng)目（No.2020- CXGC010505）;山東省中醫(yī)藥科技項(xiàng)目（No.2020M009）

碩士研究生。研究方向：中藥新藥研發(fā)。E-mail：zfs13176019640@ 163.com

通信作者：教授，博士生導(dǎo)師。研究方向：中藥新藥研發(fā)與中藥抗病毒。E-mail：tianjingzhen@163.com

惡性腫瘤是世界各國(guó)普遍關(guān)注的一項(xiàng)公共衛(wèi)生問(wèn)題。近年來(lái)，我國(guó)的惡性腫瘤防治負(fù)擔(dān)較重，亟需探索更為有效、安全的抗腫瘤藥物[1]。目前，多種黃酮類成分已被證實(shí)可在體內(nèi)外發(fā)揮抗腫瘤活性，如蘆丁[2]、槲皮素[3]、山柰酚[4]等。異鼠李素即3，5，7-三羥基-2-（4-羥基-3-甲氧基苯基）苯并吡喃-4-酮（結(jié)構(gòu)式見(jiàn)圖1），也稱為3′-O-甲基槲皮素，是一種黃酮類化合物，是槲皮素的直接代謝物，其大量存在于水果、蔬菜和茶中，也廣泛存在于沙棘、銀杏葉和槐米等多種中藥材中[5-7]。研究表明，異鼠李素能抑制各種類型的腫瘤，包括宮頸癌、胃癌、皮膚癌、結(jié)腸癌、肺癌等[8-12]?；诖耍P者收集相關(guān)文獻(xiàn)，就近年來(lái)異鼠李素抗腫瘤活性相關(guān)作用機(jī)制的研究進(jìn)展進(jìn)行了綜述，以期為該成分的進(jìn)一步研究和新藥開(kāi)發(fā)提供依據(jù)。

1 阻滯腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞周期

1.1 S期阻滯

研究表明，周期蛋白依賴性激酶（Cdks）可與周期蛋白（cyclin）結(jié)合形成異二聚體，該異二聚體可推動(dòng)細(xì)胞周期的進(jìn)展。其中，Cdk2/cyclin E復(fù)合物對(duì)驅(qū)動(dòng)細(xì)胞從G1期向S期躍遷起著關(guān)鍵作用。cyclin A是DNA復(fù)制所必需的蛋白，主要在S期和G2期表達(dá)[13]。Wang等[14]使用異鼠李素處理人晚期胰腺癌PANC-1細(xì)胞后，發(fā)現(xiàn)處于S期的細(xì)胞顯著增多，處于G1期的細(xì)胞顯著減少，其機(jī)制可能是由于異鼠李素增加了PANC-1細(xì)胞中Cdk2蛋白的表達(dá)，促進(jìn)了S期的啟動(dòng)，同時(shí)降低了細(xì)胞內(nèi)cyclin A的表達(dá)，抑制了DNA的復(fù)制，進(jìn)而抑制S期的進(jìn)展，最終將細(xì)胞阻滯在S期。在這一過(guò)程中，Ras/絲裂原激活蛋白激酶（MAPK）信號(hào)通路下游級(jí)聯(lián)蛋白絲裂原激活蛋白激酶激酶（MEK）和細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶（ERK）的磷酸化水平明顯降低，而Ras蛋白的表達(dá)水平無(wú)變化，說(shuō)明異鼠李素可能通過(guò)調(diào)控Ras/MAPK信號(hào)通路來(lái)實(shí)現(xiàn)PANC-1細(xì)胞的S期阻滯。Luan等[11]將含異鼠李素的小鼠血清作用于人HCT116和SW480兩種結(jié)腸癌細(xì)胞后發(fā)現(xiàn)，異鼠李素可通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞S期阻滯來(lái)抑制這兩種結(jié)腸癌細(xì)胞的生長(zhǎng)。此外，Wu等[15]研究了異鼠李素和異鼠李素-3-葡萄糖醛酸苷對(duì)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞的抑制活性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，二者均可通過(guò)S期阻滯、減少處于G2/M期和G0/G1期的細(xì)胞數(shù)量來(lái)抑制腫瘤細(xì)胞的增殖，且異鼠李素的阻滯作用強(qiáng)于異鼠李素-3-葡萄糖醛酸苷。

1.2 G2/M期阻滯

研究表明，異鼠李素對(duì)多種腫瘤細(xì)胞有G2/M期阻滯的作用[16-21]。與G2/M期有關(guān)的蛋白有cyclin A、cyc- lin B1、Cdk1、Cdk2、細(xì)胞分裂周期蛋白25同源蛋白C（Cdc25C）、酪氨酸激酶Wee1等，其中Wee1可催化Cdk1上Y15位點(diǎn)的特異性磷酸化，使Cdk1失活;而Cdc25C可使該位點(diǎn)去磷酸化，從而抵消Wee1對(duì)Cdk1的抑制作用[16];Cdc25C還可在M期啟動(dòng)階段進(jìn)入細(xì)胞核，激活Cdk1/cyclin B1異二聚體，進(jìn)而啟動(dòng)有絲分裂[17]。Choi等[18]研究表明，用異鼠李素處理人肝癌Hep3B細(xì)胞后，細(xì)胞內(nèi)cyclin A、cyclin B1的表達(dá)顯著減少，Cdks抑制因子p21蛋白的表達(dá)顯著增加，且通過(guò)免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)p21可分別與Cdk2、細(xì)胞分裂周期蛋白2（Cdc2）結(jié)合形成蛋白復(fù)合物，從而抑制后二者的活性，表明異鼠李素可通過(guò)誘導(dǎo)p21蛋白的表達(dá)抑制Cdk2 和Cdc2在細(xì)胞周期進(jìn)程中的作用，由此抑制G2/M期進(jìn)展。Park等[19]研究也發(fā)現(xiàn)，異鼠李素可增加人膀胱癌T24細(xì)胞中p21蛋白的表達(dá)，進(jìn)而抑制Cdk1的活性，使細(xì)胞從G2期過(guò)渡到M期受阻;該研究還發(fā)現(xiàn)，在此過(guò)程中，調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖的腺苷一磷酸活化蛋白激酶（AMPK）的下游分子——哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、p70核糖體S6蛋白激酶（p70S6K）和UNC-51樣激酶1（ULK1）的表達(dá)水平也顯著降低，推測(cè)異鼠李素還可通過(guò)抑制AMPK/mTOR信號(hào)通路而發(fā)揮G2/M期阻滯作用;此外，該研究還指出，具有抑制細(xì)胞周期作用的Wee1蛋白的表達(dá)水平也顯著降低，推測(cè)可能是由異鼠李素激活了某種負(fù)反饋調(diào)節(jié)途徑所導(dǎo)致的。Wei等[8]用異鼠李素處理人宮頸癌HeLa細(xì)胞后發(fā)現(xiàn)，其可造成細(xì)胞G2/M期阻滯;蛋白質(zhì)印跡法分析結(jié)果表明，細(xì)胞內(nèi)Cdc25C、Cdk1、cyclin B1和作為微管組成蛋白之一的α微管蛋白的表達(dá)均顯著下降，但細(xì)胞周期檢測(cè)點(diǎn)激酶2（Chk2）、Cdc25C和Cdk1的磷酸化水平有所升高。另外，Li等[20]和Jaramillo等[21]的研究結(jié)果也表明，異鼠李素可通過(guò)阻滯G2/M期而抑制人SW480、HCT116、HT-29等3種結(jié)直腸癌細(xì)胞的增殖，與其他研究不同的是，這兩項(xiàng)研究認(rèn)為異鼠李素增強(qiáng)了細(xì)胞中cyclin B1的表達(dá)、降低了蛋白激酶B（PKB，又稱Akt）的磷酸化水平，提示異鼠李素可能是通過(guò)抑制磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/Akt/mTOR信號(hào)通路而阻滯細(xì)胞周期。

1.3 G0/G1期阻滯

異鼠李素在人食管癌Eca-109細(xì)胞、人胃癌MKN28細(xì)胞、人肺癌A549細(xì)胞和小鼠肺癌Lewis細(xì)胞的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中均表現(xiàn)出G0/G1期阻滯作用，這與異鼠李素可造成DNA結(jié)合抑制劑1（Id1）、cyclin D1和增殖細(xì)胞核抗原（PCNA）表達(dá)減弱，而p53和p21蛋白表達(dá)增強(qiáng)有關(guān)[22]。其中，Id1可以提高cyclin D1的表達(dá)水平，cyclin D1與Cdk4結(jié)合成二聚體后可促進(jìn)細(xì)胞從G1期進(jìn)入S期，若Id1的表達(dá)受到抑制，則cyclin D1的水平會(huì)下調(diào)，進(jìn)而使細(xì)胞周期進(jìn)程受到阻滯[23-25]。有研究指出，PCNA在細(xì)胞增殖的啟動(dòng)中起重要作用，其表達(dá)減少將會(huì)使DNA合成受阻，導(dǎo)致細(xì)胞無(wú)法進(jìn)入S期而停留在G1期[26]。

異鼠李素阻滯腫瘤細(xì)胞細(xì)胞周期相關(guān)機(jī)制的示意圖見(jiàn)圖2。

2 誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡

胱天蛋白酶（caspase）是細(xì)胞凋亡機(jī)制的核心，其既是凋亡的起始者，又是凋亡的執(zhí)行者[27]。有研究指出，異鼠李素既可以激活與caspase-8有關(guān)的外源性凋亡途徑，也可以通過(guò)激活caspase-9啟動(dòng)線粒體內(nèi)源性凋亡途徑。外源性凋亡發(fā)生于死亡受體Fas及其配體FasL結(jié)合時(shí)[28]。相關(guān)研究表明，異鼠李素可增加Fas和FasL的表達(dá)，使之形成死亡誘導(dǎo)信號(hào)復(fù)合體（DISC），促進(jìn)caspase-8前體（pro-caspase-8）的組裝并激活生成caspase-8，最終啟動(dòng)外源性細(xì)胞凋亡[18-19]。線粒體通透性增加、細(xì)胞色素c等分子釋放到細(xì)胞質(zhì)可導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)源性凋亡，這一過(guò)程與B細(xì)胞淋巴瘤2（Bcl-2）家族蛋白中促凋亡蛋白和抗凋亡蛋白表達(dá)的失衡有關(guān)[27]。異鼠李素可以降低人膀胱癌T24細(xì)胞、人肝癌Hep3B細(xì)胞中抗凋亡蛋白Bcl-2的表達(dá)，增加促凋亡蛋白Bcl-2關(guān)聯(lián)X蛋白（Bax）、BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白（Bid）和截短型Bid蛋白（tBid）的表達(dá)，增強(qiáng)caspase-8活性[18-19]。線粒體膜電位是衡量線粒體功能的重要指標(biāo)，有研究表明，異鼠李素可以降低線粒體膜電位，引起線粒體去極化，使線粒體膜通透性增加，促進(jìn)細(xì)胞色素c從線粒體內(nèi)被釋放[29]。發(fā)動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白1（Drp1）是一種與線粒體分解有關(guān)的膜分解蛋白，當(dāng)Drp1在S616位點(diǎn)發(fā)生磷酸化后，其磷酸化產(chǎn)物可以促進(jìn)線粒體分解，而在S637位點(diǎn)的磷酸化產(chǎn)物則會(huì)抑制線粒體分解。研究表明，異鼠李素聯(lián)合氯喹可以促進(jìn)鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）在T286位點(diǎn)的磷酸化，并促使Drp1在S616位點(diǎn)發(fā)生磷酸化并向線粒體轉(zhuǎn)移，從而加速細(xì)胞色素c的釋放，進(jìn)而啟動(dòng)線粒體凋亡途徑[30]。

細(xì)胞色素c釋放到細(xì)胞質(zhì)后可形成細(xì)胞色素c-凋亡蛋白酶活化因子1（Apaf1）-caspase-9凋亡體復(fù)合物，進(jìn)而促進(jìn)caspase的激活。熱休克蛋白（HSP）可在腫瘤細(xì)胞中與Apaf1結(jié)合，使Apaf1無(wú)法與細(xì)胞色素c結(jié)合形成凋亡小體，從而影響caspase-9在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的級(jí)聯(lián)反應(yīng)，最終抑制腫瘤細(xì)胞凋亡。Luan等[11]發(fā)現(xiàn)，結(jié)腸癌細(xì)胞中HSPa1a、HSPa1b、HSPa8等3種HSP70家族蛋白的表達(dá)水平均有所升高，而經(jīng)異鼠李素處理后，上述3種蛋白的表達(dá)水平均明顯下降，表明異鼠李素可通過(guò)抑制上述3種蛋白的表達(dá)而阻止腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。

caspase-3是內(nèi)源性和外源性凋亡途徑中共同的下游因子。多腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARP）是caspase-3的底物，PARP被剪切是caspase-3激活的指標(biāo)，也是細(xì)胞凋亡的重要標(biāo)志。相關(guān)研究表明，在經(jīng)異鼠李素處理的人肝癌Hep3B細(xì)胞、膀胱癌T24細(xì)胞和肺癌A549細(xì)胞中，激活的caspase-3與被剪切的PARP數(shù)量均顯著增加，表明異鼠李素可通過(guò)誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡來(lái)發(fā)揮抗腫瘤作用[29]。

異鼠李素誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡相關(guān)機(jī)制的示意圖見(jiàn)圖3。

3 抑制腫瘤細(xì)胞遷移、侵襲

高度侵襲性腫瘤的特征之一是腫瘤組織具有較強(qiáng)的向正常組織遷移的能力，腫瘤細(xì)胞侵入鄰近組織和脈管系統(tǒng)是腫瘤轉(zhuǎn)移的第一步。抑制細(xì)胞遷移是治療腫瘤轉(zhuǎn)移的一種有前景的治療方法。研究表明，異鼠李素可通過(guò)抑制上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）過(guò)程和減少基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）的表達(dá)來(lái)抑制腫瘤細(xì)胞的黏附、遷移和侵襲。

EMT與腫瘤細(xì)胞增殖、遷移、轉(zhuǎn)化密切相關(guān)。腫瘤細(xì)胞可在EMT過(guò)程中獲得間質(zhì)細(xì)胞的特性，失去上皮的特性，增強(qiáng)運(yùn)動(dòng)和侵襲能力[31]，表現(xiàn)為間質(zhì)標(biāo)志物波形蛋白、N-鈣黏著蛋白、鋅指轉(zhuǎn)錄因子Snail等表達(dá)增加，上皮標(biāo)志物E-鈣黏著蛋白表達(dá)減少。MMPs超家族是調(diào)節(jié)細(xì)胞外基質(zhì)動(dòng)態(tài)平衡的重要酶系，可使腫瘤細(xì)胞獲得降解細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）及突破ECM屏障的能力，MMP-2、MMP-9是這一蛋白酶家族中與腫瘤最為密切的因子。MMP-2又稱明膠酶A，MMP-9又稱明膠酶B，二者都可以降解ECM中的明膠，Ⅳ、Ⅳ、Ⅶ、Ⅹ型膠原蛋白和彈性纖維等，破壞基底膜的完整性，使腫瘤細(xì)胞沿著被破壞的ECM向周圍組織浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移[32]，其中MMP-9還與腫瘤細(xì)胞的耐藥性相關(guān)[33-34]。Luo等[35]研究結(jié)果表明，異鼠李素作用于人肺癌A549細(xì)胞后可以上調(diào)E-鈣黏著蛋白的表達(dá)，下調(diào)波形蛋白、N-鈣黏著蛋白、鋅指轉(zhuǎn)錄因子Snail以及MMP-2、MMP-9的表達(dá);同時(shí)，異鼠李素可顯著抑制該細(xì)胞中ERK1/2和Akt的激活，且當(dāng)Akt或ERK1/2過(guò)表達(dá)時(shí)，異鼠李素抑制EMT的作用將消失，從而證實(shí)異鼠李素是通過(guò)阻斷Akt/ERK1/2信號(hào)通路來(lái)抑制腫瘤細(xì)胞的EMT。相似地，Cai等[36]用不同劑量異鼠李素處理雄激素非依賴型人前列腺癌DU145和PC3細(xì)胞后發(fā)現(xiàn)，異鼠李素可呈劑量依賴性地增加DU145和PC3細(xì)胞中E-鈣黏著蛋白的表達(dá)，降低波形蛋白、N-鈣黏著蛋白、MMP-2和MMP-9的表達(dá);同時(shí)該研究還發(fā)現(xiàn)，在上述過(guò)程中異鼠李素并不改變細(xì)胞中PI3K、Akt和mTOR的蛋白表達(dá)水平，但卻顯著抑制了這3種蛋白的磷酸化水平，提示異鼠李素可能通過(guò)抑制PI3K/Akt/mTOR信號(hào)通路來(lái)抑制DU145和PC3細(xì)胞的遷移和侵襲。

4 誘導(dǎo)活性氧的產(chǎn)生

異鼠李素還具有增加活性氧（ROS）產(chǎn)生的作用。有研究發(fā)現(xiàn)，人肝癌Hep3B細(xì)胞經(jīng)異鼠李素處理后，細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生了大量ROS，使用ROS清除劑N-乙酰-L-半胱氨酸（NAC）后，細(xì)胞中的ROS積累有所減少，凋亡細(xì)胞數(shù)也有所減少，細(xì)胞周期阻滯和細(xì)胞活力均有所恢復(fù)，表明ROS的增加可能是異鼠李素抗腫瘤作用的關(guān)鍵因素[18]。CaMKⅡ的激活會(huì)導(dǎo)致ROS的大量產(chǎn)生，Hu等[30]研究發(fā)現(xiàn)，在人三陰性乳腺癌MDA-MB-231和BT549細(xì)胞中，異鼠李素和氯喹聯(lián)合使用會(huì)激活CaMKⅡ，進(jìn)而使細(xì)胞中的ROS明顯增加，且超氧陰離子參與了異鼠李素和氯喹的抗腫瘤作用。Wu等[15]研究也發(fā)現(xiàn)，異鼠李素可造成人乳腺癌MCF-7細(xì)胞中過(guò)氧化氫和超氧陰離子的累積增加，表明其可通過(guò)激活ROS依賴性途徑而發(fā)揮細(xì)胞毒性作用。

5 增強(qiáng)抗腫瘤藥物活性

異鼠李素可以增強(qiáng)抗腫瘤藥物的活性。研究表明，異鼠李素與鉑類化合物（卡鉑、順鉑）聯(lián)用可增強(qiáng)鉑類化合物抑制人肺癌A549細(xì)胞增殖、阻滯其細(xì)胞周期、誘導(dǎo)其凋亡等一系列抗腫瘤活性[37]，進(jìn)而有助于減少鉑類化合物的用量，達(dá)到減少鉑類化合物副作用的目的。Ramachandran等[9]研究表明，異鼠李素可以提高5-氟尿嘧啶、多柔比星、卡培他濱等3種化療藥物對(duì)人胃癌AGS細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制率。還有研究表明，異鼠李素可以通過(guò)降低核因子κB（NF-κB）的表達(dá)來(lái)顯著增強(qiáng)卡培他濱的抗腫瘤作用，其與卡培他濱聯(lián)合治療能顯著下調(diào)多種致癌基因產(chǎn)物的過(guò)度表達(dá)，如可抑制腫瘤組織中存活蛋白、X連鎖凋亡抑制蛋白（XIAP）和細(xì)胞間黏附分子1（ICAM-1）的表達(dá)[38]。異鼠李素還可增強(qiáng)索拉非尼對(duì)小鼠腎癌Renca細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用，使后者的半數(shù)抑制濃度（IC50）從26.1 μmol/L 降至12.0 μmol/L，這可能與異鼠李素對(duì)Akt/mTOR通路以及絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶（CRAF）/MEK/ERK通路的抑制作用有關(guān)[39]。

6 抑制致癌基因表達(dá)或增加抑癌基因表達(dá)

p53蛋白是腫瘤抑制因子之一，可通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞周期或通過(guò)參與DNA的修復(fù)來(lái)抑制腫瘤的形成和發(fā)展[40]。有研究發(fā)現(xiàn)，異鼠李素作用于人肺癌A549細(xì)胞后，可增加細(xì)胞內(nèi)p53蛋白的表達(dá)[22]。c-myc是一種常見(jiàn)的原癌基因，可使細(xì)胞無(wú)限增殖，與多種腫瘤的發(fā)生有關(guān)。異鼠李素可以抑制人食管癌Eca-109細(xì)胞中c-myc的表達(dá)，同時(shí)可誘導(dǎo)細(xì)胞中p53蛋白的積累[23]。已有研究發(fā)現(xiàn)，異常激活的Src蛋白可以促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移，而異鼠李素可以通過(guò)激活C-Src酪氨酸激酶（CSK）來(lái)抑制Src蛋白在Y529位點(diǎn)的磷酸化，進(jìn)而抑制Src蛋白的活性，在人結(jié)腸癌HT29細(xì)胞的相關(guān)研究中發(fā)現(xiàn)，上述作用可能與異鼠李素抑制Wnt/β-聯(lián)蛋白（β-catenin）和Akt/MAPK途徑有關(guān)[41]。過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體γ（PPARγ）也參與了腫瘤相關(guān)的各種代謝紊亂[42]。Ramachandran等[9]研究發(fā)現(xiàn)，異鼠李素可增強(qiáng)人胃癌AGS細(xì)胞中PPARγ的活性，并增加PPARγ的表達(dá)，且當(dāng)使用PPARγ特異性抑制劑后，異鼠李素對(duì)胃癌細(xì)胞遷移與侵襲的抑制作用被逆轉(zhuǎn)，說(shuō)明異鼠李素可能是通過(guò)對(duì)PPARγ表達(dá)的調(diào)控來(lái)發(fā)揮抗腫瘤作用。

7 其他

已有研究表明，炎癥和腫瘤的形成有很強(qiáng)的關(guān)聯(lián)，一些炎癥反應(yīng)加速了腫瘤的形成[43]，因此靶向抑制炎癥和參與炎癥過(guò)程的分子可能是良好的腫瘤防治策略。環(huán)氧合酶2（COX-2）是炎癥反應(yīng)的主要介質(zhì)之一，其產(chǎn)物前列腺素E2（PGE2）具有一定的致癌作用[44]。Kim等[10]用10 μmol/L的異鼠李素處理人鱗狀細(xì)胞癌A431細(xì)胞后發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞內(nèi)COX-2的表達(dá)幾乎完全被抑制;同時(shí)，該學(xué)者還觀察到，異鼠李素可通過(guò)抑制COX-2啟動(dòng)子的作用，進(jìn)而抑制表皮生長(zhǎng)因子（EGF）誘導(dǎo)的小鼠表皮JB6細(xì)胞癌變。Saud等[41]發(fā)現(xiàn)，與模型組小鼠相比，經(jīng)異鼠李素處理的小鼠能更快地從結(jié)腸炎中恢復(fù)，其微腺瘤形成率、結(jié)直腸增生和鱗狀化生程度、最終腫瘤發(fā)生率均顯著低于模型組（P<0.05），表明異鼠李素可以通過(guò)抗炎而發(fā)揮腫瘤預(yù)防作用。此外，異鼠李素可通過(guò)抑制mTOR通路來(lái)誘導(dǎo)人肺癌A549、SPC-A1細(xì)胞收縮，減少細(xì)胞黏附[45];也可通過(guò)以腺苷三磷酸（ATP）非競(jìng)爭(zhēng)性方式直接與MEK1結(jié)合，并以ATP競(jìng)爭(zhēng)性方式與PI3K結(jié)合，進(jìn)而抑制MEK1和PI3K的活性，以此來(lái)發(fā)揮抗皮膚癌的作用[10]。異鼠李素調(diào)控信號(hào)通路相關(guān)機(jī)制的示意圖見(jiàn)圖4。

8 結(jié)語(yǔ)

異鼠李素的抗腫瘤作用涉及多種機(jī)制，尤其在阻滯腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞周期和促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡方面尤為突出，且可以通過(guò)調(diào)控PI3K/Akt/mTOR、Ras/MAPK、Wnt/β-catenin等信號(hào)通路而發(fā)揮作用。筆者曾對(duì)上文中提到的蛋白進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析，發(fā)現(xiàn)在促凋亡作用涉及的蛋白中，F(xiàn)as、Bcl-2、Bax、tBid、Apaf1以及細(xì)胞色素c均屬于p53信號(hào)通路;在細(xì)胞周期涉及的蛋白中，Cdk1、Cdk2、cyclin B1、cyclin D1以及p53本身也參與了p53信號(hào)通路，推測(cè)異鼠李素可以通過(guò)部分調(diào)控p53信號(hào)通路而發(fā)揮抗腫瘤作用。總而言之，異鼠李素的抗腫瘤作用與抗增殖、促凋亡、抑制腫瘤細(xì)胞遷移和侵襲、抑制致癌基因表達(dá)或增加抑癌基因表達(dá)等途徑有關(guān)，提示異鼠李素在抗腫瘤方面可能具有一定的預(yù)防能力和臨床療效。但目前的研究仍存在不足，如在異鼠李素可增強(qiáng)抗腫瘤藥物活性這一方面，二者是如何起到協(xié)同作用的尚需研究者進(jìn)一步探索;與異鼠李素調(diào)節(jié)腫瘤微環(huán)境相關(guān)的研究仍較少，如異鼠李素是否能抑制腫瘤血管生成、是否有增強(qiáng)免疫等作用仍有待研究;現(xiàn)階段關(guān)于異鼠李素抗腫瘤機(jī)制的研究大部分還停留在體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)階段，研究人員應(yīng)盡快建立動(dòng)物模型對(duì)相關(guān)作用機(jī)制進(jìn)行體內(nèi)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證;同時(shí)需對(duì)異鼠李素的成藥性進(jìn)行分析，如異鼠李素的溶解性、穩(wěn)定性、生物利用度、半衰期、安全范圍等，以加快該化合物的新藥開(kāi)發(fā)進(jìn)程。

參考文獻(xiàn)

[ 1 ] FENG R M，ZONG Y N，CAO S M，et al. Current cancer situation in China：good or bad news from the 2018 Global Cancer Statistics？[J]. Cancer Commun（Lond），2019，39（1）：22.

[ 2 ] IMRAN M，RAUF A，ABU-IZNEID T，et al. Luteolin，a flavonoid，as an anticancer agent：a review[J]. Biomed Pharmacother，2019，112：108612.

[ 3 ] RAUF A，IMRAN M，KHAN I A，et al. Anticancer potential of quercetin：a comprehensive review[J]. Phytother Res，2018，32（11）：2109-2130.

[ 4 ] IMRAN M，SALEHI B，SHARIFI-RAD J，et al. Kaempferol：a key emphasis to its anticancer potential[J]. Molecules，2019，24（12）：2277.

[ 5 ] 張東，鄔國(guó)棟.沙棘黃酮的化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展[J].中國(guó)藥房，2019，30（9）：1292-1296.

[ 6 ] LIU X G，WU S Q，LI P，et al. Advancement in the chemical analysis and quality control of flavonoid in Ginkgo? ?biloba[J]. J Pharm Biomed Anal，2015，113：212-225.

[ 7 ] 李秋紅，欒仲秋，王繼坤.中藥槐米的化學(xué)成分、炮制研究及藥理作用研究進(jìn)展[J]. 中醫(yī)藥學(xué)報(bào)，2017，45（3）：112-116.

[ 8 ] WEI J，SU H L，BI Y，et al. Anti-proliferative effect of isorhamnetin on HeLa cells through inducing G2/M cell? ? ?cycle arrest[J]. Exp Ther Med，2018，15（4）：3917-3923.

[ 9 ] RAMACHANDRAN L，MANU K A，SHANMUGAM M K，et al. Isorhamnetin inhibits proliferation and invasion and induces apoptosis through the modulation of peroxisome proliferator-activated receptor γ activation pathway in ga- stric cancer[J]. J Biol Chem，2012，287（45）：38028-38040.

[10] KIM J E，LEE D E，LEE K W，et al. Isorhamnetin? ? ? suppresses skin cancer through direct inhibition of MEK1 and PI3K[J]. Cancer Prev Res（Phila），2011，4（4）：582- 591.

[11] LUAN Y Q，LUAN Y P，ZHAO Y J，et al. Isorhamnetin in Tsoong blocks Hsp70 expression to promote apoptosis of colon cancer cells[J]. Saudi J Biol Sci，2019，26（5）：1011-1022.

[12] DU Y R，JIA C，LIU Y，et al. Isorhamnetin enhances the radiosensitivity of A549 cells through interleukin-13 and the NF-κB signaling pathway[J/OL]. Front Pharmacol，2020，11：610772[2021-01-25]. https：//doi.org/10.3389/fphar.2020.610772.

[13] PALMER N，KALDIS P. Less-well known functions of cyc- lin/CDK complexes[J]. Semin Cell Dev Biol，2020，107：54-62.

[14] WANG J L，QUAN Q H，JI R F，et al. Isorhamnetin suppresses PANC-1 pancreatic cancer cell proliferation through S phase arrest[J]. Biomed Pharmacother，2018，108：925-933.

[15] WU Q，KROON P A，SHAO H J，et al. Differential effects of quercetin and two of its derivatives，isorhamnetin and isorhamnetin-3-glucuronide，in inhibiting the proliferation of human breast-cancer MCF-7 cells[J]. J Agric Food Chem，2018，66（27）：7181-7189.

[16] ELB?K C R，PETROSIUS V，S?RENSEN C S. WEE1 kinase limits CDK activities to safeguard DNA replication and mitotic entry[J/OL]. Mutat Res，2020，819/820：111694[2020-02-25]. https：//doi.org/10.1016/j.mrfmmm.2020.111694.

[17] 彭花，蔣孝華. Cdc25C和cyclin B1在細(xì)胞周期調(diào)控及腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用[J].現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生，2015，31（8）：1170-1173.

[18] CHOI Y H. Isorhamnetin induces ROS-dependent cycle? arrest at G2/M phase and apoptosis in human hepatocarcinoma Hep3B cells[J]. Gen Physiol Biophys，2019，38（6）：473-484.

[19] PARK C，CHA H J，CHOI E O，et al. Isorhamnetin indu- ces cell cycle arrest and apoptosis via reactive oxygen species-mediated AMP-activated protein kinase signaling pathway activation in human bladder cancer cells[J]. Cancers（Basel），2019，11（10）：1494.

[20] LI C，YANG X，CHEN C，et al. Isorhamnetin suppresses colon cancer cell growth through the PI3K-Akt-mTOR pathway[J]. Mol Med Rep，2014，9（3）：935-940.

[21] JARAMILLO S，LOPEZ S，VARELA L M，et al. The flavonol isorhamnetin exhibits cytotoxic effects on human colon cancer cells[J]. J Agric Food Chem，2010，58（20）：10869-10875.

[22] LI Q，REN F Q，YANG C L，et al. Anti-proliferation? ? ? ?effects of isorhamnetin on lung cancer cells in vitro and in vivo[J]. Asian Pac J Cancer Prev，2015，16（7）：3035-3042.

[23] MA G，YANG C L，QU Y，et al. The flavonoid component isorhamnetin in vitro inhibits proliferation and induces apoptosis in Eca-109 cells[J]. Chem Biol Interact，2007，167（2）：153-160.

[24] 朱棟良，尹小平，王芳元.異鼠李素對(duì)胃癌細(xì)胞增殖及凋亡的影響[J].中國(guó)普外基礎(chǔ)與臨床雜志，2018，25（3）：350-353.

[25] XIA X，YU Y，ZHANG L，et al. Inhibitor of DNA binding 1 regulates cell cycle progression of endothelial progenitor cells through induction of Wnt2 expression[J]. Mol Med Rep，2016，14（3）：2016-2024.

[26] BOEHM E M，GILDENBERG M S，WASHINGTON M T. The many roles of PCNA in eukaryotic DNA replication[J]. Enzymes，2016，39：231-254.

[27] WONG R S Y. Apoptosis in cancer：from pathogenesis to treatment[J]. J Exp Clin Cancer Res，2011，30（1）：87.

[28] GOLDAR S，KHANIANI M S，DERAKHSHAN S M，et al. Molecular mechanisms of apoptosis and roles in cancer development and treatment[J]. Asian Pac J Cancer Prev，2015，16（6）：2129-2144.

[29] RUAN Y S，HU K，CHEN H B. Autophagy inhibition? ? enhances isorhamnetin-induced mitochondria-dependent apoptosis in non-small cell lung cancer cells[J]. Mol Med Rep，2015，12（4）：5796-5806.

[30] HU J J，ZHANG Y H，JIANG X X，et al. ROS-mediated activation and mitochondrial translocation of CaMKⅡ contributes to Drp1-dependent mitochondrial fission and apoptosis in triple-negative breast cancer cells by isorhamnetin and chloroquine[J]. J Exp Clin Cancer Res，2019，38（1）：225-240.

[31] ZHANG Y，WEINBERG R A. Epithelial-to-mesenchymal transition in cancer：complexity and opportunities[J]. Front Med，2018，12（4）：361-373.

[32] 袁發(fā)煥，王海燕，李驚子. ECM，MMPs/TIMPs及其調(diào)節(jié)研究進(jìn)展[J].國(guó)外醫(yī)學(xué)：生理、病理科學(xué)與臨床分冊(cè)，2000，20（2）：93-96.

[33] NAGASE H，VISSE R，MURPHY G. Structure and function of matrix metalloproteinases and TIMPs[J]. Cardiovasc Res，2006，69（3）：562-573.

[34] FIORE E，F(xiàn)USCO C，ROMERO P，et al. Matrix metalloproteinase 9（MMP-9/gelatinase B）proteolytically cleaves ICAM-1 and participates in tumor cell resistance to na- tural killer cell-mediated cytotoxicity[J]. Oncogene，2002，21（34）：5213-5223.

[35] LUO W，LIU Q B，JIANG N，et al. Isorhamnetin inhibited migration and invasion via suppression of Akt/ERK-media- ted epithelial-to-mesenchymal transition（EMT）in A549 human non-small-cell lung cancer cells[J/OL]. Biosci Rep，2019，39（9）：BSR20190159[2019-09-20]. https：//doi.org/10.1042/BSR20190159.

[36] CAI F Z，ZHANG Y M，LI J W，et al. Isorhamnetin inhibited the proliferation and metastasis of androgen-independent prostate cancer cells by targeting the mitochondrion-? ? ? dependent intrinsic apoptotic and PI3K/Akt/mTOR pathway[J]. Biosci Rep，2020，40（3）：BSR20192826[2020-03-18]. https：//doi.org/10.1042/BSR20192826.

[37] ZHANG B Y，WANG Y M，GONG H，et al. Isorhamnetin flavonoid synergistically enhances the anticancer activity and apoptosis induction by cis-platin and carboplatin in non-small cell lung carcinoma（NSCLC）[J]. Int J Clin Exp Pathol，2015，8（1）：25-37.

[38] MANU K A，SHANMUGAM M K，RAMACHANDRAN L，et al. Isorhamnetin augments the anti-tumor effect of capecitabine through the negative regulation of NF-κB? signaling cascade in gastric cancer[J]. Cancer Lett，2015，363（1）：28-36.

[39] 杜倩倩，黃璐璐，劉春霞，等.異鼠李素與索拉非尼聯(lián)合對(duì)腎癌的抑制作用及作用機(jī)制[J].藥學(xué)學(xué)報(bào)，2019，54（8）：1424-1430.

[40] DUFFY M J，SYNNOTT N C，CROWN J. Mutant p53 as a target for cancer treatment[J]. Eur J Cancer，2017，83：258-265.

[41] SAUD S M，YOUNG M R，JONES-HALL Y L，et al. Chemopreventive activity of plant flavonoid isorhamnetin in colorectal cancer is mediated by oncogenic Src and β-catenin[J]. Cancer Res，2013，73（17）：5473-5484.

[42] JANANI C，RANJITHA KUMARI B D. PPAR gamma gene：a review[J]. Diabetes Metab Syndr，2015，9（1）：46- 50.

[43] COUSSENS L M，WERB Z. Inflammation and cancer[J]. Nature，2002，420（6917）：860-867.

[44] NAKANISHI M，ROSENBERG D W. Multifaceted roles of PGE2 in inflammation and cancer[J]. Semin Immunopathol，2013，35（2）：123-137.

[45] 陳觀平，李明乾，應(yīng)栩華.異鼠李素通過(guò)mTOR通路抑制肺癌增殖、侵襲及其機(jī)制研究[J].中藥材，2021，44（2）：423-428.

（收稿日期：2021-07-12 修回日期：2021-10-28）