李 莉，何華瓊

(湖北醫(yī)藥學院基礎(chǔ)醫(yī)學院機能實驗室，湖北 十堰 442000)

急性心肌梗死(AMI)缺血心肌早期存在不應(yīng)期縮短、靜息電位降低和易損期延長，嚴重者常迅速引起心力衰竭[1-2]。除早期再灌注后氧自由基生成過多及心肌氧化應(yīng)激造成心肌缺血及再灌注損傷外，鈣通道不正常的離子內(nèi)流也是造成心室肌易損性的重要原因[3-4]。目前對丹參及丹參制劑的研究已較多，其中丹參滴丸已被廣泛用于防治冠心病、心絞痛和心肌梗死，但其對引起心室肌的易損性及心力衰竭的電生理改變，尤其對早期缺血和再灌注心室肌有效不應(yīng)期(ERP)及心室易損期(VVP)的影響，以及其對AMI心功能改變的影響如何缺少系統(tǒng)研究。本實驗的創(chuàng)新點在于觀察鈣通道的電生理改變與心室肌易損性的相互關(guān)系，探討丹參滴丸對AMI模型大鼠離體心臟心肌易損性的電生理機制。

1 材料與方法

1.1動物造模及分組 SD大鼠60只，體重(180±10)g，雌雄不拘，實驗動物由武漢金塘鑫養(yǎng)殖科技有限公司提供，許可證號：SCXK(鄂)2014-0015。實驗前采用隨機、對照、盲法原則將60只大鼠分為對照組、模型組、維拉帕米組、丹參滴丸組(A組)和維拉帕米+丹參滴丸組(B組，先給予維拉帕米再給予丹參滴丸)，丹參滴丸+維拉帕米組(C組，先給予丹參滴丸再給予維拉帕米)，每組10只。除對照組外，其他4組均用垂體后葉素(15 U/kg)于尾靜脈注射建立大鼠AMI模型[5]。以心電圖(Ⅱ?qū)?lián))T波高聳或倒置、少量Q波及ST段抬高及為大鼠AMI成功標準。本實驗所有造模動物在注射垂體后葉素均符合上述入選標準[6]。

1.2藥品與設(shè)備 丹參滴丸(天津天士力制藥股份有限公司，批號：101Z19105)、鹽酸維拉帕米片(廣東華南藥業(yè)集團有限公司，批號：180734、H18304和180437)；原子吸收光譜儀(北京朝陽華洋分析儀器有限公司是研制開發(fā)生產(chǎn)光譜分析儀器)、泰盟BL-420F生物機能實驗系統(tǒng)/生物信號采集與分析系統(tǒng)/多道生理記錄儀(成都泰盟軟件有限公司)。

1.3檢測指標及方法 采用原子吸收光譜法檢測心肌組織間液中Ca2+濃度；用BL-420F生物信號采集記錄系統(tǒng)記錄程序性電刺激誘發(fā)的有效不應(yīng)期(ERP)、心室易損期(VVP)時程、心室顫動閾值(VFT)，并統(tǒng)計心室顫動(VF)發(fā)生率。

2 結(jié) 果

模型組VVP時程延長、VF發(fā)生率升高，而ERP時程縮短、VFT和Ca2+降低，與對照組比較差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。維拉帕米組VVP時程縮短、VF發(fā)生率均明顯降低，ERP時程延長、VFT和Ca2+升高，與模型組比較差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。A、B、C組VVP時程縮短、VF發(fā)生率明顯降低，ERP時程延長、VFT和Ca2+升高，與模型組比較差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。但B、C組Ca2+、VFT 和VF與A組和維拉帕米組比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。B組和C組比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 丹參滴丸對大鼠心室 VVP、ERP時程和VFT 、Ca2+、VF的影響

3 討 論

VVP是指心室相對不應(yīng)期開始之初這一短暫時期，此時整個心室肌的興奮不一致，心室肌細胞群之間的興奮性處于離散狀態(tài)，當有其他興奮傳來或受到一定強度的期外刺激時易發(fā)生單向阻滯和傳導延緩而形成折返[7]。在AMI狀態(tài)下，心肌嚴重缺血，這會造靜息電位降低及不應(yīng)期縮短，從而導致心室肌細胞群興奮性和不應(yīng)期離散度增大，使VVP時程延長[8]。研究證實，再灌注后VFT降低，故再灌注時心肌的VF發(fā)生率增高[9]。缺血和再灌注后快Na+通道開放降低，因此Na+內(nèi)流減少，另外，缺血缺氧也會所致心肌能量代謝障礙(胞內(nèi)ATP減少)，鉀通道激活導致K+大量外流，以及缺氧所致氧自由基產(chǎn)生的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)損傷了細胞膜，細胞內(nèi)鈣超載等均會引起心律失常[10-11]。因此，阻止Ca2+內(nèi)流預(yù)防鈣超載，提高VFT、縮短VVP或(和)延長ERP等均可減少異位興奮或期外刺激引起心律失常的機會，從而降低缺血再灌注心肌VF的發(fā)生。本實驗結(jié)果表明，丹參滴丸與維拉帕米相似，可拮抗AMI心肌的VVP延長和ERP縮短的現(xiàn)象，這種作用對于降低AMI早期心肌的易損性和減少VF的發(fā)生率具有重要意義。

丹參滴丸由丹參、三七和冰片組成。其中，丹參為君藥，主要有效藥理成分有總丹參酮、丹參酚酸B、丹參酮ⅡA及丹參酚酸類合成劑等[12-13]。因其“味辛性涼，活血通經(jīng)，涼血消癰，治心肌腹痛”，常用于心腦血管、抗腫瘤化療的聯(lián)合用藥[14]。三七為臣藥，屬五加科人參屬植物，其味甘、微苦，性溫，歸肝、胃、心、小腸經(jīng)。皂苷類為三七的主要藥理活性成分，具有散瘀、止血、止痛、消腫、強壯、補虛等功效，主治外傷出血、跌打腫痛、衄血、咯血等，近年來常用于治療冠心病、抗心絞痛等[15-16]。冰片為佐藥，具有清熱止痛、開竅醒神之功效，方中主要作用為引導其他藥物進入靶點，促進藥物在靶點發(fā)揮藥效的作用。分析認為，AMI為實癥，AMI常可導致患者心力衰竭而死亡。丹參滴丸除直接擴張冠狀動脈、增加缺血心肌組織血液流量外，還可能通過阻止Ca2+內(nèi)流預(yù)防鈣超載而改善AMI后心力衰竭心功能。由此推測，丹參滴丸降低AMI心肌的易損性與其選擇性鈣通道阻滯有關(guān)。

本實驗除設(shè)置有對照組、模型組外，還設(shè)置有選擇性鈣通道阻滯維拉帕米組、丹參滴丸組(A組)、維拉帕米+丹參滴丸組(B組)，丹參滴丸+維拉帕米組(C組)。目的是觀察維拉帕米、丹參滴丸及不同給藥順序?qū)︹}通道中Ca2+濃度的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，丹參滴丸也具有與維拉帕米相類似的鈣拮抗作用，且兩者同時灌流AMI心臟時作用增強，如B組和C組的Ca2+濃度明顯高于A組和維拉帕米組，且這種增強效應(yīng)與給藥順序無關(guān)。另外，B組和C組對VFT和VF的作用較A組和維拉帕米組更加明顯，提示丹參滴丸和維拉帕米兩藥同時灌流可提高AMI心臟VFT，這對減少AMI患者VF的發(fā)生、降低AMI早期心肌易損性具有重要意義。