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贛南柑桔木虱發(fā)生動態(tài)與攜帶黃龍病菌變化研究

2022-01-28 07:39陳慈相謝金招余海中習(xí)建龍宋志青
中國南方果樹 2022年1期
關(guān)鍵詞:柑桔黃龍病株

陳慈相,胡 燕,謝金招,余海中,習(xí)建龍,李 航,宋志青

(1 江西省贛州市果樹技術(shù)推廣站,江西贛州,341000;2 江西省臍橙工程技術(shù)研究中心,江西贛州,341000;3 贛南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,江西贛州,341000)

柑桔黃龍病(Citrus Huanglongbing,HLB)是柑桔產(chǎn)業(yè)上的一種毀滅性病害,能為害幾乎所有柑桔品種[1]。柑桔木虱(Diaphorinacitri)是田間傳播柑桔黃龍病的主要媒介昆蟲,主要為害柑桔嫩梢,其田間發(fā)生量和攜帶黃龍病菌(CandidatusLiberibacter asiaticus,Las)率是柑桔黃龍病發(fā)生蔓延的決定性因素[2-4]。贛南最早于1979年發(fā)現(xiàn)有柑桔黃龍病和柑桔木虱發(fā)生,至今已有40余年的歷史。2013年,受暖冬、臍橙價格低迷后部分果農(nóng)棄管等因素影響,贛南柑桔木虱數(shù)量激增,導(dǎo)致柑桔黃龍病出現(xiàn)大暴發(fā)[5]。雖然近年來通過采取一系列綜合防控措施使疫情得到了明顯控制,但因缺乏有效的治療藥劑,該病仍然是當(dāng)前對贛南臍橙產(chǎn)業(yè)威脅最大的病害。目前,防治柑桔木虱是防控柑桔黃龍病的關(guān)鍵措施,了解柑桔木虱種群數(shù)量及其攜帶黃龍病菌情況對疫情防控具有重要意義。本研究于2016—2020年定點、定時監(jiān)測了贛南柑桔木虱發(fā)生動態(tài),分別于2018年和2020年檢測了正常管理果園和失管果園柑桔木虱成蟲帶菌率變化,以期為柑桔黃龍病和柑桔木虱的防控提供參考。

1 材料與方法

1.1 柑桔木虱田間發(fā)生動態(tài)監(jiān)測

1.1.1 監(jiān)測地點

2016—2020年,在贛南柑桔產(chǎn)區(qū)的安遠縣、信豐縣、大余縣、會昌縣、崇義縣、上猶縣、南康區(qū)、于都縣、興國縣、寧都縣10縣(區(qū)),選擇20個[信豐、會昌各3個,于都、安遠各1個,其余6縣(區(qū))各2個;品種均為紐荷爾臍橙,樹齡8~25年]正常管理的柑桔果園進行柑桔木虱田間發(fā)生動態(tài)監(jiān)測。

1.1.2 監(jiān)測方法

1—2月每月15日和30日(2月為28日)各調(diào)查一次;3—12月每隔5 d調(diào)查一次,每月調(diào)查6次,即每月5日、10日、15日、20日、25日、30日為調(diào)查日。每個果園按五點取樣法,每次隨機選5株樹,每株樹按東、南、西、北、頂5個方位各調(diào)查2枝共10枝新梢(或新芽)上柑桔木虱成蟲數(shù)量,每個監(jiān)測果園每次共調(diào)查50枝新梢(或新芽)[6]。

1.2 柑桔木虱攜帶黃龍病菌變化調(diào)查

1.2.1 柑桔木虱采集

2018年9月和2020年9月,在龍南市、尋烏縣、安遠縣、信豐縣、會昌縣、崇義縣、瑞金市、上猶縣8縣(市)選擇53個正常管理果園(2018年20個,龍南、尋烏、會昌各2個,安遠、信豐、崇義各3個,瑞金4個,上猶1個;2020年33個,上猶1個,尋烏、崇義各2個,龍南、安遠、瑞金各4個,信豐7個,會昌9個)和32個失管果園(2018年5個,龍南、尋烏各2個,安遠1個;2020年27個:龍南、尋烏各1個,崇義、上猶各2個,瑞金、信豐各3個,安遠4個,會昌11個)采集柑桔木虱成蟲,帶回實驗室。正常果園,2018年共采集了134頭成蟲,2020年共采集了354頭成蟲。失管果園,2018年共采集了18頭成蟲,2020年共采集了379頭成蟲。

1.2.2 柑桔木虱DNA提取

用動物組織直接PCR試劑盒(福際)制備單頭柑桔木虱的DNA(方法參照試劑盒說明書),制備產(chǎn)物直接用于PCR反應(yīng)或置于-20 ℃保存。

1.2.3 實時熒光定量PCR檢測

采用SYBR GreenⅠ熒光染料法,利用引物對CQULA04F/CQULA04R[7]進行黃龍病菌檢測。反應(yīng)體系為:2×SYBR GreenⅠMaster 5μL,10 μmol/L上下游引物各0.3 μL,無菌水3.4 μL,DNA模板1 μL。反應(yīng)在實時熒光定量PCR儀(Roche LightCycler?480 II,384)上進行。擴增程序為:95 ℃ 5 min;95 ℃ 10 s,60 ℃ 10 s,72 ℃ 10 s,45個循環(huán);95 ℃ 5 s;65 ℃ 1 min,97 ℃ 1 s;37 ℃ 30 s。每個樣品3次重復(fù),每次擴增分別設(shè)1個陽性對照,1個陰性對照和1個空白對照。

1.3 柑桔黃龍病病株率調(diào)查

在采集柑桔木虱的同時,從正常管理果園中再選擇10個果園(龍南、尋烏、安遠、信豐、會昌、上猶各1個,崇義、瑞金各2個),根據(jù)柑桔感染黃龍病后葉片斑駁黃化、黃梢和“紅鼻果”等典型癥狀進行發(fā)病調(diào)查,并計算病株率。

1.4 數(shù)據(jù)分析

試驗數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0軟件進行統(tǒng)計分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 贛南柑桔木虱發(fā)生動態(tài)變化

通過對20個正常管理果園進行定點、定時監(jiān)測,結(jié)果表明,贛南柑桔木虱成蟲年度發(fā)生規(guī)律相似。1—2月,成蟲處于越冬狀態(tài),發(fā)生數(shù)量較低;3月隨著氣溫上升和春梢萌發(fā),成蟲量開始逐漸增多,發(fā)生高峰期主要集中在5月下旬至10月上旬,下半年發(fā)生量明顯高于上半年,與前期研究結(jié)果一致[6]。2016—2019年,柑桔木虱成蟲年度發(fā)生最高峰平均蟲量依次為84頭/百梢(8月5日)、81頭/百梢(9月10日)、57頭/百梢(7月10日)、25頭/百梢(9月25日),發(fā)生數(shù)量呈逐年降低趨勢。尤其是2018年和2019年下降明顯,與上年相比分別下降29.63%和56.14%;但2020年柑桔木虱發(fā)生數(shù)量較前幾年明顯增加,最高峰平均蟲量達93頭/百梢(8月30日)(見圖1)。

圖1 2016—2020年贛南正常管理果園柑桔木虱成蟲發(fā)生動態(tài)

2.2 柑桔木虱攜帶黃龍病菌變化

2.2.1 正常管理果園

對采集的柑桔木虱成蟲進行單頭木虱Las檢測的結(jié)果表明,2018年帶菌柑桔木虱為27頭,帶菌率為20.15%,帶菌木虱的平均CT值為27.75±2.44(平均值±標準差,下同);2020年帶菌柑桔木虱為46頭,帶菌率為12.99%,帶菌木虱的平均CT值為28.06±1.54。這表明,總體上,2020年贛南正常管理果園柑桔木虱帶菌率較2018年有所下降,帶菌木虱體內(nèi)帶菌量(以平均CT值表示)差異無顯著(p>0.05)。不同區(qū)域正常管理果園柑桔木虱帶菌率存在一定差異,2018年從高到低依次為崇義>龍南>尋烏>會昌>安遠>瑞金>上猶>信豐,2020年依次為崇義>會昌>安遠>上猶>尋烏>瑞金>信豐>龍南。除安遠、信豐和上猶外,其他5個縣(市)2020年柑桔木虱帶菌率均較2019年有所下降(見圖2)。

圖2 正常管理果園柑桔木虱成蟲帶菌變化情況

2.2.2 失管果園

對采集的柑桔木虱成蟲進行單頭木虱Las檢測的結(jié)果表明,2018年帶菌柑桔木虱為15頭,帶菌率為83.33%,帶菌木虱的平均CT值為24.50±4.40;2020年帶菌柑桔木虱為196頭,帶菌率為51.72%,帶菌木虱的平均CT值為28.20±2.94??梢?,2020年柑桔木虱帶菌率較2018年有所下降。同一區(qū)域,失管果園柑桔木虱成蟲帶菌率大多明顯高于正常管理果園(見圖3)。

圖3 2020年同一區(qū)域正常管理果園與失管果園柑桔木虱成蟲帶菌率對比

2.3 柑桔木虱帶菌率與黃龍病病株率關(guān)系

10個正常管理果園的病株率,2018年為(7.197±4.405)%,2020年為(5.931±4.576)%。對柑桔黃龍病病株率(x)和柑桔木虱帶菌率(y)進行相關(guān)回歸分析的結(jié)果表明,總的線性回歸方程為y= 2.893 5x+ 5.888 8,R2= 0.619 9(p<0.001);2018年的相關(guān)方程式為y=2.761 6x+0.074 6,R2=0.763 5(p<0.001);2020年的回歸方程式為y=3.470 2x+9.232 4,R2=0.815 8(p<0.001)(見圖4)。即,柑桔黃龍病病株率和柑桔木虱帶菌率呈極顯著正相關(guān)。

圖4 正常管理果園2018年(左)和2020年(右)柑桔木虱帶菌率與黃龍病病株率關(guān)系

3 討論與結(jié)論

柑桔木虱是柑桔新梢害蟲,柑桔木虱成蟲只產(chǎn)卵于新梢嫩芽,沒有新梢則不產(chǎn)卵繁殖。在贛南地區(qū),柑桔木虱全年發(fā)生高峰期集中在5月下旬至10月上旬,與柑桔夏梢、秋梢、晚秋梢抽發(fā)期吻合;不同年份的具體發(fā)生高峰期存在差異,可能與當(dāng)年的氣候因素導(dǎo)致柑桔抽梢期變化有關(guān)。自2013年柑桔木虱大發(fā)生以來,贛南把柑桔木虱列為最重要的害蟲進行防治,推廣了抓“五個關(guān)鍵時期”高效藥劑防治、大區(qū)域統(tǒng)防統(tǒng)治和小區(qū)域“中心戶長制”聯(lián)防聯(lián)控,以及抹除夏梢、晚秋梢等綜合防控措施,取得了良好的防控效果。因此,2016—2019年贛南正常管理果園柑桔木虱發(fā)生數(shù)量逐年下降。2020年柑桔木虱發(fā)生數(shù)量明顯增加的原因,推測可能是受新冠肺炎疫情影響,果農(nóng)冬季、早春清園工作無法正常進行,導(dǎo)致越冬蟲口基數(shù)增多;加上5—6月贛南地區(qū)降雨多而頻繁,促使夏梢大量抽發(fā)且不整齊,導(dǎo)致6月底柑桔木虱蟲口數(shù)量明顯增加,于8月底秋梢期發(fā)生量到達全年最高峰。

秋冬季節(jié)柑桔葉片和果實更易表現(xiàn)出典型的柑桔黃龍病癥狀,植株內(nèi)病菌含量較高,柑桔木虱的獲菌率和體內(nèi)病菌濃度也隨之增高。有研究結(jié)果表明,單頭柑桔木虱含菌量在4—7月處于較低水平,隨后開始上升,9—12月柑桔木虱體內(nèi)含菌量較高[8-9]。但10月中旬后由于氣溫降低和秋梢老熟,田間柑桔木虱蟲口數(shù)量較低[6]。因此,本研究選擇在秋季9月采集田間柑桔木虱進行Las檢測。檢測結(jié)果表明,2020年正常管理果園和失管果園柑桔木虱帶菌率均低于2018年,失管果園柑桔木虱帶菌率遠高于正常管理果園。通過對柑桔木虱帶菌率與果園病株率進行相關(guān)回歸分析,發(fā)現(xiàn)柑桔木虱帶菌率與果園黃龍病病株率呈極顯著正相關(guān)關(guān)系,這與余繼華等[3]的研究結(jié)果一致。由此推測,2016—2019年贛南柑桔木虱帶菌率降低可能與贛南地區(qū)柑桔黃龍病平均發(fā)病株率逐年下降有關(guān);失管果園由于樹勢弱,抽梢不整齊,加上長期不打藥防治柑桔木虱,黃龍病發(fā)病株率較高,因此柑桔木虱的帶菌率也更高。

針對贛南柑桔木虱發(fā)生動態(tài)及其攜帶黃龍病菌情況,建議在柑桔木虱防治中重點加強下半年的柑桔木虱防治力度,尤其是夏梢、秋梢、晚秋梢萌發(fā)期的防治;同時要及時清除正常管理果園中的病樹,并徹底清理失管果園,從而減少黃龍病傳染源。

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