呂穎，馮巖，王景順

(1.河南省漯河市中心血站檢驗科， 河南 漯河 462001；2.漯河市中心醫(yī)院輸血科)

不規(guī)則抗體是由輸血、移植、母嬰(胎)血型不合妊娠、注射免疫物質(zhì)等刺激誘導(dǎo)下產(chǎn)生的非ABO血型系統(tǒng)的紅細(xì)胞血型抗體，血液中存在不規(guī)則抗體可引起交叉配血不合、血型鑒定困難、新生兒溶血病、溶血性輸血反應(yīng)等，對患者的輸血安全和輸血治療效果造成很大影響。妊娠婦女血液中存在的IgG不規(guī)則抗體可通過胎盤屏障進(jìn)入胎兒血液循環(huán)中，破壞胎兒紅細(xì)胞而引起新生兒溶血病[1]。近年來，隨著二孩政策的放開，多次妊娠分娩產(chǎn)婦數(shù)量明顯增加，妊娠婦女不規(guī)則抗體的產(chǎn)生風(fēng)險大大增加。本文分析在漯河市中心醫(yī)院進(jìn)行產(chǎn)檢的8540例妊娠婦女不規(guī)則抗體篩查結(jié)果及臨床病歷資料，報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選擇2019年1月至2020年10月于漯河市中心醫(yī)院產(chǎn)檢的8540例妊娠婦女為研究對象，年齡20～41歲；有輸血史產(chǎn)婦269例，無輸血史產(chǎn)婦8271例；無妊娠史者2257例，1次妊娠史者935例，2次妊娠史者2895例，妊娠史≥3次者2453例；妊娠婦女年齡<25歲者2386例，年齡25～35歲者3633例，年齡>35歲者2521例；妊娠婦女中血型為A型2602例，B型2532例，O型2454例，AB型952例。不規(guī)則抗體檢查均經(jīng)過妊娠婦女本人或其家屬同意，并在妊娠早期首次產(chǎn)檢建孕期保健卡時，將不規(guī)則抗體篩查列為孕期常規(guī)檢測項目。

1.2 主要試劑和儀器

主要試劑 2-巰基乙醇(2-Me)和抗人球蛋白檢測卡(長春博迅生物提供)，抗-A/抗-B血型定型試劑、譜細(xì)胞、抗體篩選紅細(xì)胞試劑盒(上海血液生物提供)，所有試劑均有生產(chǎn)廠家合格鑒定報告證書，在有效期內(nèi)應(yīng)用。主要儀器 BASO血清學(xué)離心機(貝索生物公司)，F(xiàn)YQ型免疫微柱凝膠孵育器和TD-3A型血型血清學(xué)用離心機(長春博研生產(chǎn))。

1.3 檢查方法

采集所有妊娠婦女空腹手臂肘靜脈血4mL，抗-A/抗-B血型定型試劑檢測ABO血型，妊娠婦女血液標(biāo)本離心后分離血清備用。標(biāo)記抗人球蛋白檢測卡，取不規(guī)則抗體篩查細(xì)胞，分別在相應(yīng)微孔中加入Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ號篩查細(xì)胞各50μL，在上述各孔中加入孕婦血清50μL，恒溫孵育器中37℃孵育15min，離心5min，觀察和判定不規(guī)則抗體檢查結(jié)果。對不規(guī)則抗體篩查結(jié)果陽性者應(yīng)用譜細(xì)胞檢測抗體特異性，應(yīng)用2-Me檢測不規(guī)則抗體IgG型或IgM型類別。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

應(yīng)用SPSS21.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計數(shù)資料以[n(%)]表示，采用χ2檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 妊娠婦女不規(guī)則抗體檢出情況

8540例妊娠婦女中，共檢查出74例(0.87%)不規(guī)則抗體陽性，其中Rh血型系統(tǒng)52例(70.27%)，MNS血型系統(tǒng)15例(20.27%)，Lewis血型系統(tǒng)6例(8.11%)，P血型系統(tǒng)1例(1.35%)。見表1。

表1 74例不規(guī)則抗體分布及特異性檢測結(jié)果

2.2 不規(guī)則抗體在妊娠婦女不同分組人群檢出情況

有輸血史妊娠婦女不規(guī)則抗體陽性率高于無輸血史妊娠婦女，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；妊娠次數(shù)越多不規(guī)則抗體陽性率越高，不同妊娠次數(shù)陽性率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；不同年齡段和不同血型妊娠婦女分組不規(guī)則抗體陽性率分別比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表2 妊娠婦女不同分組中不規(guī)則抗體檢出情況比較

2.3 不同孕期妊娠婦女不規(guī)則抗體檢出情況

孕晚期檢測出不規(guī)則抗體40例，檢出率為0.47%(40/8540)，Rh血型系統(tǒng)32例中抗-E(包括抗-Ec)23例，抗-D 4例，抗-C 2例，抗-c、抗-e、抗-Ce均1例；MNS血型系統(tǒng)6例均為抗-M。孕中期檢測出不規(guī)則抗體23例，檢出率為0.27%(23/8540)，Rh血型系統(tǒng)14例中抗-E(包括抗Ec)7例，抗-D 1例，抗-C 3例，抗-e、抗-c、抗-Ce均1例；MNS血型系統(tǒng)抗-M 5例。孕早期檢測出不規(guī)則抗體11例，檢出率為0.13%(11/8540)，Rh血型系統(tǒng)6例中抗-E 3例，抗-c 2例，抗-D 1例；MNS血型系統(tǒng)抗-M 3例，抗-S 1例。孕晚期不規(guī)則抗體檢出率高于孕中期、孕早期(χ2=4.604，P=0.032；χ2=16.540，P=0.000)，孕中期抗體檢出率高于孕早期(χ2=4.244，P=0.039)，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。見表3。

表3 不同孕期孕婦不規(guī)則抗體檢出情況[n(%)]

2.4 Rh血型系統(tǒng)不規(guī)則抗體效價測定情況

52例Rh血型系統(tǒng)不規(guī)則抗體中，22例(42.31%)抗體效價≤2；1例抗體效價為512，為RhD陰性妊娠婦女，以往有輸注RhD陽性紅細(xì)胞輸血史。見表4。

表4 52例Rh血型系統(tǒng)紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體效價測定情況

3 討論

不規(guī)則抗體是除ABO血型系統(tǒng)以外的其他血型系統(tǒng)抗體，在正常人群中發(fā)生率約為0.3%～2%，大部分屬IgG抗體，少部分為IgM抗體，是引起血型正反定型不一致、主次側(cè)交叉配血不相合、貧血、溶血性輸血不良反應(yīng)、新生兒溶血病的重要原因[2]。妊娠婦女血液中存在的不規(guī)則抗體主要是IgG抗體，其可通過胎盤屏障進(jìn)入胎兒血液循環(huán)，進(jìn)而破壞胎兒血液中紅細(xì)胞，輕則可引起胎兒/新生兒貧血、黃疸、水腫、肝脾腫大，重則可引起早產(chǎn)、流產(chǎn)、死胎而危及胎兒/新生兒的生命安全[3]。祝麗麗等[4]研究發(fā)現(xiàn)，二孩孕婦Rh血型不規(guī)則抗體陽性率高于首次妊娠婦女，因此妊娠婦女進(jìn)行不規(guī)則抗體檢查對于預(yù)防新生兒溶血病的發(fā)生具有重要意義。

本文結(jié)果顯示，在8540例妊娠婦女中共檢出74例不規(guī)則抗體陽性(0.87%)，低于張群等[5]報道的1.05%，高于孫文瑾等[6]報道的0.434%。檢出的不規(guī)則抗體以Rh血型系統(tǒng)最多，共52例(70.27%)，其中抗-E 25(33.78%)、抗-Ec 8例(10.81%)、抗-C 5例(6.76%)、抗-D 6例(8.11%)。目前獻(xiàn)血者和臨床患者輸血治療前只進(jìn)行ABO血型A/B抗原和Rh血型D抗原檢查，而并未常規(guī)檢查Rh血型系統(tǒng)E、e、C、c抗原，這些未常規(guī)檢查的抗原也可刺激孕婦機體產(chǎn)生相應(yīng)抗體而誘發(fā)新生兒溶血病。有多次妊娠史的妊娠婦女應(yīng)進(jìn)行抗-E和E抗原常規(guī)檢查，對于有生育需求的女性給予E抗原同型血液輸注，以避免由抗-E所致新生兒溶血病的發(fā)生。

本文8540例妊娠婦女中14例檢測出抗-M抗體，抗-M抗體常以IgM形式存在，多屬于天然抗體而不能通過胎盤屏障，多數(shù)抗-M抗體在<37℃條件下發(fā)生反應(yīng)，因而這一類別的抗體往往臨床意義不大[7]。此外，妊娠婦女中檢出6例(8.11%)Lewis血型系統(tǒng)不規(guī)則抗體，Lewis血型系統(tǒng)抗原只表達(dá)于胎兒的分泌液中，而紅細(xì)胞上常不存在Lewis血型系統(tǒng)抗原，因而Lewis血型系統(tǒng)不規(guī)則抗體不會引起嚴(yán)重的新生兒溶血病[8]。本文結(jié)果顯示，不同妊娠次數(shù)妊娠婦女中，隨妊娠次數(shù)增加不規(guī)則抗體陽性率升高，不同妊娠次數(shù)不規(guī)則抗體陽性率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，這可能與妊娠婦女受多次妊娠免疫刺激相關(guān)[9]；有輸血史妊娠婦女不規(guī)則抗體陽性率高于無輸血史，而年齡和血型因素對妊娠婦女不規(guī)則抗體的產(chǎn)生未見明顯影響。袁詠梅等[10]研究結(jié)果顯示，初胎孕婦不規(guī)則抗體陽性率(25.9%)低于兩胎及兩胎以上孕婦(75.1%)，無妊娠史孕婦不規(guī)則抗體陽性率(31.6%)低于有妊娠史孕婦(68.4%)，無輸血史孕婦陽性率(44.1%)低于既往有輸血史孕婦(55.9%)。因此，這些既往有輸血/妊娠史的妊娠婦女輸血前/產(chǎn)前進(jìn)行不規(guī)則抗體檢查和干預(yù)對于預(yù)防同種免疫反應(yīng)的發(fā)生尤為重要。

8540例妊娠婦女孕早期、中期、晚期不規(guī)則抗體檢出率分別為0.13%(11例)、0.27%(23例)和0.47%(40例)，孕晚期不規(guī)則抗體檢出率高于早期和中期(P<0.05)，孕中期抗體陽性率高于孕早期(P<0.05)。這可能為隨著孕周增加胚胎期RBC抗原逐漸成熟，同時妊娠晚期胎兒與母體血液交換增多，促進(jìn)母體產(chǎn)生不規(guī)則抗體，使抗體陽性率升高[11]。本文檢出的52例Rh血型系統(tǒng)紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體孕婦中，22例(42.31%)抗體效價≤2；1例孕婦抗體效價為512，病史和實驗室檢查結(jié)果顯示，其為RhD陰性，以往有輸注RhD陽性紅細(xì)胞史。研究顯示，妊娠婦女血液中Rh血型系統(tǒng)紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體的效價越高，新生兒溶血病發(fā)病風(fēng)險也越高，且患兒病情也越嚴(yán)重[12]。因而，對于體內(nèi)檢出Rh血型系統(tǒng)不規(guī)則抗體的妊娠婦女應(yīng)給予足夠關(guān)注，若其抗體效價隨孕周增加而不斷升高，應(yīng)加強不規(guī)則抗體的監(jiān)測，分娩后新生兒應(yīng)進(jìn)行新生兒溶血病相關(guān)檢查，病情嚴(yán)重的患兒及早給予治療[13]。

綜上所述，漯河地區(qū)妊娠婦女不規(guī)則抗體陽性率為0.87%，主要為Rh血型系統(tǒng)，其次為MNS血型系統(tǒng)和Lewis血型系統(tǒng)，既往有妊娠和輸血史是紅細(xì)胞不規(guī)則抗體產(chǎn)生的主要原因，妊娠婦女進(jìn)行不規(guī)則抗體檢查可提高輸血安全，預(yù)防、減少新生兒溶血病的發(fā)生。