吳克釵 薛玉蝶 吳小麗

慢性腎小球腎炎（CGN）是由各種病原微生物感染，可引起雙側(cè)腎小球彌漫性或局部性炎性改變的一種疾病[1]。CGN 具有發(fā)病隱匿，病程遷延，伴有不同程度的蛋白尿、血尿和進行性腎功能減退等特點，后期一般預后較差[2]。因此探究CGN 的發(fā)病因素及與腎功能的關(guān)系，對疾病預后有重要意義?？扇苄阅蚣っ感屠w溶酶原激活物受體（suPAR）可促進纖溶酶原激活、細胞黏附、趨化性和免疫細胞激活，已成為潛在的標志物[3-4]。胱抑素C（Cys-C）是大多數(shù)有核細胞分泌的內(nèi)源性半胱氨酸蛋白酶抑制劑[5]，具有預測急性腎損傷（AKI）的潛在價值[6]。本研究通過檢測CGN患者血漿suPAR、Cys-C 表達水平，分析二者與腎功能指標及預后的相關(guān)性，以期為臨床判斷CGN 預后提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2016 年11 月—2018 年12 月于溫州醫(yī)科大學附屬蒼南醫(yī)院腎內(nèi)科收治的CGN患者100 例作為研究組，另選取同期在本院進行體檢的健康人90 名作為對照組。本研究獲得醫(yī)院倫理委員會批準后實施，批準編號：LS-2016-0121；所有研究對象及家屬簽署知情同意書。

1.2 納入及排除標準 納入標準：（1）所有患者均符合中華中醫(yī)藥學會腎病分會制定的《慢性腎小球腎炎的診斷、辨證分型及療效評定（試行方案）》中對CGN 的診斷標準[7]；（2）患者病歷資料完整，有完整隨訪記錄；（3）同意遵守醫(yī)囑。排除標準：（1）患有某些會損害腎臟的疾?。ǜ哐獕?、糖尿病等）、尿路結(jié)石、急慢性前列腺疾??；（2）嚴重肝腎功能不全或衰竭者；（3）合并自身免疫性疾病的患者。

1.3 主要試劑與儀器 尿素氮（BUN）、血清肌酐（SCr）、尿酸（UA）、二氧化碳結(jié)合力（CO2CP）酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）試劑盒（上海江萊生物科技有限公司，批號分別為JL19704、1530422946、1529949594、TC0277）；血漿suPAR ELISA 試劑盒（青島捷世康生物科技有限公司，批號SJH-012988）；血漿Cys-C ELISA 試劑盒（上海雅吉生物科技有限公司，批號YS07378B）；醫(yī)用離心機（北京醫(yī)療器械有限公司，型號B600）；血氧飽和儀（美國通用公司，型號6051-0000-159）；全自動生化分析儀（美國Beckman Coulter 公司，型號AU5800）。

1.4 方 法

1.4.1 臨床資料收集 收集受試者收縮壓、舒張壓、體質(zhì)量指數(shù)（BMI）等一般資料。全自動生化分析儀檢測受試者血清總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、BUN、SCr、UA、CO2CP 水平。

1.4.2 標本采集 所有患者均于入院后、體檢者于體檢當日分別抽取肘靜脈血5mL，置于含枸櫞酸鈉抗凝劑的抽血管內(nèi)上下顛倒混勻，均靜置30min，室溫條件下3000r/min，離心15min，吸取上清液分別裝入EP 管中，置于-80℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4.3 血漿suPAR、Cys-C 水平檢測 從-80℃冰箱中取出凍存血漿樣本，解凍，采用ELISA 法測定受試者血漿suPAR、Cys-C 水平，樣品及標準品均設(shè)雙孔檢驗，用酶標儀檢測吸光度值，并繪制標準曲線，計算suPAR、Cys-C 的濃度，所有操作均嚴格按照試劑盒說明書進行。

1.4.4 隨 訪 對所有CGN 患者進行2 年隨訪，隨訪內(nèi)容為患者的疾病進展情況，方式為電話或住院隨訪，每6 個月隨訪1 次，隨訪截止時間為2020 年12 月31 日。根據(jù)預后情況分為緩解組（89 例腎功能明顯減退）和慢性腎功能衰竭組[8]（11 例腎功能明顯減退）。

1.4 統(tǒng)計學方法 應用SPSS 20.0 統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行分析，計量資料以均數(shù)±標準差（）表示，兩組間比較采用獨立樣本t 檢驗；計數(shù)資料用例表示，采用χ2檢驗。Pearson 法分析血漿suPAR、Cys-C 水平與腎功能指標的相關(guān)性；通過COX 比例風險模型分析影響CGN 患者預后的因素，P＜0.05 認為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組受試對象一般資料及臨床病歷資料比較兩組間性別、年齡、收縮壓、舒張壓、BMI、TC、TG、LDL-C、HDL-C、CO2CP 差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。與對照組比較，研究組BUN、SCr、UA 水平均升高（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組受試對象一般資料及臨床病歷資料比較

2.2 兩組受試對象血漿suPAR、Cys-C 水平比較與對照組比較，研究組血漿中suPAR、Cys-C 水平均升高（P＜0.05）。見表2。

表2 兩組受試對象血漿suPAR、Cys-C 水平比較（）

表2 兩組受試對象血漿suPAR、Cys-C 水平比較（）

注：對照組為健康人；觀察組為CGN 患者；CGN 為慢性腎小球腎炎；suPAR 為可溶性尿激酶型纖溶酶原激活物受體；Cys-C 為胱抑素C

2.3 緩解組和慢性腎功能衰竭組患者血漿suPAR、Cys-C 水平比較 與緩解組比較，慢性腎功能衰竭組血漿suPAR、Cys-C 水平均升高（P＜0.05）。見表3。

表3 緩解組和慢性腎功能衰竭組CGN 患者血漿suPAR、Cys-C 水平比較（）

表3 緩解組和慢性腎功能衰竭組CGN 患者血漿suPAR、Cys-C 水平比較（）

注：緩解組為病情緩解或無進展患者；慢性腎功能衰竭組為慢性腎功能衰竭患者；CGN 為慢性腎小球腎炎；suPAR 為可溶性尿激酶型纖溶酶原激活物受體；Cys-C 為胱抑素C

2.4 CGN 患者血漿suPAR、Cys-C 水平與腎功能指標的相關(guān)性分析 Pearson 法分析相關(guān)性顯示，CGN患者血漿suPAR、Cys-C 水平與BUN、SCr、UA 均呈正相關(guān)（P＜0.05）。見表4。

表4 CGN 患者血漿suPAR、Cys-C 水平與腎功能指標的相關(guān)性分析

2.5 影響CGN 患者預后的COX 危險因素分析 單因素COX 分析顯示，BUN、SCr、UA、suPAR、Cys-C 均是影響CGN 患者不良預后的危險因素；多因素COX分析顯示，suPAR、Cys-C 水平偏高均是CGN 患者不良預后的危險因素（HR=2.598、3.342，P＜0.05）。見表5。

表5 影響CGN 患者預后的COX 危險因素分析

3 討論

suPAR 是糖基磷脂酰肌醇錨定的三結(jié)構(gòu)域膜蛋白的循環(huán)形式，由膜結(jié)合的尿激酶型纖溶酶原激活劑受體裂解產(chǎn)生，在內(nèi)皮細胞、巨噬細胞、單核細胞、嗜中性粒細胞、淋巴細胞和成纖維細胞表達，存在于各種體液中，包括血液、尿液和腦脊髓液[9-10]。suPAR的濃度與免疫系統(tǒng)活性關(guān)系密切，當人體處于炎癥或其他疾病狀態(tài)時，免疫系統(tǒng)被激活并且suPAR 水平被感染和促炎性細胞因子上調(diào)，因此suPAR 水平可能指導炎癥相關(guān)疾病的診斷和預后[11]。研究發(fā)現(xiàn)，監(jiān)測suPAR 濃度可用于慢性腎臟病患者的早期診斷和預后，而高suPAR 濃度會增加死亡率、心血管事件和終末期腎臟疾病的風險[12]。

Cys-C 由所有核細胞穩(wěn)定產(chǎn)生并分泌，其生成不受性別、食物中蛋白質(zhì)攝入量、肌肉量等影響[13]。Cys-C 主要通過腎小球濾過從血流中去除，且?guī)缀跬耆贿h端腎小管重吸收而無腎小管分泌，與SCr不同，Cys-C 在評估慢性腎病腎功能損傷方面的特異性和準確度優(yōu)于SCr[14]。本研究發(fā)現(xiàn)，觀察組血漿suPAR、Cys-C 水平高于對照組；與緩解組相比，慢性腎功能衰竭組血漿suPAR、Cys-C 水平升高。提示suPAR、Cys-C 水平可能與CGN 及其預后情況有關(guān)。Pearson 法分析相關(guān)性顯示，CGN 患者血漿suPAR、Cys-C 水平與BUN、SCr、UA 均呈正相關(guān)。提示二者與CGN 患者腎功能關(guān)系密切。研究顯示，suPAR 水平的升高與慢性腎臟疾病的發(fā)生和腎小球濾過率的加速下降獨立相關(guān)[15]，而Cys-C 是腎小球濾過率的有效診斷標志物，因此聯(lián)合suPAR、Cys-C 水平可能反映CGN 的相關(guān)進展。本研究COX 分析顯示，su－PAR、Cys-C 水平偏高均是CGN 患者不良預后的危險因素。提示suPAR、Cys-C 可能參與CGN 患者疾病預后的進展，有一定預測作用，有助于臨床判斷CGN的預后情況。