盛桂林， 張志春，李加松，史明武，沈迎春*

(1.江蘇省農(nóng)藥總站，江蘇 南京 210036；2.江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院，江蘇 南京 210014；3.東海縣植物保護(hù)檢疫站，江蘇 東海 222300；)

金銀花是我國(guó)代表性中藥材之一，莖、葉、花均可入藥，具有清熱解毒、廣譜抗菌功效[1]。隨著新型冠狀病毒的爆發(fā)和蔓延，其作為中成藥例如連花清瘟和雙黃連的重要成分，備受市場(chǎng)青睞。蚜蟲是金銀花第一大害蟲，刺吸金銀花嫩葉、幼蕾，導(dǎo)致花蕾枯焦、葉片脫落，同時(shí)，蚜蟲能傳播多種植物病毒，嚴(yán)重影響金銀花產(chǎn)量和品質(zhì)[1-2]。當(dāng)前，僅有苦參堿(生物農(nóng)藥)、啶蟲脒(氯化煙堿類)和聯(lián)苯菊酯(擬除蟲菊類)3種藥劑正式登記用于防治金銀花蚜蟲(http：//www.chinapesticide.org.cn/hysj/index.jhtml)。為拓寬金銀花蚜蟲防治藥劑種類，延緩抗藥性發(fā)生發(fā)展，本試驗(yàn)通過(guò)開展田間藥效和農(nóng)藥殘留試驗(yàn)，探究吡蚜酮(吡啶類)對(duì)金銀花蚜蟲防治效果及殘留安全性影響，以期為科學(xué)使用吡蚜酮防治金銀花蚜蟲提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料 供試?yán)ハx：蚜蟲(江蘇：桃粉蚜；江西：芹菜蚜；四川：中華忍冬圓尾蚜；)

供試藥劑：50%吡蚜酮水分散粒劑；20%吡蟲啉可溶液劑；乙腈(色譜純；HPLC級(jí))；甲酸。

供試品種：田間藥效試驗(yàn)，巨花1號(hào)(江蘇)、大毛花(江西)、白銀花(四川)；殘留試驗(yàn)，大毛花(江蘇)、魯峪一號(hào)(河南)、山東四季(湖北)、百花1號(hào)(山東)。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.2.1 吡蚜酮防治金銀花蚜蟲田間試驗(yàn) 在江蘇、江西、四川3地進(jìn)行試驗(yàn)，每個(gè)地區(qū)4個(gè)重復(fù)，50%吡蚜酮水分散粒劑設(shè)置9.6g/667m2、14.4g/667m2、19.2g/667m23個(gè)用量梯度，以15mL/667m220%吡蟲啉可溶液劑為對(duì)照。于金銀花現(xiàn)蕾期，蚜蟲發(fā)生始盛期用藥1次。每個(gè)小區(qū)隨機(jī)五點(diǎn)取樣，每個(gè)點(diǎn)定點(diǎn)調(diào)查1簇，每簇在東西南北中五個(gè)方位調(diào)查5個(gè)枝條(頂端長(zhǎng)10cm)上蚜蟲數(shù)，施藥前和施藥后1、3、7d各調(diào)查1次活蟲數(shù)。計(jì)算防治效果。

1.2.2 吡蚜酮在金銀花中殘留試驗(yàn) 在江蘇、河南、山東、湖北4地試驗(yàn)小區(qū)各設(shè)置1個(gè)處理小區(qū)，1個(gè)對(duì)照小區(qū)，每個(gè)小區(qū)面積200m2，以制劑量19.2g/667m2(有效成分144g/hm2)施藥1次。施藥后第14d和第21d分別采集樣品。將采集的金銀花樣品用電熱鼓風(fēng)干燥箱烘干(制干方法：開始烘干時(shí)溫度控制在30～35℃；2h后將溫度提高到40℃左右；再經(jīng)5～10h，溫度提高到45～50℃，維持10h：最后溫度提升到55～58℃，最高≤60℃，烘干總時(shí)間為24h，烘成9成干。烘干樣品-18℃保存)。

準(zhǔn)確稱取5g金銀花烘干樣品于50mL離心管中，加入25mL乙腈，研磨震蕩30min，然后以5 000r/min離心5min，取0.5mL上清液加1.5mL乙腈混溶后，過(guò)0.22μm濾膜于1mL進(jìn)樣瓶中，用HPLC-MS/MS法測(cè)定殘留量。在毒理學(xué)和化學(xué)殘留量基礎(chǔ)上，根據(jù)我國(guó)居民膳食消費(fèi)量，估算農(nóng)藥膳食攝入量，包括長(zhǎng)期/短期膳食攝入，評(píng)估膳食風(fēng)險(xiǎn)。

1.3 數(shù)據(jù)分析

1.3.1 田間藥效試驗(yàn)

蟲口減退率(%)=(施藥前活蟲數(shù)-施藥后活蟲數(shù))/施藥前活蟲數(shù)×100；

防治效果(%)=(處理區(qū)蟲口減退率-空白對(duì)照區(qū)蟲口減退率)/(100-空白對(duì)照區(qū)蟲口減退率)

相關(guān)試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用鄧肯氏新復(fù)極差“DMRT”法，利用DPS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

1.3.2 吡蚜酮在金銀花中殘留量計(jì)算

R=(C×V1×V3)/(W×V2)

式中：R：樣品中測(cè)試物殘留量，mg/kg；C：樣品提取溶液濃度，mg/L； V1：樣品溶液的最終定容體積，mL；V2：樣品溶液的移取體積，mL；V3：樣品提取溶液總體積，mL；W：樣品重量，g。

1.3.3 吡蚜酮在金銀花中的膳食風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

計(jì)算國(guó)家估算每日攝入量NEDI=Σ[STMRi(STMR-Pi)×Fi]

風(fēng)險(xiǎn)概率RQ(%)=NEDI/(ADI×b.w.)×100

式中：STMRi為農(nóng)藥在某種食品中的規(guī)范殘留試驗(yàn)中值，mg/kg；STMR-Pi為采用加工因子校正后的規(guī)范殘留試驗(yàn)中值，mg/kg；Fi為一般人群對(duì)該食品的消費(fèi)量，kg；b.w.為我國(guó)普通人群人均體重，按63 kg計(jì)；RQ為風(fēng)險(xiǎn)商，%；ADI為農(nóng)藥的每日允許攝入量，mg/kg b.w.。在計(jì)算NEDI時(shí)，如果沒(méi)有合適的STMR值或STMR-Pi值，可直接采用相應(yīng)的MRL值代替。當(dāng)RQ≤100%時(shí)，認(rèn)為該農(nóng)藥殘留對(duì)一般人群健康的影響在可接受的風(fēng)險(xiǎn)水平，值越小，風(fēng)險(xiǎn)越低。

2 結(jié)果與分析

2.1 吡蚜酮對(duì)金銀花蚜蟲的防效 為明確吡蚜酮對(duì)金銀花蚜蟲作用效果及防效穩(wěn)定性，根據(jù)農(nóng)藥田間試驗(yàn)準(zhǔn)則，我們于2020年在江蘇、江西、四川3地開展了吡蚜酮防治金銀花蚜蟲田間試驗(yàn)。試驗(yàn)結(jié)果顯示，在江蘇地區(qū)，施用50%吡蚜酮水分散粒劑14.4～19.2g/667m2(有效成份108～144g/hm2)于金銀花蚜蟲發(fā)生始盛期施藥，7d后對(duì)其防效為82%～94%，在江西地區(qū)防效為92%～99%，在四川地區(qū)防效為93%～99%，3地防效雖有一定差異，但均>80%，生產(chǎn)中可有效防治金銀花蚜蟲(表1)。另外試驗(yàn)過(guò)程中，3地金銀花正常生長(zhǎng)，未觀察到藥害癥狀。

表1 50%吡蚜酮水分散粒劑防治金銀花蚜蟲藥效試驗(yàn)

2.2 吡蚜酮在金銀花中的殘留量 根據(jù)殘留試驗(yàn)指南要求，在江蘇、河南、山東和湖北4個(gè)省份開展了吡蚜酮在金銀花中殘留試驗(yàn)，結(jié)果表明，吡蚜酮在施藥后14和21d后在金銀花(干)中的最高殘留量均為<0.01～0.07mg/kg(表2)。膳食風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估報(bào)告表明，根據(jù)我國(guó)農(nóng)藥登記和居民的人均膳食結(jié)構(gòu)情況分析，普通人群國(guó)家估算每日吡蚜酮攝入量是1.80mg，占日允許攝入量的95.49%(<100%)，膳食風(fēng)險(xiǎn)可接受(表3)，即距離施藥后14d后采摘金銀花膳食風(fēng)險(xiǎn)可控。

表2 50%吡蚜酮水分散粒劑在金銀花(干)中的最終殘留量

表3 50%吡蚜酮水分散粒劑在金銀花中膳食風(fēng)險(xiǎn)

3 討論與結(jié)論

吡蚜酮作為是高效低毒的吡啶甲亞胺衍生物，能夠有效阻塞蚜蟲口針，導(dǎo)致蚜蟲饑餓致死[3-4]。目前，吡蚜酮已經(jīng)登記用于防治蚜蟲、小綠斑葉蟬、飛虱、薊馬等刺吸式害蟲，適用作物包括水稻、小麥、蔬菜、棉花和果樹等[3]。本試驗(yàn)中，江蘇、江西和四川3地的藥效試驗(yàn)表明，50%吡蚜酮水分散粒劑對(duì)金銀花蚜蟲防效穩(wěn)定在>80%，不同處理劑量防效有一定差異顯著性，生產(chǎn)中建議使用14.4～19.2g/667m2劑量防治金銀花蚜蟲。值得思考的是，本試驗(yàn)中，四川、江蘇2地在藥后1d，吡蟲啉速效性與吡蚜酮相當(dāng)，可能是和蚜蟲種類及基地前期用藥習(xí)慣等因素相關(guān)。下一步，需強(qiáng)化基礎(chǔ)研究，明確蚜蟲在金銀花上的生物學(xué)特性和危害特點(diǎn)，進(jìn)一步明確用藥時(shí)間，監(jiān)測(cè)蚜蟲抗藥性。

殘留是中藥材安全用藥的第一考慮要素。吡蚜酮屬于吡啶類殺蟲劑，已有在水稻[5]、甘藍(lán)[4]和柑橘[6]等作物上的殘留試驗(yàn)報(bào)道，但未有在忍冬科植物上相關(guān)試驗(yàn)報(bào)道。本次在河南、江蘇、山東和湖北4地開展的農(nóng)藥殘留試驗(yàn)表明，在施藥14d后的殘留量均<0.01～0.07 mg/kg，膳食風(fēng)險(xiǎn)可接受?？紤]當(dāng)前金銀花以露天栽培為主，光照、雨水能加速吡蚜酮降解[4]，此外，吡蚜酮具有良好的內(nèi)吸性[3]，能加速其在植物表層降解，在推薦劑量范圍內(nèi)，可放心使用，14d安全間隔期后采收風(fēng)險(xiǎn)可控。

綜合田間防效和殘留試驗(yàn)，生產(chǎn)中可用吡蚜酮防治金銀花蚜蟲，應(yīng)注意與聯(lián)苯菊酯、啶蟲脒等已登記藥劑輪換使用。