王露，李見(jiàn)

（徐州市中心醫(yī)院 檢驗(yàn)科，江蘇 徐州221009）

2 型糖尿病腎病（type 2 diabetic nephropathy,T2DN）是2 型糖尿病患者慢性微血管并發(fā)癥之一，是發(fā)生腎衰竭的主要原因之一，可導(dǎo)致腎功能不全、尿毒癥等，嚴(yán)重威脅患者的生命健康[1]。據(jù)報(bào)道，我國(guó)糖尿病患者約占總?cè)藬?shù)的2.6%～9.7%，其中約6.5%～42.0%可并發(fā)腎臟疾病[2]。血清核因子-κB（nuclear factor-κB，NF-κB）與機(jī)體防御反應(yīng)、組織損傷、細(xì)胞分化等過(guò)程中的信息傳遞相關(guān)，丙二醛（Malondialdehyde, MDA）是膜脂過(guò)氧化的產(chǎn)物之一，可加劇膜的損傷。研究發(fā)現(xiàn)[3-5]，2 型糖尿病患者由于高血糖的刺激可激活NF-κB，觸發(fā)多種炎癥細(xì)胞的高水平表達(dá)，導(dǎo)致血管受到損害，引發(fā)并發(fā)癥。有關(guān)研究[6-7]表明，糖尿病腎病患者M(jìn)DA 水平大多存在嚴(yán)重異常，推測(cè)二者可能存在一定關(guān)系，可相互影響，但其相關(guān)性仍需深入探討。本研究擬探討T2DN 患者血清NF-κB、MDA 水平及其與腎功能的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年3月—2019年10月徐州市中心醫(yī)院收治的初診T2DN 患者96 例作為DN 組，同期本院?jiǎn)渭僒2DN 患者52 例為DM 組，另選取同期本院體檢健康者52 例作為NC 組。納入標(biāo)準(zhǔn)：DN 組和DM 組患者均符合相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)[8-9]。排除標(biāo)準(zhǔn)：感染及炎癥疾病者；腫瘤疾病者；合并內(nèi)分泌、心血管等疾病者；原發(fā)性腎病、腎動(dòng)脈狹窄等疾病者；心臟、肝臟等全身疾病引發(fā)的腎臟疾病者。3 組研究對(duì)象性別構(gòu)成、年齡及體質(zhì)量指數(shù)（BMI）比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），DN 組和DM 組的空腹血糖（FPG）、餐后2 h 血糖（2 h PG）水平及糖尿病病程比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。見(jiàn)表1。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有研究對(duì)象簽署知情同意書(shū)。

表1 3組研究對(duì)象基本資料的比較

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 抽取所有研究對(duì)象清晨空腹時(shí)肘靜脈血5 mL，2 000 r/min 離心3 min 后，分離血清，置入-80℃超低溫冰箱中保存待測(cè)；留取所用研究對(duì)象24 h 尿液，混勻，取10 mL，-80℃超低溫冰箱中保存待測(cè)。

1.2.2 NF-κB 和MDA 水平檢測(cè) 采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)試劑盒（上海博湖生物科技有限公司）檢測(cè)血清NF-κB 水平；使用MDA 檢測(cè)試劑盒（南京邁博生物科技有限公司） 和紫外分光光度計(jì)（型號(hào)：UV-3000PC，杭州俊生科學(xué)器材有限公司）檢測(cè)MDA 水平。

1.2.3 腎功能指標(biāo)檢測(cè) 采用分立式全自動(dòng)生化分析儀（型號(hào)：BK-500，山東博科）檢測(cè)血清肌酐（serum creatinine, Scr） 、β2微球蛋白（β2-microglobulin, β2-MG）、尿素氮（urea nitrogen, BUN）、尿蛋白排泄率（urinary albumin excretion rate,UAER），其中Scr 采用苦味酸法檢測(cè)；β2-MG 采用熒光免疫層析法檢測(cè)；BUN 采用紫外-谷氨酸脫氫酶法檢測(cè)；UAER 采用放射免疫法檢測(cè)；腎小球?yàn)V過(guò)率（glomerular filtration rate, eGFR）的計(jì)算依據(jù)腎臟疾病膳食改良（MDRD）公式：①男性，eGFR=186×（Scr）-1.154×（年齡）-2.03；②女性，eGFR=186×（Scr）-1.154×（年齡）-2.03×0.742。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)分析采用SPSS 25.0 統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，比較用方差分析，進(jìn)一步兩兩比較用SNK-q檢驗(yàn)；相關(guān)性分析用Pearson 法。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3組血清NF-κB和MDA水平的比較

3 組血清NF-κB 和MDA 水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），DN 組 高于DM 組 和NC 組（P＜0.05），DM 組與NC 組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表2。

表2 3組血清NF-κB和MDA水平的比較 （±s）

表2 3組血清NF-κB和MDA水平的比較 （±s）

注：①與DM組比較，P ＜0.05；②與NC組比較，P ＜0.05。

組別DN組DM組NC組F 值P 值n 96 52 52 NF-κB/（μg/L）31.28±9.19①②23.57±9.13 20.43±9.06 27.259 0.000 MDA/（nmol/L）6.12±1.21①②4.71±1.02 4.36±0.78 56.756 0.000

2.2 3組腎功能指標(biāo)的比較

3 組Scr、β2-MG、BUN、eGFR 及UAER 水 平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），DN 組Scr、β2-MG、BUN 及UAER 水平高于DM 組和NC 組（P＜0.05），DN組eGFR 水平低于DM 組和NC 組（P＜0.05）；DM 組與NC 組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表3。

表3 3組腎功能指標(biāo)的比較 （±s）

表3 3組腎功能指標(biāo)的比較 （±s）

注：①與DM組比較，P ＜0.05；②與NC組比較，P ＜0.05。

組別DN組DM組NC組F 值P 值n 96 52 52 Scr/（μmol/L）83.47±9.84①②72.12±9.71 69.86±9.53 41.790 0.000 β2-MG/（μg/mL）0.56±0.11①②0.30±0.07 0.28±0.03 248.725 0.000 BUN/（mmol/L）8.16±2.16①②5.68±1.35 5.23±1.04 61.720 0.000 eGFR/[mL/（min·1.73 m2）]69.43±8.46①②78.43±9.26 81.34±9.83 34.730 0.000 UAER/（mg/24 h）36.37±8.36①②10.51±2.15 9.82±1.46 483.635 0.000

2.3 T2DM 患者血清NF-κB 和MDA 與腎功能的相關(guān)性分析

Pearson 相關(guān)性分析結(jié)果顯示：T2DM 患者血清NF-κB 與Scr、β2-MG、BUN 及UAER 呈正相關(guān)（P＜0.05）；與eGFR 呈負(fù)相關(guān)（P＜0.05）。MDA 與Scr、β2-MG、BUN 及UAER 呈正相關(guān)（P＜0.05）；與eGFR 呈負(fù)相關(guān)（P＜0.05）。見(jiàn)表4。

表4 T2DM患者血清NF-κB、MDA與腎功能的相關(guān)性分析

3 討論

糖尿病腎病的發(fā)生主要與遺傳、環(huán)境等多種因素有關(guān)?；颊咛谴x異常是腎臟病變的基礎(chǔ)，多數(shù)炎癥介質(zhì)、細(xì)胞因子被激活是病變形成的直接機(jī)制[10-11]。糖尿病腎病是糖尿病主要的損傷合并癥，若出現(xiàn)腎衰竭，會(huì)給患者帶來(lái)巨大的痛苦，也會(huì)使家庭和社會(huì)承受較大的經(jīng)濟(jì)壓力，對(duì)糖尿病腎病應(yīng)給予盡早的診斷和準(zhǔn)確的評(píng)估。NF-κB、MDA 等細(xì)胞因子與免疫性疾病的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[12-14]，但與T2DN 患者腎功能的相關(guān)性尚缺乏研究，檢測(cè)T2DN 患者血清NF-κB 和MDA 水平，研究其與腎功能的關(guān)系具有十分重要的意義。

本研究中，DN 組NF-κB 和MDA 水平高于DM組，結(jié)果表明T2DN 患者血清NF-κB 和MDA 水平均存在明顯異常現(xiàn)象，且較單純糖尿病患者異常程度更為嚴(yán)重。相關(guān)研究指出[15-17]，早期糖尿病腎功能損傷患者存在NF-κB 信號(hào)傳導(dǎo)途徑的激活和高表達(dá)，MDA 水平明顯升高，與本研究結(jié)果一致。有研究指出[18-19]，糖尿病可影響機(jī)體對(duì)胰島素的敏感性，進(jìn)而影響糖代謝狀態(tài)，導(dǎo)致腎功能損傷的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)升高，其中原因可能為：胰島素分泌不足或胰島素抵抗引發(fā)高血糖，促進(jìn)胰島細(xì)胞產(chǎn)生大量的炎癥因子作用于肝臟細(xì)胞，腎小球的高過(guò)濾、高灌注嚴(yán)重?fù)p傷腎臟。NF-κB 作為一種核轉(zhuǎn)錄細(xì)胞因子，對(duì)生理功能的調(diào)節(jié)具有多向性。有相關(guān)研究報(bào)道[20]，在早期階段巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)腎小球，NF-κB 活性會(huì)出現(xiàn)明顯的增加，T2DN 患者局部腎組織出現(xiàn)炎癥反應(yīng)，血清NF-κB 可作為糖尿病腎病發(fā)展的標(biāo)志物。對(duì)T2DN 患者的治療可阻斷NF-κB 的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，抑制腎臟炎癥反應(yīng)。MDA 的檢測(cè)結(jié)果可反映機(jī)體細(xì)胞受氧自由基損傷的程度，在糖尿病的發(fā)生、發(fā)展中有著重要作用。氧化自由基過(guò)多致使腎臟細(xì)胞產(chǎn)生毒性，在一定程度上能夠反映糖尿病腎病患者的腎功能損傷。臨床診斷及治療過(guò)程中，可通過(guò)定期檢測(cè)T2DN 患者的MDA 水平，了解病情的發(fā)生、發(fā)展，若出現(xiàn)異常，需及時(shí)給予有效的調(diào)節(jié)措施。

本研究DN 組Scr、β2-MG、BUN 及UAER 水平高于DM 組和NC 組；DN 組eGFR 水平低于DM 組和NC 組，結(jié)果表明DN 組患者腎功能指標(biāo)相比DM 組和NC 組呈現(xiàn)出嚴(yán)重異?，F(xiàn)象。有研究報(bào)道[21-22]，腎功能指標(biāo)異常的原因?yàn)椋禾悄虿∧I病患者由于血糖長(zhǎng)期處于較高水平，糖代謝長(zhǎng)期處于紊亂影響微循環(huán)狀態(tài)，甚至導(dǎo)致微循環(huán)障礙，可影響腎功能相關(guān)指標(biāo)；另一方面，胰島素對(duì)血管緊張素的影響致使腎小球血流動(dòng)力學(xué)改變，腎小球內(nèi)壓升高，降低了對(duì)白蛋白的重吸收，因此T2DN 患者腎功能Scr、β2-MG、BUN、UAER 及eGFR 水平出現(xiàn)嚴(yán)重異常。此外，本研究對(duì)T2DN患者的血清NF-κB、MDA 水平與腎功能進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果表明，NF-κB、MDA 與Scr、β2-MG、BUN 及UAER 呈正相關(guān)，與eGFR呈負(fù)相關(guān)?？芍猅2DN患者血清NF-κB、MDA 與Scr、β2-MG、BUN、eGFR 及UAER 存在緊密聯(lián)系，二者可相互影響。糖尿病腎病患者的腎功能損傷是由糖尿病合并微血管所引發(fā)的主要并發(fā)癥，機(jī)體處于氧化應(yīng)激狀態(tài)，產(chǎn)生過(guò)量的氧自由基，超出腎組織的清除能力，致使組織發(fā)生嚴(yán)重的損傷[23]。結(jié)合既往報(bào)道[24-25]，T2DN 患者血清NF-κB、MDA 水平影響腎功能指標(biāo)的原因?yàn)椋篢2DN 患者由于血清NF-κB 和MDA 水平升高，引發(fā)炎癥反應(yīng)且機(jī)體應(yīng)激反應(yīng)增強(qiáng)，加重患者腎臟功能的代謝水平，進(jìn)而影響腎功能指標(biāo)。

綜上所述，T2DN 患者血清NF-κB、MDA 水平及Scr、β2-MG、BUN、UAER、eGFR 水平存在嚴(yán)重 異 常，且 血 清NF-κB 和MDA 與Scr、β2-MG、BUN、UAER 呈正相關(guān)，與eGFR 呈負(fù)相關(guān)。鑒于此，在對(duì)T2DN 患者的治療中，除嚴(yán)格控制血糖外，還需加強(qiáng)對(duì)血清NF-κB、MDA 水平與腎功能指標(biāo)的檢測(cè)及分析，對(duì)存在的問(wèn)題及時(shí)解決，減輕對(duì)腎功能的損傷，進(jìn)而有效延緩T2DN 患者病情的發(fā)生、發(fā)展。