任正東，夏 輝，蔣國振，劉 萍

陜西省糧食質(zhì)量安全中心 (西安 710016)

鄰苯二甲酸酯( phthalateacid esters, PAEs)即塑化劑，是世界上生產(chǎn)量大，應(yīng)用面廣的人工合成的有機化合物之一，也是一種常用的增塑劑，可增大產(chǎn)品的可塑性和柔韌性，廣泛用于塑料產(chǎn)品，驅(qū)蟲劑，農(nóng)藥載體，染料助劑，涂料及潤滑油等工業(yè)產(chǎn)品中。如果塑化劑存在于食品，其毒性比三聚氰胺毒有過之而無不及。人們?nèi)菀自谒芰现破钒b中接觸到鄰苯二甲酸酯( PAEs)類，在生活中有很多食物在加工、加熱、包裝、盛裝的過程中，可能會造成PAEs的溶出且滲入食物中[1]。

美國、日本、中國先后將PAEs列入優(yōu)先控制污染物的黑名單，PAEs對人類健康的危害已經(jīng)引起世界的廣泛關(guān)注。人們接觸PAEs的途徑主要是通過飲食。PAEs為脂溶性物質(zhì)，很容易通過包裝材料遷移到食品中，特別是一些油性食品。因此，對食用油中塑化劑的檢測非常必要。中國衛(wèi)生部于2011年6月1日緊急發(fā)布公告，將塑化劑鄰苯二甲酸酯類物質(zhì)，列入食用植物油中可能違法添加的非食用物質(zhì)和易濫用的食用植物油添加劑名單[2]。

本文通過使用安捷倫全新一代7000C三重四級桿氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀(GC-MSMS)分析檢測食用植物油中16種鄰苯二甲酸酯的方法。通過MRM掃描方式進行，充分減少了在復(fù)雜基質(zhì)樣品中的背景干擾影響，提高目標化合物的檢測靈敏度和準確度，使得檢測結(jié)果更加準確可靠。

1 材料與方法

1.1 儀器和試劑

氣相色譜-三重四級桿質(zhì)譜儀(安捷倫7000C)，色譜住(DB-5MS，30 m×0.25 mm×0.25 μm,毛細管色譜柱)；凝膠色譜儀(萊伯泰科PrepElite-GVS)；環(huán)己烷、乙酸乙酯(默克爾)。

1.2 方法

1.2.1凝膠滲透色譜條件

GPC凈化柱(320 mm×25 mm) ；填料為50.0 g多孔聚苯乙烯-二乙烯基苯(Bio-Beads S-X3)；流動相，乙酸乙酯和環(huán)己烷(1∶1，v/v)混合溶液；流速為5 mL/min；預(yù)淋洗時間10 s；凈化除雜質(zhì)時間1 000 s；主要收集時間1 000 s；尾流時間300 s；濃縮器溫度為 35 ℃，19 kPa下預(yù)濃縮，最后 21 kPa下緩慢濃縮定容至 5 mL。

1.2.2氣相色譜條件

柱溫箱：60 ℃保持1 min，以20 ℃/min升至220 ℃，保持1 min，再以5 ℃/min的速率升至280 ℃，保持4 min；進方方式為不分流進樣，不分流時間1 min；進樣口溫度250 ℃；進樣量1 μL；載氣為氦氣(純度≥99.999%)，恒流1 mL/min；傳輸線為280 ℃。

1.2.3質(zhì)譜條件

離子源(EI)溫度為250 ℃；碰撞氣流速1.5 mL/min；電離能量為70 eV；溶劑延遲為5 min；監(jiān)測方式為MRM。檢測離子對見表1。

1.2.4前處理方法

稱取混合均勻的菜籽油樣品0.50 g，用乙酸乙酯和環(huán)己烷(1∶1，v/v)定容至10.0 mL，渦旋混合2 min，用0.22 μm濾膜過濾，濾液經(jīng)凝膠滲透色譜裝置凈化，收集流出液，減壓濃縮至2.0 mL后,進行GC-MSMS分析。

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜分離

由于溶劑中可能含有鄰苯二甲酸酯，所以每次做樣一定要做溶劑對照，以便排除溶劑中的干擾效應(yīng)。由于16種鄰苯二甲酸酯的離子對信息比較相似，所以盡可能選擇分離度比較好的色譜柱，讓16種鄰苯二甲酸酯實現(xiàn)分離，從而使定性定量更加準確。本實驗選擇DB-5MS(30 m×0.25 mm×0.25 μm)毛細管色譜柱，各化合物通過此種方法可以實現(xiàn)有效的分離。濃度為5 ng/mL的16種鄰苯二甲酸酯的混標扣去溶劑背景的總離子流色譜圖見圖1。

2.2 回收率與檢出限

本方法的最低檢出限為取某一低濃度的標準溶液加入空白植物油樣品，重復(fù)測定6次，以3倍信噪時的濃度計算出16種鄰苯二甲酸酯最低檢出限。當(dāng)植物油樣品為0.50 g時，得到本方法的最低檢出量。

取空白植物油樣品0.50 g，加入標準溶液，使樣品中領(lǐng)苯二甲酸酯含量高、中、低分別為2 mg/kg、1 mg/kg、0.2 mg/kg,在這3個水平下進行加標實驗，檢測結(jié)果顯示其平均回收率為 69.5%～115%，測定結(jié)果見表2。

2.3 標準曲線及重現(xiàn)性

以環(huán)己烷為溶劑，分別配制1 ng/mL、5 ng/mL、10 ng/mL、50 ng/mL、100 ng/mL、500 ng/mL、1 000 ng/mL的混標溶液，建立標準曲線。將濃度為10 ng/mL的樣品重復(fù)進樣5針，計算各組分的RSD，得到各化合物的重現(xiàn)性如表3所示。

由表3可知，這16種化合物的標準曲線線性良好，相關(guān)系數(shù)R2均大于0.99。由于溶劑本底中各類鄰苯二甲酸酯的含量是不同的，所以干擾程度也不同。對于溶劑中存在干擾的化合物，需要將本底減去再計算標準曲線，以使標準曲線更加準確。本次實驗除了DIBP、DBP、DMEP和DEHP的線性范圍最低做到5 ng/mL，其余化合物的最低定量限都在1 μg/kg，其中溶劑中的DMP、DEP、DEEP和BBP含量估計是1 ng/mL標準品的20%～30%，所以可以將最低定量限做到1 μg/kg，其余幾種鄰苯二甲酸酯在溶劑中未發(fā)現(xiàn)干擾。這16種化合物的RSD值均滿足方法驗證重現(xiàn)性的要求。

2.4 樣品檢測

本次實驗使用菜籽油樣品，按照前處理方法進行。由于前處理過程中只用到環(huán)己烷，所以需要用環(huán)己烷做溶劑對照，以扣除溶劑中的鄰苯二甲酸酯類干擾物質(zhì)。圖2為菜籽油以及環(huán)己烷為樣品按照上述方法進樣得到的總離子流色譜圖。

圖2 菜籽油樣品扣去環(huán)己烷背景的鄰苯二甲酸酯總離子流色譜圖

菜籽油以及環(huán)己烷為樣品按照1.2.4前處理方法處理后，經(jīng)凝膠色譜過柱后進樣，扣去GPC處理的環(huán)己烷背景后得到的色譜圖見圖3。

由圖2和圖3可以看出，菜籽油樣品經(jīng)前處理提取過濾并經(jīng)凝膠色譜處理后進樣，扣除環(huán)己烷溶劑背景離子相對豐度，目標物得到了快速有效分離的目的。

3 結(jié)束語

使用安捷倫7000C氣相色譜-三重四級桿質(zhì)譜儀，DB-5MS毛細管色譜柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm),檢測分析16種鄰苯二甲酸酯具有速度快、分離度好等特點，并且通過多反應(yīng)離子監(jiān)測掃描可以極大得去除基質(zhì)背景離子的干擾，使檢測結(jié)果更加準確可靠。由于鄰苯二甲酸酯的化學(xué)特性，幾乎存在于塑料、染料助劑、涂料及潤滑油中，所以在樣品前處理過程中要盡量避免使用塑料產(chǎn)品帶來的干擾，樣品處理時必須使用玻璃容器，并且在使用溶劑時，需要用到盡可能對目標物干擾較少的溶劑，從而使檢測結(jié)果更加準確可靠。

圖3 菜籽油樣品扣去GPC處理的環(huán)己烷背景后鄰苯二甲酸酯的總離子流色譜圖