魏君，項倩

（赤壁市人民醫(yī)院，湖北 咸寧 437300）

0 引言

肺結核是肺部感染結核分枝桿菌的一種慢性傳染性疾病，全球發(fā)病率和死亡率都比較高[1]。根據臨床特點可以將肺結核分為原發(fā)性肺結核、血行播散性肺結核和繼發(fā)性肺結核[2]。不同類型的肺結核具有共同的臨床表現即：咳嗽、咯血、低熱、全身倦怠乏力，渾身酸痛等。一直以來，尋找快速準確的診斷方法是臨床工作的難點，常用的肺結核檢測方法是痰涂片，操作簡單，但結核分枝桿菌培養(yǎng)周期長且對于一些少痰或無痰的患者容易出現漏診的現象，加上無法辨別活菌或死菌，導致特異性差且假陰性率比較高[3]?；蛟\斷技術PCR由于實驗操作條件要求高，對于實驗技術條件并不發(fā)達的基層來講不適合此種方法[4]，故尋找敏感、特異、快速、簡單的診斷方法對肺結核的診治具有十分重要的意義。目前臨床檢測肺結核的方法還包括結核菌素試驗（PPD）、血結核多種抗原IgG/LgM抗體蛋白芯片檢測技術。本研究對兩組患者均行血清結核抗體檢測（結核抗體LgG/LgM檢測）和結核菌素試驗通過檢測并計算兩種檢測方法各自的菌陽肺結核靈敏度、菌陰肺結核靈敏度、假陽性、假陰性、總靈敏度、特異性、準確性、陽性預測值、陰性預測值進而比較兩種方法對活動性肺結核診斷的價值?，F將報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015年5月-2016年12月在我院接受治療肺結核的68例患者作為觀察組，男36例，女32例；年齡21～78歲，平均（40.26±13.64）歲。另選取同期在我院接受治療的其他肺部疾病患者55例作為對照組，男26例，女29例；年齡22～76歲，平均（41.36±12.67）歲；其中慢性支氣管炎21例，急性上呼吸道感染16例，支氣管肺炎11例，塵肺4例，肺癌3例。觀察組患者均經細菌學或組織病理學確診為活動性肺結核，并且臨床抗結核治療有效。對照組患者影像學檢查和實驗室檢查均不支持肺結核診斷。入選條件包括：所有患者均進行胸部X線攝片，并按《肺結核診斷和治療指南》中的肺結核診斷標準進行診斷。所有患者排除合并全身嚴重感染者、嚴重心血管和腦疾病者、自身免疫缺陷性疾病、正在接受放化療治療者、精神異常、惡性腫瘤、妊娠及哺乳期者。所有患者知情同意并簽署知情同意書，患者依從性較好，患者病歷資料完整。本研究通過醫(yī)院倫理會批準。兩組患者年齡性別等基線資料經過比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 檢測方法

所有患者均進行PPD試驗及結核抗體LgG/LgM檢測。PPD試劑選取成都生物制品研究所生產的結核菌素純蛋白衍生物（TB-PPD），取0.5mL的PPD試劑進行左側臂掌側皮內注射，每1mL含有5 IU PPD，經注射72h后檢查注射部位變化情況并測量硬結大小，無皮膚硬結出現或硬結平均直徑小于5mm則為PPD皮試陰性，若硬結直徑為5～9mm評定為一般陽性，硬結直徑為10～19mm評定為中度陽性，20mm或以上以及任何局部出現水泡、出血、壞死、潰破或淋巴管炎等則評定為強陽性。

結核抗體LgG/LgM試劑選取北京藍譜生物技術開發(fā)有限公司，批號為（國械注進）20143405184操作步驟：①使用前將樣品放置在室溫條件下；②打開密封的鋁箔袋兒，將檢測卡取出平放在水平桌面上；③在檢測卡上標記患者樣本；④用加樣器取60μl血清滴入樣本孔，再滴加一滴樣本稀釋液，保證操作的整個過程中無氣泡的產生；⑤10min之后判讀結果；⑥結果判讀，在質控線c出現的條件下，當僅有一條T1反應線出現時，說明結核抗體LgG呈現陽性，只有T2反應線出現時說明結核抗體LgM為陽性，當T1、T2反應線均出現時說明結核抗體LgG、LgM均呈現陽性。如果只有一條質控線c出現時，說明沒有檢測到結核分枝桿菌其為陰性。

痰涂片抗酸染色培養(yǎng)基購自廣州市西塔生物科技有限公司，操作步驟嚴格參照《結核病診斷實驗室檢測規(guī)范》。

1.3 統(tǒng)計學方法

數據統(tǒng)計分析采用SPSS 19.0進行處理，所有計量指標均采用均數±標準差（）進行統(tǒng)計描述，靈敏度和特異度等計數資料比較采用兩組獨立樣本的χ2檢驗，年齡等計量資料比較采用兩組獨立樣本的t檢驗，當P＜0.05：表示具有統(tǒng)計學差異。

2 結果

2.1 兩種方法檢測結果、靈敏度和特異度比較

結核抗體LgG/LgM檢測菌陽肺結核靈敏度為77.42%，菌陰肺結核靈敏度為59.46%。診斷活動性肺結核中假陽性22例，假陰性7例，總靈敏度為67.64%，特異性為96.36%準確性為57.35%，陽性預測值為35.29%，陰性預測值為22.06%。結核菌素檢測菌陽肺結核靈敏度為50.00%，菌陰肺結核靈敏度為52.94%。診斷活動性肺結核中假陽性18例，假陰性17例，總靈敏度為51.47%，特異性為89.09%，準確性為48.53%（33/68），陽性預測值為25.00%，陰性預測值為23.53%。結核抗體LgG/LgM檢測的靈敏度和特異度高于結核抗體檢測，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），詳見表1、表2。

表1 兩種方法檢測結果

表2 兩種檢測方法的靈敏度和特異度比較

3 討論

結核是感染結核分枝桿菌所致的全球傳染性最高、歷史最悠久、后果最嚴重的一種慢性疾病，具有較高的致死率，嚴重威脅著患者的生命安全。肺結核指患者肺部感染結核分枝桿菌，該病菌經過呼吸道傳播，嚴重情況下可引起全身各臟器病變，傳染性和致死性都比較高。早期診斷對于控制病情減低死亡率具有非常重要的意義，目前診斷肺結核常用的辦法主要有分子生物學檢測法、細胞學檢測法、免疫學檢測法[5]。痰涂片及培養(yǎng)因其操作比較簡單是一種常用的檢測方法，但是結核分枝桿菌培養(yǎng)周期比較長，浪費時間，且診斷敏感性不高，加上受到取痰效果的影響，一些患者少痰甚至無痰會容易漏診。因此，肺結核診斷方式探索改進成為結核病診治重點。

結核菌素試驗（PPD）相對價廉且操作簡單，可通過皮膚局部反應檢測是否感染過結核桿菌，檢測靈敏度比痰涂片高。凡是感染結核分枝桿菌的患者機體就會刺激致敏淋巴細胞再次識別抗原。結核菌素試驗提供相同的抗原刺激致敏淋巴細胞，其在48～72h會發(fā)生局部炎性反應，根據硬結大小判斷陽性率[6]。本研究結果顯示結核菌素檢測菌陽肺結核靈敏度為50%，菌陰肺結核靈敏度為52.94%，診斷活動性肺結核中假陽性18例，假陰性17例，總敏感度為51.47%，特異性為89.09%，準確性為48.53%，陽性預測值為25%，陰性預測值為23.53%。結果表明經PPD試驗檢測在敏感度、特異性等方面較低，易出現假陽性或假陰性的情況，由于PPD試驗受較多因素影響，例如重癥結核、機體免疫功能水平等，患者免疫力在受到功能損害以后會削弱PPD試驗的反應，導致皮試結果無反應或反應弱，因此本實驗結果中出現假陰性的原因可能是由于小兒老年人免疫功能低下或者是免疫功能缺陷所致。另外，本研究中出現較多假陽性，由于非結核分枝桿菌抗原或卡介苗與PPD試劑含有的蛋白衍生物抗原具有相同成分，若之前有過結核菌感染史或接種過卡介苗的非結核患者人群，在試驗過程中也容易出現交叉反應，故出現假陽性其原因是可能患者進行過卡介苗接種或曾經患過結核病的治愈者。

血清結核抗體檢測（TB-Ab）具有特異性和靈敏度高的特點，可直接反應機體相應抗體水平。該檢測分為雙抗體夾心酶聯免疫吸附法、免疫色譜法（DIGFA）、免疫膠體層析法，其主要區(qū)別在于抗原表位的選擇以及抗原的純化水平。一般選取的結核菌為細胞壁多糖結核菌LAM、基因工程表達結核分枝桿菌抗原、38kDa、16kDa蛋白?？贵w主要包括結核抗體LgG/LgM。一般情況下只檢測LgG而本研究也檢測了LgM能夠提高其陽性檢出率。結核桿菌的發(fā)生發(fā)展轉歸與免疫活動有密切的關系。當機體再次感染結核分枝桿菌時會刺激漿細胞產生B淋巴細胞，B淋巴細胞立刻分泌免疫球蛋白LgG/LgM，進而能夠反映患者體內結核的活動情況。本實驗結果顯示結核抗體LgG/LgM檢測菌陽肺結核靈敏度為77.42%，顯著高于PPD實驗中菌陽肺結核靈敏度50%（P＜0.05）菌陰肺結核靈敏度為59.46%同樣顯著高于PPD檢測結果52.29%（P＜0.05）活動性肺結核中假陽性22例，假陰性7例，總靈敏度為67.64%，特異度為96.36%明顯高于PPD實驗中總靈敏度51.47%和特異度89.09%（P＜0.05）且準確性為57.35%（39/68），陽性預測值為35.29%（24/68），陰性預測值為22.06%（15/68）。結果可看出相對于PPD檢測，結核抗體LgG/LgM檢測具有更高的總靈敏度和特異性，具有更高的臨床診斷價值。其原因可能是當患者感染肺結核后，機體體液免疫增強，細胞免疫降低。而PPD試驗檢測的是機體細胞免疫，受患者病程長短、機體免疫程度等方面影響較大，病程長則檢出率較高，而結核抗體LgG/LgM檢測機體體液免疫，人為因素干擾少，與非結核分枝桿菌不會有交叉反應，能相對客觀的反應機體抗體水平，特異性及準確率較高。

綜上所述，結核抗體LgG/LgM檢測靈敏度和特異度高于結核菌素檢測試驗。本研究的創(chuàng)新之處在于結合肺結核檢測的靈敏度、特異度、假陽性、假陰性、陽性預測值以及陰性預測值等多項觀察指標對比分析了結核菌素試驗以及結核抗體檢測試驗對肺結核檢測的靈敏度以及特異度使實驗結果更加客觀。為肺結核的診斷提供了更加簡單、快速、敏感、科學的方法和依據。