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血清CircRNA_0050908、CircRNA_0001879聯(lián)合 Hs-cTnI在急性心肌梗死患者中的表達(dá)及其臨床意義

2022-05-22 13:52麥壯艷林應(yīng)源萬樹莉王婷婷
浙江醫(yī)學(xué) 2022年9期
關(guān)鍵詞:標(biāo)志物心血管血清

麥壯艷 林應(yīng)源 萬樹莉 王婷婷

急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)是一種由心肌缺血性壞死造成的急性致命性疾病,盡管過去10年預(yù)后有了顯著改善,但其死亡率仍居高不下[1]。對AMI進(jìn)行早期診斷,并及時(shí)采取有效的救治措施,是降低死亡率并改善預(yù)后的關(guān)鍵。高敏心肌肌鈣蛋白I(high sensitivity cardiac troponin I,Hs-cT-nI)檢測能早期提示微小心肌損傷,是當(dāng)前診斷AMI的首選實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)[2]。越來越多的研究表明,環(huán)狀RNA(circular RNA,CircRNA)是一種內(nèi)源性轉(zhuǎn)錄物,具有較高的穩(wěn)定性和組織特異性,其異常表達(dá)與心血管疾病的發(fā)病機(jī)制高度關(guān)聯(lián)[3-4]。近期研究發(fā)現(xiàn),CircRNA_0050908及CircRNA_0001879在心血管疾病患者中存在異常表達(dá),對心血管疾病的發(fā)生、發(fā)展具有重要的調(diào)控作用,有望成為心血管疾病診斷和治療干預(yù)的理想候選指標(biāo)[5-6]。目前,關(guān)于CircRNA_0050908及CircRNA_0001879對AMI的診斷價(jià)值少有文獻(xiàn)報(bào)道。本研究通過檢測AMI患者血清CircRNA_0050908及CircRNA_0001879水平,分析其聯(lián)合傳統(tǒng)心肌標(biāo)志物Hs-cTnI對 AMI診斷及預(yù)測心血管不良事件的價(jià)值,以期為AMI的診治提供幫助。

1 對象和方法

1.1 對象 選取2018年1月至2021年6月海南西部中心醫(yī)院收治的AMI患者108例作為研究對象(AMI組),其中男 73例,女 35例;年齡 35~81(57.30±11.82)歲。納入標(biāo)準(zhǔn):(1)符合《歐洲心臟病學(xué)會急性心肌梗死管理指南(2017)》[7]中的診斷標(biāo)準(zhǔn);(2)年齡≥18歲,發(fā)病至入院時(shí)間<8 h。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)已接受過冠狀動脈旁路移植術(shù)、靜脈溶栓治療;(2)存在惡性腫瘤、血液病及腦血管疾病。隨訪所有患者在確診30 d內(nèi)再次發(fā)生心血管不良事件的情況,AMI患者再次發(fā)生心血管不良事件18例(心源性死亡4例,再次心肌梗死4例,心絞痛7例,心力衰竭3例)。另選取健康體檢者50名作為對照組,其中男32例,女性18例;年齡36~80(58.10±9.62)歲。兩組研究對象性別、年齡、基礎(chǔ)疾病史、血壓、TC、TG、LDL-C及 HDL-C比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05),見表1。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審批通過,所有研究對象均知情同意。

表1 兩組研究對象臨床資料比較

1.2 方法

1.2.1 血清CircRNA_0050908及CircRNA_0001879水平檢測 采集所有患者入院即刻和健康體檢者體檢時(shí)的靜脈血各3 ml,3 000 r/min離心10 min,分離血清。取血清400 μl采用Trizol試劑盒提取血清總RNA,使用逆轉(zhuǎn)錄試劑盒進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,獲取反轉(zhuǎn)錄DNA(PCR相關(guān)試劑盒均購自上海生物工程有限公司)。采用RT-qPCR法檢測血清CircRNA_0050908及CircRNA_0001879 水平,PCR 總反應(yīng)體系為 20 μl:1 μl引物及探針 Mix(20×),10 μl TaqMan 通用混合物溶液(2×),1.33 μl反轉(zhuǎn)錄脫氧核糖核酸,7.67 μl雙蒸水。擴(kuò)增反應(yīng)條件為:95℃預(yù)變性5 min 1個(gè)循環(huán),95℃變性15 s,60℃退火30 s,72℃延伸60 s。以甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)為內(nèi)參基因,采用 2-ΔΔCt法計(jì)算結(jié)果。

1.2.2 血清Hs-cTnI水平檢測 另取上述血清200 μl,使用DXI 800全自動化學(xué)發(fā)光分析儀(美國貝克曼庫爾特公司)及配套試劑檢測Hs-cTnI水平。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以 表示,方差齊時(shí),組間比較采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn);方差不齊時(shí),組間比較采用非參數(shù)檢驗(yàn)。ROC曲線評估CircRNA_0050908、CircRNA_0001879聯(lián)合HscTnI診斷AMI及預(yù)測心血管不良事件的效能。采用Pearson相關(guān)分析 AMI患者血清CircRNA_0050908、CircRNA_0001879水平與Hs-cTnI水平的相關(guān)性。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組研究對象血清CircRNA_0050908、CircRNA_0001879及Hs-cTnI水平比較 AMI組患者血清CircRNA_0050908、CircRNA_0001879及Hs-cTnI水平均明顯高于對照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.01),見表2。

表2 兩組研究對象血清CircRNA_0050908、CircRNA_0001879及Hs-cTnI水平比較

2.2 CircRNA_0050908、CircRNA_0001879聯(lián)合Hs-cTnI診斷AMI的效能 CircRNA_0050908、CircRNA_0001879及Hs-cTnI診斷AMI的最佳截?cái)嘀捣謩e為1.83、1.50、0.91 μg/L,3項(xiàng)聯(lián)合診斷AMI的AUC明顯高于單項(xiàng)CircRNA_0050908、CircRNA_0001879及 Hs-cTnI檢測,其靈敏度為0.982,特異度為0.913,見表3和圖1(插頁)。

表3 CircRNA_0050908、CircRNA_0001879聯(lián)合Hs-cTnI診斷AMI的效能

圖1 CircRNA_0050908、CircRNA_0001879聯(lián)合 Hs-cTnI診斷AMI的ROC曲線

2.3 CircRNA_0050908、CircRNA_0001879聯(lián)合Hs-cTnI預(yù)測心血管不良事件的效能 CircRNA_0050908、CircRNA_0001879及Hs-cTnI預(yù)測心血管不良事件的最佳截?cái)嘀捣謩e為 1.95、1.61、0.86 μg/L,3 項(xiàng)聯(lián)合預(yù)測心血管不良事件的AUC明顯高于單項(xiàng)CircRNA_0050908、CircRNA_0001879及 Hs-cTnI檢測,其靈敏度為0.943,特異度為0.875,見表4和圖2(插頁)。

表4 CircRNA_0050908、CircRNA_0001879聯(lián)合Hs-cTnI預(yù)測心血管不良事件的效能

圖2 CircRNA_0050908、CircRNA_0001879聯(lián)合Hs-cTnI預(yù)測心血管不良事件的ROC曲線

2.4 AMI患者血清CircRNA_0050908、CircRNA_0001879水平與Hs-cTnI水平的相關(guān)性分析 Pearson相關(guān)分析顯示,AMI患者血清CircRNA_0050908、CircRNA_0001879水平與Hs-cTnI水平均呈正相關(guān)(r=0.830和0.751,均 P<0.01),見圖 3。

圖3 AMI患者血清CircRNA_0050908、CircRNA_0001879水平與Hs-cTnI水平的散點(diǎn)圖

3 討論

AMI是一種心肌急性缺血性壞死的常見急危重癥,在過去的幾十年中,AMI已成為一個(gè)重要的死亡原因,在全球范圍內(nèi)AMI的發(fā)病率逐年上升,嚴(yán)重威脅著人類的生命健康[8]。早發(fā)現(xiàn)、早治療是當(dāng)前AMI防治的重中之重。生物標(biāo)志物在AMI早期診斷和治療中起著重要的作用。因而,尋找一種更加有效的AMI診療標(biāo)志物組合對患者的早期救治具有極大的幫助。CircRNA是一類呈封閉環(huán)狀結(jié)構(gòu)的特殊非編碼RNA,參與調(diào)節(jié)心肌細(xì)胞凋亡及心肌損傷,在心血管疾病的診斷及治療中起到很大的指導(dǎo)作用,被認(rèn)為是臨床治療AMI的新靶點(diǎn)[9]。國內(nèi)外研究證實(shí),CircRNA在心血管疾病患者血液樣本中異常表達(dá),其參與多種心血管疾病的發(fā)生、發(fā)展,可能是一種潛在的心血管疾病診斷和治療的理想候選基因生物標(biāo)志物[10-11]。Hs-cTnI作為AMI診斷的金指標(biāo),已在臨床上得到廣泛認(rèn)可和共識,其對心肌損傷的診斷具有重大的幫助[12]。

本研究 AMI組患者血清CircRNA_0050908、CircRNA_0001879及Hs-cTnI水平均明顯高于對照組,提示血清CircRNA_0050908、CircRNA_0001879及HscTnI水平高表達(dá)可能參與AMI的發(fā)病過程。這可能是CircRNA_0050908和CircRNA_0001879作為重要的炎癥調(diào)控因子,其過度表達(dá)促進(jìn)了冠狀動脈粥樣硬化的發(fā)生,使心肌缺血、缺氧從而引起心肌梗死,在AMI的發(fā)生及發(fā)展中起著重要作用。Lau等[13]研究指出,與對照組相比,AMI患者血清Hs-cTnI水平明顯升高,對AMI診斷具有一定價(jià)值。Gong等[14]研究認(rèn)為,CircRNA在AMI的發(fā)生、調(diào)控和病理生理作用中發(fā)揮了重要的作用,對AMI的診斷和預(yù)后具有重要的生物學(xué)意義,是AMI治療的潛在靶點(diǎn)。由此推測CircRNA_0050908、CircRNA_0001879 在 AMI發(fā)病中發(fā)揮了巨大的潛力。

本研究ROC曲線顯示,CircRNA_0050908、CircRNA_0001879及Hs-cTnI對 AMI診斷及預(yù)測心血管不良事件的AUC均較高,3項(xiàng)聯(lián)合的AUC最大,均>0.925。相關(guān)分析也顯示,AMI患者血清CircRNA_0050908、CircRNA_0001879水平與Hs-cTnI水平均呈正相關(guān)。說明 CircRNA_0050908、CircRNA_0001879診斷 AMI及預(yù)測心血管不良事件有很大的潛力,兩者聯(lián)合HscTnI診斷AMI及預(yù)測心血管不良事件的效能最高。研究表明,Hs-cTnI診斷AMI的準(zhǔn)確性較高,在早期排查AMI中也有較高的靈敏度,具有較好的臨床實(shí)用性[15]。另有研究認(rèn)為,CircRNA在AMI中起著至關(guān)重要的調(diào)節(jié)作用,是AMI的潛在診斷標(biāo)志物和預(yù)后標(biāo)志物,為AMI的靶向治療提供了很好的指導(dǎo)作用[16]。由此可見,早期檢測CircRNA_0050908及CircRNA_0001879水平對早期發(fā)現(xiàn)AMI有很大的幫助。

綜上所述,AMI患者血清 CircRNA_0050908、CircRNA_0001879表達(dá)水平明顯升高,聯(lián)合Hs-cTnI檢測有助于提高 AMI診斷及心血管不良事件預(yù)測的準(zhǔn)確性。通過 CircRNA_0050908、CircRNA_0001879與Hs-cTnI的相互結(jié)合,很好地彌補(bǔ)了Hs-cTnI單一指標(biāo)對AMI診斷存在的局限性,為AMI的早診斷、早救治提供重要的依據(jù)。

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