王緒娟 羅永鑫 李成強(qiáng) 王汝晉 向敏

晚期乳腺癌病人原發(fā)病灶體積較大，實(shí)施手術(shù)治療通常難以完整切除，且病人癌細(xì)胞已出現(xiàn)廣泛轉(zhuǎn)移，因此多需對(duì)病人實(shí)施化療治療[1-2]。而老年病人身體狀況較差，對(duì)化療的敏感性及耐受性均較低，實(shí)施化療后預(yù)后不良風(fēng)險(xiǎn)高[3]。探討與老年乳腺癌病人化療預(yù)后相關(guān)的指標(biāo)，及早預(yù)測(cè)病人預(yù)后，并改進(jìn)治療方案尤為必要。研究指出，微小RNA(microRNA，miR)不僅可調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄后表達(dá)，參與腫瘤細(xì)胞生成、增殖、轉(zhuǎn)移等途徑，還可抑制細(xì)胞凋亡，進(jìn)而影響腫瘤的發(fā)生、進(jìn)展及治療獲益[4]。其中miR-29a被證實(shí)在宮頸癌、肝癌病人癌組織中均呈異常表達(dá)，并與腫瘤細(xì)胞惡性生物學(xué)行為密切相關(guān)[5-6]。推測(cè)miR-29a也可能與乳腺癌病人治療獲益有關(guān)。環(huán)氧化酶-2(Cyclooxygenase-2，COX-2)被證實(shí)與癌癥病人化療敏感性有一定關(guān)系[7]。推測(cè)COX-2也可能與乳腺癌病人化療獲益有關(guān)。本研究旨在探討血清miR-29a、COX-2水平與老年晚期乳腺癌病人化療預(yù)后的相關(guān)性，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析本院2018年1月至2020年1月接受TAC(紫杉醇+吡柔比星+環(huán)磷酰胺)方案化療后并接受至少為期1個(gè)月隨訪的114例老年晚期乳腺癌病人臨床資料，年齡60～84歲，平均(71.94±8.68)歲；發(fā)病部位：?jiǎn)蝹?cè)47例，雙側(cè)67例；病灶直徑：3～7 cm，平均(5.19±0.65)cm；組織學(xué)類型：浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌88例，浸潤(rùn)性小葉癌18例，其他8例；組織學(xué)分化：高分化69例，中分化42例，低分化3例；分子亞型：Luminal A 37例，Luminal B/HER2+33例，Luminal B/HER2-23例，三陰性21例。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合乳腺癌診斷標(biāo)準(zhǔn)[8]；(2)經(jīng)檢查病人均已發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，失去手術(shù)治療機(jī)會(huì)；(3)病人有乳房疼痛、乳房腫塊、乳頭溢液等癥狀；(4)病理學(xué)檢查結(jié)果顯示病人TNM分期[9]為Ⅳ期；(5)臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并2型糖尿病的病人；(2)有其他部位原發(fā)腫瘤的病人；(3)合并慢性或急性炎癥性疾病的病人；(4)復(fù)發(fā)病人；(5)對(duì)化療藥物有過敏反應(yīng)的病人；(6)化療或隨訪期間病死、失訪的病人。

1.3 方法

1.3.1 基線資料：設(shè)計(jì)基線資料調(diào)查表，查閱病人電子檔案(錄入時(shí)間為病人化療前)，記錄研究所需資料，包括年齡、發(fā)病部位、病灶直徑、組織學(xué)類型、組織學(xué)分化、分子亞型、標(biāo)準(zhǔn)化攝入值(standardized uptake value，SUV)、血清腫瘤標(biāo)志物水平、基質(zhì)金屬蛋白酶2(matrix metallo proteinases 2，MMP-2)、血清miR-29a及COX-2水平。采用美國(guó)羅氏公司提供的腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)試劑盒檢測(cè)病人糖類抗原125(CA125)、CA153水平，檢測(cè)方法選用電化學(xué)發(fā)光免疫分析法。采用美國(guó)羅氏公司RNA提取試劑盒說明書提取RNA，取1μg RNA，采用美國(guó)羅氏公司反轉(zhuǎn)錄試劑盒進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，反應(yīng)條件為37℃ 60 min，95 ℃ 5 min，采用ABI 7500 Fast Star定量PCR儀檢測(cè)血清miR-29a水平。采用美國(guó)羅氏公司酶聯(lián)免疫吸附試劑盒檢測(cè)MMP-2、COX-2水平。

1.3.2 化療預(yù)后評(píng)估：病人均接受TAC(紫杉醇+吡柔比星+環(huán)磷酰胺)方案進(jìn)行化療治療。以10 d為1療程，21 d為1周期，治療6個(gè)周期后至少隨訪1個(gè)月。參照實(shí)體瘤療效評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)[10]制定化療效果評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)，分為完全緩解(complete remission，CR)、部分緩解(partial response，PR)、穩(wěn)定(stable disease，SD)和進(jìn)展(progressive disease，PD)。其中PD病人為化療預(yù)后不良(預(yù)后不良組)，CR+PR+SD為化療預(yù)后良好(預(yù)后良好組)。

2 結(jié)果

表2 回歸分析檢驗(yàn)各主要指標(biāo)與老年晚期乳腺癌病人化療預(yù)后的關(guān)系

2.1 預(yù)后不良組與預(yù)后良好組基線資料比較 114例老年晚期乳腺癌病人中，有44例(38.60%)預(yù)后不良，有70例(61.40%)預(yù)后良好；預(yù)后不良組CA125、CA153、MMP-2、miR-29a相對(duì)表達(dá)量、COX-2水平均高于預(yù)后良好組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；2組年齡、發(fā)病部位、病灶直徑、組織學(xué)類型、組織學(xué)分化、分子亞型、SUV比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 預(yù)后不良組與預(yù)后良好組基線資料比較

2.2 老年晚期乳腺癌病人化療預(yù)后的影響因素分析 將初步基線資料比較結(jié)果顯示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的CA125、CA153、MMP-2、miR-29a相對(duì)表達(dá)量、COX-2納入作為自變量，將老年晚期乳腺癌病人化療預(yù)后作為因變量(1=預(yù)后不良，0=預(yù)后良好)納入Logistic回歸方程，結(jié)果顯示，CA125、CA153、MMP-2、miR-29a相對(duì)表達(dá)量、COX-2表達(dá)上調(diào)與老年晚期乳腺癌病人化療預(yù)后不良發(fā)生有關(guān)。見表2。

2.3 各主要指標(biāo)對(duì)老年晚期乳腺癌病人化療預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值 ROC曲線結(jié)果顯示，CA125、CA153、MMP-2、miR-29a相對(duì)表達(dá)量、COX-2預(yù)測(cè)預(yù)后不良發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的AUC分別為0.830、0.855、0.816、0.842、0.815，閾值分別為34.500 U/mL、30.600 U/mL、107.500 ng/mL、0.750、52.200 ng/mL，見表3。

表3 各主要指標(biāo)預(yù)測(cè)老年晚期乳腺癌病人化療預(yù)后不良風(fēng)險(xiǎn)的ROC曲線結(jié)果

3 討論

管秀雯等[11]研究指出，我國(guó)老年晚期乳腺癌病人的生存情況較差，中位總生存期較非老年病人明顯縮短。而早期乳腺癌癥狀較為隱蔽，篩查難度較大，老年病人確診時(shí)已進(jìn)入晚期，癌細(xì)胞發(fā)生轉(zhuǎn)移，治療難度增大，行化療治療的獲益較低，探討病人預(yù)后尤為必要。

本研究結(jié)果顯示，CA125、CA153、MMP-2、miR-29a相對(duì)表達(dá)量、COX-2表達(dá)上調(diào)與老年晚期乳腺癌病人化療預(yù)后不良有關(guān)。CA125屬于糖鏈抗原，正常人體中，由胚胎期體腔上皮發(fā)育而來的組織僅可產(chǎn)生少量CA125，當(dāng)機(jī)體出現(xiàn)癌變時(shí)，惡變組織釋放過量CA125，造成血清CA125水平上調(diào)[12]。因此CA125水平越高，癌變程度越嚴(yán)重，病人預(yù)后越差。CA153是乳腺癌的特異性標(biāo)志物，研究證實(shí)，隨著CA153水平升高，腫瘤病人治療獲益降低，預(yù)后不良風(fēng)險(xiǎn)升高[13]。MMP-2是近年來發(fā)現(xiàn)的與乳腺癌病人預(yù)后相關(guān)的指標(biāo)，研究認(rèn)為在MMP-2表達(dá)上調(diào)時(shí)，細(xì)胞外基質(zhì)降解，血管通透性升高，腫瘤細(xì)胞更易進(jìn)入血液循環(huán)，在靶器官中定植，進(jìn)而增加病人預(yù)后不良風(fēng)險(xiǎn)[14]。

miR是一類單鏈非編碼微小RNA，被證實(shí)可調(diào)控靶基因表達(dá)[15]。研究指出，miR-29a可負(fù)向調(diào)控第10號(hào)染色體同源丟失性磷酸酶-張力蛋白(PTEN)基因，即在miR-29a水平升高時(shí)，PTEN表達(dá)水平降低[16]。而PTEN編碼基因是腫瘤抑制基因，可產(chǎn)生抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的蛋白，具有蛋白和脂質(zhì)雙重磷酸酶活性，可通過拮抗磷酸化酶(如酪氨酸激酶)活性，發(fā)揮抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖、侵襲的效果，減少血管生成及局部黏附，并可使IP3的第三位磷酸去磷酸化，間接抑制胰島素誘導(dǎo)的磷酸肌醇-3激酶活性，進(jìn)一步抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)[17]。miR-29a水平越高，乳腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)、侵襲能力越強(qiáng)，受抑制程度較輕，行化療治療時(shí)，腫瘤對(duì)化療藥物的耐受性較高，病人易出現(xiàn)預(yù)后不良。COX-2是COX的亞型，在正常生理狀態(tài)下表達(dá)量極小，而在病理狀態(tài)(如癌基因激活)下可過量分泌，通過促使前列腺素合成，增加腫瘤生長(zhǎng)、增殖風(fēng)險(xiǎn)，提高血管滲透性，促使腫瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移[18]。COX-2還可通過上調(diào)原癌基因Bcl-2表達(dá)，提高腫瘤細(xì)胞的抗凋亡能力，通過產(chǎn)生催化產(chǎn)物前列腺素E2，抑制淋巴因子產(chǎn)生，減少T細(xì)胞和B細(xì)胞增殖，通過誘導(dǎo)免疫抑制酶3-雙加氧酶表達(dá)，使病人機(jī)體免疫監(jiān)視功能減弱，腫瘤細(xì)胞易發(fā)生免疫逃逸[19]。因此，COX-2水平升高時(shí)，癌細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖、轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)增加，抗凋亡能力較強(qiáng)，病人行化療的預(yù)后不良風(fēng)險(xiǎn)較高。

綜上所述，CA125、CA153、MMP-2、miR-29a相對(duì)表達(dá)量、COX-2與老年晚期乳腺癌病人預(yù)后不良密切相關(guān)，可作為預(yù)后不良的預(yù)測(cè)因子。