汪詠曾，祝胡仙，朱教勝

（勁牌有限公司檢測中心，湖北大冶 435100）

甲醛是一種無色、有毒的氣體，易溶于水，廣泛存在于啤酒、發(fā)酵酒和蒸餾酒中。2017 年10 月27 日，世界衛(wèi)生組織國際癌癥研究機(jī)構(gòu)公布的致癌物清單中，將甲醛放在一類致癌物列表中。雖然現(xiàn)行有效的GB 2758—2012《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 發(fā)酵酒及其配制酒》 中規(guī)定，啤酒中甲醛小于等于2.0 mg/L[1]，但是對白酒及其配制酒中的甲醛含量沒有限量要求，也沒有相應(yīng)的檢測方法標(biāo)準(zhǔn)。試驗參照GB/T 5009.49—2008《發(fā)酵酒及其配制酒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的分析方法》[2]基礎(chǔ)上對白酒及其配制酒中甲醛檢測方法進(jìn)行研究與改進(jìn)，為白酒及其配制酒酒中甲醛含量的檢測提供參考。

1 材料與方法

1.1 試劑與材料

紫外分光光度計、全玻蒸餾裝置（1 000 mL）、移液管、容量瓶、比色管、乙酰丙酮溶液、磷酸、乙酸銨、冰乙酸、甲醛。

1.2 測定方法

參照GB/T 5009.49—2008《發(fā)酵酒及其配制酒中衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的分析方法》。

1.3 測定步驟

（1） 直接測定法。對于無色清亮透明的白酒樣品可采用直接法進(jìn)行測定。取樣品1～10 mL 樣品于25 mL 比色管中，用水稀釋至10 mL。各管中分別加入乙酰丙酮溶液2 mL，塞好瓶蓋搖勻后，用紗布將瓶蓋包扎緊，在60 ℃水中水浴30 min，取出冷卻[3]，以水作參比，于波長415 nm 處測定吸光度。其計算公式為：

式中：

X——試樣中甲醛的含量，μg/mL；

C1——從標(biāo)準(zhǔn)曲線中得到的甲醛質(zhì)量，μg；

C0——試劑空白從標(biāo)準(zhǔn)曲線中得到的質(zhì)量，μg；

V——測定用樣品的體積，mL。

（2） 蒸餾法。有顏色配制酒樣品蒸餾后測定，具體步驟：準(zhǔn)確吸取25.0 mL 樣品樣品至蒸餾瓶中，加入200 g/L 磷酸溶液20 mL，再加水至液體總體積為120 mL，迅速裝好蒸餾裝置，將冷凝管下端插入裝有盛有20 mL 水的100 mL 錐形瓶液面下（外加冰?。?，打開冷卻水，開始蒸餾，收集餾出液于近100 mL，取下錐形瓶，將上述蒸餾液完全轉(zhuǎn)移至100 mL 容量瓶中并定容至刻度。取蒸餾液2～10 mL于10 mL 比色管中，用水稀釋至刻度。各管中分別加入乙酰丙酮溶液2 mL，塞好瓶蓋搖勻后，用紗布將瓶蓋包扎緊，在60 ℃水中水浴30min，取出冷卻[3]，以水作參比，于波長415 nm 處測定吸光度。其計算公式為：

式中：

X——試樣中甲醛的質(zhì)量濃度，μg/mL；

C1——從標(biāo)準(zhǔn)曲線中得到的甲醛質(zhì)量，μg；C0——試劑空白從標(biāo)準(zhǔn)曲線中得到的質(zhì)量，μg；V1——蒸餾用試樣的體積，mL；

V2——測定用試樣蒸餾液的體積，mL。

2 方法學(xué)考查

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的考查

精密吸收1 μg/mL 的甲醛標(biāo)準(zhǔn)溶液各0，0.50，1.00，2.00，3.00，4.00，8.00，10.00 mL 于25 mL比色管中，加水至10 mL。標(biāo)準(zhǔn)工作液質(zhì)量濃度依次為0，0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，0.8，10.0 μg/mL。按1.3（2） 建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，并擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線。

標(biāo)準(zhǔn)工作液質(zhì)量濃度見表1。

表1 標(biāo)準(zhǔn)工作液質(zhì)量濃度

2.2 精密度試驗

選取酒類樣品蒸餾液進(jìn)行顯色并重復(fù)測定6 次，計算檢測結(jié)果相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。

精密度結(jié)果見表2。

由表2 可知，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD 值符合方法驗證要求，說明試驗的精密度較好。

表2 精密度結(jié)果/ μg

2.3 穩(wěn)定性試驗

選取酒類樣品蒸餾液進(jìn)行顯色測定，將顯色好的樣品分別放置0，10，30，50，70，100，120 min，計算檢測結(jié)果相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。

相對標(biāo)準(zhǔn)偏差見表3。

表3 相對標(biāo)準(zhǔn)偏差/ μg

由表3 可知，在120 min 內(nèi)穩(wěn)定性良好，但檢測結(jié)果有隨著時間的延長而出現(xiàn)升高的趨勢。

2.4 重復(fù)性試驗

分別選取1 個配制酒樣品和白酒樣品，白酒樣品則按直接法測定，配制酒樣品用蒸餾法測定。

直接法和蒸餾法結(jié)果見表4。

表4 直接法和蒸餾法結(jié)果 / μg

直接法RSD 值為0.95%，蒸餾法RSD 值為4.85%。

2.5 準(zhǔn)確度試驗

選取白酒和配制酒樣品，分別添加不同3 個梯度甲醛標(biāo)準(zhǔn)溶液混合均勻，每個梯度做3 個平行。其中白酒用直接法測定，配制酒用蒸餾法測定。

不同梯度準(zhǔn)確度試驗結(jié)果見表5。

表5 不同梯度準(zhǔn)確度試驗結(jié)果

2 種方法相比較，其中直接法檢測準(zhǔn)確度更高。

2.6 樣品中酒精度對結(jié)果的影響研究

配制3 個不同酒精度樣品（3 個樣品中甲醛含量一致），取10.0 mL 樣品按用直接法進(jìn)行測定。

不同酒精度對試驗結(jié)果的影響見表6。

表6 不同酒精度對試驗結(jié)果的影響

從以上檢測結(jié)果分析，樣品中酒精度含量在50%Vol 以內(nèi)對甲醛檢測結(jié)果影響較小。

2.7 樣品中醛類物質(zhì)對檢測結(jié)果的影響研究

根據(jù)白酒含有中乙醛和乙縮醛類物質(zhì)的濃度，配制成與白酒中醛類濃度相似的混合酒精溶液（其中酒精度為50%Vol，乙醛質(zhì)量濃度0.97 μg/mL，乙縮醛質(zhì)量濃度為0.99 μg/mL），在上述混合溶液再添加甲醛標(biāo)準(zhǔn)溶液，用直接法進(jìn)行樣品顯色與測定。

醛類物質(zhì)對試驗結(jié)果的影響見表7。

表7 醛類物質(zhì)對試驗結(jié)果的影響

以上檢測結(jié)果表明，醛類物質(zhì)會導(dǎo)致檢測結(jié)果偏高。

2.8 樣品pH 值對檢測結(jié)果的影響研究

將同一酒樣中pH 值調(diào)節(jié)成3 個不同梯度，然后按1.3.2～1.3.4 步驟進(jìn)行顯色與測定。

不同pH 值對試驗結(jié)果的影響見表8。

表8 不同pH 值對試驗結(jié)果的影響

3 個不同pH 值的樣品甲醛檢測結(jié)果的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在允許范圍之內(nèi)，說明pH 值對甲醛影響較小。

3 結(jié)論

在以上試驗中，將GB/T 5009.49—2008 標(biāo)準(zhǔn)中的沸水浴10 min 改為60 ℃水浴30 min 并包扎瓶口后，可以有效防止高溫水浴過程中瓶塞開崩的情況；標(biāo)準(zhǔn)曲線線性關(guān)系良好；對于沒有顏色的白酒用直接法測定，可減少蒸餾過程中甲醛的損失，重復(fù)性好、準(zhǔn)確度高、操作簡單且耗時少；而有顏色的配制酒則需要用蒸餾法測定，以避免顏色的干擾；樣品中的酒精度在50%Vol 以下，pH 值為3.8～10.0，對結(jié)果影響較小，但醛類物資則可能會導(dǎo)致檢測結(jié)果偏高。