李京泓，周佳蕊，郭 彤，劉 坤

（1. 河北經(jīng)貿(mào)大學(xué)生物科學(xué)與工程學(xué)院，河北石家莊 050061；2. 南開大學(xué)泰達(dá)生物技術(shù)研究院，天津 300000）

果凍是一種低能量、高膳食纖維的健康食品[1]，作為一種老少皆宜的零食一直深受消費(fèi)者的喜愛。傳統(tǒng)果凍一般只注重果凍的口味、外觀等因素，21 世紀(jì)的今天，人們更注重健康問題，具有高營養(yǎng)價(jià)值和一定保健功能的果凍可能是未來的發(fā)展方向[2]。

山藥約含淀粉65%，蛋白質(zhì)9%，纖維1.2%和多種生物活性物質(zhì)，是預(yù)防糖尿病和心臟病的功能性食品[3]。蕎麥富含粗纖維、黃酮、高活性蛋白質(zhì)等具有降糖生物活性的成分[4]，廣泛應(yīng)用于各種食品的制作，如降糖酸奶[5]等。點(diǎn)柄粘蓋牛肝菌（Suillus granulatus） 是牛肝菌科、粘蓋牛肝菌屬的一種可食用真菌[6]，富含甾類、酚酸類及各種色素等成分[7-8]，且真菌的次生代謝物色素是食品天然色素和食品添加劑的良好來源[9]，具有極高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和生物價(jià)值[10]。以粗纖維山藥粉和蕎麥粉為主要原料、以點(diǎn)柄粘蓋牛肝菌中提取得到的色素提取物為色素添加劑、羅漢果甜苷為甜味劑、檸檬酸為酸味劑、卡拉膠為凝固劑探究粗纖維牛肝菌保健型果凍的最佳制作工藝，以期為點(diǎn)柄粘蓋牛肝菌色素提取物的應(yīng)用及新型果凍的研制提供借鑒和參考。

1 材料與方法

1.1 原料及輔料

蕎麥粉、山藥粉、卡拉膠、羅漢果甜苷、檸檬酸、點(diǎn)柄粘蓋牛肝菌菌粉（食品級(jí)）。

1.2 儀器設(shè)備

HH-數(shù)顯恒溫水浴鍋，江蘇市榮華儀器制造有限公司產(chǎn)品；電子天平，北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司產(chǎn)品；電磁爐，廣州美的生活電器有限公司產(chǎn)品。

1.3 工藝流程

①山藥粉→涼水溶解→熬煮至澄清；

②蕎麥粉→熬煮→過濾；

①+②→點(diǎn)柄粘蓋牛肝菌色素提取物、卡拉膠、羅漢果甜苷、檸檬酸→調(diào)配→注模→滅菌→冷卻。

1.4 試驗(yàn)方法

1.4.1 單因素試驗(yàn)

（1） 山藥粉和蕎麥粉配比篩選。分別取質(zhì)量比為1∶3，1∶2，1∶1，2∶1，3∶1 的山藥粉和蕎麥粉過篩，根據(jù)山藥粉和蕎麥粉的色澤、香味確定山藥粉和蕎麥粉的最佳配比。

（2） 山藥蕎麥粉添加量篩選。以水的質(zhì)量計(jì)，在添加卡拉膠2%，羅漢果甜苷0.1%，檸檬酸0.1%的基礎(chǔ)上分別添加0.5%，1.0%，1.5%，2.0%，3.0%的山藥蕎麥粉進(jìn)行單因素試驗(yàn)，通過感官評(píng)價(jià)確定山藥蕎麥粉的最佳添加量。

（3） 卡拉膠添加量篩選。以水的質(zhì)量計(jì)，添加山藥蕎麥粉1.5%，羅漢果甜苷0.1%，檸檬酸0.1%，然后分別添加0.50%，0.75%，1.00%，1.25%，1.50%的卡拉膠進(jìn)行單因素試驗(yàn)，并對(duì)果凍感官進(jìn)行評(píng)價(jià)，確定卡拉膠的最佳添加量。

（4） 羅漢果甜苷添加量篩選。以水的質(zhì)量計(jì)，添加卡拉膠2%，檸檬酸0.1%，山藥蕎麥粉1.5%，然后分別添加0.05%，0.10%，0.15%，0.20%，0.25%的羅漢果甜苷進(jìn)行單因素試驗(yàn)，并對(duì)果凍感官進(jìn)行評(píng)價(jià)，確定羅漢果甜苷的最佳添加量。

（5） 檸檬酸添加量篩選。以水的質(zhì)量計(jì)，添加卡拉膠2%，羅漢果甜苷0.1%，山藥蕎麥粉1.5%，然后分別添加0.06%，0.07%，0.08%，0.09%，1.00%的檸檬酸進(jìn)行單因素試驗(yàn)，并對(duì)果凍感官進(jìn)行評(píng)價(jià)，確定檸檬酸的最佳添加量。

（6） 點(diǎn)柄粘蓋牛肝菌色素提取物添加量篩選。以水的質(zhì)量計(jì)，添加卡拉膠2%，羅漢果甜苷0.1%，檸檬酸0.1%，山藥蕎麥粉1.5%，然后分別添加0.1%，0.2%，0.3%，0.4%，0.5%的點(diǎn)柄粘蓋牛肝菌色素進(jìn)行單因素試驗(yàn)，并對(duì)果凍感官進(jìn)行評(píng)價(jià)，確定點(diǎn)柄粘蓋牛肝菌色素的最佳添加量。

1.4.2 響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)

在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，以山藥粉和蕎麥粉添加量、卡拉膠添加量、點(diǎn)柄粘蓋牛肝菌色素提取物添加量為影響因素，感官評(píng)價(jià)得分為響應(yīng)值，根據(jù)Box-behnken 模型進(jìn)行響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)。

響應(yīng)面試驗(yàn)自變量因素與水平設(shè)計(jì)見表1。

表1 響應(yīng)面試驗(yàn)自變量因素與水平設(shè)計(jì)/%

1.5 產(chǎn)品的感官評(píng)價(jià)指標(biāo)

試驗(yàn)由15 名食品專業(yè)不同年級(jí)的學(xué)生組成感官評(píng)價(jià)小組對(duì)果凍進(jìn)行評(píng)價(jià)打分。根據(jù)色澤（20 分）、滋味（30 分）、氣味（30 分）、組織狀態(tài)（20 分） 等指標(biāo)進(jìn)行評(píng)分，取其平均值四舍五入為整數(shù)。

粗纖維牛肝菌果凍感官評(píng)價(jià)指標(biāo)見表2。

表2 粗纖維牛肝菌果凍感官評(píng)價(jià)指標(biāo)

2 結(jié)果與分析

2.1 單因素試驗(yàn)結(jié)果

2.1.1 山藥粉和蕎麥粉配比對(duì)果凍感官品質(zhì)的影響

山藥粉和蕎麥粉配比對(duì)果凍品質(zhì)的影響見圖1。

圖1 山藥粉和蕎麥粉配比對(duì)果凍品質(zhì)的影響

由圖1 可知，當(dāng)蕎麥粉山藥粉質(zhì)量比為1∶1時(shí)，感官評(píng)分較高，產(chǎn)品的色澤最為宜人、山藥粉和蕎麥粉的香味更加均勻。

2.1.2 山藥蕎麥粉添加量對(duì)果凍品質(zhì)的影響

山藥粉蕎麥粉添加量對(duì)果凍品質(zhì)的影響見圖2。

由圖2 可知，當(dāng)山藥蕎麥粉添加量為1%時(shí)，果凍感官評(píng)分最高。添加量過少味道寡淡，沒有蕎麥和山藥的香氣，添加量過多，味道過于濃郁，蕎麥苦澀味明顯。

圖2 山藥粉蕎麥粉添加量對(duì)果凍品質(zhì)的影響

2.1.3 卡拉膠添加量對(duì)果凍品質(zhì)的影響

卡拉膠添加量對(duì)果凍品質(zhì)的影響見圖3。

由圖3 可知，當(dāng)卡拉膠添加量為1.25%時(shí)果凍富有彈性、脆度適中，感官評(píng)分最高。當(dāng)卡拉膠添加量過少時(shí)，果凍無法成型，添加量過多時(shí)，果凍過硬，且膠味明顯。

圖3 卡拉膠添加量對(duì)果凍品質(zhì)的影響

2.1.4 羅漢果甜苷添加量對(duì)果凍品質(zhì)的影響

羅漢果甜苷添加量對(duì)果凍品質(zhì)的影響見圖4。

圖4 羅漢果甜苷添加量對(duì)果凍品質(zhì)的影響

由圖4 可知，當(dāng)羅漢果甜苷添加量為0.15%時(shí)，果凍甜味適中，感官評(píng)分最高，且符合國家標(biāo)準(zhǔn)。羅漢果甜苷添加量太大將導(dǎo)致果凍味道過甜而有苦澀味。

2.1.5 檸檬酸添加量對(duì)果凍品質(zhì)的影響

檸檬酸添加量對(duì)果凍品質(zhì)的影響見圖5。

由圖5 可知，當(dāng)檸檬酸添加量為0.08%時(shí)，果凍酸味適中，感官評(píng)分最高，且符合國家標(biāo)準(zhǔn)。

圖5 檸檬酸添加量對(duì)果凍品質(zhì)的影響

2.1.6 點(diǎn)柄粘蓋牛肝菌色素提取物添加量對(duì)果凍品質(zhì)的影響

點(diǎn)柄粘蓋牛肝菌色素提取物添加量對(duì)果凍品質(zhì)的影響見圖6。

由圖6 可知，點(diǎn)柄粘蓋牛肝菌色素提取物添加量為0.15%時(shí)感官評(píng)分最高，此時(shí)色澤為誘人的淡黃色。當(dāng)添加量超過此值時(shí)，果凍顏色偏向于褐色，感官評(píng)分呈下降趨勢(shì)。

圖6 點(diǎn)柄粘蓋牛肝菌色素提取物添加量對(duì)果凍品質(zhì)的影響

2.2 響應(yīng)面試驗(yàn)結(jié)果與分析

2.2.1 模型的建立及顯著性檢驗(yàn)

以單因素試驗(yàn)結(jié)果為基礎(chǔ)，感官評(píng)分為指標(biāo)，采用Box-behnken 模型進(jìn)行三因素三水平試驗(yàn)設(shè)計(jì)。

響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果見表3。

表3 響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果

運(yùn)用Design Expert V8.0.6 軟件對(duì)表3 中得分進(jìn)行擬合，得回歸方程：

對(duì)于上述回歸方程進(jìn)行方差分析，R2為0.996 3，校正R2為0.991 6，預(yù)測(cè)R2為0.981 7，信噪比為44.017。

回歸方程方差分析見表4。

表4 回歸方程方差分析

由表4 可知，所建立模型的p＜0.000 1，極顯著；失擬差p=0.751＞0.05，不顯著，表明模型可靠性較高，試驗(yàn)誤差較小，因此可以對(duì)粗纖維牛肝菌果凍的感官評(píng)分進(jìn)行分析和預(yù)測(cè)。其中A、B、C 均為極顯著水平，即蕎麥山藥粉添加量、卡拉膠添加量、點(diǎn)柄粘蓋牛肝菌色素提取物添加量均達(dá)到極顯著水平，且蕎麥山藥粉添加量、卡拉膠添加量對(duì)感官評(píng)分的影響略大于點(diǎn)柄粘蓋牛肝菌色素提取物添加量。交互項(xiàng)AB 和BC 對(duì)結(jié)果影響顯著，二次項(xiàng)A2、B2、C2對(duì)結(jié)果影響極顯著。

2.2.2 響應(yīng)面分析

兩因素交互作用對(duì)粗纖維牛肝菌果凍感官評(píng)分影響的響應(yīng)面曲線見圖7。

根據(jù)模型所作的響應(yīng)曲面及其等高線圖可比較形象直觀地展現(xiàn)出各試驗(yàn)因素之間的相互關(guān)系，且響應(yīng)面圖傾斜程度與響應(yīng)值對(duì)因素的變化呈正比。由圖7 可知，當(dāng)點(diǎn)柄粘蓋牛肝菌色素提取物添加量、蕎麥山藥粉添加量和卡拉膠添加量與粗纖維牛肝菌果凍感官評(píng)分存在一定相關(guān)性。經(jīng)過Design Expert 8.0.6 軟件對(duì)回歸方程進(jìn)行多次回歸可知粗纖維牛肝菌果凍最佳制作工藝為蕎麥山藥粉添加量0.90%，卡拉膠添加量1.28%，點(diǎn)柄粘蓋牛肝菌色素提取物添加量0.091%，為了便于操作，將最佳制作工藝參數(shù)修訂為蕎麥山藥粉添加量1.0%，卡拉膠添加量1.25%，點(diǎn)柄粘蓋牛肝菌色素提取物添加量0.1%，在此最優(yōu)條件下進(jìn)行試驗(yàn)，粗纖維牛肝菌果凍的感官評(píng)分為91 分，與理論值89.51 分較為一致，驗(yàn)證了模型的可靠性。

圖7 兩因素交互作用對(duì)粗纖維牛肝菌果凍感官評(píng)分影響的響應(yīng)面曲線

3 結(jié)論

以單因素試驗(yàn)結(jié)果為基礎(chǔ)，感官評(píng)價(jià)為指標(biāo)，設(shè)計(jì)響應(yīng)面試驗(yàn)，通過回歸方程與方差分析確定此種粗纖維牛肝菌果凍最佳制作工藝為蕎麥山藥粉添加量1.0%，卡拉膠添加量1.25%，點(diǎn)柄粘蓋牛肝菌色素提取物添加量0.1%。在該工藝條件下制作的粗纖維牛肝菌果凍為淡黃色，且色澤均一、酸甜適中，富有彈性，具有山藥粉和蕎麥粉獨(dú)特風(fēng)味，且充分發(fā)揮了山藥粉、蕎麥粉、羅漢果甜苷、點(diǎn)柄粘蓋牛肝菌色素提取物的降糖等生物活性，使果凍具有一定的保健功能和營養(yǎng)價(jià)值，符合當(dāng)今廣泛開發(fā)利用天然健康原料生產(chǎn)食品產(chǎn)品的趨勢(shì)。