董怡飛 徐秀麗 張新婉 徐巍 楊金鵬 郭夢(mèng)捷 張楷 宋福行

(1 北京工商大學(xué) 輕工科學(xué)技術(shù)學(xué)院，北京 100048；2 中國(guó)地質(zhì)大學(xué)(北京) 海洋學(xué)院，北京 100083)

海洋是地球上生物多樣性和物種最豐富的棲息地之一，特殊的環(huán)境條件如高壓、高鹽、無(wú)光、低溫、氧含量低、沉積物多等，使其成為天然產(chǎn)物的巨大資源寶庫(kù)，海洋來(lái)源的天然產(chǎn)物在抑菌、抗病毒、抗腫瘤、鎮(zhèn)痛等領(lǐng)域發(fā)揮著非常顯著的作用[1-2]，為新藥研究提供了結(jié)構(gòu)獨(dú)特和生物活性豐富的化合物。如今，抗生素的廣泛使用造成高水平耐藥的病原菌大量出現(xiàn)，因此，尋找新型抗菌活性物質(zhì)變得更加迫切[3]。研究表明，海洋真菌在發(fā)掘海洋天然產(chǎn)物中的貢獻(xiàn)顯著，從其次級(jí)代謝產(chǎn)物中分離得到結(jié)構(gòu)新穎且活性顯著的化合物逐年增多，為海洋藥物的研發(fā)提供了候選化合物[4]。

曲霉屬真菌(Aspergillus)廣泛存在于各種環(huán)境中，從其次級(jí)代謝產(chǎn)物中發(fā)現(xiàn)獨(dú)特分子的潛力巨大[5-6]。近年來(lái)，從海洋來(lái)源曲霉中分離出了很多具有抗菌活性的化合物，如從太平洋深海海泥來(lái)源的真菌Aspergillus versicolorMCCC 3A00080中分離出一個(gè)新聯(lián)苯衍生物versiperol A，其對(duì)金黃色葡萄球菌最低抑菌濃度為8 μg/mL[7]；從西太平洋深海海泥來(lái)源的真菌Aspergillus sydowiiC1-S01-A7中分離得到化合物2-hydroxy-6-formyl-vertixanthone和12-O-acetylsydowinin A，它們對(duì)兩株甲氧西林耐藥金黃色葡萄球菌均有較好的抑制作用[8]；從南海深海海泥來(lái)源的真菌Aspergillus insuetusSD-512分離出兩種新的苯酚衍生物insphenol A和acetylpeniciphenol，其中acetylpeniciphenol對(duì)遲鈍愛(ài)德華菌，溶藻弧菌和創(chuàng)傷弧菌的最低抑菌濃度分別為4、8和8 μg/mL[9]。為進(jìn)一步探索深海來(lái)源曲霉產(chǎn)生的抗菌天然產(chǎn)物，本研究對(duì)分離自西太平洋深海沉積物中的一株真菌Aspergillussp.20220129開(kāi)展了次級(jí)代謝產(chǎn)物研究，從中分離純化得到9個(gè)化合物，通過(guò)波譜學(xué)方法對(duì)化合物進(jìn)行了結(jié)構(gòu)解析，分別鑒定為terretonin(1)、terretonin A (2)、methyl dichloroasterrate (3)、methyl asterrate (4)、methyl 6-acetyl-5,7,8-trihydroxy-4-methoxy-2-naphthalenecarboxylate (5)、territrem B(6)、alantrypinone (7)、butyrolactone I (8)與versicolactone B (9) (圖1)。利用微量梯度稀釋法對(duì)上述化合物進(jìn)行了抑菌活性篩選，結(jié)果表明化合物5、8和9對(duì)金黃色葡萄球菌有一定的抑菌效果，最低抑菌濃度分別為100、100和50 μg/mL。

圖1 化合物1～9結(jié)構(gòu)式Fig.1 The chemical structures of compounds 1～9

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑

Agilent 1200高效液相色譜儀(安捷倫公司，美國(guó))；EYELA NVP-2100V型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(EYELA東京理化器械株式會(huì)社，日本)；MVS-83立式壓力蒸汽滅菌器(冰山松洋生物科技有限公司，日本)；KQ-500DE超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)；ZF-20D紫外分析儀(上海予申儀器有限公司)；BBSDDC潔凈工作臺(tái)(濟(jì)南鑫貝西生物技術(shù)有限公司)；MQD-M3R振蕩培養(yǎng)箱(上海旻泉儀器有限公司)；Bruker Avance DRX500MHz核磁共振儀(布魯克公司，瑞士)；其它常用試劑購(gòu)于康科德科技有限公司。

1.2 菌株鑒定

菌株分離于西太平洋海域深度3000 m的深海沉積物中。菌株活化后用離心柱型真菌基因組提取試劑盒(Scintol，北京賽音圖科技有限公司)提取全基因組D N A 后，用真菌通用引物ITS4(5'-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3')與ITS5(5'-GGAAGTAAAAGTCGTAACAAGG-3')擴(kuò)增菌株的核糖體rDNA的ITS(Internal transcribed spacer)序列。PCR反應(yīng)體系(20 μL) ：2×PCR Master Mix(含Taq酶，buffer，dNTP)10 μL，DNA模板1 μL，引物(20 μmol/L) 各0.8 μL，dd H2O 7.4 μL。反應(yīng)條件：94℃ 3 min；94℃ 30 s，50℃ 1 min，72℃ 30 s，40個(gè)循環(huán)；72℃ 10 min，4℃保存。將PCR產(chǎn)物送往測(cè)序公司(北京擎科生物科技有限公司)測(cè)序，獲得序列信息后，在GenBank中進(jìn)行BLAST相似性比對(duì)，選取相似度較高的菌株ITS序列，最后用MEGA-X的Neighbor-Joining法構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)。

1.3 菌株發(fā)酵

取MEA培養(yǎng)平板(麥芽浸粉30 g，蛋白胨5 g，瓊脂15 g，蒸餾水1 L，pH6.0)上活化的1 cm2大小菌落，接入PDB培養(yǎng)基(PDB粉末35 g，蒸餾水 1 L)中，180 r/min，28℃培養(yǎng)3d后，將種子液接入滅菌的大米培養(yǎng)基(1 L三角瓶中，含150 g大米與120 mL水)中，28℃靜置培養(yǎng)30 d，發(fā)酵量3.0 kg。

1.4 化合物的分離純化

將發(fā)酵完成的培養(yǎng)基用混合溶液(乙酸乙酯-甲醇 4:1，V:V)浸泡過(guò)夜后，超聲20 min，抽濾除去培養(yǎng)基和菌體，反復(fù)提取3次，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將提取物濃縮，再用混合溶劑(乙酸乙酯-水 1:1，V:V)將其溶解，用分液漏斗反復(fù)萃取3次，將乙酸乙酯相合并濃縮后得粗提物16.2 g。粗提物進(jìn)行硅膠拌樣，然后利用減壓正相硅膠柱色譜(薄層層析硅膠H)分離，用700 mL正己烷/二氯甲烷和二氯甲烷/甲醇體系(組分A：正己烷-二氯甲烷 50:50；組分B：正己烷-二氯甲烷 20:80；組分C：正己烷-二氯甲烷 5:95；組分D：正己烷-二氯甲烷 3:97；組分E：正己烷-二氯甲烷 2:98；組分F：正己烷-二氯甲烷 1:99；組分G：二氯甲烷-甲醇 99:1；組分H：二氯甲烷-甲醇 97:3；組分I：二氯甲烷-甲醇 95:5；組分J：二氯甲烷-甲醇90:10；組分K：二氯甲烷-甲醇 85:15；組分L：二氯甲烷-甲醇 80:20；組分M：二氯甲烷-甲醇 50:50)梯度洗脫，得到A～M共13個(gè)組分。隨后將組分C、D、H、I分別進(jìn)行Sephadex LH-20凝膠柱色譜分離，均采用混合溶劑(二氯甲烷-甲醇 2:1，V:V)裝柱和洗脫，利用薄層色譜分析后，將收集的組分合并，分別得到C1～C4共4個(gè)組分、D1～D4共4個(gè)組分、H1～H9共9個(gè)組分、I1～I(xiàn)7共7個(gè)組分。

E組分直接進(jìn)行HPLC制備(Agilent Zorbax RX-C8,9.4 mm×250 mm,5 μm，3.0 mL/min，35%～100%乙腈線性梯度14 min)，得到化合物3(13.2 mg)與5(1.5 mg)。C4和D3組分進(jìn)行HPLC制備(Agilent Zorbax SB-C18,9.4 mm×250 mm,5 μm,3.0 mL/min,50%～100%乙腈線性梯度15 min)，分別得到化合物1(0.9 mg)和化合物3(2.2 mg)、5(4.1 mg)與8(8.3 mg)。H5組分進(jìn)行HPLC制備(Agilent Zorbax SB-C18,9.4 mm×250 mm,5 μm,3.0 mL/min,35%～100%乙腈線性梯度15 min)，得到化合物5(12.4 mg)與6(13.9 mg)。H6組分進(jìn)行HPLC制備(Agilent Zorbax SB-C18,9.4 mm×250 mm,5 μm,3.0 mL/min,45%～100%乙腈線性梯度15 min)，得到化合物2(21.1 mg)、4(3.2 mg)與7(7.8 mg)。I2組分進(jìn)行HPLC制備(Agilent Zorbax SB-C18,9.4 mm×250 mm,5 μm,3.0 mL/min,30%～100%乙腈線性梯度25 min)，得到化合物2(9.8 mg)、6(10.3 mg)、8(19.9 mg)和9(45.6 mg)。

1.5 活性測(cè)試

采用96孔板微量稀釋法，對(duì)已鑒定的化合物進(jìn)行活性測(cè)試。用二甲基亞砜(DMSO)將化合物濃度配制為4 mg/mL，采用96孔板微量稀釋法，測(cè)定已鑒定化合物對(duì)金黃色葡萄球菌(S.aureus)、白念珠菌(C.albicans)、大腸埃希菌(E.coli)的抗菌活性，分別以甲氧西林(methicillin)、雷帕霉素(rapamycin)、環(huán)丙沙星(ciprofloxacin)為陽(yáng)性對(duì)照，其中DMSO為陰性對(duì)照。

采用相應(yīng)的培養(yǎng)基配制好不同濃度的菌液，其中金黃色葡萄球菌與大腸埃希菌使用MHB培養(yǎng)基(Solarbio MHB干粉24 g，蒸餾水1 L)，菌液濃度分別為1.0×106CFU/mL與2.5×105CFU/mL，白念珠菌使用RPMI 1640培養(yǎng)基(Gibco RPMI 1640粉末10.4 g，3-N-嗎啉代丙磺酸34.5 g，蒸餾水1 L，pH=7.0)，菌液濃度為1.0×104CFU/mL。

將96孔細(xì)胞培養(yǎng)板的各孔均加入80 μL菌液，每個(gè)培養(yǎng)板均設(shè)陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照，即在第一行的1孔內(nèi)加入相應(yīng)濃度的陽(yáng)性對(duì)照，另一孔加入8 μL的DMSO作為陰性對(duì)照，剩余孔中加入8 μL濃度為4 mg/mL的待測(cè)化合物，隨后將第一行用相應(yīng)的菌液補(bǔ)齊，使其總體積至160 μL，抽吸混勻后，用排槍從第1行中吸取80 μL溶液置于第2行，抽吸混勻，依次梯度稀釋至第8行，使待測(cè)化合物在濃度為200、100、50、25、12.5、6.25、3.125和1.56 μg/mL，培養(yǎng)板用封口膜封好。培養(yǎng)細(xì)菌和真菌的96孔培養(yǎng)板，分別放入37℃和28℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)16～18 h后觀察菌液是否澄清，菌液澄清孔相對(duì)應(yīng)化合物的濃度即為其最低抑菌濃度[10]。

2 結(jié)果

2.1 菌株鑒定結(jié)果

將ITS序列信息進(jìn)行BLAST序列比對(duì)，選取相似度較高的菌株ITS序列，構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)(圖2)，將菌株20220129初步鑒定為Aspergillussp.。

圖2 基于ITS基因序列相似性構(gòu)建的菌株20220129的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)Fig.2 Phylogenetic tree of strain 20220129 and its related strains based on ITS sequences

2.2 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：白色粉末；ESI-MSm/z：489.1[M+H]+，C26H32O9；1H NMR(500 MHz,DMSO-d6) δH: 5.17(1H,s),4.94(1H,s),3.70(3H,s),3.67(1H,s),2.91(1H,d,J=14.5 Hz),2.67(1H,dd,J=19.0,8.5 Hz),2.38(1H,m),2.29(1H,d,J=14.5 Hz),2.06(1H,m),1.79(1H,m),1.78(3H,s),1.58(3H,s),1.35(3H,s),1.33(6H,s),1.06(3H,s);13C NMR(125 MHz,DMSO-d6) δC: 32.4(C-1),34.0(C-2),214.4(C-3),52.0(C-4),130.7(C-5),139.2(C-6),197.1(C-7),43.5(C-8),77.5(C-9),47.2(C-10),27.9(C-11),140.4(C-12),48.9(C-13),42.8(C-14),167.9(C-15),84.7(C-16),202.5(C-17),21.2(C-18),23.7(C-19),21.3(C-20),18.6(C-21),113.9(C-22),18.3(C-23),23.1(C-24),168.0(C-25),53.5(C-1’)。以上化合物的波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[11]報(bào)道的terretonin基本一致，故化合物1鑒定為terretonin。

化合物2：白色粉末；ESI-MSm/z：473.2[M+H]+，C26H32O8；1H NMR(500 MHz,DMSO-d6) δH: 5.00(1H,s),4.95(1H,s),3.75(3H,s),2.74(1H,s),2.69(1H,dd,J=19.0,9.0 Hz),2.57(1H,t,J=13.5 Hz),2.38(2H,m),2.16(1H,dd,J=13.5,9.0 Hz),1.68(1H,m),1.70(3H,s),1.60(3H,s),1.56(1H,dd,J=12.5,2.5 Hz),1.36(3H,s),1.35(3H,s),1.33(3H,s),0.98(3H,s);13C NMR(125 MHz,DMSO-d6)δC: 33.4(C-1),32.4(C-2),214.2(C-3),47.3(C-4),136.1(C-5),139.7(C-6),197.4(C-7),45.9(C-8),51.5(C-9),37.5(C-10),28.3(C-11),144.0(C-12),50.1(C-13),48.5(C-14),166.6(C-15),85.0(C-16),201.9(C-17),21.0(C-18),23.2(C-19),15.6(C-20),16.6(C-21),110.7(C-22),23.2(C-23),21.7(C-24),167.7(C-25),53.8(C-1’)。以上化合物的波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[12]報(bào)道的terretonin A基本一致，故化合物2鑒定為terretonin A。

化合物3：無(wú)色晶體；ESI-MSm/z：431.0 [M+H]+，C18H16Cl2O8；1H NMR(500 MHz,DMSO-d6) δH: 9.83(2H,brs),6.76(1H,d,J=2.5 Hz),6.66(1H,d,J=2.5 Hz),3.65(3H,s),3.60(3H,s),3.27(3H,s),2.45(3H,s);13C NMR(125 MHz,DMSO-d6) δC: 135.1(C-1),124.4(C-2),107.4(C-3),154.7(C-4),104.7(C-5),152.9(C-6),56.1(C-7),164.5(C-8),52.0(C-9),149.2(C-1’),112.5(C-2’),149.0(C-3’),115.4(C-4’),135.7(C-5’),115.5(C-6’),18.2(C-7’),163.8(C-8’),51.9(C-9’)。以上化合物的波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[13]報(bào)道的methyl dichloroasterrate一致，故化合物3鑒定為methyl dichloroasterrate。

化合物4：黃色粉末；ESI-MSm/z：363.1[M+H]+，C18H18O8；1H NMR(500 MHz,DMSO-d6)δH: 10.07(1H,s),9.89(1H,s),6.75(1H,d,J=2.5 Hz),6.74(1H,d,J=2.5 Hz),6.31(1H,m),5.62(1H,m),3.76(3H,s),3.69(3H,s),3.61(3H,s),2.06(3H,s);13C NMR(125 MHz,DMSO-d6)δC: 133.7(C-1),125.7(C-2),107.5(C-3),155.1(C-4),104.8(C-5),153.5(C-6),56.1(C-7),167.0(C-8),52.1(C-9),165.3(C-1’),100.7(C-2’),157.0(C-3’),104.3(C-4’),145.9(C-5’),109.5(C-6’),21.4(C-7’),170.9(C-8’),51.9(C-9’)。以上化合物的波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[14]報(bào)道的methyl asterrate基本一致，故化合物4鑒定為methyl asterrate。

化合物5：黃色針狀；ESI-MSm/z：307.1[M+H]+，C15H14O7；1H NMR(500 MHz,DMSO-d6) δH: 6.94(1H,d,J=1.5 Hz),6.72(1H,d,J=1.5 Hz),3.67(3H,s),3.66(3H,s),2.43(3H,s);13C NMR(125 MHz,DMSO-d6)δC: 107.5(C-1),128.0(C-2),103.7(C-3),156.8(C-4),158.7(C-5),112.2(C-6),141.8(C-7),155.4(C-8),111.3(C-9),125.5(C-10),52.3(2-OMe),165.7(2-CO),56.1(4-OMe),18.9(6-Me),200.3(6-CO)。以上化合物的波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[15]報(bào)道的methyl 6-acetyl-5,7,8-trihydroxy-4-methoxy-2-naphthalenecarboxylate基本一致，故化合物5鑒定為methyl 6-acetyl-5,7,8-trihydroxy-4-methoxy-2-naphthalenecarboxylate。

化合物6：淺黃色粉末；ESI-MSm/z：527.1[M+H]+，C29H34O9；1H NMR(500 MHz,DMSO-d6)δH:7.12(2H,s),6.96(1H,s),6.58(1H,s),6.34(1H,d,J=10.5 Hz),6.32(1H,s),5.65(1H,d,J=10.5 Hz),3.86(6H,s),3.71(3H,s),3.49(1H,d,J=17.5 Hz),2.74(1H,d,J=17.5 Hz),2.29 (1H,dt,J=13.5,3.0 Hz),1.96 (1H,td,J=14.0,3.5 Hz),1.74 (1H,dt,J=14.0,3.5 Hz),1.66 (1H,dt,J=13.0,3.5 Hz),1.40(3H,s),1.36(3H,s),1.20(3H,s),1.07(3H,s);13C NMR(125 MHz,DMSO-d6) δC: 200.9(C-1),123.2(C-2),152.8(C-3),42.1(C-4),79.1(C-4a),25.2(C-5a),28.5(C-6a),80.7(C-6a),162.3(C-7a),98.2(C-8),156.7(C-9),163.2(C-11),97.8(C-11a),26.5(C-12a),74.9(C-12a),56.1(C-12b),23.5(4a-Me),24.8(4β-Me),23.3(6a-Me),21.5(12b-Me),126.6(C-1’),102.5(C-2’,6’),153.2(C-3’,5’),139.4(C-4’),55.3(3’,5’-OMe),60.1(4’-OMe)。以上化合物的波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[16]報(bào)道的territrem B基本一致，故化合物6鑒定為territrem B。

化合物7：淺黃色粉末；ESI-MSm/z：373.1[M+H]+，C21H16N4O3；1H NMR(500 MHz,DMSO-d6)δH: 10.65(1H,s),9.56(1H,s),8.22(1H,dd,J=8.0,1.0 Hz),7.87(1H,ddd,J=8.5,8.0,1.5 Hz),7.70(1H,d,J=8.0 Hz),7.60(1H,ddd,J=8.5,8.0,1.0 Hz),7.32(1H,ddd,J=7.5,7.5,1.0 Hz),7.19(1H,dd,J=7.5,1.0 Hz),7.11(1H,ddd,J=7.5,7.5,1.0 Hz),6.93(1H,d,J=8.0 Hz),5.58(1H,m),2.41(2H,m),1.18(3H,s);13C NMR(125 MHz,DMSO-d6) δC: 169.1(C-1),61.8(C-2),153.0(C-3),146.8(C-4),127.7(C-5),134.7(C-6),127.2(C-7),126.4(C-8),120.1(C-9),158.3(C-10),52.0(C-11),35.9(C-12a),54.7(C-13),176.7(C-14),142.6(C-15),109.9(C-16),129.2(C-17),122.4(C-18),123.8(C-19),130.0(C-20),13.4(C-21)。以上化合物的波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[17]報(bào)道的alantrypinone基本一致，故化合物7鑒定為alantrypinone。

化合物8：淺黃色粉末；ESI-MSm/z：425.1[M+H]+，C24H24O7；1H NMR(500 MHz,DMSO-d6)δH: 10.53(1H,s),9.93(1H,s),9.14(1H,s),7.51(2H,d,J=8.5 Hz),6.88(2H,d,J=8.5 Hz),6.53(1H,d,J=8.0 Hz),6.48(1H,dd,J=8.0,2.0 Hz),6.38(1H,d,J=2.0 Hz),5.01(1H,m),3.74(3H,s),3.37(2H,s),3.00(2H,m),1.63(3H,s),1.53(3H,s);13C NMR(125 MHz,DMSO-d6)δC: 167.9(C-1),138.1(C-2),126.5(C-3),84.7(C-4),38.1(C-5),169.9(C-6),121.1(C-1’),128.8(C-2’,6’),115.8(C-3’,5’),157.9(C-4’),123.1(C-1’’),130.9(C-2’’),127.5(C-3’’),153.8(C-4’’),114.1(C-5’’),128.4(C-6’’),27.5(C-7’’),122.4(C-8’’),131.4(C-9’’),25.2(C-10’’),17.5(C-11’’),53.5(6-OMe)。以上化合物的波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[18]報(bào)道的butyrolactone I基本一致，故化合物8鑒定為butyrolactone I。

化合物9：棕黃色粉末；ESI-MSm/z：409.2[M+H]+，C24H24O6；1H NMR(500 MHz,DMSO-d6) δH: 11.03(1H,s),9.17(1H,s),7.62(2H,d,J=8.0 Hz),7.50(2H,dd,J=8.0,8.0 Hz),7.41(1H,t,J=8.0 Hz),6.53(1H,dd,J=8.0 Hz),6.47(1H,dd,J=8.0,2.0 Hz),6.35(1H,d,J=2.0 Hz),5.00(1H,m),3.76(3H,s),3.39(2H,m),2.99(2H,m),1.61(3H,s),1.52(3H,s);13C NMR(125 MHz,DMSO-d6) δC: 167.6(C-1),140.4(C-2),126.5(C-3),84.9(C-4),37.9(C-5),169.6(C-6),130.1(C-1’),127.0(C-2’,6’),128.9(C-3’,5’),129.4(C-4’),123.0(C-1’’),130.9(C-2’’),126.4(C-3’’),153.8(C-4’’),114.1(C-5’’),128.6(C-6’’),27.5(C-7’’),122.3(C-8’’),131.3(C-9’’),17.5(C-10’’),25.5(C-11’’),53.6(6-OMe)。以上化合物的波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[19]報(bào)道的versicolactone B基本一致，故化合物9鑒定為versicolactone B。

2.3 化合物抑菌活性測(cè)定

采用96孔板微量稀釋法對(duì)化合物抑菌濃度的測(cè)試結(jié)果顯示，化合物1～9對(duì)白念珠菌和大腸埃希菌無(wú)明顯抑制效果，化合物5、8和9對(duì)金黃色葡萄球菌具有一定的抑菌效果，其中化合物5和8的最低抑菌濃度為100 μg/mL，化合物9的抑菌效果最好，其最低抑菌濃度為50 μg/mL(表1)。

表1 化合物1～9最低抑菌濃度Tab.1 The MIC values of compounds 1～9

3 結(jié)論

本文通過(guò)對(duì)深海來(lái)源真菌Aspergillussp.20220129在大米培養(yǎng)基中的次級(jí)代謝產(chǎn)物進(jìn)行研究，共分離并鑒定了9個(gè)化合物，抗菌活性測(cè)試表明化合物methyl 6-acetyl-5,7,8-trihydroxy-4-methoxy-2-naphthalenecarboxylate(5)、butyrolactone I(8)和versicolactone B(9)對(duì)金黃色葡萄球菌具有一定的抑菌活性。化合物5曾從土壤來(lái)源的Penicilliumsp.中分離得到，對(duì)李斯特菌、蠟樣芽胞桿菌與金黃色葡萄球菌有一定的抑制活性[15,20]?；衔?是曾從土曲霉中分離的γ-丁烯酸內(nèi)酯類化合物，具有抗氧化、α-葡萄糖苷酶抑制[18]、抗病毒[19]、抗腫瘤[21-22]和抗細(xì)菌[23]活性?；衔?是從內(nèi)生真菌雜色曲霉KJ801852[19]以及海洋土曲霉[24]中分離鑒定的γ-丁烯酸內(nèi)酯類化合物，具有良好的抗煙草花葉病毒活性[19]，并可以抑制人胰腺癌細(xì)胞PANC-1的增殖[24]。本研究豐富了深海來(lái)源曲霉屬真菌的次級(jí)代謝產(chǎn)物，為開(kāi)發(fā)利用海洋微生物天然產(chǎn)物資源與尋找藥物先導(dǎo)化合物提供了科學(xué)依據(jù)。