牙釉質(zhì)脫礦通常被稱為釉質(zhì)白斑（white spot lesions，WSLs）是正畸治療中最常見的并發(fā)癥。目前大多數(shù)報告顯示釉質(zhì)脫礦的發(fā)生率為50% ～70%

。成熟牙釉質(zhì)主要由六棱柱的羥基磷灰石（hydroxyapatite，HA）晶體組成。在牙齒發(fā)育過程中，負責形成牙釉質(zhì)的成釉細胞在成熟階段會發(fā)生程序性的細胞死亡，釉質(zhì)一旦受損則不能被生物修復或替換

。因此，需要對正畸致WSLs 進行預防和適當?shù)闹委?/p>

。

近年來，多巴胺（dopamine）輔助HA 形成是研究熱點，聚多巴胺（polydopamine，PDA）薄膜的存在為合成HA 提供了一種創(chuàng)新的仿生方法

。DA 可以在堿性條件下通過氧化自聚反應在各種形狀和材料類型上產(chǎn)生一個PDA 薄膜

。DA 形成的PDA薄膜不僅是一種可用于修飾各種基底表面的簡單、通用的材料，而且可以改善生物相容性和親水性

。PDA 與基質(zhì)有強烈的共價作用，化學性質(zhì)穩(wěn)定，PDA 涂層具有良好的耐久性，可在水環(huán)境中長期使用。在Xi 等

的研究中，PDA 涂層在60 ℃的去離子水中浸泡36 d 后仍然穩(wěn)定，而且親水性能在長時間的洗滌后仍能保持良好。本實驗以DA自聚形成的PDA 為成核中心，通過仿生礦化法誘導生成HA，觀察PDA 對離體牙釉質(zhì)脫礦的抑制作用及在脫礦牙釉質(zhì)表面誘導HA 生成的情況，為預防和治療WSLs 提供新的思路。

1 材料和方法

1.1 材料與儀器

多巴胺鹽酸鹽（北京索萊寶科技有限公司，中國），超聲清洗機（KQ5200，昆山超聲儀器有限公司，中國），能量色散光譜儀（Hitachi S-4800，日立公司，日本），低速切割機（IsoMet 1000，Buehler Ltd，Lake Bluff IL，美國），掃描電鏡（nSM-5600LV，Nicolet，美國），傅里葉變換紅外光譜儀（NEXUS 670，喬爾有限公司，日本）。

1.2 人工脫礦液的配置

按表1 配置人工脫礦液，用5.0 mL KOH 調(diào)整pH 為4.5，最終以去離子水定容至1 000 mL。

1.3 模擬體液的配置

配置模擬體液（simulated body fluid，SBF），各離子濃度：Na

142.0 mmol/L，K

5.0 mmol/L，Mg

1.5 mmol/L，Ca

2.5 mmol/L，Cl

147.8 mmol/L，HOCO

4.2 mmol/L，HPO

1.0 mmol/L，SO

0.5 mmol/L。以去離子水定容。

1.4 多巴胺溶液的配置

圖1a 顯示實驗組牙釉質(zhì)表面的PDA 薄膜形貌均勻、光滑、平整。圖1b 顯示將對照組牙釉質(zhì)進行脫礦3d 處理后，牙釉質(zhì)表面形成蜂窩狀孔隙，大小一致，同時釉柱結構被溶解破壞。圖1c 顯示實驗組牙釉質(zhì)脫礦3d 后形成的孔隙較小，零散分布，同時孔隙較淺。圖1d ～1f 為脫礦處理后對照組和實驗組隨之進行再礦化7d 后的SEM 圖。圖1d 可以看到對照組牙釉質(zhì)表面有大小不等的絮狀礦物質(zhì)沉積，無具體外形，結晶度差。圖1e、1f 圖顯示實驗組的牙釉質(zhì)表面產(chǎn)生了片狀晶粒，生長呈明顯方向性，生長規(guī)律，排列均勻一致。

1.5 牙釉質(zhì)標本準備與脫礦處理

本實驗已通過蘭州大學口腔醫(yī)學院倫理委員會審批（批號：LZUKQ-2020-037）。收集20 顆新鮮拔除的牛下頜切牙，要求完整無缺損，釉質(zhì)發(fā)育正常。潔牙機去除菌斑色素后自牙頸部截去牙根，切成5 mm×5 mm×1 mm 的釉質(zhì)切片，共20 片，紗條拋光后備用。將準備好的釉質(zhì)切片隨機分為實驗組和對照組，各組10 片，實驗組樣本懸吊于新鮮配制的多巴胺溶液中，室溫，避光下靜置24 h，制備PDA 涂層，取出后用去離子水超聲清洗20 min，N

干燥；對照組不處理。

企業(yè)以及物資采購員自身必須明確其崗位職責以及崗位權限。從企業(yè)角度來講，結合企業(yè)自身實際情況定期對采購人員實施輪崗制度，并將采購業(yè)務授權以及審核批準制度不斷完善，要求采購人員嚴格按照規(guī)章制度開展各項采購業(yè)務。企業(yè)每一次采購都需要結合企業(yè)實際需求而制訂，比如，物資采購計劃。首先，需要制訂合理的物資采購依據(jù)以及物資質(zhì)量標準，這樣才能確保物資采購計劃與生產(chǎn)相契合；其次，建立并完善監(jiān)督機制，采購人員在物資采購過程中有必要加強監(jiān)督力度，并做到動態(tài)跟蹤，及時發(fā)現(xiàn)問題并對物資采購計劃進行調(diào)整，使其質(zhì)量與成本都能夠得到有效控制，確保采購工作是按照采購計劃有效進行的［2］。

將Image-Pro Plus 軟件測量的脫礦孔隙直徑數(shù)據(jù)采用SPSS 26.0 統(tǒng)計軟件分析數(shù)據(jù)，使用配對

檢驗，

＜0.05 認為差異有統(tǒng)計學意義。

1.6 牙釉質(zhì)再礦化實驗

圖3 是多巴胺樣品、實驗組24 h 牙釉質(zhì)沉積物和實驗組再礦化7 d 后牙釉質(zhì)沉積物的FTIR 光譜圖。24 h 牙釉質(zhì)沉積物的光譜中可以看到3 283 cm

處出現(xiàn)較寬的峰，這是因為O-H 和N-H 的伸縮振動疊加形成的，1 644 cm

處的峰是苯環(huán)上C=C鍵的伸縮振動，1 515 cm

處的峰是N-H 的剪切振動，以上結果證明本實驗在牙釉質(zhì)上成功制備出PDA 涂層。再礦化7 d 后牙釉質(zhì)沉積物的光譜中可以看到3 572 cm

處為O-H 的特征性吸收峰，1 089 cm

處為PO

的伸縮振動峰。3 572 cm

處的峰屬于HA 中的O-H 基團，1 089 cm

處的峰屬于HA 中的PO

基團，以上FTIR 結果證明再礦化7 d后牙釉質(zhì)表面沉積物的主要成分為HA。

1.7 表征

用掃描電子顯微鏡（scanning slectron microscope，SEM）觀察釉質(zhì)表面形貌，將脫礦3 d 的SEM圖導入Image-Pro Plus 軟件，測量所有脫礦孔隙直徑。通過能量色散光譜儀（energy dispersive spectroscopy，EDS）分析釉質(zhì)表面鈣磷比。用傅里葉變換紅外光譜儀（Fourier transform infrared spectroscopy，F(xiàn)TIR）探尋沉積物中的特征官能團。

兩種性別基因表達平衡的不斷進化，導致表型的性別均衡，掩蓋了細胞機制的性別偏差。平衡可能是由選擇壓力驅(qū)動的，該選擇壓力確?；瘜W計量的X：A比例在男性、女性的相似性，使得XX和XY細胞均在適當?shù)募毎δ艿南薅葍?nèi)工作。但任何表型的性別均等僅僅是可能的，因為XX和XY細胞各自執(zhí)行不同的功能，即，用不同的分子機制來調(diào)整其基因組的差異。XX細胞必須調(diào)整其基因組/表觀基因組系統(tǒng)，使之可以與XY細胞以不同的方式正常工作。這使得性別平衡是暫時的，因為細胞環(huán)境中的任何擾動(例如由年齡、環(huán)境毒素和產(chǎn)生腫瘤的突變引起)可以影響這一平衡，導致疾病的性別差異，而這在健康細胞中不存在。

1.8 統(tǒng)計學分析

據(jù)業(yè)內(nèi)人士介紹，全球有60個已發(fā)生過非洲豬瘟疫情的國家中，迄今只有13個國家根除了疫情，根除時間多為5至36年。比如俄羅斯從2007年首次發(fā)生非洲豬瘟至今已經(jīng)有11年，共發(fā)生疫情超過1000起，但仍沒有得到有效控制。由此可見，防控非洲豬瘟將是一個長期戰(zhàn)役，其對豬肉乃至食品整體價格的影響也將持續(xù)。

2 結 果

2.1 SEM 觀察脫礦處理后釉質(zhì)表面形貌

稱取0.12 g 的多巴胺，去離子水定容，配置2 mg/mL 多巴胺溶液共100 mL，溶解溫度設為37 ℃，轉(zhuǎn)速800 r/min。完全溶解后，用10 mmol/L Tris-HCl 緩沖液調(diào)整pH 值至8.5。

由于遺傳、環(huán)境和年齡因素的影響，不同人牙的成分和結構是具有差異的，而牛牙與人牙的化學成分最相似，有幾乎相同的Ca、P 含量、釉質(zhì)厚度、以及相似的耐酸能力

，同時，牛牙可以標準化牙齒的大小和年齡，其寬大、平坦的釉質(zhì)表面也更利于操作。因此本研究選擇在體外離體牛牙釉質(zhì)上，以PDA 為成核中心，通過仿生礦化法誘導生成HA。

2.2 EDS 分析脫礦后釉質(zhì)表面Ca/P 比

圖2 為兩組脫礦后釉質(zhì)表面的EDS 圖。根據(jù)EDS 得到的元素含量計算得出，對照組在牙釉質(zhì)表面進行脫礦3 d 后的Ca/P 比為2.53，而實驗組PDA薄膜牙釉質(zhì)脫礦3 d 后的Ca/P 比為2.37，低于對照組，更接近標準HA 的Ca/P 比（1.67）。

2.3 FTIR 分析牙釉質(zhì)沉積物中的特征官能團

將脫礦后剩余的實驗組和對照組牙釉質(zhì)切片各5 片，分別浸泡于新鮮配置的SBF 中，置于37 ℃的恒溫箱，每天更換一次SBF，誘導脫礦牙釉質(zhì)發(fā)生再礦化。持續(xù)浸泡7 d 后取出，用去離子水溫和地超聲清洗20 min，再用流動的去離子水漂洗，室溫下干燥，表征備用。

3 討 論

牙在口腔中不斷經(jīng)歷脫礦和再礦化的循環(huán)，在遇到酸性物質(zhì)后，牙齒中的礦物質(zhì)流失被稱為脫礦，而將這些礦物質(zhì)恢復到牙齒結構中被稱為再礦化

。正畸過程中過大的酸蝕范圍、殘留的粘接劑、不良的口腔衛(wèi)生等會打破這種動態(tài)平衡。WSLs 被定義為局部的釉質(zhì)脫礦區(qū)，最早可在正畸治療開始后4 周內(nèi)發(fā)生

。雖然唾液可以在一定程度上使WSLs 再礦化，但這種作用是有限的

；也并非所有的病例都能出現(xiàn)這種恢復

。

目前WSLs 的預防和治療主要分為微創(chuàng)手段和創(chuàng)傷性治療手段。微創(chuàng)手段中氟化物的應用與研究相對較多。含氟牙膏和含氟漱口水需要正畸患者在口腔健康定期維護的基礎上使用，有證據(jù)表明正畸患者每天使用含氟漱口水的依從性只有13%

。氟保護漆的使用有一定局限性，高濃度的氟會阻止深層釉質(zhì)再礦化；高頻次應用氟化物會使變形鏈球菌產(chǎn)生耐氟菌株。除了氟化物，近年來酪蛋白磷酸多肽-無定形磷酸鈣（casein phosphopeptide-amorphic calcium phosphate，CPP-ACP）成為了研究熱點。有研究表明與普通氟化物牙膏相比，CPP-ACP 在改善表面病變的嚴重程度和活性方面沒有差別

。同時CPP-ACP 使用后，沒有觀察到脫礦釉質(zhì)微硬度或再礦化的重大變化。WSLs的創(chuàng)傷性治療方法主要有微研磨、牙齒漂白、滲透樹脂技術和美白貼面修復。有研究顯示微研磨無法避免釉質(zhì)結構中鈣、磷的流失，在去除釉質(zhì)表層的同時會將鈣離子、磷離子壓入釉柱間隙，從而導致微研磨后的釉質(zhì)折光率發(fā)生改變甚至會加重WSLs 的白堊色

。牙齒漂白的副作用最主要的是牙齒敏感問題，臨床應慎用。滲透樹脂技術近年來開始應用于臨床，但由于口腔環(huán)境的挑戰(zhàn)，樹脂修復材料的壽命仍然是一個主要問題。老化過程、刷牙和飲用有色飲料會影響WSLs 的顏色穩(wěn)定性和表面粗糙度

。因此，需要尋找一種在促進牙釉質(zhì)再礦化的同時能抑制牙釉質(zhì)脫礦的簡單有效方法。

貽貝的斑塊內(nèi)含有高濃度的3，4-二羥基苯丙氨酸（dihydroxyphenylal- anine，DOPA），而DOPA 最獨特的結構是含有兒茶酚基團。DA 是DOPA 的一種非常重要的衍生物，同時是一種常見的神經(jīng)傳遞物質(zhì)，近年來引起了研究者的重視和廣泛關注。Lee 等

將DA 溶在生物緩沖劑三羥甲基氨基甲烷緩沖溶液中，調(diào)整pH 值為8.5，其中浸泡不同的材料，有氧條件下靜置24 h，最終得到了厚約50 nm的PDA 薄膜，強酸浸泡和超聲震蕩后PDA 薄膜仍存在，且黏附性良好。DA 靜置24 h 后形成的PDA薄膜幾乎可以附著在任何固體材料表面，例如金屬、貴金屬、半導體和各類合成高分子材料。近年來，DA 輔助HA 形成的研究不斷涌出，PDA 薄膜的存在為仿生礦化法合成HA 提供了一種創(chuàng)新的仿生方法。

37 ℃恒溫箱中，將兩組樣本在人工脫礦液中浸泡3 d，誘導牙釉質(zhì)脫礦，每天更換一次人工脫礦液。取出后，用去離子水溫和地超聲清洗20 min，再用流動的去離子水漂洗，室溫下干燥，取實驗組和對照組牙釉質(zhì)切片各5 片作為表征材料。

脫礦處理3 d 后，對照組牙釉質(zhì)表面產(chǎn)生的孔隙直徑為（4.21 ± 0.71）μm，實驗組孔隙直徑為（2.09 ± 0.48）μm，兩組差異具有統(tǒng)計學意義（

=19.392，

＜0.001）。

在運營管理方面，建立現(xiàn)代化的綠色礦業(yè)集團，構建“互聯(lián)網(wǎng)+礦業(yè)”模式，建設礦山生產(chǎn)自動化系統(tǒng)，打造智慧礦山。

目前對于PDA 薄膜結構特征和特性的表征方法主要有化學光譜法（核磁共振波譜、紫外-可見分光光度法、拉曼光譜、傅里葉變換紅外光譜）和質(zhì)譜分析法（飛行時間質(zhì)譜、電噴霧質(zhì)譜、飛行時間二次離子質(zhì)譜）

。傅里葉變換紅外光譜由于其掃描速度快、分辨能力高、所需樣本少，常被用于測定各種材料和粘合劑性能

。因此本研究選用SEM 進行表面形貌觀察，用FTIR 進行PDA 薄膜結構的表征，用EDS 對比HA 晶體結構中的Ca/P 比。結果顯示，與對照組相比，實驗組的牙釉質(zhì)脫礦3 d 后形成的孔隙較小，差異具有統(tǒng)計學意義。同時EDS 結果顯示脫礦3 d 后對照組的Ca/P 比為2.53，而實驗組的Ca/P 比為2.37，實驗組Ca/P 比更接近標準HA 的Ca/P 比（1.67）。Ergun 等

提出不同Ca/P 比的HA 晶體結構和性能差異很大，越接近標準計量比的HA 晶體結構越完整，性能越穩(wěn)定，而越偏離標準計量比的HA 晶體結構缺陷越大，越不穩(wěn)定。以上結果說明PDA 可以抑制牙釉質(zhì)脫礦過程的Ca、P 離子流失和釉柱結構的破壞。

再礦化實驗中，對照組再礦化7 d 后的SEM 圖可以看到牙釉質(zhì)表面有大小不等的絮狀礦物質(zhì)沉積，無具體外形，結晶度差；而實驗組的牙釉質(zhì)表面產(chǎn)生了片狀晶粒，生長呈明顯方向性，生長規(guī)律，排列均勻一致。這可能歸因于PDA 的兒茶酚基團在SBF 中表現(xiàn)出高的鈣離子配位能力，并能促進各種基質(zhì)上HA的形成

。EDS結果中再礦化7 d后實驗組Ca/P 比為2.37，小于對照組的2.53，更接近標準計量比。FTIR 結果證明再礦化7 d 后實驗組牙釉質(zhì)表面沉積物為HA。以上結果說明PDA可以加速Ca、P 離子沉積，輔助生成HA。此外很多材料疏水性的表面限制了仿生礦化的應用，而PDA 作為一種親水改性劑，改善了基底的濕潤性，可以提高基底的生物礦化能力

。

再次，能夠多角度的呈現(xiàn)事物。信息技術能輕松實現(xiàn)事物的伸縮、定格、整體和局部等，利于幼兒觀察，幼兒觀察的越廣泛、深刻，在大腦中留下的表象就越豐富、清晰，豐富的表象有助于幼兒想象力的發(fā)揮，從而提高幼兒的創(chuàng)造力。

電子商務課程是實踐性和綜合性極強的一門交叉課程，傳統(tǒng)的理論教學方法和案例教學方法已遠遠不能滿足社會對電子商務人才的需求。目前，照本宣科式的教學方法依然存在，學生被禁錮在狹窄的教科書空間里，涉及不到廣闊的互聯(lián)網(wǎng)世界，很難接觸全面的、專業(yè)的電子商務實踐環(huán)境。這不僅不能激發(fā)學生的學習興趣，反而磨滅了學生積極向上、潮氣蓬勃的創(chuàng)新精神，不利于電子商務課程教學，無法滿足社會對電子商務人才的需求。

綜上，PDA 涂層對WSLs 有抑制作用，能減少釉質(zhì)表面Ca、P 離子的流失。同時可以影響HA 的成核過程，促進脫礦釉質(zhì)表面生成HA。PDA 為預防和治療WSLs 提供了一種新的思路。

【

】 Zeng T performed the experiments and wrote the article. Chen WYF, Zhang GR, Liu YN and Yang YX performed the experiments and revised the article. Cao BC designed the study and revised the article. All authors read and approved the final manuscript as submitted.

[1] Buschang PH, Chastain D, Keylor CL, et al. Incidence of white spot lesions among patients treated with clear aligners and traditional braces[J]. Angle Orthod, 2019, 89(3): 359-364. doi: 10.2319/073118-553.1.

[2] Angelova VA,Zaugg LK,Neves V,et al.Tooth repair and regeneration[J].Curr Oral Health Rep,2018,5(4):295-303.doi:10.1007/s40496-018-0196-9.

[3] Shan D,He Y,Gao M,et al.A comparison of resin infiltration and microabrasion for postorthodontic white spot lesion[J]. Am J Orthod Dentofacial Orthop, 2021, 160(4): 516-522. doi: 10.1016/j.ajodo.2020.04.039.

[4] Tapsir Z, Jamaludin FH, Pingguan-Murphy B, et al. Immobilisation of hydroxyapatite-collagen on polydopamine grafted stainless steel 316L:coating adhesion and

cells evaluation[J].J Biomater Appl,2018,32(7):987-995.doi:10.1177/0885328217744081.

[5] Xu H,Zhang G,Xu K,et al.Mussel-inspired dual-functional PEG hydrogel inducing mineralization and inhibiting infection in maxillary bone reconstruction[J]. Mater Sci Eng C Mater Biol Appl,2018,90:379-386.doi:10.1016/j.msec.2018.04.066.

[6] Lee H, Dellatore SM, Miller WM, et al. Mussel-inspired surface chemistry for multifunctional coatings[J]. Science, 2007, 318(5849):426-430.doi:10.1126/science.1147241.

[7] Poinard B, Kamaluddin S, Tan AQQ, et al. Polydopamine coating enhances mucopenetration and cell uptake of nanoparticles[J].ACS Appl Mater Interfaces,2019,11(5):4777-4789.doi:10.1021/acsami.8b18107.

[8] Xi ZY, Xu YY, Zhu L, et al. A facile method of surface modification for hydrophobic polymer membranes based on the adhesive behavior of poly(Dopa) and poly(Dopamine)[J]. J Membran Sci,2009,327:244-253.doi:10.1016/j.memsci.2008.11.037.

[9] AlShehab AH, AlHazoom AA, Alowa MH, et al. Effect of bristle stiffness of manual toothbrushes on normal and demineralized human enamel-an

profilometric study[J]. Int J Dent Hyg,2018,16(2):e128-e132.doi:10.1111/idh.12332.

[10] Julien KC, Buschang PH, Campbell PM. Prevalence of white spot lesion formation during orthodontic treatment[J]. Angle Orthod,2013,83(4):641-647.doi:10.2319/071712-584.1.

[11] Kobeissi R, Badr SB, Osman E. Effectiveness of self-assembling peptide P(11)-4 compared to tricalcium phosphate fluoride varnish in remineralization of white spot lesions:a clinical randomized trial[J].Int J Clin Pediatr Dent,2020,13(5):451-456.doi:10.5005/jpjournals-10005-1804.

[12] He T,Li X,Dong Y,et al.Comparative assessment of fluoride varnish and fluoride film for remineralization of postorthodontic white spot lesions in adolescents and adults over a 6-month period:a single-center,randomized controlled clinical trial[J]. Am J Orthod Dentofacial Orthop,2016,149(6):810-819.doi:10.1016/j.ajodo.

[13] Anggani HS,Arifiani P,Siregar E.The color improvement of postdebonding white spot lesions after fluoride and casein phosphopeptide- amorphous Calcium phosphate application[J]. J Adv Pharm Technol Res, 2021, 12(3): 274-278. doi: 10.4103/japtr.JAPTR_203_21.

[14] Karabekiro?lu S,ünlü N,Kü?ükyilmaz E,et al.Treatment of postorthodontic white spot lesions with CPP-ACP paste: a three year follow up study[J]. Dent Mater J, 2017, 36(6): 791-797. doi:10.4012/dmj.2016-228.

[15] Kamath P, Nayak R, Kamath S, et al. A comparative evaluation of the remineralization potential of three commercially available remineralizing agents on white spot lesions in primary teeth: an

study[J]. J Indian Soc Pedod Prev Dent, 2017, 35(3): 229-237.doi:10.4103/JISPPD.JISPPD_242_16.

[16] Hernandé-Gatón P,Palma-Dibb RG,Silva L,et al.Effect of ultrasonic, sonic and rotating-oscillating powered toothbrushing systems on surface roughness and wear of white spot lesions and sound enamel:an

study[J].Am J Dent,2018,31(2):76-80.

[17] Soares LE, Santo AM. Morphological and chemical comparative analysis of the human and bovine dentin-adhesive layer[J].Microsc Microanal,2015,21(1):204-213.doi:10.1017/S143192761401366X.

[18] Delparastan P, Malollari KG, Lee H, et al. Direct evidence for the polymeric nature of polydopamine[J]. Angew Chem Int Ed Engl,2019,58(4):1077-1082.doi:10.1002/anie.201811763.

[19] Hofko B,Porot L,Cannone AF,et al.FTIR spectral analysis of bituminous binders: reproducibility and impact of ageing temperature[J].Mate&Struct, 2018,51(2): 45.doi: 10.1617/s11527-018-1170-7.

[20] Ergun C. Enhanced phase stability in hydroxylapatite/zirconia composites with hot isostantic pressing[J]. Ceram Int, 2010 (37):935-942.doi:10.1016/j.ceramint.2010.11.001.

[21] Liu Y, Zhang ZX, Lv HL, et al. Surface modification of chitosan film via polydopamine coating to promote biomineralization in bone tissue engineering[J].J Bioact Compat Polym, 2018,33:134-145.doi:10.1177/0883911517713228.