董志岷,王韻斐,張瑞琴,杜金娥,張 健,陳秋菊,楊成虎,候 琴,王 貴*
(1.河套學(xué)院,內(nèi)蒙古 巴彥淖爾 015000;2.內(nèi)蒙古巴彥淖爾市農(nóng)牧科學(xué)研究所,內(nèi)蒙古巴彥淖爾 015000;3.內(nèi)蒙古巴彥淖爾市畜牧業(yè)服務(wù)中心,內(nèi)蒙古巴彥淖爾 015000;4.內(nèi)蒙古包頭市達茂旗巴音敖包蘇木應(yīng)急管理和科技推廣中心,內(nèi)蒙古包頭 014500;5.內(nèi)蒙古五原縣動物疫病預(yù)防控制中心,內(nèi)蒙古巴彥淖爾 015100)
隨著養(yǎng)羊業(yè)的發(fā)展,集約化、規(guī)模化的養(yǎng)殖已成為必然趨勢,直接關(guān)系到養(yǎng)羊業(yè)的經(jīng)濟效益。綿羊同期發(fā)情技術(shù)就是利用某些激素制劑,人為地控制一群母羊的發(fā)情周期,使其在特定時間內(nèi)集中發(fā)情的技術(shù)。通過同期發(fā)情技術(shù)使母羊按預(yù)定時間發(fā)情、配種,達到同時發(fā)情、同時配種、同時妊娠、同時產(chǎn)羔、同時哺乳、同時斷奶、同時育肥和同時出欄,實現(xiàn)肉羊養(yǎng)殖的標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)?;彤a(chǎn)品規(guī)格統(tǒng)一化的目的,從而提高養(yǎng)羊業(yè)的經(jīng)濟效益(盧守亮等,2022)。同期發(fā)情的關(guān)鍵是控制母畜黃體的消長。一般繁殖母羊的同期化處理有兩種方法:一種是使用孕激素及其類似物,人為地延長其黃體期,使母羊推遲發(fā)情,為下一個發(fā)情周期創(chuàng)造一個共同的起點;另一種方法是利用前列腺素及其類似物縮短母羊的發(fā)情周期,使母畜的發(fā)情期統(tǒng)一提前(余小亮等,2021)。其中,使用孕酮及其類似物處理母羊同期發(fā)情效果較好(Matsumoto等,2021)。
本試驗利用孕酮微囊包被技術(shù)形成液態(tài)制劑噴灑于全混日糧(TMR)實施孕酮投放,通過對比其與陰道孕酮釋放裝置調(diào)節(jié)體內(nèi)孕酮水平同期發(fā)情方法的差異,探討孕酮微囊包被液態(tài)制劑的效果,為推動其在生產(chǎn)中的應(yīng)用提供參考。
1.1 試驗動物試驗羊由內(nèi)蒙古富川養(yǎng)殖科技股份有限公司提供,選擇適齡空懷繁殖母羊(杜寒高代雜交)240只、種公羊5只、試情公羊12只。將繁殖母羊隨機分成3組,每組80只,飼養(yǎng)在兩個欄內(nèi),每欄40只。參試羊飼養(yǎng)在同一圈舍,采取統(tǒng)一飼養(yǎng)管理。
1.2 同期發(fā)情藥品孕酮微囊包被液態(tài)制劑〔(P4含量1.5 g/1L),鼎正動物藥業(yè)(天津)有限公司、河套學(xué)院動物遺傳育種與繁殖研究中心共同研發(fā)中〕;CIDR〔孕激素(含P4300 mg)陰道硅膠支架,新西蘭〕;海綿栓〔孕激素(含P450 mg)海綿柱,澳大利亞〕;PMSG(孕馬血清促性腺激素,寧波三生生物科技股份有限公司)、PGF2a(前列腺素,上海計勝生物科技有限公司)。
2.1 試驗設(shè)計
2.1.1 試驗羊分組 將240只空懷繁殖母羊隨機分成3組,每組80只,飼養(yǎng)在兩欄個內(nèi),每欄40只。參試羊飼養(yǎng)在同一棟羊舍,采取統(tǒng)一飼養(yǎng)管理。Ⅰ組以全混日糧(TMR)為載體投放孕酮(孕酮微囊包被液態(tài)制劑);Ⅱ組以海綿栓(一種浸潤了孕酮的海綿柱)為載體投放孕酮;Ⅲ組以CIDR(一種含孕酮的陰道硅膠支架)為載體投放孕酮。試驗羊分組試驗方案見表1。
表1 試驗?zāi)秆蚍纸M及同期發(fā)情處理方案
2.1.2 試驗羊同期發(fā)情人工授精處理方案投藥或放栓日設(shè)為“0”天,第12天Ⅰ組停止投藥同時肌注PGF2a(1 mL/0.1 mg)和PMSG(每只250 IU);Ⅱ組撤栓、清洗陰道(生理鹽水)同 時 肌 注 PGF2a(1 mL/0.1 mg)和 PMSG(每只250 IU);Ⅲ組撤栓同時肌注PGF2a(1 mL/0.1 mg)和PMSG(每只250 IU)。12 h后各組分別試情,統(tǒng)計各組發(fā)情母羊數(shù)。母羊發(fā)情后12 h輸精,間隔12 h復(fù)配一次。發(fā)情母羊人工授精后40 d利用B超進行妊娠檢測,分別統(tǒng)計發(fā)情母羊妊娠數(shù)量及比例。
表2 試驗?zāi)秆蛲诎l(fā)情人工授精實施方案
2.2 統(tǒng)計分析記錄各組母羊發(fā)情情況、處理后母羊生殖道情況、妊娠情況等數(shù)據(jù),用SPSS軟件單因素方差分析模型進行數(shù)據(jù)分析,P>0.05表示組間差異不顯著,P<0.05表示組間差異顯著,P<0.01表示組間差異極顯著。
3.1 不同孕酮投放方式對母羊發(fā)情時間和同期發(fā)情效果的影響由表3可知,Ⅰ組、Ⅱ組和Ⅲ組總發(fā)情率分別為88.8%、90.0%和93.8%,差異不顯著(P>0.05)。從母羊發(fā)情時間可知,Ⅰ組、Ⅱ組和Ⅲ組12 h發(fā)情率分別為6.3%、16.3%、18.8%,Ⅰ組對Ⅱ組和Ⅲ組極顯著偏低(P<0.01)、Ⅱ組對Ⅲ組差異不顯著(P>0.05),24、36 h發(fā)情率各組之間無顯著差異(P>0.05)。
表3 母羊發(fā)情情況統(tǒng)計(續(xù))
表3 母羊發(fā)情情況統(tǒng)計
3.2 不同孕酮投放方式對母羊生殖道內(nèi)環(huán)境的影響由表4可知,Ⅱ組母羊撤栓時生殖道異常率極顯著高于Ⅲ組(P<0.01)(Ⅰ組無撤栓環(huán)節(jié)),同時Ⅱ組的丟栓現(xiàn)象也顯著高于Ⅲ組(P<0.05),輸精時,Ⅰ組母羊生殖道異常率極顯著低于Ⅱ組(P<0.01),顯著低于Ⅲ組(P<0.05),Ⅲ組極顯著低于Ⅱ組(P<0.01)。
表4 母羊生殖道異常統(tǒng)計表
3.3 不同孕酮投放方式對母羊人工授精妊娠率的影響由表5可知,Ⅰ組發(fā)情母羊人工授精妊娠率極顯著高于Ⅱ組(P<0.01),顯著高于Ⅲ組(P<0.05);參試羊受胎率Ⅰ組、Ⅲ組無顯著差異(P>0.05),但均顯著高于Ⅱ組(P<0.05)。
表5 母羊妊娠情況統(tǒng)計
4.1 不同孕酮投放方式對母羊發(fā)情時間和同期發(fā)情效果的影響一般肉羊發(fā)情同期化處理有兩種方法(Romano,2015),一種是使用孕激素及其類似物,人為地延長其黃體期,推遲母羊發(fā)情,為下一個發(fā)情周期創(chuàng)造一個共同的起點;另一種方法是利用前列腺素及其類似物(謝周勛,2021),縮短母羊的發(fā)情周期,使母羊發(fā)情期統(tǒng)一提早出現(xiàn)。孕激素的投藥方法目前主要以CIDR(一種陰道硅膠支架)和陰道海綿栓為載體在陰道中被陰道黏膜緩慢吸收(Habeeb,2021)。此方法雖然同期發(fā)情效果較好,但處理過程較繁瑣,放栓、撤栓、陰道清洗等技術(shù)環(huán)節(jié)較難掌握,同時人力消耗較多,而且CIDR成本較高,不適合用于普通繁殖母羊的同期發(fā)情(Arrais,2021)。因此,一種簡單、安全、人力投入較少的不影響母羊生殖道內(nèi)環(huán)境,同時能得到較高同期發(fā)情效果的孕激素投藥方法是本課題研究目的所在。試驗結(jié)果表明,3種孕酮投放方法均能使母羊達到較高的同期發(fā)情效果,停藥或撤栓后60 h總發(fā)情率分別是88.8%、90.0%和93.8%,差異不顯著(P>0.05)。只是發(fā)情起始時間有一定差異,12 h發(fā)情率Ⅰ組對Ⅱ組和Ⅲ組極顯著偏低(P<0.01)、Ⅱ組對Ⅲ組差異不顯著(P> 0.05),24、36 h發(fā)情率各組之間無顯著差異(P>0.05)。
4.2 不同孕酮投放方式對母羊生殖道內(nèi)環(huán)境的影響試驗結(jié)果可知,母羊撤栓時生殖道異常率Ⅱ組極顯著高于Ⅲ組(P<0.01)(Ⅰ組無撤栓環(huán)節(jié)),同時Ⅱ組的丟栓現(xiàn)象也顯著高于Ⅲ組(P<0.05),輸精時母羊生殖道異常率Ⅰ組極顯著低于Ⅱ組(P<0.01),顯著低于Ⅲ組(P<0.05),Ⅲ組極顯著低于Ⅱ組(P<0.01)。表明通過飼料完成孕激素投藥不影響生殖道內(nèi)環(huán)境(趙興緒,2008)。雖然CIDR的孕酮投藥方式對生殖道影響較小,但也會因操作不當(dāng)而引起一定的生殖道異常。
4.3 不同孕酮投放方式對發(fā)情母羊人工授精妊娠率的影響同期發(fā)情處理后,母羊人工授精受胎率不但與母羊發(fā)情率、輸精時間、操作人員的技術(shù)水平有關(guān),還與同期發(fā)情處理過程中對母羊生殖道內(nèi)環(huán)境的影響程度有關(guān),特別是在放栓、撤栓過程中對母羊生殖道的損傷程度和污染程度。同時放入生殖道內(nèi)的孕酮釋放裝置對生殖道內(nèi)環(huán)境的影響也不可忽視(Martinez-Ros,2021)。由試驗結(jié)果可知,發(fā)情母羊人工授精妊娠率Ⅰ組極顯著高于Ⅱ組(P<0.01),顯著高于Ⅲ組(P<0.05),Ⅲ組顯著高于Ⅱ組(P<0.05)。說明通過日常投料過程投放孕激素不影響生殖道內(nèi)環(huán)境,不會對進入母羊生殖道的精子有影響,同時也表明CIDR對母羊生殖道的影響也較小。另外,參試羊總體受胎率Ⅰ組、Ⅲ組無顯著差異(P>0.05),但均顯著高于Ⅱ組(P<0.05),說明CIDR處理的母羊同期發(fā)情率較高,同時對母羊生殖道內(nèi)環(huán)境的影響也較小,其總體受胎率也會較高,但其成本偏高,不適宜大面積推廣使用。
綜上所述,通過孕酮微囊包被技術(shù)和日常飼料完成孕激素投放,通過胃黏膜等消化器官上皮吸收作用調(diào)節(jié)體內(nèi)孕酮水平與通過陰道孕酮釋放裝置通過生殖道上皮吸收調(diào)節(jié)體內(nèi)孕酮水平的同期發(fā)情方法效果差異不顯著。孕酮微囊包被液態(tài)制劑相對其他同期發(fā)情產(chǎn)品價格便宜,操作簡單、節(jié)省大量的人力投入、同時不影響生殖道內(nèi)環(huán)境,通過自然交配或人工授精會達到較高的受胎率,方法簡單易行,便于推廣,從而收到較好的經(jīng)濟效益。