管遠(yuǎn)紅，張璟晶，趙永旺，陳光明，穆曉惠，陳曉蘭

（江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院，江蘇泰州 225300）

桑葉富含黃酮、生物堿、多糖等天然活性成分，可提高動物生產(chǎn)性能，改善抗氧化功能（任超，2021）；周東來等（2021）研究發(fā)現(xiàn)，日糧添加低比例桑葉粉可顯著提高草魚肌肉中蛋白質(zhì)和不飽和脂肪酸含量，改善肉質(zhì)風(fēng)味；王雅敏（2021）發(fā)現(xiàn)，飼糧添加6%的益生菌可以提高飼料營養(yǎng)價值，促進(jìn)蛋雞生產(chǎn)性能，提高蛋品質(zhì)。研究表明，益生菌發(fā)酵飼料的開發(fā)為解決替抗問題提供了良好途徑（魏越波，2020）。雖然桑葉粉和益生菌是常用的飼料添加劑，但對兩者聯(lián)合應(yīng)用的研究較少。本試驗(yàn)將蛋雞作為對象，在其日糧中添加桑葉粉、益生菌，通過測定蛋雞血液指標(biāo)，探討能否提高蛋雞免疫力，為蛋雞飼養(yǎng)提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料桑葉粉購自安徽亳州中藥材專業(yè)市場；益生菌為課題組前期自行分離培養(yǎng)獲得（為枯草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌1∶1∶1與葡萄糖、黃豆餅、玉米淀粉按一定比例加工配制而成的混合物，益生菌總數(shù)為6.8×109cfu/g）。海蘭褐蛋雞由泰州某禽業(yè)有限公司提供（250日齡，體重2 kg左右，產(chǎn)蛋率相近）。

1.2 儀器全自動血液細(xì)胞分析儀（BC-10），深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司生產(chǎn)；全自動生化分析儀（M4），天津微納芯科技有限公司生產(chǎn)。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計試驗(yàn)將600只海蘭褐蛋雞隨機(jī)分成4組，每組5個重復(fù)，每個重復(fù)30只。第1組為對照組，2、3、4組為試驗(yàn)組，日糧飼料中分別添加2%的桑葉粉、1%益生菌、2%的桑葉粉+1%益生菌，試驗(yàn)周期42 d，預(yù)飼期7 d，正試期35 d，正試期開始，對照組飼料不變，試驗(yàn)2、3、4組按設(shè)計方案在日糧中進(jìn)行添加。

1.4 指標(biāo)測定與方法

1.4.1 血液常規(guī)指標(biāo) 在試驗(yàn)第 14、21、28、35、42天采血，采血前禁食12 h，正常飲水。每組隨機(jī)從每個重復(fù)中挑選3只蛋雞，5個重復(fù)共挑選15只，EDTA采血管翅靜脈采血2 mL，全自動血細(xì)胞分析儀（BC-10）檢測各項(xiàng)血液指標(biāo)。

1.4.2 血液生化指標(biāo) 在試驗(yàn)第 14、21、28、35、42天采血，采血前禁食12 h，正常飲水。每組隨機(jī)從每個重復(fù)中挑選3只蛋雞，5個重復(fù)共挑選15只，生化采血管翅靜脈采血2 mL，全自動血液生化分析儀（M4）和試劑盒檢測蛋雞肝功能、腎功能、血鈣、血磷和相關(guān)免疫指標(biāo)等。

1.5 統(tǒng)計分析在EXCEL軟件中計算出各重復(fù)指標(biāo)的平均值，計算標(biāo)準(zhǔn)差，結(jié)果以“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，然后采用Turkey法進(jìn)行多重比較（SPPS軟件單因素方差分析模型），P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 對蛋雞血液指標(biāo)的影響由表1可知，試驗(yàn)期間，2、3、4組試驗(yàn)蛋雞血液中白細(xì)胞數(shù)（WBC）數(shù)量、淋巴細(xì)胞（LYM）數(shù)量顯著高于對照組（P＜ 0.05）。在第 21、28、35和 42天，第 4組（2%桑葉粉+1%益生菌聯(lián)合組）白細(xì)胞總數(shù)、淋巴細(xì)胞數(shù)量（LYM）及淋巴細(xì)胞比率（LYM%）均顯著高于其他兩個試驗(yàn)組（P＜0.05）。

表1 蛋雞血液指標(biāo)——白細(xì)胞淋巴細(xì)胞檢測結(jié)果

2.2 對蛋雞肝功能的影響由表2可知，試驗(yàn)期間，2、3、4組試驗(yàn)蛋雞血液中白蛋白（ALB）的濃度高于對照組，在第35、42天時，試驗(yàn)組白蛋白（ALB）的濃度顯著升高（P＜0.05），其中，第4組（2%桑葉粉+1%益生菌聯(lián)合組）在第21天白蛋白（ALB）的濃度達(dá)到顯著差異（P＜0.05）。試驗(yàn)期間，試驗(yàn)組總蛋白（TP）、球蛋白（GLB）、堿性磷酸酶（ALP）的濃度明顯升高，第4組（2%桑葉粉+1%益生菌聯(lián)合組）顯著高于對照組（P＜ 0.05）。

表2 蛋雞血液指標(biāo)——肝功能檢測結(jié)果

2.3 對蛋雞腎功能及血脂的影響由表3可知，試驗(yàn)期間，試驗(yàn)組葡萄糖（GLU）的濃度明顯升高，第4組（2%桑葉粉+1%益生菌聯(lián)合組）在第14天葡萄糖（GLU）濃度顯著高于其他3組（P＜0.05）。與對照組相比，試驗(yàn)組甘油三脂（TG）濃度顯著降低（P＜0.05），第28天，試驗(yàn)組蛋雞血液中膽固醇（CHOL）、甘油三脂（TG）的濃度顯著低于對照組（P＜0.05）。

表3 蛋雞血液指標(biāo)——腎功能及血脂檢測結(jié)果

2.4 對蛋雞血鈣、血磷和免疫指標(biāo)的影響由表4可知，試驗(yàn)組血鈣（Ca2+）濃度顯著高于對照組（P＜0.05），其中第14天第4組（2%桑葉粉+1%益生菌聯(lián)合組）血鈣（Ca2+）濃度顯著高于其他各組（P＜0.05）；試驗(yàn)組血清無機(jī)磷（PHOS）濃度也明顯升高，第4組（2%桑葉粉+1%益生菌聯(lián)合組）血液中血清無機(jī)磷（PHOS）濃度在第28天時顯著高于對照組（P＜0.05）。試驗(yàn)組溶菌酶（LZM）濃度也得到升高，與對照組相比，第21天第4組（2%桑葉粉+1%益生菌聯(lián)合組）溶菌酶（LZM）濃度存在差異顯著（P＜0.05）。

表4 蛋雞血液指標(biāo)——鈣、磷、溶酶菌等檢測結(jié)果

3 討論

白細(xì)胞是動物機(jī)體免疫系統(tǒng)重要組成部分，具有免疫識別、吞噬異物、產(chǎn)生抗體、傳遞免疫信息等功能，郭軍蕊等（2017）在蛋雞飼料中添加枯草芽孢桿菌和苜蓿多糖可顯著提高蛋雞血液中的白細(xì)胞數(shù)量。血液中淋巴細(xì)胞數(shù)量與動物機(jī)體抵抗力相關(guān)，楊碩（2021）發(fā)現(xiàn)，艾蒿醇提物具有提高機(jī)體淋巴細(xì)胞與特異性免疫的作用，大量研究表明，動物機(jī)體免疫力與血液白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞數(shù)量有直接關(guān)系。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，添加桑葉粉、益生菌后，蛋雞血液中白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞數(shù)量顯著高于對照組，說明桑葉粉、益生菌及其聯(lián)合在蛋雞日糧飼料中添加能明顯提高蛋雞免疫指數(shù)，且2%桑葉粉+1%益生菌聯(lián)合應(yīng)用效果較單獨(dú)使用桑葉粉或益生菌效果好，與上述結(jié)果相符。

白蛋白主要參與動物機(jī)體組織修復(fù)和能量代謝，是由肝臟實(shí)質(zhì)細(xì)胞合成，其含量與肝細(xì)胞數(shù)量相關(guān)，當(dāng)肝細(xì)胞受損時，白蛋白含量減少，肝細(xì)胞功能狀態(tài)良好時，白蛋白含量較高，畢文明等（2021）研究證實(shí)，在蛋雞飼料中添加甪里艾葉粉能提高血清白蛋白含量。球蛋白是由肝臟漿細(xì)胞分泌形成，與機(jī)體免疫力相關(guān)，當(dāng)肝細(xì)胞接觸病原或抗原時，球蛋白數(shù)量會增加?？偟鞍子砂椎鞍缀颓虻鞍捉M成，具有維持血管內(nèi)膠體滲透壓和酸堿平衡的作用，還參與代謝，與機(jī)體免疫力相關(guān)。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，蛋雞日糧添加桑葉粉、益生菌能提高蛋雞血液中總蛋白和白蛋白含量，與上述研究結(jié)果相似，說明桑葉粉、益生菌及其聯(lián)合應(yīng)用對蛋雞具有促生長作用，結(jié)果表明聯(lián)合應(yīng)用的效果更佳。

血清尿素氮經(jīng)腎小球?yàn)V過排出體外，腎小球受損后，濾過作用降低，血清中尿素氮濃度升高。肌酐是動物肌肉代謝過程中的小分子物質(zhì)，主要經(jīng)腎小球?yàn)V過排出體外，正常情況下，動物體內(nèi)的尿素氮和肌酐濃度相對穩(wěn)定，血清尿素氮和肌酐含量是臨床評價腎功能的重要指標(biāo)，當(dāng)血清中這兩指標(biāo)升高，說明腎小球?yàn)V過作用出現(xiàn)異常，腎臟可能遭受損害（陳靜等，2012）。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，試驗(yàn)組與對照組蛋雞血液中尿素氮和肌酐濃度均無明顯差異，說明桑葉粉、益生菌及其聯(lián)合應(yīng)用對蛋雞無不利影響。

血漿中鈣、磷離子濃度與機(jī)體多項(xiàng)功能有關(guān)，吳信等（2021）發(fā)現(xiàn)，畜禽血漿中鈣磷濃度與畜禽生長發(fā)育、新陳代謝、內(nèi)分泌和免疫功能有關(guān)，在生命活動過程中，血液中鈣、磷濃度高有利于畜禽生產(chǎn)。本試驗(yàn)結(jié)果表明，桑葉粉、益生菌及其聯(lián)合能提高蛋雞血漿中鈣、磷濃度，這可能與蛋雞生產(chǎn)性能的提升有關(guān)。

4 結(jié)論

綜上所述，蛋雞日糧飼料中添加桑葉粉、益生菌及其聯(lián)合應(yīng)用能改善蛋雞血液指標(biāo)，增強(qiáng)機(jī)體免疫力，試驗(yàn)結(jié)果也進(jìn)一步驗(yàn)證以上添加對蛋雞無明顯毒副作用，且聯(lián)合應(yīng)用效果更佳。