李 鑫,丁 旭,劉笑夢(mèng),劉歆嬋,武 洲,于維先,4

（1.吉林大學(xué)口腔醫(yī)院牙周科，吉林 長(zhǎng)春 130021；2.吉林大學(xué)口腔醫(yī)院種植科，吉林 長(zhǎng)春 130021；3.日本九州大學(xué)齒學(xué)研究院，日本 福岡 812-8582；4.吉林省牙發(fā)育及頜骨重塑與再生重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，吉林 長(zhǎng)春 130021）

牙周炎是發(fā)生于牙周組織的慢性炎癥性疾病，主要表現(xiàn)為牙周結(jié)締組織破壞和牙槽骨吸收，是成人牙齒缺失的主要原因。研究［1］顯示：牙周炎不僅損害局部牙周組織，也會(huì)嚴(yán)重威脅人類健康，導(dǎo)致非酒精性脂肪肝和阿爾茲海默癥等疾病發(fā)生。近年來(lái)，牙周炎與腎臟疾病之間的關(guān)系引起了學(xué)術(shù)界的廣泛關(guān)注［2-6］。研究［7］顯示：牙周炎患者慢性腎?。╟hronic kidney disease，CKD）的患病率是牙周健康者的1.73倍，而局部牙周治療可有效減緩CKD進(jìn)程［3］。因此，探討慢性牙周炎誘發(fā)腎臟損傷的相關(guān)機(jī)制，尋找防治靶點(diǎn)是目前研究的關(guān)鍵問(wèn)題。沉默信息調(diào)節(jié)因子1（silencing information regulator 1，SIRT1）是一種煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamide adenine dinucleotide，NAD）依賴性蛋白質(zhì)去乙酰基酶，在能量穩(wěn)態(tài)和細(xì)胞應(yīng)激中起關(guān)鍵作用，其失調(diào)與癌癥、糖尿病和心臟疾病等全身 疾 病 有 關(guān)［8］。周 豐 等［9］研 究 發(fā) 現(xiàn)：SIRT1可 調(diào)節(jié)牙周炎中氧化應(yīng)激和炎癥通路，從而調(diào)控牙周炎的發(fā)生發(fā)展。采用SIRT1激活劑白藜蘆醇可有效降低牙周炎大鼠牙周組織中氧化應(yīng)激水平，上調(diào)SIRT1表達(dá)，從而延緩牙周炎進(jìn)展［10］。此外，SIRT1的抗氧化功能有利于減輕糖尿病腎病小鼠腎臟纖維化，改善腎組織形態(tài)［11］。然而，有關(guān)SIRT1對(duì)慢性牙周炎模型大鼠腎損傷作用的研究目前國(guó)內(nèi)外尚未見報(bào)道。本研究旨在探討SIRT1在慢性牙周炎大鼠腎損傷中的作用，為牙周炎大鼠腎損傷的防治提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、主要試劑和儀器SPF級(jí)Wistar雄性大鼠20只，8周齡，體質(zhì)量200～220 g，飼養(yǎng)于吉林大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心，動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK（遼）2015-0001，購(gòu)自遼寧長(zhǎng)生生物技術(shù)股份有限公司。大鼠在溫度22℃～25℃、相對(duì)濕度55%～70%和12 h晝夜循環(huán)環(huán)境 中 適 應(yīng) 性 喂 養(yǎng)1周，自由飲水及進(jìn)食。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)經(jīng)吉林大學(xué)口腔醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)（2019/64）。過(guò)碘酸雪夫（periodic acid-schiff stain，PAS）染 色 液 試 劑 盒（北京酷萊博科技有限公司），SYBR Prime-ScriptTMRT-PCR Kit試劑盒（日本TaKaRa公司），SIRT1抗體（美國(guó)Proteintech公司），過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體γ輔助因子1α（peroxisome-proliferatoractivated receptor γ coactivator-1α，PGC-1α）抗體、腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）抗體和核因子κB（nuclear factor-kappa B，NF-κB）p65抗體（英國(guó)Abcam公司），總抗氧化狀態(tài)（total antioxidative status，TAS）試劑盒（武漢伊萊瑞特生物科技有限公司），錳-超氧化物歧化酶（manganese superoxide dismutase，Mn-SOD）試劑盒、谷胱甘肽（glutathione，GSH）試劑盒和丙二醛（malondialdehyde，MDA）試劑盒（南京建成生物工程研究所）。酶標(biāo)檢測(cè)儀（美國(guó)Bio-TEK公司），實(shí)時(shí)熒光定量PCR（real-time fluorescence quantitative PCR，RT-qPCR）擴(kuò) 增 儀MX3005P（美國(guó)AgILent公司）。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組和造模20只大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組和牙周炎組，每組10只。按照參考文獻(xiàn)［12］和本課題組前期研究［13］中的方法造模。牙周炎組：直徑0.2 mm正畸絲結(jié)扎大鼠雙側(cè)上頜第一磨牙頸部，持續(xù)8周；對(duì)照組大鼠不作處理。采用牙周臨床指標(biāo)檢查及牙槽骨吸收水平評(píng)價(jià)牙周炎模型是否成功建立［13］。造模8周后對(duì)大鼠進(jìn)行安樂(lè)死，取上頜骨、血清和腎組織行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

1.3 2組大鼠牙周組織臨床指標(biāo)檢查2 mL·kg－12%戊巴比妥鈉麻醉后，肉眼觀察2組大鼠牙齦顏色、形狀和質(zhì)地，采用相機(jī)拍攝各組大鼠上頜第一磨牙及其牙周組織。記錄牙齦出血指數(shù)（bleeding index，BI）、牙周探診深度（probing depth，PD）和牙齒松動(dòng)度（tooth mobility，TM）。采用Mazza法記錄BI：0=牙齦健康，無(wú)炎癥及出血；1=牙齦顏色有炎癥性改變，探診不出血；2=探診后有點(diǎn)狀出血；3=探診出血沿牙齦緣擴(kuò)散；4=出血流滿并溢出齦溝；5=自動(dòng)出血。采用牙周探針于大鼠上頜第一磨牙頰腭側(cè)近中、中央和遠(yuǎn)中6個(gè)點(diǎn)測(cè)量牙周袋深度，取平均值記錄PD。用鑷子檢查2組大鼠上頜第一磨牙是否松動(dòng)，記錄TM：＜Ⅰ度：生理活動(dòng)度；Ⅰ度松動(dòng)：頰腭向松動(dòng)；Ⅱ度松動(dòng)：頰腭向及近遠(yuǎn)中向松動(dòng)；Ⅲ度松動(dòng)：頰腭向、近遠(yuǎn)中向和垂直向均松動(dòng)。以上結(jié)果均由同一人檢查并記錄。

1.4 蘇木素-伊紅（hematoxylin-eosin，HE）染色觀察2組大鼠牙周組織病理形態(tài)表現(xiàn)處死大鼠后，取上頜骨置于10%中性甲醛固定液中固定24～48 h，經(jīng)10%乙二胺四乙酸脫鈣3個(gè)月后，乙醇梯度脫水，二甲苯溶液透明，浸蠟，包埋，組織切片（5 μm）；二甲苯脫蠟后，梯度乙醇水化，蘇木素10 min；沖洗，1%鹽酸酒精分化，氨水返藍(lán)，1%伊紅5 min；染色后，梯度乙醇脫水，二甲苯透明，最后中性樹膠封片。封片后顯微鏡下觀察2組大鼠牙周組織結(jié)合上皮完整性、附著喪失水平和牙槽骨吸收情況。

1.5 微型計(jì)算機(jī)斷層成像（micro computed tomography，Micro-CT）評(píng)價(jià)2組大鼠牙槽骨吸收情況Micro-CT掃描大鼠上頜骨，掃描參數(shù)設(shè)置為70 kV，200 mA，300 ms。采用IPL圖像處理軟件重建上頜骨三維圖像，Image J軟件分別測(cè)量近遠(yuǎn)中釉牙骨質(zhì)界（cement-enamel junction，CEJ）到牙槽嵴頂（alveolar bone crest，BC）的距離，單位為mm，并取平均值，判斷2組大鼠牙槽骨吸收情況。

1.6 HE染色觀察2組大鼠腎組織病理形態(tài)表現(xiàn)處死大鼠后，取部分腎組織按“1.4”中步驟進(jìn)行包埋、切片和染色。顯微鏡下觀察2組大鼠腎組織中腎小球和腎小管結(jié)構(gòu)變化。

1.7 PAS染色觀察2組大鼠腎組織病理形態(tài)表現(xiàn)5 μm腎組織切片脫蠟至水，氧化劑室溫孵育8 min，水洗后，室溫陰暗處Schiff試劑浸染15 min，偏重亞硫酸鈉分化，自來(lái)水沖洗10 min，蘇木素復(fù)染，鹽酸分化，返藍(lán)，常規(guī)脫水，透明，封片。觀察2組大鼠腎組織中腎小球和腎小管結(jié)構(gòu)完整性。

1.8 生化試劑盒檢測(cè)2組大鼠24 h尿蛋白、尿肌酐（creatinine，Cr）及 血清 中Cr、尿 素氮（blood urea nitrogen，BUN）和白蛋白（albumin，Alb）水平建模8周后，處死前將大鼠置于代謝籠中收集24 h尿液，生化試劑盒檢測(cè)2組大鼠尿液中總蛋白和Cr水平；麻醉后腹主動(dòng)脈取血，4℃、3 000 g離心15 min，取上清，生化試劑盒檢測(cè)2組大鼠血清中Cr、BUN和Alb水平。

1.9 生化試劑盒檢測(cè)2組大鼠腎組織中TAS、Mn-SOD、GSH和MDA水平取1 g大鼠腎組織，加入9 mL生理鹽水，置于冰上勻漿，離心后取上清，采用生化試劑盒檢測(cè)2組大鼠腎組織中TAS、Mn-SOD、GSH和MDA水平。

1.10 Western blotting法檢測(cè)2組大鼠腎組織中TNF-α和NF-κB p65蛋白表達(dá)水平取大鼠新鮮腎組織，與RIPA裂解液混合后勻漿，4℃離心后取上清。BCA試劑盒測(cè)定蛋白濃度，100℃煮沸5 min使蛋白變性。每孔20 μg蛋白等量上樣，聚丙烯酰胺凝膠電泳后濕轉(zhuǎn)法將蛋白轉(zhuǎn)至聚偏二氟乙烯膜上，5%脫脂牛奶封閉1 h，TNF-α抗體（1∶1 000）、NF-κ B p65抗 體（1∶1 000）和β-actin抗 體（1∶10 000）4℃孵育過(guò)夜，二抗室溫1 h，電化學(xué)發(fā) 光法（electrochemiluminescence，ECL）顯色。Image J軟件分析蛋白條帶灰度值，計(jì)算目的蛋白表達(dá)水平。目的蛋白表達(dá)水平=目的蛋白條帶灰度值/β-actin蛋白條帶灰度值。

1.11 免疫組織化學(xué)法檢測(cè)2組大鼠腎組織中SIRT1和PGC-1α蛋白表達(dá)水平腎組織切片二甲苯脫蠟后，置于梯度乙醇中水化，檸檬酸鈉抗原修復(fù)，山羊血清封閉后，SIRT1（1∶250）、PGC-1α（1∶25）抗體4℃孵育過(guò)夜，按照兔超敏二步法免疫組織化學(xué)試劑盒說(shuō)明書操作，DAB顯色，流水終止反應(yīng)，蘇木素復(fù)染，鹽酸分化，返藍(lán)，常規(guī)脫水透明，最后中性樹膠封片，顯微鏡下觀察。免疫組織化學(xué)結(jié)果半定量方法，采用Image J軟件分析腎組織棕色部分累計(jì)光密度（integrated optical density，IOD）值和面積，計(jì)算平均光密度值（averaged optical density，AOD）。AOD=IOD/面積，以AOD值代表目的蛋白表達(dá)水平。

1.12 RT-qPCR法檢測(cè)2組大鼠腎組織中SIRT1和PGC-1α mRNA表達(dá)水平取新鮮腎組織，液氮研磨，TRIzol試劑提取組織中總RNA，按照逆轉(zhuǎn)錄試劑盒說(shuō)明書操作將提取的RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，采用SYBR Prime-ScriptTMRT-PCR Kit試劑盒進(jìn)行RT-qPCR反應(yīng)，以β-actin為內(nèi)參。引物序列見表1。反應(yīng)條件：95℃預(yù)變性30 s；95℃變性5 s；60℃退火30 s，共40個(gè)循環(huán)。每個(gè)樣本設(shè)置3個(gè)復(fù)孔，取平均值，采用2－ΔΔCt法計(jì)算目的mRNA表達(dá)水平。

表1 PCR引物序列Tab.1 Primer sequences of PCR

1.13 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS 25.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。各組大鼠PD，尿和血清中生化指標(biāo)水平，腎組織中氧化應(yīng)激指標(biāo)水平，腎組織中TNF-α和NF-κB p65蛋 白 表 達(dá) 水 平，腎 組 織 中SIRT1和PGC-1α mRNA和蛋白表達(dá)水平均符合正態(tài)分布，以±s表示，2組間樣本均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)；大鼠牙周BI和TM組間比較采用曼-惠特尼U檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 2組大鼠牙周組織臨床指標(biāo)對(duì)照組大鼠未探及深牙周袋，探診無(wú)出血，牙齒無(wú)松動(dòng)；牙周炎組大鼠可探及深牙周袋，探診易出血，牙齒不同程度松動(dòng)。見表2。

表2 2組大鼠牙周組織臨床指標(biāo)Tab.2 Clinical indexes of peridontium of rats in two groups(n=10）

2.2 2組大鼠牙周組織病理形態(tài)表現(xiàn)和牙槽骨吸收情況肉眼觀察：對(duì)照組大鼠牙齦呈粉紅色，齦緣緊貼牙面，質(zhì)地韌；牙周炎組大鼠牙齦腫脹，質(zhì)地松軟。HE染色結(jié)果顯示：對(duì)照組大鼠牙周組織結(jié)構(gòu)完整、清晰，無(wú)附著喪失；牙周炎組大鼠可見深牙周袋及附著喪失，牙槽骨高度明顯降低。Micro-CT結(jié)果顯示：與對(duì)照組比較，牙周炎組大鼠牙槽骨吸收明顯。對(duì)照組和牙周炎組大鼠CEJBC距離分別為（0.835 7±0.057 9）和（1.513 0±0.044 6）mm。見圖1。

圖1 2組大鼠牙周組織病理形態(tài)表現(xiàn)和牙槽骨吸收情況Fig.1 Pathomorphology of peridontium tissue and alvelar bone resorption of rats in two groups

2.3 2組大鼠腎組織病理形態(tài)表現(xiàn)HE染色結(jié)果顯示：對(duì)照組大鼠腎組織結(jié)構(gòu)完整清晰，未見病理?yè)p傷；牙周炎組大鼠腎組織形態(tài)紊亂，腎小囊腔擴(kuò)張，少數(shù)近曲腎小管上皮細(xì)胞脫落。PAS染色結(jié)果顯示：對(duì)照組大鼠腎小球基底膜薄而清晰，腎小管刷狀緣完整；牙周炎組大鼠腎小球基底膜輕度增厚，腎小管刷緣被破壞。見圖2和3。

圖2 HE染色觀察2組大鼠腎組織病理形態(tài)表現(xiàn)Fig.2 Pathomorphology of kidney tissue of rats in two groups observed by HE staining

2.4 2組大鼠腎臟功能指標(biāo)與對(duì)照組比較，牙周炎組大鼠24 h尿蛋白和Cr及血清中BUN、Alb和Cr水平升高，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表3。

表3 2組大鼠腎臟功能指標(biāo)Tab.3 Renal function indexes of rats in two groups (n=3，±s）

表3 2組大鼠腎臟功能指標(biāo)Tab.3 Renal function indexes of rats in two groups (n=3，±s）

Group Control Periodontitis Alb in serum[ρB/(g·L-1)]20.31±0.41 21.35±0.11 Cr in serum[mB/(μmol·L-1)]28.68±0.98 30.54±1.22 BUN in serum[mB/(mmol·L-1)]5.29±0.09 5.65±0.14 Urine protein[ρB/(mg·L-1)]1 034.00±36.83 1 087.00±18.86 Cr in urine[mB/(μmol·L-1)]910.80±87.33 1 140.00±76.76

圖3 PAS染色觀察2組大鼠腎組織病理形態(tài)表現(xiàn)Fig 3 Pathomorphology of kidney tissue of rats in two groups observed by PAS staining

2.5 2組大鼠腎組織中氧化應(yīng)激水平與對(duì)照組比較，牙周炎組大鼠腎組織中TAS、Mn-SOD和GSH水平降低（P＜0.01），MDA水平升高（P＜0.01）。見表4。

表4 2組大鼠腎組織中氧化應(yīng)激水平Tab.4 Levels of oxidative stress in kidney tissue of rats in two groups (n=3，±s）

表4 2組大鼠腎組織中氧化應(yīng)激水平Tab.4 Levels of oxidative stress in kidney tissue of rats in two groups (n=3，±s）

*P＜0.01 vs control group.

Group Control Periodontitis TAS[mB/(μmol·g－1)]14.89±0.91 8.89±0.51*Mn-SOD[λB/(U·mg－1)]66.17±2.81 34.33±2.64*MDA[mB/(μmol·g－1)]3.79±0.17 5.57±0.32*GSH[mB/(μmol·g－1)]27.21±0.62 22.35±0.56*

2.6 2組大鼠腎組織中TNF-α和NF-κB p65蛋白表達(dá)水平Western blotting檢測(cè)結(jié)果顯示：與對(duì)照組比較，牙周炎組大鼠腎組織中TNF-α和NF-κB p65蛋白表 達(dá)水平升高（P＜0.05或P＜0.01）。見圖4。

圖4 2組大鼠腎組織中TNF-α和NF-κB p65蛋白表達(dá)電泳圖（A）和直條圖（B，C）Fig.4 Electrophoregram(A)and histogram(B，C)of expressions of TNF-α and NF-κB p65 proteins in kidney tissue of rats in two groups

2.7 2組大鼠腎組織中SIRT1和PGC-1α蛋白表達(dá)水平SIRT1和PGC-1α蛋白主要表達(dá)于腎小管上皮細(xì)胞中，免疫組織化學(xué)染色陽(yáng)性信號(hào)表現(xiàn)為棕黃色。與對(duì)照組比較，牙周炎組大鼠腎組織中SIRT1和PGC-1α蛋 白 表 達(dá) 水 平 降 低（P＜0.05）。見圖5和6。

圖5 免疫組織化學(xué)法檢測(cè)2組大鼠腎組織SIRT1和PGC-1α蛋白表達(dá)情況Fig.5 Expressions of SIRT1 and PGC-1α proteins in kidney tissue of rats in two groups detected by immunohistochemistry

2.8 2組大鼠腎組織中SIRT1和PGC-1α mRNA表達(dá)水平RT-qPCR檢測(cè)結(jié)果顯示：與對(duì)照組比較，牙周炎組大鼠腎組織中SIRT1和PGC-1α mRNA表 達(dá) 水 平 降 低（P＜0.05或P＜0.01）。見表5。

表5 2組大鼠腎組織中SIRT1和PGC-1α mRNA表達(dá)水平Tab.5 Expression levels of SIRT1 and PGC-1α mRNA in kidney tissue of rats in two groups (n=3，±s）

表5 2組大鼠腎組織中SIRT1和PGC-1α mRNA表達(dá)水平Tab.5 Expression levels of SIRT1 and PGC-1α mRNA in kidney tissue of rats in two groups (n=3，±s）

*P＜0.05，**P＜0.01 vs control group.

Group Control Periodontitis SIRT1 1.01±0.09 0.50±0.02**PGC-1α 1.00±0.06 0.76±0.03*

3 討 論

牙周炎是人類第六大常見的疾病，被認(rèn)為是CKD的潛在危險(xiǎn)因素［14-16］。KOSE等［17］發(fā)現(xiàn)：結(jié)扎誘導(dǎo)的慢性牙周炎大鼠腎組織出現(xiàn)腎小囊腔擴(kuò)張、腎小管壞死和周圍毛細(xì)血管充血等病理表現(xiàn)，GALENO等［18］進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)：去除結(jié)扎絲后牙周炎大鼠的腎損傷未見好轉(zhuǎn)。本研究采用正畸絲結(jié)扎大鼠雙側(cè)上頜第一磨牙構(gòu)建牙周炎模型，8周后大鼠牙周組織出現(xiàn)明顯附著喪失和牙槽骨吸收等癥狀，表明成功建立大鼠牙周炎模型。本研究結(jié)果顯示：慢性牙周炎大鼠腎組織結(jié)構(gòu)改變，出現(xiàn)腎小囊腔擴(kuò)張，腎小管上皮細(xì)胞脫落等形態(tài)表現(xiàn)。此外，與先前研究［17-19］結(jié)果相似，本研究中牙周炎大鼠腎臟功能指標(biāo)變化差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示牙周炎可誘發(fā)大鼠腎組織損傷。

圖6 2組大鼠腎組織中SIRT1和PGC-1α蛋白表達(dá)水平Fig.6 Expression levels of SIRT1 and PGC-1α proteins in kidney tissue of rats in two groups

研究［4］表明：牙周炎與CKD之間的關(guān)系可能是通過(guò)氧化應(yīng)激介導(dǎo)的。牙周炎發(fā)生時(shí)，牙周組織中淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞等防御細(xì)胞釋放活性氧（reactive oxygen species，ROS）以抵御牙周致病菌的入侵。而過(guò)量的ROS可通過(guò)血液循環(huán)到達(dá)腎臟，從而導(dǎo)致腎臟組織中氧化/抗氧化系統(tǒng)失衡，造成腎臟組織氧化損傷［19-20］。研究［10，19］證實(shí)：結(jié)扎誘導(dǎo)的牙周炎模型大鼠牙周組織中氧化應(yīng)激水平升高。此外，與健康個(gè)體比較，牙周炎患者唾液、齦溝液和血漿中氧化應(yīng)激標(biāo)志物水平升高；而牙周治療可將牙周炎患者氧化應(yīng)激標(biāo)志物水平降至與牙周健康個(gè)體相當(dāng)［21-22］。FRAN?A等［19］證實(shí)：結(jié)扎誘導(dǎo)的慢性牙周炎可通過(guò)氧化應(yīng)激引起大鼠腎組織損傷。本研究結(jié)果顯示：與對(duì)照組比較，牙周炎組大鼠腎組織中氧化應(yīng)激標(biāo)志物水平升高。牙周炎是一種炎癥性疾病，可導(dǎo)致全身炎癥負(fù)荷增加，KOSE等［17］發(fā)現(xiàn)：牙周炎組大鼠腎組織中炎癥因子TNF-α和白細(xì)胞介素1β（interleukin-1β，IL-1β）水平明顯高于對(duì)照組。ERDEMLI等［23］發(fā)現(xiàn)：與對(duì)照組比較，牙周炎組大鼠血清中TNF-α、IL-1β及白細(xì)胞介素6（interleukin-6，IL-6）水 平 升高。本研究結(jié)果顯示：與對(duì)照組比較，牙周炎組大鼠 腎 組 織 中TNF-α和NF-κB p65蛋 白 表 達(dá) 水 平 升高，提示牙周炎可引起大鼠腎組織中氧化應(yīng)激和炎癥水平升高。研究［24-26］報(bào)道：炎癥反應(yīng)過(guò)程中，TNF-α/NF-κB通路可促進(jìn)線粒體產(chǎn)生過(guò)量ROS，引起氧化應(yīng)激水平升高；另一方面，過(guò)量的ROS可激活NF-κB信號(hào)通路，增強(qiáng)炎癥反應(yīng)。因此氧化應(yīng)激和炎癥可形成惡性循環(huán)促進(jìn)牙周炎大鼠腎損傷。

SIRT1是一種去乙?；?，可調(diào)控多種細(xì)胞生物活性，已被證實(shí)具有腎臟保護(hù)功能［8］。生理?xiàng)l件下，SIRT1能促進(jìn)PGC-1α去乙酰化使其轉(zhuǎn)錄功能上調(diào)，維持線粒體穩(wěn)態(tài)，降低細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激水平［27］。此 外，SIRT1還 可 通 過(guò)NF-κB去 乙 酰 化 降低炎癥介質(zhì)TNF-α水平，從而抑制炎癥過(guò)程［8］。因此，SIRT1可能是打破氧化應(yīng)激和炎癥惡性循環(huán)，減輕牙周炎大鼠腎損傷的關(guān)鍵靶點(diǎn)。然而，氧化應(yīng)激可以下調(diào)SIRT1表達(dá)，抑制SIRT1活性，使其無(wú)法發(fā)揮腎臟保護(hù)功能［27］。本研究結(jié)果顯示：與對(duì)照組比較，牙周炎組大鼠腎組織中SIRT1及其下游因子PGC-1α mRNA和蛋白表達(dá)水平降低，提示在慢性牙周炎模型大鼠中，SIRT1表達(dá)下調(diào)，加重牙周炎大鼠腎組織損傷。

綜上所述，本研究通過(guò)分析結(jié)扎誘導(dǎo)的慢性牙周炎大鼠腎組織形態(tài)表現(xiàn)、腎組織中氧化應(yīng)激和SIRT1蛋白表達(dá)水平，證實(shí)SIRT1下調(diào)可加重慢性牙周炎大鼠腎損傷，提示SIRT1可作為牙周炎誘發(fā)腎損傷的防治靶點(diǎn)。但在大鼠慢性牙周炎模型中，牙周炎是否直接通過(guò)抑制SIRT1/PGC-1α信號(hào)通路誘導(dǎo)大鼠腎損傷尚需進(jìn)一步研究。