周潔蕊，馬忠文，李園園，鄔乃霞，吳紅翔*

(1.江西農(nóng)業(yè)大學(xué) 動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，江西 南昌 332045；2.江西省九江市柴桑區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，江西 九江 332100)

隨著無(wú)抗政策相繼出臺(tái)，生產(chǎn)出無(wú)抗生素殘留的優(yōu)質(zhì)畜禽產(chǎn)品是我國(guó)未來(lái)畜禽養(yǎng)殖的目標(biāo)，因此開(kāi)發(fā)綠色、環(huán)保、高效的生物飼料對(duì)降低飼料成本、減排環(huán)保滿足人們對(duì)綠色健康食品的迫切需求具有重要意義[1-2]?，F(xiàn)如今飼料可以通過(guò)微生物發(fā)酵作用，利用其他的技術(shù)手段，實(shí)現(xiàn)發(fā)酵飼料產(chǎn)品的大規(guī)模生產(chǎn)，微生物發(fā)酵飼料不僅能夠有效解決畜禽抗生素殘留問(wèn)題，飼料經(jīng)過(guò)有益微生物進(jìn)過(guò)發(fā)酵，在發(fā)酵過(guò)程中產(chǎn)生大量的多種不飽和脂肪酸和芳香酸，也產(chǎn)生了大量微生物菌體蛋白和有益代謝產(chǎn)物，大量抗?fàn)I養(yǎng)因子被消除，降低飼料中抗?fàn)I養(yǎng)因子對(duì)動(dòng)物產(chǎn)生的不利影響，而且能夠提高飼料利用率，提高畜禽健康水平、改善畜產(chǎn)品品質(zhì)和養(yǎng)殖環(huán)境[3-4]。例如孫汝江等[5]通過(guò)探究在基礎(chǔ)日糧添加微生物發(fā)酵飼料后，蛋雞的產(chǎn)蛋率顯著提高，朱憲章等[6]用經(jīng)過(guò)發(fā)酵劑發(fā)酵后的基礎(chǔ)飼糧飼喂朗德鵝，發(fā)現(xiàn)朗德鵝的平均日采食量顯著提高。蚯蚓是我國(guó)重要的中藥材之一。其中含有的蚓激酶、抗菌肽是不可多得的抗菌、抗病毒成分，保障了畜禽健康成長(zhǎng)[7]，但由于動(dòng)物蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)致密，活性成分提取有限，畜禽采食蚯蚓后沒(méi)有充分吸收利用，會(huì)造成巨大浪費(fèi)。而將蚯蚓經(jīng)過(guò)發(fā)酵工藝制成蚯蚓發(fā)酵液可以保存多種活性成分，很好的解決上述問(wèn)題。在此基礎(chǔ)上，本試驗(yàn)旨在研究蚯蚓發(fā)酵液對(duì)康樂(lè)黃雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)以及脂質(zhì)指標(biāo)的影響，以期為深入研究蚯蚓發(fā)酵液在畜禽養(yǎng)殖中的應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料隨機(jī)選取160只190日齡健康狀態(tài)良好且產(chǎn)蛋日齡相近的康樂(lè)黃雞，均購(gòu)自萬(wàn)載縣康樂(lè)黃雞原種場(chǎng)。蚯蚓發(fā)酵液由浙江倍康生物科技有限公司提供，含有蛋白質(zhì)10.59 g/L，具體的營(yíng)養(yǎng)組成及含量見(jiàn)表1。

表1 蚯蚓發(fā)酵液營(yíng)養(yǎng)成分表 g/100 L

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)和飼養(yǎng)管理隨機(jī)選取160只健康狀態(tài)良好且產(chǎn)蛋日齡相近的康樂(lè)黃雞，先用基礎(chǔ)日糧飼養(yǎng)1周，結(jié)束后體質(zhì)量差異不顯著時(shí)進(jìn)入正式的試驗(yàn)期，試驗(yàn)期共計(jì)40 d。將其隨機(jī)分為4組，每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10只雞。試驗(yàn)Ⅰ組為對(duì)照組，飼喂基礎(chǔ)日糧；試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組是在基礎(chǔ)日糧中分別添加0.5%，1.0%，1.5%的蚯蚓發(fā)酵液。即分別為每1 kg飼料分別添加蚯蚓液5，10，15 mL，將所添加蚯蚓發(fā)酵液經(jīng)過(guò)加水稀釋后與飼料均勻攪拌進(jìn)行飼喂。本次試驗(yàn)的飼料采用的基礎(chǔ)日糧來(lái)自江西南昌市正大公司。日糧配方及養(yǎng)分含量參照NRC(2004)標(biāo)準(zhǔn)配制，試驗(yàn)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表2。按常規(guī)免疫程序接種雞群和圈舍消毒，專人飼養(yǎng)。

表2 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1.3 生產(chǎn)性能的測(cè)定以重復(fù)為單位記錄試驗(yàn)期每日產(chǎn)蛋數(shù)、總蛋質(zhì)量、破損蛋數(shù)，稱剩余料質(zhì)量，再以組為單位來(lái)計(jì)算產(chǎn)蛋率、平均蛋質(zhì)量、平均日采食量、蛋破損率及料蛋比。

1.4 屠宰性能的測(cè)定第230天，每重復(fù)組隨機(jī)選取4只平均體質(zhì)量接近的試驗(yàn)雞，進(jìn)行屠宰試驗(yàn)。測(cè)定活體質(zhì)量、屠體質(zhì)量、全凈膛質(zhì)量、半凈膛質(zhì)量、腿肌質(zhì)量、胸肌質(zhì)量和腹脂質(zhì)量，測(cè)定屠宰率、半凈膛率、全凈膛率、胸肌率和腿肌率等屠宰性能指標(biāo)。

1.5 蛋品質(zhì)的測(cè)定飼養(yǎng)試驗(yàn)期間，每周一相同時(shí)間收集一次雞蛋，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取8枚雞蛋，每組32枚，共128枚，當(dāng)天下午進(jìn)行蛋品質(zhì)(蛋質(zhì)量、相對(duì)密度、蛋形指數(shù)、蛋黃顏色、蛋殼比例、蛋黃比例、蛋殼厚度、蛋白高度、蛋殼強(qiáng)度、哈夫單位)測(cè)定。

1.6 脂質(zhì)相關(guān)指標(biāo)的測(cè)定

1.6.1脂肪性狀的測(cè)定 第230日，每個(gè)重復(fù)組隨機(jī)選取4只平均體質(zhì)量接近的試驗(yàn)雞，進(jìn)行屠宰試驗(yàn)的同時(shí)測(cè)定脂肪性狀。用游標(biāo)卡尺測(cè)定皮下脂肪厚度、肌間脂肪厚度。取10 g左右胸肌、腿肌和肝臟樣品，稱質(zhì)量烘干，然后經(jīng)過(guò)粉碎機(jī)粉碎，采用索氏提取法測(cè)定肌肉脂肪含量。

1.6.2血清中血脂指標(biāo)的測(cè)定 試驗(yàn)結(jié)束時(shí)每重復(fù)隨機(jī)取1只雞，翅靜脈采血5 mL，3 000 r/min離心10 min，分離血清，-20℃保存?zhèn)溆?，用血糖、甘油三?TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)膽固醇、低密度脂蛋白(LDL)膽固醇試劑盒(南京建成生物工程研究所)于紫外分光光度計(jì)(Alpha1506)測(cè)定吸光度，并根據(jù)公式對(duì)其含量進(jìn)行計(jì)算。

2 結(jié)果

2.1 蚯蚓發(fā)酵液對(duì)康樂(lè)黃雞生產(chǎn)性能的影響由表3可知，與試驗(yàn)Ⅰ組相比，試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組的產(chǎn)蛋率、蛋破損率和料蛋比均無(wú)顯著影響(P>0.05)；而試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組的平均日采食量比試驗(yàn)Ⅰ組分別提高8.65%，9.62%，7.69%，且存在顯著性差異(P<0.05)；試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組的平均蛋質(zhì)量比試驗(yàn)Ⅰ組分別提高4.42%，6.35%，8.81%，且存在顯著性差異(P<0.05)。

表3 蚯蚓發(fā)酵液對(duì)康樂(lè)黃雞生產(chǎn)性能的影響

2.2 蚯蚓發(fā)酵液對(duì)康樂(lè)黃雞屠宰性能的影響由表4可知，與試驗(yàn)Ⅰ組相比，試驗(yàn)Ⅲ組的屠宰率顯著提高了2.35%(P<0.05)；與試驗(yàn)Ⅰ組相比，試驗(yàn)Ⅲ、Ⅳ組的半凈膛率分別顯著提高了6.18%，5.05%(P<0.05)。

表4 蚯蚓發(fā)酵液對(duì)康樂(lè)黃雞屠宰性能的影響 %

2.3 蚯蚓發(fā)酵液對(duì)康樂(lè)黃雞蛋品質(zhì)的影響由表5可知，試驗(yàn)Ⅲ組的蚯蚓發(fā)酵液添加比例對(duì)康樂(lè)黃雞蛋品質(zhì)的影響優(yōu)于其他試驗(yàn)組。與試驗(yàn)Ⅰ組相比，試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組的蛋殼厚度分別顯著提高了9.68%，16.13%，12.90%(P<0.05)。

表5 蚯蚓發(fā)酵液對(duì)康樂(lè)黃雞蛋品質(zhì)的影響

2.4 蚯蚓發(fā)酵液對(duì)康樂(lè)黃雞體脂分布的影響由表6可知，與試驗(yàn)Ⅰ組相比，試驗(yàn)Ⅲ、Ⅳ組的肌間脂肪厚度分別顯著降低了32.63%和43.15%(P<0.05)；與試驗(yàn)Ⅰ組相比，試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組的腹脂率分別顯著上升了8.51%,12.88%,5.15%(P<0.05)。

表6 蚯蚓發(fā)酵液對(duì)康樂(lè)黃雞體脂分布的影響

2.5 蚯蚓發(fā)酵液對(duì)康樂(lè)黃雞血脂指標(biāo)的影響從表7可知，與試驗(yàn)Ⅰ組相比，試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組血液中的TC含量分別顯著降低了15.41%，28.27%，21.37%(P<0.05)；與試驗(yàn)Ⅰ組相比，試驗(yàn)Ⅲ、Ⅳ組血液中的TG含量分別顯著提高了18.23%，9.52%(P<0.05)；與試驗(yàn)Ⅰ組相比，試驗(yàn)Ⅲ、Ⅳ組的HDL膽固醇的含量顯著提高了21.38%,18.39%(P<0.05)；與試驗(yàn)Ⅰ組相比，試驗(yàn)Ⅲ、Ⅳ組的LDL膽固醇顯著降低了35.78%，27.36%(P<0.05)。

表7 蚯蚓發(fā)酵液對(duì)康樂(lè)黃雞血脂指標(biāo)的影響 mmol/L

3 討論

3.1 蚯蚓發(fā)酵液對(duì)康樂(lè)黃雞生產(chǎn)性能的影響經(jīng)過(guò)微生物發(fā)酵制成的蚯蚓發(fā)酵液不僅含有大量的有益于動(dòng)物機(jī)體的氨基酸、多肽和可溶性小分子蛋白類(lèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，也含有相對(duì)豐富的維生素和微量元素。蚯蚓發(fā)酵液的營(yíng)養(yǎng)特性能夠促進(jìn)機(jī)體對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用，提高畜禽生長(zhǎng)速度，改進(jìn)畜產(chǎn)品品質(zhì)[8-10]。本試驗(yàn)中，隨著蚯蚓發(fā)酵液添加比例的上升，試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組的日均采食量，蛋均質(zhì)量也隨之提高，這與顧永芬等[11]用蚯蚓粉替代魚(yú)粉飼喂蛋雞后，蛋雞的平均蛋質(zhì)量提高，朱宇旌等[12]發(fā)現(xiàn)在飼糧中添加5%的蚯蚓粉可以顯著提高日增質(zhì)量等結(jié)果相符。本試驗(yàn)中隨著蚯蚓發(fā)酵液添加比例的上升，試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ組的產(chǎn)蛋率有降低的趨勢(shì)，但是差異不顯著(P>0.05)，這可能與蛋雞的脂肪沉積有關(guān)，已有研究發(fā)現(xiàn)家禽個(gè)體攝入的能量過(guò)高，會(huì)引起產(chǎn)蛋雞腹腔脂肪過(guò)度沉積，卵巢和輸卵管被大量脂肪包被和壓迫，影響家禽卵子的形成和排卵速度，進(jìn)而導(dǎo)致產(chǎn)蛋率降低。本試驗(yàn)中試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ組的腹脂率都顯著高于試驗(yàn)Ⅰ組(P<0.05)，這可能導(dǎo)致了產(chǎn)蛋率沒(méi)有增加，料蛋比升高的情況。

在畜禽生產(chǎn)中屠宰性能能夠在很大程度上反映畜禽的胴體品質(zhì)，其中屠宰率和全凈膛率是屠宰性狀中的2個(gè)重要指標(biāo)，也是衡量畜禽產(chǎn)肉性能的重要指標(biāo)。有報(bào)道在屠宰試驗(yàn)中認(rèn)為一般雞的屠宰率在80%以上、全凈膛率在60%以上，雞的肉用性能良好[13]。本試驗(yàn)中隨著蚯蚓發(fā)酵液添加比例的上升，蛋雞的屠宰率、半凈膛率都有顯著提高(P<0.05)，而且本試驗(yàn)中所有試驗(yàn)組的屠宰率和全凈膛率分別在80%和60%以上，說(shuō)明蚯蚓發(fā)酵液在提高蛋雞屠宰性能的同時(shí)，也可以改善康樂(lè)黃雞的肉用性能。這與雷小文等[14]在基礎(chǔ)飼糧中添加蚯蚓液飼喂寧都黃雞后，不僅能提高寧都黃雞生產(chǎn)性能，還能改善肉用性能的試驗(yàn)結(jié)果相符。而產(chǎn)生這一結(jié)果的原因可能是蚯蚓發(fā)酵液提高了蛋雞蛋白質(zhì)和氨基酸的利用率，加強(qiáng)了蛋白質(zhì)的合成代謝。

3.2 蚯蚓發(fā)酵液對(duì)康樂(lè)黃雞蛋品質(zhì)的影響蛋品質(zhì)主要通過(guò)蛋殼厚度、蛋殼強(qiáng)度、哈夫單位和蛋黃顏色等指標(biāo)來(lái)綜合判斷。蛋殼強(qiáng)度和蛋殼厚度直接影響雞蛋的運(yùn)輸、保存和價(jià)格，哈夫單位直接反映雞蛋新鮮程度及蛋品質(zhì)[15-16]。在本試驗(yàn)中，試驗(yàn)Ⅲ組的的蚯蚓發(fā)酵液添加比例對(duì)康樂(lè)黃雞蛋品質(zhì)的影響優(yōu)于其他試驗(yàn)組，3個(gè)試驗(yàn)組的蛋殼厚度比試驗(yàn)Ⅰ組顯著提高(P<0.05)，而導(dǎo)致蛋殼變厚的原因可能是家禽蛋殼的形成及質(zhì)量主要與家禽對(duì)飼料中鈣的吸收和利用有關(guān)。在蛋殼的形成過(guò)程中所需鈣的來(lái)源主要有兩部分，2/3直接來(lái)自于飼料，還有部分來(lái)自于骨髓[17]。因此，飼糧中鈣的含量水平直接決定著家禽蛋殼的質(zhì)量。家禽對(duì)飼糧中鈣的吸收部位是小腸，主要靠濃度梯度關(guān)系被動(dòng)擴(kuò)散及在鈣結(jié)合蛋白(CaBP)的作用下進(jìn)行主動(dòng)吸收[18-19]。而想要通過(guò)加大鈣離子的濃度來(lái)增強(qiáng)鈣離子的被動(dòng)擴(kuò)散作用是比較困難的，因?yàn)殁}離子的吸收還會(huì)受到飼糧中磷含量的制約。而CaBP可以通過(guò)與鈣離子結(jié)合，通過(guò)主動(dòng)運(yùn)輸作用將鈣離子直接轉(zhuǎn)移到動(dòng)物體內(nèi)，相對(duì)于鈣離子的被動(dòng)運(yùn)輸更加高效，但是CaBP的合成依賴于家禽體內(nèi)維生素D含量。蚯蚓經(jīng)過(guò)微生物的發(fā)酵后，發(fā)酵液中不僅含有乳酸菌等有益菌群分泌的乳酸、乙酸等各種有機(jī)酸，而且還含有豐富的維生素，如維生素A、D、E等[20]。當(dāng)家禽使用發(fā)酵液后，不僅為家禽腸道具有穩(wěn)定的腸道pH值，而且還能增強(qiáng)腸道有益菌群的增殖，減少有害菌群的含量，保持腸道生態(tài)環(huán)境健康。有試驗(yàn)表明，健康的腸道生態(tài)環(huán)境能促進(jìn)微量元素等物質(zhì)的吸收。當(dāng)機(jī)體合成CaBP的速度提高時(shí)，加快腸道中鈣離子的吸收速率，從而促進(jìn)鈣在蛋殼中的沉積，進(jìn)而提高蛋殼厚度與蛋殼強(qiáng)度，達(dá)到改善蛋品質(zhì)的作用。

3.3 蚯蚓發(fā)酵液對(duì)康樂(lè)黃雞脂質(zhì)指標(biāo)的影響脂肪是家禽機(jī)體的重要儲(chǔ)能器官，通過(guò)儲(chǔ)存和消耗能量，進(jìn)而維持機(jī)體的產(chǎn)熱和代謝穩(wěn)態(tài)，也是機(jī)體極其重要的分泌器官[21]。家禽體內(nèi)的脂肪主要分為皮下、肌內(nèi)和腹腔等3部分。在本試驗(yàn)中，與試驗(yàn)Ⅰ組相比，試驗(yàn)Ⅲ、Ⅳ組的肌間脂肪厚度均顯著降低(P<0.05)；試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組的腿肌粗脂肪含量均顯著提高(P<0.05)。郭瑞萍等[22]研究發(fā)現(xiàn)在基礎(chǔ)日糧中添加蚯蚓粉可以減少脂肪沉積，這與本試驗(yàn)結(jié)果基本相符。血糖是動(dòng)物代謝和抵抗應(yīng)激所需能量的最有效營(yíng)養(yǎng)素，其含量的變化可以反映機(jī)體對(duì)糖吸收、運(yùn)轉(zhuǎn)和代謝的動(dòng)態(tài)情況[23]。本試驗(yàn)中，隨著蚯蚓發(fā)酵液添加比例的上升，康樂(lè)黃雞的血糖含量也隨之上升。此試驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明蚯蚓發(fā)酵液能夠提高家禽機(jī)體對(duì)糖吸收、運(yùn)轉(zhuǎn)和代謝的能力，出現(xiàn)這一試驗(yàn)結(jié)果的原因可能是發(fā)酵液中的多糖與有益菌對(duì)腸道菌群產(chǎn)生的多重影響。血清中TG水平能直接反映機(jī)體脂肪沉積狀況[24]，HDL和LDL是動(dòng)物體內(nèi)運(yùn)輸膽固醇的2種脂蛋白。HDL是一種抗動(dòng)脈粥樣硬化的血漿脂蛋白，血清中HDL水平相對(duì)較高有助于機(jī)體健康。而LDL當(dāng)其含量過(guò)高時(shí)，所攜帶的膽固醇便積存在動(dòng)脈壁上，引起動(dòng)脈粥樣硬化，血清中LDL水平降低有助于機(jī)體健康，可以降低冠心病的危險(xiǎn)[25-26]。本試驗(yàn)中試驗(yàn)Ⅲ、Ⅳ組的血液中HDL膽固醇含量顯著高于試驗(yàn)Ⅰ組(P<0.05)，LDL膽固醇、TC含量顯著低于試驗(yàn)Ⅰ組(P<0.05)，這一試驗(yàn)結(jié)果與BAHADORI等[27]通過(guò)在肉雞飼糧中添加蚯蚓粉降低肉雞血液膽固醇含量的結(jié)果相符，在一定程度上說(shuō)明了蚯蚓發(fā)酵液能調(diào)節(jié)康樂(lè)黃雞的脂質(zhì)代謝,降低血清中總膽固醇含量,加速膽固醇和脂蛋白的生物合成、分解及其轉(zhuǎn)化和排泄,減少體脂肪沉積。