趙 莉，陳艷娟，彭 銳，吳偉晴，雷焙焙，劉冬舟，洪小平，何 慧*，陳 永*

1. 深圳市人民醫(yī)院（暨南大學(xué)第二臨床醫(yī)學(xué)院、南方科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院）健康管理中心，深圳 518020

2. 深圳市人民醫(yī)院（暨南大學(xué)第二臨床醫(yī)學(xué)院、南方科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院）風(fēng)濕免疫科，深圳 518020

衰老幾乎存在于所有生物中，是從生殖成熟期開始或加速的一種持續(xù)的、不可逆的退行性改變，機(jī)體衰老的特征包括生育力下降、對(duì)疾病和組織功能障礙的易感性增加及死亡風(fēng)險(xiǎn)升高［1］。關(guān)于衰老的原因和方式有許多理論假說，如程序衰老理論、氧化應(yīng)激損傷理論等，但目前衰老的定義仍不能確定。研究顯示衰老的特點(diǎn)是生物學(xué)特征如代謝、炎癥反應(yīng)等發(fā)生了變化［2］。如何將細(xì)胞和組織衰老的原因與伴隨的無數(shù)變化進(jìn)行區(qū)分是研究衰老的主要挑戰(zhàn)之一，例如，是衰老導(dǎo)致了脂質(zhì)代謝異常，還是脂質(zhì)代謝異常加速了衰老［3］；是自身免疫性機(jī)制加速了炎癥性衰老［4］，還是衰老促進(jìn)了炎癥反應(yīng)［5］。根據(jù)已有的大量基礎(chǔ)研究結(jié)果，在大多數(shù)情況下是代謝-炎癥與衰老存在相互作用關(guān)系，但是目前相關(guān)研究尚缺乏臨床驗(yàn)證。已有研究證實(shí)胰島素抵抗是各種老年相關(guān)性疾病的共同機(jī)制［6-8］，在生物衰老的進(jìn)程中是否存在糖化血紅蛋白（glycosylated hemoglobin，GHb）水平的變化？衰老的進(jìn)程伴隨著代謝-炎癥狀態(tài)的變化，而瘦素（leptin）參與機(jī)體代謝和炎癥的調(diào)節(jié)［9］，那么在健康人衰老的進(jìn)程中年齡是否與瘦素水平存在相關(guān)性？

本研究基于衰老領(lǐng)域中BMI、瘦素的研究結(jié)論，在健康成年女性人群中驗(yàn)證BMI、瘦素與臨床生物化學(xué)指標(biāo)的相關(guān)性，并探討炎癥因子TNF- 、 干擾素等與代謝-衰老指標(biāo)的關(guān)系，為挖掘臨床可及的衰老程度評(píng)估指標(biāo)提供依據(jù)。

1 對(duì)象和方法

1.1 研究對(duì)象 連續(xù)選擇2021 年3-4 月于深圳市人民醫(yī)院健康管理中心進(jìn)行全面健康體檢的100名成年女性。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）年齡為18～60 歲；（2）無心腦血管疾病、糖尿病、癌癥等明確診斷的疾??；（3）無急性感染，如活動(dòng)性乙型肝炎、結(jié)核病、艾滋病；（4）無子宮肌瘤、近期手術(shù)史、厭食癥等可能引起貧血、營(yíng)養(yǎng)不良或影響臨床生物化學(xué)檢查結(jié)果的疾病。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）有精神病史，患有社會(huì)認(rèn)知障礙；（2）近2 個(gè)月服用過降脂、降血壓、降血糖等可能影響臨床檢查結(jié)果的藥物；（3）有假肢或脊柱、關(guān)節(jié)手術(shù)史等可能影響身高測(cè)量者；（4）正在接受藥物或其他方式進(jìn)行減重或增加體重者。共38 名符合條件者納入研究，本研究通過深圳市人民醫(yī)院倫理委員會(huì)審批（LLKY-2022068），研究對(duì)象均簽署知情同意書。

1.2 一般資料采集 對(duì)所有研究對(duì)象于健康體檢當(dāng)天詢問病史，記錄年齡、月經(jīng)史和既往史等，測(cè)量收縮壓、舒張壓、身高、體重并計(jì)算BMI。

1.3 生物化學(xué)指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果收集 于健康體檢當(dāng)日上午空腹，通過肘前靜脈采集外周血2 mL 于EDTA 二鉀抗凝管，采用TEK8520 型血細(xì)胞分析儀（江西特康科技有限公司）檢測(cè)血紅蛋白。采集外周血約3 mL 于促凝管（添加劑為分離膠-促凝劑），采用Cobas702 型全自動(dòng)生化檢測(cè)儀（美國(guó)Roche 公司）檢測(cè)血清白蛋白、球蛋白（總蛋白與白蛋白的差值）、血糖、GHb、總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇（low density lipoproteincholesterol，LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（high density lipoprotein-cholesterol，HDL-C）、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（alanine aminotransferase，ALT）、天冬氨 酸 轉(zhuǎn) 氨 酶（aspartate aminotransferase，AST）和尿酸等。采集外周血3 mL 于促凝管，采用MAGLUMI 4000 型化學(xué)發(fā)光免疫分析儀（深圳市新產(chǎn)業(yè)生物醫(yī)學(xué)工程有限公司）檢測(cè)腫瘤標(biāo)志物癌胚抗原、糖類抗原（carbohydrate antigen，CA）153、CA19-9、CA242、甲胎蛋白、神經(jīng)元特異性烯醇化酶（neuron-specific enolase，NSE）。

1.4 細(xì)胞因子的檢測(cè) 采集外周血3 mL 于EDTA二鉀抗凝管，4 ℃ 2 000×g離心8 min 取血漿。采用人脂肪因子磁珠面板檢測(cè)試劑盒（貨號(hào)HADK2MAG-61K，美國(guó)Millipore 公司），通過MILLIPLEX?MAGPI 多因子檢測(cè)平臺(tái)測(cè)定瘦素、 干擾素和TNF- ，操作步驟嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。使用MILLIPLEX Analyst 5.1 軟件，通過5 參數(shù)法擬合標(biāo)曲法［10］對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行定量分析。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 38 人中4 人BMI 數(shù)據(jù)缺失，對(duì)缺失值不處理。應(yīng)用GraphPad Prism 8.0.1 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。呈正態(tài)分布的計(jì)量資料以±s表示，兩組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；非正態(tài)分布的計(jì)量資料以中位數(shù)（下四分位數(shù)，上四分位數(shù)）表示，兩組間比較采用Mann-WhitneyU檢驗(yàn)。采用Pearson 或Spearman 相關(guān)分析進(jìn)行相關(guān)性分析。檢驗(yàn)水準(zhǔn)（α）為0.05。

2 結(jié) 果

2.1 （圍）絕經(jīng)期健康女性臨床指標(biāo)變化 共納入38 名健康成年女性，年齡為23～58 歲。育齡期（＜45 歲且停經(jīng)不超過12 個(gè)月）女性22 名，圍絕經(jīng)期及絕經(jīng)期（≥45 歲或停經(jīng)12 個(gè)月后）女性16 名。（圍）絕經(jīng)期女性BMI 及ALT、血糖、GHb、總膽固醇、甘油三酯、LDL-C、甲胎蛋白、瘦素、 干擾素水平均高于育齡期女性（P均＜0.05）。（圍）絕經(jīng)期女性收縮壓、舒張壓略高于育齡期女性但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＞0.05）。見表1。

表1 （圍）絕經(jīng)期與育齡期健康女性臨床指標(biāo)比較Tab 1 Comparison of clinical indexes between (peri)menopausal and childbearing age healthy women

2.2 年齡與血清白蛋白水平的相關(guān)性 健康成年女性中，年齡與血清白蛋白水平呈負(fù)相關(guān)（r＝-0.339，P＜0.05 ；圖1），而與球蛋白水平無相關(guān)性（r＝0.085，P＞0.05）。

2.3 年齡與血糖、BMI、血脂、腫瘤標(biāo)志物的相關(guān)性 健康成年女性年齡與血糖、HDL-C、甘油三酯水平無相關(guān)性（r＝0.214、-0.203，rs＝0.379，P均＞0.05），但是隨著年齡增長(zhǎng)GHb、BMI、總膽固醇、LDL-C 均逐漸升高（r＝0.364、r＝0.378、rs＝0.540、r＝0.559，P均＜0.05；圖2A～2D）。健康成年女性中，年齡與甲胎蛋白水平呈正相關(guān)（r＝0.451，P＜0.05；圖2E），與其余腫瘤標(biāo)志物如癌胚抗原、CA153、CA19-9、CA242 及NSE水平均無相關(guān)性（r＝0.315、-0.241、0.015、-0.193、0.169，P均＞0.05）。

2.4 BMI 與血壓、血生物化學(xué)指標(biāo)的相關(guān)性 健康成年女性中，BMI 與收縮壓、舒張壓均呈正相關(guān)（r＝0.395、0.461，P均＜0.05；圖3A、3B），與血糖水平呈正相關(guān)（r＝0.350，P＝0.046；圖3C）。隨著BMI 增加總膽固醇、甘油三酯、LDL-C、ALT水平無顯著性變化（rs＝0.195、rs＝0.197、r＝0.305、rs＝0.372，P均＞0.05），而BMI 與HDL-C 水 平呈負(fù)相關(guān)（r＝-0.472，P＝0.006；圖3D）。BMI與血尿酸水平呈正相關(guān)（r＝0.395，P＝0.023；圖3E）。

2.5 血漿瘦素與年齡、BMI、血壓的相關(guān)性 健康成年女性中，隨著年齡的增長(zhǎng)，血漿瘦素水平呈上升趨勢(shì)（r＝0.390，P＝0.017；圖4A）；血漿瘦素水平與BMI、收縮壓均呈正相關(guān)（r＝0.378、0.394，P均＜0.05；圖4B、4C）。

2.6 血漿瘦素與血生物化學(xué)指標(biāo)的相關(guān)性 健康成年女性中，血漿瘦素水平與血糖、GHb 水平無相關(guān)性（r＝0.213、0.053，P均＞0.05）。血漿瘦素水平與總膽固醇、LDL-C、甘油三酯、血尿酸水平均呈正相關(guān)（rs＝0.412、r＝0.355、rs＝0.567、r＝0.518，P均＜0.05；圖5A～5D）。血漿瘦素水平與ALT 水平呈正相關(guān)（rs＝0.372，P＝0.025；圖5E）。

2.7 血漿瘦素與TNF-α 水平的相關(guān)性 健康成年女性中，血漿瘦素水平與炎癥因子TNF-α 水平呈正相關(guān)（r＝0.347，P＝0.035；圖6）。

3 討 論

衰老是機(jī)體功能逐漸下降、損害而導(dǎo)致個(gè)體適應(yīng)性、生理和心理功能下降的復(fù)雜過程［11］。代謝在衰老的調(diào)節(jié)機(jī)制中發(fā)揮著重要作用，代謝重編程是衰老的主要驅(qū)動(dòng)力，其導(dǎo)致機(jī)體出現(xiàn)健康受損、疾病易感性增高、應(yīng)激反應(yīng)能力降低及虛弱程度增加等衰老表現(xiàn)［12］。研究發(fā)現(xiàn)，人類的脂質(zhì)譜隨著年齡的增長(zhǎng)而發(fā)生變化［13］，脂質(zhì)代謝對(duì)于機(jī)體適應(yīng)外環(huán)境及繁殖至關(guān)重要，親脂性分子（如游離脂肪酸）、類固醇和復(fù)合脂質(zhì)（如甘油三酯和磷脂）等在衰老中發(fā)揮著重要作用。因性別對(duì)臨床生物化學(xué)檢查、預(yù)期壽命的影響顯著［14］，且最近有僅在男性患者中分析瘦素與衰老關(guān)系的研究［15］，本研究考慮僅選擇女性人群以排除性別帶來的偏倚。在本研究中，年齡相對(duì)較大的（圍）絕經(jīng)期女性BMI、血糖及GHb 均高于育齡期女性，血脂包括總膽固醇、甘油三酯、LDL-C 的水平亦在（圍）絕經(jīng)期女性中顯著升高。雖然炎癥是機(jī)體正常的愈合、修復(fù)反應(yīng)，但當(dāng)炎癥加重并持續(xù)存在時(shí)即會(huì)具有破壞性，慢性、低度炎癥被認(rèn)為是促進(jìn)和加速衰老的機(jī)制之一，稱為炎癥性衰老［16］。

本研究在健康成年女性人群中驗(yàn)證了炎癥與衰老-代謝的相關(guān)性。結(jié)果顯示隨著年齡的增長(zhǎng)，血清白蛋白水平呈下降趨勢(shì)。白蛋白不僅發(fā)揮著維持血漿膠體滲透壓的基本作用，還整合了機(jī)體的炎癥和營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)等信息［17］。由于健康機(jī)體對(duì)血糖水平具有較高的保守性，在本研究嚴(yán)格篩選的健康女性人群中年齡與血糖水平未見顯著相關(guān)性，但隨著年齡的增長(zhǎng)GHb 水平上升。中國(guó)臺(tái)灣一項(xiàng)大樣本前瞻性隊(duì)列研究（平均隨訪5.3 年）結(jié)果顯示，GHb 水平與身體機(jī)能下降相關(guān)，GHb 水平較高的人群衰老程度較高［18］。本研究結(jié)果顯示，年齡與BMI 和總膽固醇、LDL-C 水平呈正相關(guān)，甘油三酯亦隨年齡增長(zhǎng)呈上升趨勢(shì)，但由于樣本量較小差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。雖然年齡與BMI 及血脂不存在必然的因果關(guān)系，但研究顯示隨著年齡的增長(zhǎng)，人群肥胖及血脂異常的發(fā)生率升高，肥胖可通過對(duì)代謝途徑的影響促進(jìn)衰老［19］。HDL-C 是血管保護(hù)因子，與心腦血管疾病的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)存在負(fù)相關(guān)關(guān)系［20］，本研究中雖然HDL-C 水平與年齡未見顯著相關(guān)性，但其與BMI 呈負(fù)相關(guān)。尿酸是嘌呤代謝的最終氧化產(chǎn)物，目前研究認(rèn)為尿酸升高與高血壓及糖尿病等老年相關(guān)疾病的發(fā)生密切相關(guān)［21-22］，本研究結(jié)果顯示伴隨BMI 的增大，血尿酸水平逐漸升高。

甲胎蛋白屬于白蛋白家族的一種糖蛋白，主要由胎兒肝細(xì)胞及卵黃囊合成，在胎兒血液循環(huán)中有較高的濃度，出生后逐漸被白蛋白替代，故在成人血清中其含量極低。目前對(duì)甲胎蛋白的研究主要是將其作為肝癌等多種腫瘤的標(biāo)志物，但有研究顯示在衰老小鼠中甲胎蛋白高表達(dá)［23］。本研究結(jié)果顯示，甲胎蛋白水平在（圍）絕經(jīng)期女性人群中升高，且與年齡呈正相關(guān)，可見甲胎蛋白或許能作為衰老的評(píng)估指標(biāo)。

本研究結(jié)果顯示在健康女性人群中，血漿瘦素水平與年齡、BMI 呈正相關(guān)。自從瘦素作為脂肪細(xì)胞衍生的飽腹因子被發(fā)現(xiàn)以來，脂肪組織不再被認(rèn)為僅是簡(jiǎn)單的能量?jī)?chǔ)存部位，還是一種活躍的內(nèi)分泌和旁分泌器官，可分泌多種介質(zhì)（稱為脂肪因子）。研究表明，脂肪細(xì)胞通過多種脂肪因子與其他器官交流，并參與包括心血管功能等在內(nèi)的多種代謝過程［23］。瘦素作為一種蛋白質(zhì)激素，通過體內(nèi)廣泛分布的受體在調(diào)節(jié)食物攝入、血壓等生理過程中發(fā)揮作用。本研究中，瘦素水平與血壓及血脂（總膽固醇、LDL-C、甘油三酯）水平呈正相關(guān)，亦與血尿酸水平表現(xiàn)出正相關(guān)關(guān)系。這與在中年男性人群中的研究結(jié)果［24］一致。本研究還發(fā)現(xiàn)伴隨血漿瘦素水平的升高，ALT 水平升高，這可能與肝臟脂肪變性導(dǎo)致肝功能損害有關(guān)。瘦素不僅參與代謝調(diào)節(jié)，還參與炎癥反應(yīng)［25］，在本研究中血漿瘦素水平與TNF- 水平呈正相關(guān)，這一結(jié)果驗(yàn)證了炎癥在代謝與衰老中的相互影響學(xué)說。

本研究分析了健康成年女性人群BMI、血漿瘦素水平與血壓及血脂、血糖等生物化學(xué)指標(biāo)的相關(guān)性，結(jié)果顯示隨著年齡的增長(zhǎng)，血清白蛋白水平下降，BMI 及GHb、血脂、瘦素、甲胎蛋白水平均升高；伴隨BMI、瘦素水平的增加，機(jī)體血壓、血尿酸呈上升趨勢(shì)，且瘦素水平與炎癥因子TNF- 水平呈正相關(guān)。本研究結(jié)果表明在健康成年女性人群中，隨著年齡增長(zhǎng)、BMI 增加，機(jī)體代謝、炎癥水平發(fā)生了變化，這可為臨床評(píng)估代謝-炎癥性衰老提供可靠指標(biāo)及依據(jù)。