莫雯惠，袁 莉，陳錦華*，徐三妹, 2，劉 冰

(1 吉首大學(xué) 生物資源與環(huán)境科學(xué)學(xué)院，湖南吉首 416000；2 懷化師范高等專科學(xué)校 文理綜合學(xué)院，湖南懷化 418000)

在1844年，Kützing[1]以明晰雙肋藻[Amphipleurapellucida(Kützing) Kützing]為模式種，建立了硅藻門雙肋藻屬(Amphipleura)。它是一類兩側(cè)及兩端都對稱的舟形雙殼縫類硅藻，生活在淡水中[2]。該屬的主要形態(tài)特征是具有一條明顯的中央胸骨，其在靠近兩端時分叉成兩條肋(雙肋藻屬的名稱由此而來)，然后在接近最末端處又融合，從而在殼面上形成針眼狀的結(jié)構(gòu)。由于殼縫僅存在此針眼結(jié)構(gòu)中，所以較短。因其模式種明晰雙肋藻的結(jié)構(gòu)精細，線紋密集(密度約37～40條/10 μm)，所以其標本常被研究人員用來檢測光學(xué)顯微鏡的分辨能力[2]。根據(jù)AlgaeBase網(wǎng)站的統(tǒng)計，在世界范圍內(nèi)，雙肋藻屬在分類上公認的種類只有10個[3]。在中國，李家英等[4]在《中國淡水藻志》系列專著中收錄了雙肋藻屬3種和1變種。但明晰雙肋藻至今沒有詳細的掃描電鏡研究，所以它的一些關(guān)鍵特征，比如其殼縫的近縫端和遠縫端的形態(tài)、孔紋的結(jié)構(gòu)等尚處于未知狀態(tài)。

武陵山區(qū)跨湖北、湖南、重慶、貴州四省市，包括四省份交界地區(qū)的71個縣(市、區(qū))，目前在武陵山區(qū)已建立了19個國家級自然保護區(qū)，是中國生物多樣性研究熱點之一。在對武陵山區(qū)硅藻分類和多樣性研究過程中，我們收集到了一種雙肋藻的標本，經(jīng)研究鑒定，其為明晰雙肋藻。本研究期望通過對明晰雙肋藻的詳細觀察和描述為其提供更多的超微結(jié)構(gòu)資料及新描述，同時更新讀者對雙肋藻屬和武陵山區(qū)硅藻多樣性的認識。

1 材料和方法

本研究中，明晰雙肋藻的樣品于2021年6月24日取自湖南省會同縣廣坪鎮(zhèn)的一口水井中，取樣點地理坐標為26°47′23″ N，109°36′51″ E，海拔270 m；水質(zhì)參數(shù)為：溫度(20.1±0.5) ℃，pH (7.1±0.2)，電導(dǎo)率(464±2) μS·cm-1。具體取樣方法為，選取井壁著生的水草(主要是水綿)放入250 mL的樣品瓶中，然后加入25 mL 4%的甲醛溶液固定。

實驗室內(nèi)的處理步驟為：取25 mL樣品于250 mL燒杯中，加入2倍待處理硅藻樣品體積30%的過氧化氫溶液，然后把燒杯放在加熱平臺上，在80 ℃恒溫條件下加熱6 h以氧化去掉硅藻細胞的有機物質(zhì)，然后加入5 mL 10%的稀鹽酸溶解要處理樣品中含鈣固體化合物。冷卻后，向燒杯中加入蒸餾水至250 mL，靜置至少12 h，然后用移液槍小心吸走100 mL刻度線以上的上清液，這個過程重復(fù)5次以得到干凈的硅藻標本。利用Naphrax?封裝劑制成永久裝片以供光學(xué)顯微鏡觀察和拍照(德國徠卡光學(xué)顯微鏡，型號Leica DM3000)。永久裝片保存在吉首大學(xué)植物標本館(標本館國際代碼JIU)。掃描電鏡觀察在湖南懷化學(xué)院完成(德國卡爾蔡司場發(fā)射掃描電子顯微鏡，型號Sigma HD)。用于描述和鑒定雙肋藻屬種類的形態(tài)術(shù)語參照Kützing[1]和Round等[2]，中英文對照術(shù)語參考何佳昕等[5]、劉騰騰等[6]、王婷等[7]文獻。

2 結(jié) 果

明晰雙肋藻(圖版Ⅰ，1～9；圖版Ⅱ，1～6)

Amphipleurapellucida(Kützing) Kützing 1844: 103, pl. 3, fig. 52; pl. 30, fig. 84; Cantonatietal. 2017: 97, pl. 68, figs 27-29

光學(xué)顯微鏡觀察(圖版Ⅰ，1～3)：殼瓣紡錘形，末端尖，不拉伸。殼瓣大小為(測量29個標本)：長98～104 μm，寬8.1～9.7 μm。中央胸骨長而明顯，長度為69～73 μm，約占整個殼面長度的70%。中央胸骨在靠近兩端處形成針眼狀結(jié)構(gòu)，殼縫僅存在于此針眼中(圖3，兩箭所示)。線紋密集，在光學(xué)顯微鏡下難以分辨。

掃描電子顯微鏡觀察(圖版Ⅰ，4～9；圖版Ⅱ，1～6)：殼瓣紡錘形，殼面外側(cè)平坦，殼套淺，中央胸骨長且直(圖版Ⅰ，4，5)。從殼面外側(cè)看，殼縫直，近縫端和遠縫端結(jié)構(gòu)相似，兩者皆略微膨大(圖版Ⅰ，6，8，9中各箭所示)。單列橫向線紋平行排列，與中央胸骨垂直；縱向線紋與橫向線紋相互垂直，孔紋外側(cè)開口縱向長度大于橫向，形狀不一，或橢圓或長方形等。橫向線紋密度為38～39條/10 μm (測量6個標本)，孔紋密度為54～58個/10 μm。從殼面內(nèi)側(cè)看，中央胸骨明顯增厚，長且直(圖版Ⅱ，1)。螺旋舌大，水滴狀，在末端與兩條胸肋融合形成類似蠟筆夾狀結(jié)構(gòu)(圖版Ⅱ，2，3兩箭所示)；殼縫近縫端和遠縫端結(jié)構(gòu)相似，兩者皆不膨大(圖版Ⅱ，4，5兩箭所示)；線紋位于相鄰兩條增厚橫肋之間，孔紋在殼面內(nèi)側(cè)開口被圓形的篩膜所覆蓋，開口的邊緣沒有鑲邊狀增厚圓環(huán)(圖版Ⅱ，5)。

3 討論和結(jié)論

明晰雙肋藻個體形態(tài)特征明顯，容易鑒定，但是本研究對更多的超微結(jié)構(gòu)特征進行了描述。從前面的描述中，可以看出明晰雙肋藻的孔紋內(nèi)外開口形狀不同，外側(cè)開口形狀不統(tǒng)一且無篩膜覆蓋，但是其縱向長度大于橫向，內(nèi)側(cè)開口為圓形且被篩膜所覆蓋；無論內(nèi)外，其近縫端和遠縫端結(jié)構(gòu)都相似，但是在外側(cè)皆略微膨大，而內(nèi)側(cè)都呈直線狀，不膨大。本研究中的明晰雙肋藻標本外形和數(shù)量性狀與參考文獻中的吻合[8]，其身份完全可以確定。另外，有文獻報道明晰雙肋藻喜歡生活在靜水或緩慢流動的水體中，本研究中的明晰雙肋藻取自湖南會同縣一水井中，生境也與這篇參考文獻中的相似[2]。