杜忠偉 魏森清 胡志強(qiáng) 王 旭 李 健 王 鑫*

（1.延邊朝鮮族自治州農(nóng)業(yè)科學(xué)院，吉林 龍井 133400；2.延邊興旺生物科技有限公司，吉林 汪清 133100）

桑黃是桑黃屬（Sanghuangporus）真菌的統(tǒng)稱(chēng)。該屬目前已知有桑樹(shù)桑黃Sanghuangporus sanghuang、楊樹(shù)桑黃Sanghuangporus vaninii、暴馬桑黃Sanghuangporus baumii等14 個(gè)種[1,2]。桑黃藥用歷史悠久，在《藥性論》《本草綱目》和《神農(nóng)本草經(jīng)》等著作中均有桑黃及其藥效的明確記載，也被現(xiàn)代人稱(chēng)為“森林黃金”[3]?，F(xiàn)代研究表明，桑黃主要活性成分有多糖類(lèi)、多酚類(lèi)和萜類(lèi)等，具有抗腫瘤、抗氧化、抗炎抑菌、降血糖等藥理作用[4,5]。

隨著桑黃的藥用功效逐漸被人們所認(rèn)識(shí)，近年來(lái)我國(guó)人工栽培桑黃產(chǎn)業(yè)得到快速發(fā)展，目前人工栽培的主要種類(lèi)為楊樹(shù)桑黃（S.vaninii），栽培方式以段木栽培和代料栽培為主。但是因栽培菌種、栽培地區(qū)氣候、栽培基質(zhì)及栽培模式的不同，尚沒(méi)有統(tǒng)一的栽培標(biāo)準(zhǔn)。因地制宜開(kāi)展桑黃人工栽培技術(shù)研究，是促進(jìn)桑黃產(chǎn)業(yè)發(fā)展的重要途徑。

東北地區(qū)受溫帶季風(fēng)氣候影響，四季分明，夏季高溫多雨，冬季寒冷干燥，具有人工栽培桑黃的優(yōu)越氣候條件。夏秋季節(jié)是野生食藥用菌的高發(fā)期，也是人工栽培桑黃子實(shí)體生長(zhǎng)的最佳時(shí)期，實(shí)踐證明適當(dāng)?shù)臏夭畲碳び欣谏｜S子實(shí)體形成。本文對(duì)東北地區(qū)段木栽培桑黃的栽培設(shè)施要求、各級(jí)菌種制作、菌段制作、出黃管理、病蟲(chóng)害防控等各環(huán)節(jié)技術(shù)進(jìn)行集成，旨在為桑黃生產(chǎn)者提供參考，為桑黃產(chǎn)業(yè)發(fā)展做出貢獻(xiàn)。

桑黃人工段木栽培流程：母種制作→原種制作→栽培種制作→菌段制作→菌段開(kāi)口→催芽→出黃管理→采收。

1 栽培設(shè)施要求

1.1 場(chǎng)地選擇

東北地區(qū)桑黃人工栽培通常在室外大棚內(nèi)進(jìn)行，搭棚場(chǎng)地一般選在遠(yuǎn)離村莊的林區(qū)，周?chē)兴矗瑘?chǎng)地土質(zhì)保水性好、地勢(shì)平坦或稍有坡度。

1.2 大棚搭建及消毒

大棚一般采用鋼架結(jié)構(gòu)，選擇有利于通風(fēng)的朝向搭建，要求棚長(zhǎng)不超過(guò)30 m，跨度10 m 左右，棚高2.6 m，大棚兩頭開(kāi)寬2 m 的門(mén)，兩側(cè)設(shè)卷膜桿留通風(fēng)口，有利于通風(fēng)管理。大棚塑料膜外通常使用兩層遮陽(yáng)網(wǎng)覆蓋，遮陽(yáng)網(wǎng)遮陽(yáng)率外層用75%，內(nèi)層用95%，使得棚內(nèi)光照強(qiáng)度在500 lx 左右，以利于桑黃子實(shí)體生長(zhǎng)。在大棚兩側(cè)挖排水溝，防止棚內(nèi)積水。

大棚在覆蓋塑料膜和遮陽(yáng)網(wǎng)前，內(nèi)部的栽培場(chǎng)地一般是翻耕后陽(yáng)光曝曬2 天，然后鋪上厚約5 cm的河沙或風(fēng)化砂。棚內(nèi)可作成3 個(gè)寬約2.8 m、長(zhǎng)與棚等長(zhǎng)的畦，畦與畦之間留有過(guò)道。大棚搭建好后需要對(duì)地面及棚內(nèi)進(jìn)行消毒，通常在地面撒上一層生石灰，并使用保菇王消毒粉（主要有效成分為二氯異氰尿酸鈉，使用量為8～10 g/m3），對(duì)大棚進(jìn)行熏蒸。

2 桑黃人工段木栽培菌種生產(chǎn)流程

2.1 菌種生產(chǎn)

（1）母種（一級(jí)種，圖1）制作。選擇野生桑黃馴化后的種性清楚、農(nóng)藝性狀穩(wěn)定的菌種作為種源。桑黃母種培養(yǎng)基可選用①PDA 培養(yǎng)基：馬鈴薯200 g（去皮切成1 cm立方塊，加水煮沸15 min過(guò)濾取汁液）、葡萄糖20 g、磷酸二氫鉀3 g、硫酸鎂1.5 g、瓊脂粉15 g、純凈水1 000 mL，pH 自然；②馬鈴薯木屑綜合培養(yǎng)基：馬鈴薯200 g（處理方法同上）、木屑20 g（水煮30 min 過(guò)濾取濾液）、葡萄糖20 g、瓊脂粉15 g、水1 000 mL，pH自然。

圖1 桑黃母種

滅菌：制作好的培養(yǎng)基裝入試管，高溫高壓121 ℃下保持30 min，待溫度降至80 ℃左右時(shí)，取出試管擺成斜面冷卻，3～5 天后觀察，確保無(wú)雜菌出現(xiàn)方可進(jìn)行母種生產(chǎn)。

母種擴(kuò)繁：挑選無(wú)雜菌污染的菌種，將菌絲尖端接種至斜面試管中，置于30 ℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)2 天，待菌絲萌發(fā)后將溫度調(diào)至28 ℃，繼續(xù)培養(yǎng)約10 天即可用于轉(zhuǎn)管擴(kuò)繁，1 支試管通?？梢詳U(kuò)繁30 支母種。

培養(yǎng)：接種后的試管放入28 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)期間每天檢查并做好記錄，如發(fā)現(xiàn)有雜菌污染的試管須及時(shí)挑出。

（2）原種（二級(jí)種，圖2）制作。可采用谷粒培養(yǎng)基或木屑培養(yǎng)基。谷粒培養(yǎng)基：選用籽粒飽滿(mǎn)、無(wú)雜質(zhì)、無(wú)霉變的玉米粒或小麥粒，用清水浸泡5～7 天，期間每天更換一次清水以防變質(zhì)，待谷粒充分吸水后，撈出加入5%左右的含水量為60%的木屑拌勻，再裝入500 mL 的透明玻璃瓶或聚乙烯塑料瓶滅菌。

圖2 桑黃原種

木屑培養(yǎng)基：配方為優(yōu)質(zhì)新鮮柞木屑80%、麥麩16%、黃豆粉2%、蔗糖1%、石膏1%，使用篩料機(jī)將木屑雜質(zhì)去除，干料按比例混合均勻后加水?dāng)嚢?，使含水量?0%～65%后裝瓶滅菌。

滅菌接種：一般采用常壓滅菌，105 ℃下保持8 h；高溫高壓滅菌為121 ℃下保持2 h。滅菌完畢后出鍋冷卻，在無(wú)菌接種室內(nèi)超凈工作臺(tái)上進(jìn)行接種，通常1 支試管母種可以接5～6 瓶原種。

培養(yǎng)：培養(yǎng)室保持溫度在28 ℃，暗培養(yǎng)，每天早、晚各通風(fēng)20 min，30 天左右菌絲即可長(zhǎng)滿(mǎn)。

（3）栽培種（三級(jí)種，圖3）制作。培養(yǎng)基配方：優(yōu)質(zhì)新鮮柞木屑82%、麥麩14%、黃豆粉2%、生石灰1%、石膏1%。菌袋選擇折徑16.1 cm、長(zhǎng)37 cm、厚0.005 cm 的聚乙烯塑料袋，使用裝袋機(jī)裝料，每袋裝濕料1.4 kg 左右，裝好后料高約21 cm，中心孔通透。使用窩口機(jī)向內(nèi)窩口，深3～4 cm，以能塞住菌塞又不碰到培養(yǎng)料為度。滅菌方法與原種相同。

圖3 桑黃栽培種

接種培養(yǎng)：在無(wú)菌接種室內(nèi)的接種箱或超凈工作臺(tái)下完成接種，1 瓶原種可以接50～60 瓶栽培種；培養(yǎng)方法與原種相同。

2.2 栽培菌段制作

裝袋：選擇直徑4～12 cm、長(zhǎng)18～20 cm 的新鮮柞木段，將木段劈開(kāi)后樹(shù)皮朝外裝入折徑24 cm、長(zhǎng)45 cm、厚0.014 cm 的聚乙烯塑料袋（重14 g）中，制成直徑16 cm 的圓柱形緊實(shí)木捆。裝袋時(shí)木塊間避免有大的縫隙，并防止扎破料袋，以免造成后期易感染雜菌。向裝好的袋內(nèi)加入150～200 g 蒸餾水，使袋內(nèi)含水量達(dá)60%左右，再用尼龍繩扎緊封口。

滅菌：采用高壓滅菌，溫度118～119 ℃保持16 h。滅菌后置于冷卻室內(nèi)待冷卻后接種。

接種：在接種室內(nèi)使用接種箱或在超凈工作臺(tái)上進(jìn)行。先將栽培種袋表用75%的酒精擦拭消毒，再剪去袋口，將菌種搗碎成直徑為1 cm 的顆粒，倒入木段中，使菌種完全覆蓋木段表面，然后封口，完成接菌。

培養(yǎng)：將接好種的栽培段轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)層架上避光培養(yǎng)（圖4），前一周溫度設(shè)定為30 ℃，待菌種定植后降到28 ℃，期間根據(jù)培養(yǎng)室實(shí)際情況控制通風(fēng)次數(shù)，經(jīng)80～90 天培養(yǎng)，菌絲可長(zhǎng)滿(mǎn)袋。

圖4 菌段培養(yǎng)

3 菌段轉(zhuǎn)色

菌絲滿(mǎn)袋后的桑黃菌段，表面呈淡黃色或黃色，菌絲和菌袋貼合不夠緊密，此時(shí)菌絲不夠成熟，須進(jìn)行轉(zhuǎn)色管理。通過(guò)打開(kāi)門(mén)窗和培養(yǎng)室燈光增加散射光照射的方法，待菌段表面菌絲老化，形成紅棕色菌皮及肉眼可見(jiàn)的瘤狀突起，菌袋收縮、緊實(shí)有彈性時(shí)，即完成轉(zhuǎn)色（圖5）。這一過(guò)程通常需要15～20 天，只有轉(zhuǎn)色好的菌段才可以進(jìn)入大棚，進(jìn)行開(kāi)口出菇。

圖5 菌段轉(zhuǎn)色前后顏色變化

4 菌段開(kāi)口

根據(jù)擺放的方式，菌段開(kāi)口的方法有兩種，即底部開(kāi)口和頂部開(kāi)口。

底部開(kāi)口：將轉(zhuǎn)色好的菌段扎口處朝上直立擺放，使用75%酒精對(duì)菌段和開(kāi)口刀具進(jìn)行消毒，在菌段底部距離邊緣2～3 cm 處開(kāi)直徑為5 cm 的圓形口，便于菌段吸收水分；在菌段上部1/3 處，均勻開(kāi)3個(gè)長(zhǎng)5～8 cm、寬1～2 cm的拱橋形出黃口，將開(kāi)好口的菌袋在大棚內(nèi)呈“品”字形擺放，間距10～12 cm，底部埋入深約2 cm 的沙土，周邊壓實(shí)，防止桑黃從底部長(zhǎng)出，徒耗菌段養(yǎng)分。

頂部開(kāi)口：將菌段頂部扎口處用剪刀剪去，倒立擺放，其他處理同底部開(kāi)口法。

5 催芽

催芽即桑黃開(kāi)口處菌絲恢復(fù)并長(zhǎng)出原基的過(guò)程。高溫高濕有利于開(kāi)口處菌絲恢復(fù)，桑黃菌段開(kāi)口后，在生產(chǎn)中通常采取外罩黑色塑料袋的方法進(jìn)行催芽（圖6），既可防止開(kāi)口處菌絲干燥死亡，又可避免水直接噴濺到開(kāi)口處，影響菌絲恢復(fù)。保持棚內(nèi)空氣濕度在85%～90%，關(guān)閉棚門(mén)及通風(fēng)口，期間需要抖動(dòng)塑料袋，防止缺氧導(dǎo)致桑黃原基畸形。待桑黃子實(shí)體長(zhǎng)出0.5～1 cm 時(shí)可以摘去塑料袋，進(jìn)行出黃管理。

圖6 開(kāi)口后套袋催芽

6 出黃管理

出黃階段（圖7）主要通過(guò)覆蓋遮陽(yáng)網(wǎng)、控制噴水和通風(fēng)的頻次調(diào)節(jié)大棚內(nèi)溫濕度和二氧化碳濃度等環(huán)境因素。桑黃出黃適宜溫度在26～28 ℃，過(guò)高易滋生雜菌；濕度宜80%～90%，最好采用霧化設(shè)備噴水，使達(dá)到地面濕潤(rùn)不積水、菌段和子實(shí)體有彈性的效果，避免子實(shí)體表面積水影響品相。

圖7 出黃階段

通風(fēng)次數(shù)和時(shí)間根據(jù)季節(jié)進(jìn)行調(diào)控，一般每天早晚各通風(fēng)10 min。段木栽培桑黃按季節(jié)分階段管理，每年8 月下旬至10 月中旬的夏秋時(shí)節(jié)，桑黃子實(shí)體生長(zhǎng)速度最快，是出黃管理的關(guān)鍵時(shí)期，直接影響桑黃產(chǎn)量。

6.1 春季管理

4 月末至5 月初，越冬后的桑黃開(kāi)始進(jìn)行噴水管理，此時(shí)菌段失水較嚴(yán)重，采用少?lài)娗趪姷姆椒?，使菌段緩慢吸水并恢?fù)生長(zhǎng)。又由于此時(shí)期棚內(nèi)地溫較低，晝夜溫差大，不利于子實(shí)體生長(zhǎng)，因此每天要加強(qiáng)通風(fēng)，避免子實(shí)體表面積水而產(chǎn)生綠色木霉等雜菌。

6.2 夏季管理

6 月隨著氣溫升高，大棚內(nèi)地溫也升高，桑黃子實(shí)體進(jìn)入生長(zhǎng)期，此時(shí)需要增加噴水次數(shù)和噴水量，噴水量以保證地面土質(zhì)有充足水分又不積水為度。但由于氣溫不穩(wěn)定，遇到氣溫較低的陰雨天時(shí)，不宜噴水，需打開(kāi)通風(fēng)口加大通風(fēng)量，防止雜菌產(chǎn)生。進(jìn)入伏天后，空氣潮濕悶熱，桑黃子實(shí)體生長(zhǎng)緩慢，極易產(chǎn)生雜菌，此時(shí)大棚須增覆遮陽(yáng)網(wǎng)、增加噴水，對(duì)菌段進(jìn)行降溫，大棚通風(fēng)口保持長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)狀態(tài)。

6.3 秋季管理

秋季是桑黃生長(zhǎng)最佳時(shí)期。每年9 月以后，天氣逐漸涼爽，晝夜溫差較大，通過(guò)去掉大棚外一層遮陽(yáng)網(wǎng)，菌段上加蓋1 層遮陽(yáng)網(wǎng)，達(dá)到增加棚內(nèi)溫度、減小光照強(qiáng)度的目的。此時(shí)減少?lài)娝螖?shù)，通常白天噴水1～2 次，每次5 min。

6.4 冬季管理

冬季桑黃子實(shí)體進(jìn)入休眠期，當(dāng)室外溫度接近0 ℃時(shí)，對(duì)棚內(nèi)地面澆透水，然后封閉大棚。期間做好大棚的加固工作，防止大風(fēng)和大雪破壞大棚。

7 采收及儲(chǔ)存

段木栽培桑黃通常培養(yǎng)至第三年時(shí)進(jìn)行采收，秋季當(dāng)桑黃菌蓋邊緣顏色變深、停止生長(zhǎng)并放射出大量的孢子（菌蓋表面可見(jiàn)黃綠色粉末）時(shí)，標(biāo)志著桑黃子實(shí)體成熟。此時(shí)可停止噴水，打開(kāi)大棚門(mén)及通風(fēng)口進(jìn)行通風(fēng)，降低棚內(nèi)濕度，晾干子實(shí)體表面水分，經(jīng)一周左右即可進(jìn)行采收。采收后先清理子實(shí)體表面雜物，在晾曬場(chǎng)進(jìn)行初步晾曬，隨后置于烘干爐，烘干溫度設(shè)定40 ℃、45 ℃、50 ℃各1～2 h。裝爐時(shí)不可劃傷、弄臟子實(shí)體腹面，保持其色澤。烘干后按照桑黃子實(shí)體的品質(zhì)進(jìn)行等級(jí)分類(lèi)，裝入自封袋內(nèi)，置于通風(fēng)干燥室內(nèi)密封保存。

8 病蟲(chóng)害防治

8.1 病害

桑黃人工栽培過(guò)程中，病害主要為侵染性病害，發(fā)生在菌種培養(yǎng)期和出黃期間。其中，以青霉、木霉、黃曲霉為主的雜菌污染（圖8）對(duì)桑黃影響最大，發(fā)生在生產(chǎn)各個(gè)環(huán)節(jié)，一旦發(fā)現(xiàn)要及時(shí)挑出，避免其成熟后產(chǎn)生孢子四散傳播，加重危害。并加強(qiáng)培養(yǎng)室和大棚的通風(fēng)，使用75%酒精對(duì)發(fā)生區(qū)域進(jìn)行噴灑消毒。

圖8 霉菌侵染桑黃子實(shí)體

造成雜菌侵染的因素有多種，包括菌種不純，滅菌不徹底，接種環(huán)境不清潔、操作不規(guī)范，培養(yǎng)室消毒不徹底，菌袋有微孔等。發(fā)生在菌袋內(nèi)部的雜菌難以處理。出黃期間桑黃子實(shí)體受到雜菌侵染時(shí)，可通過(guò)改變環(huán)境條件和科學(xué)使用藥品殺滅雜菌，同時(shí)對(duì)發(fā)生區(qū)域進(jìn)行全面消殺。

8.2 蟲(chóng)害

蟲(chóng)害主要發(fā)生在桑黃出黃階段，以菌蚊、夜蛾幼蟲(chóng)及蛞蝓為主。其中，夜蛾幼蟲(chóng)對(duì)桑黃的危害最大（圖9）：成蟲(chóng)將卵產(chǎn)到子實(shí)體腹面，幼蟲(chóng)孵出后直接啃食子實(shí)體，使腹面出現(xiàn)傷口，乃至被吃光，對(duì)于剛長(zhǎng)出的桑黃甚至可以啃食殆盡。幼蟲(chóng)為害時(shí)，可在桑黃子實(shí)體的下方地面上看到黑色顆粒狀幼蟲(chóng)糞便。

圖9 被夜蛾幼蟲(chóng)啃噬后的桑黃子實(shí)體腹面

蟲(chóng)害防治措施有抓好環(huán)境衛(wèi)生，清除大棚周?chē)s草，使用黃色粘蟲(chóng)板或蚊蟲(chóng)燈誘殺成蟲(chóng)，及時(shí)捕捉幼蟲(chóng)，在棚外拉防蟲(chóng)網(wǎng)阻擋害蟲(chóng)進(jìn)入等[6]。