盛丹丹，楊帆，郭宏舉，錢奇芳，劉芳，史寧△

（1.中國人民解放軍戰(zhàn)略支援部隊(duì)特色醫(yī)學(xué)中心，北京 100101；2.中國人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學(xué)第一附屬醫(yī)院，重慶 400038）

慢性胃炎為臨床常見疾病，主要表現(xiàn)為反酸、疼痛、腹脹等癥狀，因多種致病因素對胃黏膜上皮細(xì)胞的反復(fù)侵襲，導(dǎo)致持續(xù)性慢性炎癥改變［1］，如不及時、有效治療，易發(fā)展為胃癌［2］。西藥主要通過抑制胃酸分泌、保護(hù)胃黏膜、根除幽門螺桿菌（HP）、促進(jìn)胃腸蠕動等措施進(jìn)行治療，但有細(xì)菌耐藥、病情復(fù)發(fā)等缺點(diǎn)。慢性胃炎屬中醫(yī)“胃脘痛”“痞滿”“吐酸”等范疇，其病位雖在胃，但其發(fā)生與肝、脾功能密切相關(guān)。疏肝法為慢性胃炎的中醫(yī)常用療法，常用方劑包括化肝煎、柴胡疏肝散、石斛養(yǎng)胃湯、半夏瀉心湯等［3-5］，可有效緩解患者不適，降低復(fù)發(fā)率，顯著提升療效［6］。非酒精性脂肪性肝?。∟AFLD）為全球最常見的肝病，屬代謝功能障礙相關(guān)性脂肪肝?。?］，目前尚無批準(zhǔn)療法［8］?！斗蔷凭灾拘愿尾≈嗅t(yī)診療專家共識意見（2017）》指出，采用疏肝健脾方法治療肝郁脾虛證［9］。化肝煎出自《景岳全書》，由陳皮、青皮、丹皮、梔子、白芍、澤瀉、土貝母組方，具有疏肝瀉熱功效，化肝煎加減用于治療慢性胃炎［10-12］和NAFLD［13-14］的療效顯著，但其異病同治的作用機(jī)制尚未闡明。本研究中基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對接技術(shù)，初步探討了化肝煎對慢性胃炎和NAFLD異病同治的作用機(jī)制。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 研究方法

1.1 篩選化肝煎活性成分及靶點(diǎn)

在中藥系統(tǒng)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫和分析平臺（TCMSP，https：//old.tcmsp-e.com/tcmsp.php）中，以“陳皮”“青皮”“白芍”“丹皮”“梔子”“澤瀉”“土貝母”為關(guān)鍵詞搜索，以口服生物利用度（OB）≥30%和類藥性（DL）≥0.18%的化合物為化肝煎方中的有效活性成分，同時通過檢索文獻(xiàn)對未入選但有相關(guān)活性研究的成分進(jìn)行補(bǔ)充，匯集全部有效活性成分及藥物活性成分相關(guān)靶點(diǎn)。利用Uniprot數(shù)據(jù)庫將靶點(diǎn)名稱轉(zhuǎn)變成標(biāo)準(zhǔn)基因名稱，得到化肝煎靶點(diǎn)基因。

1.2 建立與慢性胃炎和NAFLD的靶點(diǎn)交集

在OMIM（https：//omim.org/）、GeneCards（https：//www.genecards.org/）、TTD（http：//db.idrblab.net/ttd/）數(shù)據(jù)庫中，以“chronic gastritis”“nonalcoholic fatty liver disease”為關(guān)鍵詞，搜索2種疾病的作用靶點(diǎn)，合并并刪除重復(fù)靶點(diǎn)，得到有效靶點(diǎn)。采用Venny 2.1軟件（https：//bioinfogp.cnb.csic.es/tools/venny/）處理慢性胃炎、NAFLD和化肝煎活性成分的靶點(diǎn)，得交集靶點(diǎn)，并繪制韋恩圖。

1.3 構(gòu)建藥物-活性成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)

利用獲得的交集靶點(diǎn)基因反向篩查化肝煎中對應(yīng)的藥物活性成分，借助Cytoscape_v 3.8.0軟件構(gòu)建藥物-活性成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)。

1.4 構(gòu)建藥物與疾病蛋白相互作用（PPI）網(wǎng)絡(luò)

采用String數(shù)據(jù)庫（https：//cn.string-db.org/）對1.2項(xiàng)下交集靶點(diǎn)進(jìn)行PPI分析，物種限定為Homo Sapiens，中置信度（medium confidence）＞0.4。通過Cytoscape_v 3.8.0軟件進(jìn)行可視化分析，運(yùn)用CytoHubba插件篩選出PPI網(wǎng)絡(luò)的核心靶點(diǎn)。

1.5 富集分析

使用R語言軟件對交集靶點(diǎn)基因進(jìn)行基因本體論（GO）生物功能富集分析及京都基因與基因組百科全書（KEGG）通路富集分析，并對分析結(jié)果繪制氣泡圖進(jìn)行可視化處理（氣泡大小代表富集基因數(shù)目；adjustedPvalue顏色從紅色至紫色，表示值從大到小，富集程度越來越顯著）。

1.6 分子對接

選取PPI網(wǎng)絡(luò)中節(jié)點(diǎn)度值排名前3的靶蛋白（受體蛋白）和藥物-活性成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)中節(jié)點(diǎn)度值排名靠前的藥物活性成分（配體分子）進(jìn)行分子對接驗(yàn)證。從PubChem數(shù)據(jù)庫（https：//pubchem.ncbi.nlm.nih.gov）下載藥物活性成分的2D結(jié)構(gòu)，從PDB數(shù)據(jù)庫（https：//www1.rcsb.org）下載受體蛋白的3D結(jié)構(gòu)，利用PyMOL軟件去掉受體蛋白配體，AutoDockTools軟件對受體蛋白及其配體分子進(jìn)行去水、加氫、加電荷操作，并進(jìn)行分子對接。利用PyMOL軟件將對接結(jié)果進(jìn)行可視化處理。

2 結(jié)果與分析

2.1 活性成分及靶點(diǎn)獲取

共得到藥物化學(xué)成分57個［15］，預(yù)測靶點(diǎn)243個。

2.2 疾病靶點(diǎn)獲取

分別獲得慢性胃炎和NAFLD疾病靶點(diǎn)2 756個和859個，與化肝煎活性成分的靶點(diǎn)取交集，得到三者的交集靶點(diǎn)36個，見圖1。根據(jù)交集靶點(diǎn)反向篩選其對應(yīng)藥物活性成分，獲得同時治療2種疾病的潛在藥物活性成分，詳見表1。

圖1 化肝煎治療慢性胃炎和NAFLD交集靶點(diǎn)韋恩圖Fig.1 Venn diagram of the common targets of Huagan Decoction in the treatment of chronic gastritis and NAFLD

表1 化肝煎治療慢性胃炎和NAFLD關(guān)鍵活性成分基本信息Tab.1 Basic information of key active components of Huagan Decoction in the treatment of chronic gastritis and NAFLD

2.3 藥物-活性成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)

共23個活性成分、66個節(jié)點(diǎn)和114條邊，見圖2（A1，A2，A3代表陳皮、青皮共有成分，B1代表丹皮、梔子共有成分，C1代表白芍、丹皮共有成分，D1代表白芍、丹皮、梔子共有成分，E1代表白芍、梔子、土貝母共有成分）。以節(jié)點(diǎn)度值設(shè)置節(jié)點(diǎn)面積大小，并按節(jié)點(diǎn)度值大小進(jìn)行排列篩選。節(jié)點(diǎn)度值排前5的活性成分為MOL000098（quercetin/槲皮素）、MOL000422（kaempferol/山柰酚）、MOL005828（nobiletin/川陳皮素）、MOL004328（naringenin/柚皮素）、MOL003095［5-羥基-7-甲氧基-2-（3，4，5-三甲氧基苯基）色酮］。

圖2 化肝煎治療慢性胃炎和NAFLD藥物-活性成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)Fig.2 Drugs-active components-targets network of Huagan Decoction in the treatment of chronic gastritis and NAFLD

2.4 PPI分析

PPI網(wǎng)絡(luò)包含36個節(jié)點(diǎn)和307條邊，平均度值為17.06，無游離節(jié)點(diǎn)，見圖3（網(wǎng)絡(luò)中各節(jié)點(diǎn)的大小、顏色與其度值成正比，節(jié)點(diǎn)面積越大、顏色越深，其度值就越高，在PPI網(wǎng)絡(luò)中越關(guān)鍵）。PPI網(wǎng)絡(luò)中排名前10的核心靶點(diǎn)（圖4），包括白細(xì)胞介素1β（IL-1β）、表皮生長因子受體（EGFR）、細(xì)胞腫瘤抗原P53（TP53）、腫瘤壞死因子（TNF）、白細(xì)胞介素6（IL-6）、白蛋白（ALB）、細(xì)胞趨化因子8（CXCL8）、前列腺素內(nèi)過氧化物合酶2（PTGS2）、轉(zhuǎn)化生長因子β1（TGF-β1）和雷帕霉素靶蛋白（mTOR）。上述靶點(diǎn)在PPI網(wǎng)絡(luò)中起關(guān)鍵作用，可能是化肝煎治療慢性胃炎和NAFLD的關(guān)鍵靶點(diǎn)。

圖3 化肝煎治療慢性胃炎和NAFLD交集靶點(diǎn)的PPI網(wǎng)絡(luò)Fig.3 PPI network of common targets of Huagan Decoction inthe treatment of chronic gastritis and NAFLD

圖4 核心靶點(diǎn)的PPI網(wǎng)絡(luò)Fig.4 PPI network of core targets

2.5 富集分析

GO生物功能富集分析共獲得1 445個生物過程（BP），13個細(xì)胞組分（CC），58個分子功能（MF）?；赑值大小，分別篩選BP，CC，MF排名前10的條目進(jìn)行分析（圖5），可見，化肝煎異病同治靶點(diǎn)參與的生物過程包括傷口愈合過程、平滑肌細(xì)胞增殖及調(diào)節(jié)增殖過程、營養(yǎng)應(yīng)答過程、細(xì)菌源分子應(yīng)答過程、脂多糖應(yīng)答過程等，細(xì)胞組分主要影響核膜、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔、內(nèi)吞囊泡、囊泡腔等，分子功能主要涉及細(xì)胞因子受體結(jié)合、DNA轉(zhuǎn)錄因子受體結(jié)合、RNA聚合酶Ⅱ特異性DNA結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合、受體配體活性、細(xì)胞因子活性等。KEGG通路富集分析獲得125條信號通路，其中與化肝煎異病同治相關(guān)的有晚期糖基化產(chǎn)物-晚期糖基化終末產(chǎn)物受體（AGE-RAGE）信號通路、Janus酪氨酸蛋白激酶-信號轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子（JAK-STAT）信號通路、白細(xì)胞介素17（IL-17）等信號通路（圖6）。

圖5 化肝煎治療慢性胃炎和NAFLD作用靶點(diǎn)GO生物富集分析氣泡圖Fig.5 Bubble diagram of targets of Huagan Decoction in the treatment of chronic gastritis and NAFLD based on the GO bio-concentration analysis

圖6 化肝煎治療慢性胃炎和NAFLD作用靶點(diǎn)KEGG通路富集分析氣泡圖Fig.6 Bubble diagram of targets of Huagan Decoction in the treatment of chronic gastritis and NAFLD based on the KEGG pathway enrichment analysis

2.6 分子對接驗(yàn)證

配體與受體結(jié)合能小于0，表示其能自發(fā)結(jié)合，且結(jié)合能越小，表示結(jié)合構(gòu)象越穩(wěn)定，一般認(rèn)為，結(jié)合能≤-5 kcal/mol時配體與受體有良好的結(jié)合性。結(jié)果見表2，可知核心靶點(diǎn)與藥物成分均具有較強(qiáng)的相互作用。將表2中對接模式進(jìn)行可視化分析（圖7）。分子對接結(jié)果顯示，化肝煎主要活性成分與靶點(diǎn)蛋白能很好地結(jié)合，證實(shí)角鯊烯、槲皮素、芍藥苷、山柰酚、4-氧-甲基-芍藥苷治療慢性胃炎和NAFLD的可能性。

圖7 化肝煎活性成分與關(guān)鍵靶點(diǎn)的分子對接圖Fig.7 Molecular docking of active components of Huagan Decoction with key targets

表2 化肝煎活性成分與關(guān)鍵靶點(diǎn)分子對接結(jié)果Tab.2 Molecular docking of active components of Huagan Decoction with key targets

3 討論

慢性胃炎和NAFLD在發(fā)生和發(fā)展過程中具有關(guān)聯(lián)性，如HP不僅是慢性胃炎的主要誘因，且是NAFLD發(fā)展的獨(dú)立危險因素之一［16］。研究發(fā)現(xiàn)，在NAFLD患者和非酒精性脂肪性肝炎（NASH）患者的肝臟樣本中存在HP的DNA/RNA［17-18］，推測HP可能通過十二指腸和膽道由胃進(jìn)入肝臟［19］，誘導(dǎo)NAFLD發(fā)生?；渭逶?種疾病中均有較好的臨床療效，但其異病同治的作用機(jī)制尚未闡明。故本研究中基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)探討了化肝煎治療慢性胃炎和NAFLD可能的作用機(jī)制，為化肝煎異病同治的臨床應(yīng)用和基礎(chǔ)研究提供了思路。

本研究中對化肝煎方進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析和篩選知其有57個活性成分（OB≥30%且DL≥0.18%），其中同時治療慢性胃炎和NAFLD的關(guān)鍵成分有23種，藥物-活性成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)節(jié)點(diǎn)度值排名前列的活性成分為槲皮素、山柰酚、川陳皮素、柚皮素、5-羥基-7-甲氧基-2-（3，4，5-三甲氧基苯基）色酮、β-谷甾醇、角鯊烯、豆甾醇、兒茶素。槲皮素、山柰酚、柚皮素均屬黃酮類化合物。研究表明，槲皮素具有抗氧化、抗炎、抗疲勞、抗癌、抗微生物等多種生物學(xué)功能，可通過調(diào)節(jié)DNA修復(fù)系統(tǒng)、抑癌基因、緊密連接蛋白保持胃黏膜的完整性［20］，可通過改善肝臟脂質(zhì)累積、調(diào)節(jié)腸道微生物群代謝治療NAFLD［21］。在慢性胃炎模型小鼠中，槲皮素可通過p38促分裂原活蛋白激酶（MAPK）通路維持胃黏膜上皮細(xì)胞增殖和凋亡平衡，阻止HP誘導(dǎo)胃炎的發(fā)生［22-23］。在高脂飲食誘導(dǎo)的NAFLD模型大鼠中，槲皮素通過抑制MAPK通路改善肝臟脂質(zhì)沉積、炎癥和纖維化［24］，發(fā)揮治療NAFLD作用。山柰酚可通過降低髓過氧物酶活性，下調(diào)TNF-α和IL-1β水平，上調(diào)一氧化氮水平以維持胃黏膜蛋白的表達(dá)，保護(hù)胃黏膜免受損傷［25］。在HepG2細(xì)胞中，山柰酚可通過抑制脂肪生成蛋白、脂滴蛋白、氧化應(yīng)激相關(guān)蛋白的表達(dá)減弱油酸引起的脂質(zhì)累積和氧化應(yīng)激，可作為預(yù)防和治療NAFLD的候選藥物［26］。柚皮素能調(diào)節(jié)急性和慢性炎癥，可有效控制多種炎癥相關(guān)疾?。ㄈ缒摱景Y、急性肝病、纖維化和癌癥）［27］。BAO等［28］的體外研究發(fā)現(xiàn)，柚皮素可通過抑制AKT通路降低基質(zhì)金屬蛋白酶9（MMP9）表達(dá)誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞凋亡，尚未發(fā)現(xiàn)其在胃炎中的相關(guān)研究。臨床試驗(yàn)結(jié)果顯示，NAFLD患者攝入柚皮素后，血清中甘油三酯、總膽固醇、低密度脂蛋白水平降低，高密度脂蛋白水平升高，表明柚皮素可調(diào)節(jié)NAFLD患者的血脂［29］。川陳皮素是一種多甲氧基黃酮類化合物，通過減少細(xì)胞中活性氧產(chǎn)生、降低脂質(zhì)過氧化物和谷胱甘肽的含量，抑制HP引起的炎癥感染［30］，長期低劑量補(bǔ)充川陳皮素可調(diào)節(jié)肝臟膽固醇合成、脂肪合成、脂肪酸氧化，減輕高脂飲食誘導(dǎo)的NAFLD［31］。β-谷甾醇是一種植物甾醇，在各種胃腸疾病中均有治療作用［32］，以及抗高脂血癥和護(hù)肝作用，能改善由飲食誘導(dǎo)的NAFLD［33-34］。故化肝煎主要通過槲皮素、山柰酚、柚皮素、川陳皮素等活性成分發(fā)揮異病同治作用。

化肝煎與慢性胃炎和NAFLD的交集靶點(diǎn)有36個。PPI網(wǎng)絡(luò)圖中節(jié)點(diǎn)度值排名靠前的靶點(diǎn)有TNF，IL-6，ALB，IL-1β，EGFR，TP53，CXCL8等。慢性胃炎在組織學(xué)中表現(xiàn)為胃黏膜炎性細(xì)胞浸潤。在炎癥進(jìn)展過程中，信號級聯(lián)反應(yīng)被激活，胃黏膜上皮細(xì)胞通過分泌一系列細(xì)胞因子和趨化因子（如IL-6和IL-1β）募集中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞，造成炎性浸潤。樹突狀細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞也可造成浸潤并分泌TNF-α、IL-12、人單核細(xì)胞趨化因子-1（MCP-1）等炎性因子［35］。TNF-α，IL-6，IL-1β均為促炎因子，是炎性反應(yīng)中的重要免疫介質(zhì)。TNF-α可促進(jìn)胃黏膜細(xì)胞凋亡，而持續(xù)的細(xì)胞凋亡可能導(dǎo)致胃潰瘍等廣泛的胃黏膜損傷［36-37］。在IL-1β轉(zhuǎn)基因模型小鼠中，IL-1β的高表達(dá)可導(dǎo)致嚴(yán)重的胃部炎癥及癌變［38］；在IL-1β缺失模型小鼠中，HP感染導(dǎo)致的中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞募集被顯著抑制，炎性細(xì)胞浸潤減弱［39］。IL-6持續(xù)高表達(dá)可引起Th17/Treg失衡，進(jìn)一步導(dǎo)致自身免疫性疾病和慢性炎性疾病的發(fā)生和發(fā)展［40］。臨床研究發(fā)現(xiàn)，HP陽性患者的IL-6水平顯著高于未感染者，且與慢性胃炎分級相關(guān)［41］。TP53是腫瘤抑制蛋白，在檢測DNA損傷中起關(guān)鍵作用，HP感染可能導(dǎo)致胃上皮細(xì)胞DNA錯配修復(fù)不足，這可能增加胃黏膜細(xì)胞突變積累的風(fēng)險和慢性胃癌的風(fēng)險［42］。NAFLD病理譜廣泛，范圍從單純性脂肪變性到非酒精性脂肪性肝炎（NASH）、肝細(xì)胞壞死和炎癥，定義為代謝功能障礙相關(guān)性脂肪肝?。?］。TNF-α和IL-6可誘導(dǎo)肝臟脂肪生成和胰島素抵抗，破壞胰島素信號傳導(dǎo)。在IL-6缺失模型小鼠中，若長期給藥會加劇高脂飲食誘導(dǎo)的肝臟脂肪變性［43］。在肝細(xì)胞中，IL-1β能促進(jìn)膽固醇和甘油三酯的累積［44］，NAFLD患者血清中IL-1β水平顯著升高［45］；IL-1β還可增加肝臟中IL-17和TNF-α的表達(dá)，加劇肝損傷和肝纖維化［46］；而在NAFLD模型小鼠中，IL-1β或IL-1R1缺失能減輕小鼠肝臟炎癥和纖維化［47］。TP53在NAFLD的發(fā)病機(jī)制中也有重要作用，在HepG2和Huh7細(xì)胞系中，抑制TP53表達(dá)可減少棕櫚酸酯誘導(dǎo)的脂質(zhì)累積［48］；在TP53缺失模型小鼠中，高脂飲食導(dǎo)致的肝臟脂質(zhì)累積減少［49］?；渭逯饕ㄟ^靶向調(diào)控促炎因子改善胃黏膜的炎癥，并通過調(diào)節(jié)其余靶基因保護(hù)胃黏膜免受其他損傷，從而治療慢性胃炎；通過改善肝臟中脂質(zhì)累積，減輕肝臟脂肪變性、纖維化、炎癥，從而發(fā)揮抗NAFLD作用。

GO生物功能富集分析結(jié)果顯示，化肝煎治療慢性胃炎和NAFLD過程中參與多種生物過程，涉及的細(xì)胞組分、分子功能廣泛，說明化肝煎治療慢性胃炎和NAFLD是多靶點(diǎn)、多通路的過程。KEGG通路富集分析發(fā)現(xiàn)化肝煎發(fā)揮治療作用排名前3的關(guān)鍵通路為AGERAGE信號通路、JAK-STAT信號通路、IL-17信號通路。慢性胃炎患者多伴隨胃動力障礙癥狀，AGE可通過AGE/RAGE/核因子-κB（NF-κB）通路下調(diào)平滑肌收縮蛋白和心肌素的表達(dá)，誘發(fā)胃動力障礙［50］。AGERAGE信號通路也參與NAFLD的進(jìn)展。AGE引起的炎癥和氧化應(yīng)激可致NAFLD從簡單的脂肪變性發(fā)展為NASH和纖維化［51］，而氧化應(yīng)激和炎癥也會誘導(dǎo)AGE的產(chǎn)生［52］。AGE與RAGE結(jié)合后激活A(yù)GE-RAGE信號通路，進(jìn)一步誘導(dǎo)氧化應(yīng)激和炎癥［53］。AGE-RAGE信號通路與氧化應(yīng)激和炎癥形成惡性循環(huán)。臨床研究報(bào)道，因AGE和RAGE分泌過多，導(dǎo)致血糖水平升高患者的NAFLD更快進(jìn)展成纖維化［54］。抑制AGE的產(chǎn)生和阻斷AGE與RAGE的相互作用，有望成為治療慢性胃炎和NAFLD的新手段。JAK-STAT通路介導(dǎo)免疫調(diào)節(jié)過程，在HP感染導(dǎo)致的胃部炎癥和癌變過程中，細(xì)菌通過激活STAT1和上調(diào)程序性死亡配體1（PD-L1）表達(dá)抑制T淋巴細(xì)胞亞群CD8+的抗腫瘤免疫反應(yīng)，促進(jìn)胃癌進(jìn)展［55］。豆甾醇、槲皮素可通過抑制JAK-STAT通路發(fā)揮抗腫瘤作用［56-57］。JAK-STAT通路在肝病發(fā)病機(jī)制中有多種關(guān)鍵作用［58］，如在非酒精性肝炎模型小鼠中，肝臟中的自然殺傷細(xì)胞通過分泌大量的促炎因子如IL-1β，γ干擾素（IFN-γ），IL-12，趨化因子配體4（CCL4），CCL5，粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子（GM-CSF）激活肝臟中JAK-STAT 1/3和NF-κB信號傳導(dǎo)并誘導(dǎo)肝細(xì)胞損傷［59］。山柰酚可通過抗氧化和抗凋亡作用保護(hù)肝細(xì)胞，對多種肝病發(fā)揮治療作用［60］。Th17細(xì)胞分泌的促炎細(xì)胞因子在HP感染導(dǎo)致的胃部炎癥中起主要作用［61］。臨床研究結(jié)果顯示，患者血清中IL-17水平與慢性胃炎嚴(yán)重程度呈正相關(guān)［62］。研究表明，IL-17/IL-21軸、IL-17/IL-23軸參與維持Th17擴(kuò)增［63-64］。NAFLD的發(fā)病機(jī)制涉及多種免疫細(xì)胞介導(dǎo)的炎性過程及免疫功能失衡［65］，IL-17在這種炎性反應(yīng)中起核心作用。NAFLD模型大鼠的Th17/Treg失衡，Th17細(xì)胞比例明顯增加導(dǎo)致IL-17大量分泌［66］。IL-17可作用于肝細(xì)胞、Kupffer細(xì)胞、肝星狀細(xì)胞，誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞募集、膠原沉積、促炎因子和趨化因子的產(chǎn)生［67］。IL-17過表達(dá)會促使肝細(xì)胞攝取脂質(zhì)，導(dǎo)致肝細(xì)胞損傷/死亡和疾病進(jìn)展［68］。IL-17通過激活Kupffer細(xì)胞，分泌大量的IL-6和TNF-α，加劇肝纖維化［69］。芍藥苷可通過調(diào)節(jié)Th17/Treg平衡，改善結(jié)腸炎［70］。槲皮素可通過Tim-3和TLR4-MyD88-NF-κB信號通路維持Th17/Treg平衡，抑制雷公藤內(nèi)酯素誘導(dǎo)的肝損傷［71］。上述研究結(jié)果表明，AGE-RAGE，JAK-STAT，IL-17信號通路與慢性胃炎和NAFLD的發(fā)生與發(fā)展密切相關(guān)，化肝煎活性成分有可能通過作用于多條信號通路發(fā)揮異病同治作用。

綜上所述，基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法和分子對接技術(shù)對化肝煎治療慢性胃炎和NAFLD的活性成分、潛在作用靶點(diǎn)和分子機(jī)制進(jìn)行了初步探討，闡述了化肝煎通過多成分、多靶點(diǎn)、多通路的協(xié)同作用，影響炎癥進(jìn)展、脂質(zhì)累積、氧化應(yīng)激而發(fā)揮療效。但基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法預(yù)測活性成分和潛在機(jī)制也存在局限性，篩選出的活性成分可能與患者血液中實(shí)際吸收的成分不一致，且未能區(qū)分活性成分對潛在靶點(diǎn)的抑制作用和激活作用。未來研究中需對潛在有效成分進(jìn)行進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。